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耐多药结核病病人的医院感染管理对策探讨
[目的]探讨耐多药结核病(MDR-TB)的医院感染管理对策.[方法]加强组织管理与制度建设,规范病房管理及病人安置,严格消毒隔离和职业防护,加大健康教育与用药指导.[结果]加强耐多药结核病人的管理,确保了医疗安全,未发生医院感染.[结论]采取综合措施加强科学管理,严格环境控制,可防止MDR-TB的传播,减少MDR-TB对社会的危害.
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支气管镜下Nd3+:YAG激光治疗气道内耐多药结核病人的护理
气道内结核是气管、支气管黏膜或黏膜下层发生的结核病变,为肺结核或纵隔淋巴结结核的并发症.近年来随着我国结核病疫情回升,耐药性及难治性结核病例明显增多,耐药性气道内结核病例也有一定程度的增加.
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医院148例复治结核患者结核杆菌耐药分析
目的:了解医院结核病患者耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法:采用绝对浓度间接法,将结核菌株进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)对氨基水杨酸钠(PAS)、丁胺卡那(AK)、卷曲霉素(CPM)、丙硫异烟胺(TH)、利福喷丁(RFT)、力克肺疾(PASI)10种药物的药敏试验.结果:148例均不同程度耐药,总耐药率100%.4种药以上耐药率占比例大,为87.84%,2～3种药耐药占比例小,为12.16%.耐多药占29.05%.结论:目前复治结核患者耐药严重,应引起有关部门高度重视.
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肺结核236例耐药情况临床分析
近年来结核病疫情回升,耐药性肺结核尤其是耐多药结核病患者的发生对结核病控制构成严重的威胁,因此开展结核菌耐药性监测与评价的工作,除指导临床治疗外,还可以为本地区制定结核病防治对策提供依据.本文就我院近年来收治的肺结核患者236例耐药情况进行了分析讨论.
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结核分枝杆菌耐药的分子机制及耐药基因检测方法的研究进展
结核分枝杆菌(MTB)简称结核杆菌,于1882年由德国科学家Koch发现并证明是结核病的病原体.随着抗结核药物的不断发展和卫生状况的改善,结核病的发病率和病死率曾大幅度下降,但20世纪80年代后,结核病在世界范围内又死灰复燃.结核病疫情呈现全球性明显回升趋势的主要原因之一是耐药菌株的产生和播散,尤其是耐多药菌株的出现.结核杆菌的高耐药问题已成为新世纪结核病控制的三大难题之一.
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江苏省常州市2013年结核耐药情况调查与分析
多药耐药结核病（MDR-TB）是指患者感染的结核分枝杆菌对异烟肼、利福平等≥2种抗结核药物耐药[1]。广泛耐药结核病（XDR-TB）指除耐多药之外对任何氟喹诺酮类药物以及3种二线注射药物（硫酸卷曲霉素、卡那霉素和阿米卡星）中至少1种具有耐药性的结核分枝杆菌[2]。因M/XDR-TB治疗时间长，治愈率低，多药耐药结核病已经严重影响了国民的身心健康[3]。为了解常州地区2013年多药耐药结核耐药情况，探讨耐药的发展趋势，从收集的601株结核分枝杆菌菌株中，找出耐多药和广泛耐药的菌株，并分析其药敏情况，以期为M/XDR-TB的治疗和控制提供参考依据，现报告如下。
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对结核病耐药性的认识
一般典型肺结核病的临床诊断、治疗并不困难,但疑难的、难治的,也称耐药的,耐多药的肺结核病,却给临床治疗带来了很大的困难,也成为结核病控制规划实施的重大障碍.20世纪90年代以后,耐药及耐多药的肺结核病发病率逐渐增高,内科化疗效果差,长期排菌对全球控制结核病构成了很大的威胁.作为一项对耐药结核治疗的重要措施,外科手术再次受到关注.为了更好的了解和研究,我们仍需要将继续努力.现结合临床谈一下自己对耐药性肺结核病的认识:
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48例耐多药肺结核患者停药原因分析及护理干预
目的:探讨耐多药肺结核患者中断治疗的原因及进行针对性护理干预的方法.方法:通过问卷调查的方法,对48例耐多药肺结核患者停药原因进行调查分析,根据调查结果采取相应的护理措施进行干预.结果:9个月痰菌转阴14例,阴转率29.2％；治疗1年痰菌转阴28例,阴转率58.3％；治疗1年痰菌仍为阳性4例,占8.3％；2例并发肺心病死亡,占4.8％.结论:护理干预能改善耐多药肺结核患者的心理问题,明显提高患者治疗的依从性,提高治愈率.
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志贺菌诱导耐药相关基因序列分析
目的 获取并分析志贺菌由抗生紊诱导产生的耐多药相关基因序列.方法 以志贺菌敏感株(223)和诱导株(YD)基因组DNA为模板,利用引物设计软件Primer 5.0根据已测得基因序列(Y16B3、Y16B8和Y16A11)设计引物,PCR扩增诱导耐多药相关基因并将相关基因克隆到pMD19-T载体上,测序并将结果在序列相似性搜索工具Blast上检索分析相关基因序列.结果 Y1683和Y1688基因片段分别在诱导株中扩增出320和225 bp产物,在敏感株中未扩增出;而Y16A11基因片段在诱导株扩增出310 bp产物,在敏感株中扩增出554 bp产物,并且产物序列同源性极低.结论 志贺菌在抗生素诱导下产生的耐多药株与敏感菌株比较,具有基因组差异.
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志贺菌属非典型1类整合子与耐多药关系
目的 研究志贺菌属中非典型1类整合子的分布及其与耐多药性的关系.方法 对实验室保存的90株志贺菌属进行8种抗生素药敏实验,针对非典型1类整合子的耐药基因盒区域设计引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增和限制性片段长度多态性(RFLP)分析,对代表性菌株进行测序分析.结果 90株志贺菌属中有86株(95.6%)对≥3种抗生素耐药;有66株(73.3%)对氨苄青霉素(AMP)、四环素(TET)和氯霉素(CHL)联合耐药;非典型1类整合子分布于65株(72.2%)志贺菌属中;RFLP分析结果表明,所有酶切产物的带型均一,测序分析发现序列为blaoxa-30-aadA1;非典型1类整合子阳性菌株对AMP-TET-CHL联合耐药率(81.5%)高于阴性菌株(52.0%),经双侧x2检验发现差异有统计学意义(P＜0.05).结论 志贺菌属非典型1类整合子阳性与其对AMP-TET-CHL联合耐药有关,可能参与耐多药性的形成.
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志贺菌耐多药相关基因水平转移研究
目的 验证志贺菌耐多药相关基因水平转移及对该基因的位置进行初步判定.方法 培养已筛选出的包含耐多药差异基因片段阳性克隆,提取其质粒,PCR扩增其耐多药差异基因片段、纯化、制备探针,与志贺菌敏感株Z23、耐多药大肠埃希菌E.667、转移株的基因组DNA、质粒进行斑点杂交.结果 该耐多药差异基因片段制备的探针与耐多药大肠埃希菌、敏感株、转移株的基因组DNA、质粒进行杂交后,转移株、耐多药大肠埃希菌的全基因组及质粒均有杂交信号,与Z23的全基因组、质粒均没有杂交信号.结论 此耐多药相关基因片段在液体结合实验中由耐多药大肠埃希菌水平转移给志贺菌敏感株,根据斑点杂交结果可判断其存在于耐多药大肠埃希菌和转移株的质粒中.
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志贺菌敏感株与基因转移耐多药株蛋白组学分析
目的 对志贺菌敏感株与基因转移耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组比较,寻找细菌耐多药相关蛋白.方法 采用接合基因转移实验对临床分离鉴定志贺菌敏感株进行基因转移耐多药试验;并对志贺菌敏感株及基因转移耐多药株全菌蛋白进行双向电泳;电泳图谱采用Image Master 2D Platinum软件分析,并对差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MOLDITOF-TOF)分析.结果 成功获得志贺菌基因转移耐多药株,在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分析别检出(946±37)和(1 013±157)个蛋白质斑点;经分析共发现43个差异表达的蛋白点,初步对其中7个差异表达蛋白进行质谱鉴定,基因转移耐多药株中发现2个新出现的耐多药相关蛋白分别为成簇插入的DNA重复序列(CRISPR)相关蛋白及Hsp60的分子伴侣蛋白(Groel-Groes-Adp7);ATP结合盒(ABC)转运蛋白、胱氨酸合成酶、预测的胞浆脂蛋白表达量上调;翻译延长因子Tu及DNA单链结合蛋白表达量下降.结论 对7个耐多药相关蛋白鉴定分析表明,供体菌中一些耐多药相关基因通过基因转移方式插入志贺菌敏感株中并大量表达,同时一些在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调,ABC转运蛋白在志贺菌基因转移耐多药机制中也起重要作用.
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EGCG逆转肝癌耐多药差异基因表达
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)逆转人肝癌细胞耐多药的机制,为进一步在基因转录水平上高通量筛选逆转肝癌耐多药天然药物提供一定的参考依据.方法 采用人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶Bel-FU细胞,甲基四唑蓝法检测耐药Bel-FU细胞的耐多药性及对EGCG进行体外细胞毒性试验;选择与肝癌发生发展相关途径的42个功能基因作为检测基因,采用实时定量PCR微阵列技术检测Bel-7402组、Bel-FU组、Bel-FU+EGCG作用组基因表达;实时定量PCR检测相同条件下处理的基因Hras、MDR1表达变化以验证微阵列技术结果.结果 耐药细胞Bel-FU对5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、阿霉素、柔红霉素的耐药指数分别为:89.6、3.9、37.2、16.5、3.7;EGCG对细胞Bel-FU的IC50、IC10值分别为587.4、73.1μg/mL;实时定量PCR微阵列检测结果显示:与Be-7402组比较,Bel-FU组中有5个基因上调;与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG作用组有5个基因下调,其中有3个基因为Bel-7402组与Bel-FU组之间的差异基因;实时定量PCR验证结果:Bel-FU组中基因Hras、MDR1表达为Bel-7402组中的2.84、2.74倍,与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG组作用中基因Hras、MDR1表达分别下调3.21、3.74倍.结论 EGCG对人肝癌耐多药细胞Bel-FU具有一定逆转作用.
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志贺菌敏感株与诱导耐多药株蛋白质组学分析
目的 对志贺菌敏感株与诱导耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组学比较,寻找细菌耐多药相关蛋白.方法 采用4类抗生素的次抑菌浓度,对临床分离鉴定的志贺菌敏感株进行诱导耐多药试验;对志贺菌敏感株及诱导耐多药株全菌蛋白进行双向电泳;电泳图谱采用Image Master2D Platinum软件分析;差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MOLDI TOF-TOF质谱)分析.结果 成功获得志贺菌诱导耐多药株,在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分别检测出(946±37)个和(1 096±189)个蛋白质斑点;共发现48个差异表达的蛋白点,其中5个质谱鉴定为ABC转运蛋白、谷胺酰转肽酶、天冬氨酸氨甲酰基转移酶、翻译延长因子Tu、单链DNA结合蛋白;其中前3个蛋白中在耐多药株中表达量增强,后2个减弱.结论 5个耐多药相关蛋白中在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调;ABC转运蛋白在志贺菌诱导耐多药机制中起重要作用.
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志贺菌敏感株诱导耐药与marOR基因突变关系
目的 对志贺菌敏感株进行诱导使其耐多药,研究其诱导耐药前后marOR基因的差异.方法 用4类抗生素的次抑菌浓度对临床分离鉴定的志贺菌敏感株进行诱导耐多药试验.对志贺菌敏感株及诱导耐多药株的marOR基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增后,测序比较其诱导耐药前后marOR基因序列的差异.结果 成功获得志贺菌诱导耐多药株,命名为YD株；其小抑菌浓度(MIC)分别为初始菌株的6～8倍；该诱导耐药株对庆大霉素、诺氟沙星、磺胺甲基异恶唑、头孢噻吩等均耐药；测序结果发现诱导耐药株marOR基因YD株有6个位点出现突变,其中5个为同义突变,1个为错义突变(1630位点A→G,赖氨酸→精氨酸).结论 marOR基因的突变可能是志贺菌诱导耐药的调控机制之一.
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福建省耐多药结核分枝杆菌MLVA分型分析
目的 了解福建省耐多药结核分枝杆菌分子流行病学特征,为控制耐多药肺结核提供参考依据.方法 采用多位点数目可变串联重复序列基因分型(MLVA)方法,对30个监测点纳入监测的所有耐多药结核分枝杆菌分离菌株DNA进行检测,使用BioNumerics(Version 4.5)软件进行聚类分析.结果 76株耐多药结核分枝杆菌被分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三大基因群,分别包含Ⅰ群5株(6.6％)、Ⅱ群68株(89.5％)、Ⅲ群3株(3.9％);在株水平基因分型上,有19株菌成7簇,各包含2～4株菌,成簇菌株来源于同一县区或不同县区.结论 福建省耐多药结核分枝杆菌菌株主要流行株为Ⅱ群菌株;部分菌株存在县区内,甚至跨县域的近期传播流行.
关键词： 结核分枝杆菌 多位点可变数目串联重复序列 基因分型 耐多药 -
耐多药结核杆菌多重PCR-SSCP检测敏感性分析
异烟肼和利福平为抗结核一线药物,对结核杆菌的作用机理及耐药机制的研究报道较多.研究认为结核杆菌耐利福平与RNA聚合酶的β亚基的编码基因rpoB的突变有关,耐异烟肼主要与过氧化氢酶-过氧化物酶的编码基因KatG基因的缺失突变有关[1].因此,临床上可以通过鉴别rpoB、KatG等耐药相关基因的变异来判断结核杆菌的耐药性,相对于常规药敏试验或仪器检测能够大大缩短结果报告的时间.
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成都市结核分支杆菌4688株耐药情况分析
耐药结核病尤其是耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)是目前结核病防治工作中的重点.来自WHO和国际抗结核肺病联合会(IUATLD)的76个国家3年( 1999 -2002)实施的耐药检测结果报告显示,耐多药结核病的中位患病率为1.1％[1].2008年WHO发布的第四次全球耐多药监测报告估计全球每年将有49万耐多药新发病例,其中近5万例为广泛耐药结核病例[2].中国近年来随着耐多药/广泛耐药结核病(extensively druy-resistant tuberculosis,XDR-TB)的蔓延,严重阻碍了结核病的控制进程[3].本研究对2004-2009年四川省成都市传染病医院4 688株结核分支杆菌的耐药情况进行分析,为成都地区进一步制定结核病防治策略提供科学依据.
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左氧氟沙星及力克肺疾治疗耐多药肺结核临床观察
目前,耐药或耐多药结核病呈上升趋势,据估算,全球约有5000万人感染了耐多药结核病(MDR-TB),给治疗带来极大困难.我国属经济欠发达的国家,制定一个高效、合理、低毒的治疗方案尤为重要.
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国家卫生计生委关于进一步加强结核病防治工作的通知
结核病是严重危害人民群众健康的呼吸道传染病.党中央、国务院高度重视结核病防治工作,各级卫生计生行政部门积极履行职责,各项防控措施有效落实,全国结核病疫情呈逐年下降的趋势.但是,我国结核病防治形势依然严峻.我国仍是全球30个结核病高负担国家之一,特别是近年来结核病防治工作仍存在诸多薄弱环节,如防治工作中预防和治疗不衔接,病人发现、诊疗、管理不到位,耐多药肺结核防治薄弱,学校等重点场所聚集性疫情时有发生.
