首页 > 文献资料
-
艾灸对克罗恩病大鼠结肠肿瘤坏死因子-α含量及艾灸鼠结肠上清液对培养的结肠上皮细胞内紧密连接蛋白及其基因表达的影响
目的:通过观察温和灸、隔药灸对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)体外诱导大鼠结肠上皮细胞紧密连接--咬合蛋白(occludin)、闭合蛋白1(claudin-1)和闭锁蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)及其基因表达的影响,探讨艾灸对肠上皮屏障损伤的修复/保护机制.方法:将SD大鼠随机分成正常组、模型组、温和灸组、隔药灸组和西药组,各12只.采用三硝基苯磺酸制备克罗恩病(Crohn's Disease,CD)大鼠模型.温和灸组与隔药灸组选择"天枢""气海"穴分别予以温和灸和隔药灸,每日1次,共治疗14次;西药组以柳氮磺胺吡嘧溶液灌胃,每日2次,共14次.治疗结束后剖取各CD组大鼠结肠,制备结肠黏膜上清液;正常组纯化并培养结肠上皮细胞建立肠上皮屏障体外模型.将各CD组结肠黏膜上清液分别与正常大鼠结肠上皮细胞混合培养1周,采用ELISA法检测各组结肠黏膜上清液TNF-α含量,Western blot和荧光定量PCR法观察其对CD大鼠体外结肠上皮紧密连接occludin、claudin-1和ZO-1及其mRNA表达的影响.结果:CD模型组较正常组大鼠结肠黏膜上清液中TNF-α含量有显著增高(P<0.01),温和灸、隔药灸和柳氮磺胺吡嘧治疗后TNF-α含量显著降低(均P<0.01),其中温和灸、隔药灸组优于西药组(均P<0.05);与此同时,温和灸、隔药灸和西药组结肠黏膜TNF-α上清液体外诱导大鼠结肠上皮紧密连接occludin、claudin-1和ZO-1及其mRNA表达较模型组有显著增高(P<0.01,P<0.05),且隔药灸、温和灸两组也优于西药组(均P<0.05).结论:艾灸(隔药灸、温和灸)可能是通过降低CD大鼠结肠黏膜异常增高的TNF-α,进而促进或调节结肠上皮紧密连接.ccludin,claudin 1和ZO-1及其mRNA表达,达到修复/保护肠上皮屏障损伤的目的.
-
四君子汤对UC模型大鼠的治疗作用及其对紧密连接蛋白Occludin表达的影响
目的:观察四君子汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠治疗作用及其对黏膜上皮细胞紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)表达的影响.方法:SD大鼠实验分为正常组,模型组,阳性药组(柳氮磺胺吡啶肠溶片,SASP,0.4g·kg-1),四君子汤高、中、低剂量给药组(生药5.6,2.8,1.4 g·kg-1),每组8只.除正常组外,其余各组采用TNBS灌肠法制作溃疡性结肠炎模型,造模24 h后各组分别按设计剂量连续ig给药10d.观察大鼠饮食、精神状态、疾病活动指数、大便次数与质量等情况,末次给药24 h后,处死动物取结肠,肉眼观察结肠黏膜的病变并进行结肠大体形态损伤评分,取病变部位进行HE染色,光镜下评价黏膜病理损伤指数,免疫组织化学法检测大鼠结肠Occludin蛋白的表达.结果:模型组大鼠DAI评分、结肠形态与组织学损伤评分等均比正常组高,Occludin蛋白表达较正常组低(P＜0.05),四君子汤与SASP治疗能不同程度减轻TNBS诱导的UC模型对黏膜的破坏,使紧密连接蛋白Occludin表达升高,抑制结肠通透性的增加,保护结肠黏膜屏障功能(P＜0.05).结论:四君子汤能有效增加Occludin蛋白表达,促进实验性UC大鼠结肠黏膜屏障功能修复,这可能是其治疗结肠炎的机制之一.
-
浆膜腔积液恶性肿瘤细胞鉴别诊断标志物研究进展
良性和恶性浆膜腔积液的诊疗和预后不同,因此对浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断具有重要的临床意义.传统的浆膜腔积液细胞学检杳特异性高,但敏感性较低,特别是转移性癌细胞和间皮细胞的形态学上有交叉,鉴别诊断常很困难.随着免疫细胞化学和分子遗传学技术的进步,越来越多的标志物开始被应用于浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断.一、闭合蛋白(claudin)细胞间的紧密连接由咬合蛋白、闭合蛋白和连接黏附分子构成.目前已发现闭合蛋白家族由24个跨膜蛋白亚型组成,相对分子质量为20 000 ～27 000[1].闭合蛋白表达异常所致的细胞间紧密连接功能的失常,可能是影响肿瘤细胞发生、发展的原因之一.研究显示,闭合蛋白-1、-7在宫颈癌中表达显著增高,闭合蛋白-3、4在浆液性卵巢癌中呈高表达,而闭合蛋白-4的低表达与胃癌细胞的低分化、浸润深度和转移情况密切相关[ 2-3].
-
铅暴露对体外血脑脊液屏障功能及ZO-1和闭合蛋白表达的影响
目的 通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制.方法 使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)2 2.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h.采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测BCB中紧密连接蛋白ZO-1和闭合蛋白表达及分布.结果 与细胞对照组相比,Pb(AC)2 2.5,5.0和10.0 mmol·L-1暴露48 h对Z310细胞存活率和密度均无明显影响.暴露后第12天,与细胞对照组比较,Pb(AC)2 5.0和10.0 mmol· L-1组TEER值明显降低(P＜0.05),葡聚糖通过率显著增高(P＜0.05).Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测结果显示,与细胞对照组相比,Pb(AC)2各浓度暴露48 h后,ZO-1和闭合蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论 铅暴露能够破坏BCB模型的通透性,其机制可能与抑制紧密连接蛋白的表达有关.
-
正肝汤对肝硬化大鼠肠道紧密连接蛋白OCLN和ZO-1表达的影响
目的:探讨正肝汤对肝硬化大鼠肠道紧密连接蛋白OCLN和ZO-1表达的影响.方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和正肝汤组,每组各30只.制备四氯化碳肝硬化大鼠模型,正肝汤组大鼠予正肝汤(1.5 g/100 9·d)灌胃干预.对肝组织进行苏木素-伊红染色,透射电镜观察小肠组织的超微结构,免疫印迹法检测小肠组织中OCLN和ZO-1的蛋白表达.结果:与正常组相比较,模型组大鼠的肝组织中胶原纤维广泛增生,纤维间隔相互连接,徦小叶形成,电镜见小肠黏膜上皮细胞表面微绒毛稀疏,减少、变短,排列不规则,部分断裂扭曲,脱落明显.正肝汤组大鼠的肠黏膜损伤较模型组明显减轻.正常组大鼠小肠组织中OCLN和ZO-1的表达量分别是模型组2.94和3.91倍,均P＜0.01,差异显著.正肝汤组的小肠组织中OCLN和ZO-1的表达量分别是模型组1.74和1.91倍,与模型组相比均P＜0.05,有统计学差异.结论:正肝汤能显著减轻肝硬化大鼠的肠黏膜损伤,并上调小肠组织中OCLN和ZO-1的蛋白表达.
关键词： 正肝汤 肝硬化 紧密联接 闭合蛋白 胞质紧密粘连蛋白-1 -
紧密连接蛋白-1、闭锁蛋白、白细胞介素-18在急性重症心肌炎心脏粘膜中的表达
目的 观察急性重症心肌炎大鼠心脏粘膜紧密连接蛋白(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)及白细胞介素(IL)-18的表达变化,探讨急性重症心肌炎时心脏屏障功能损伤的机制.方法 选择SD大鼠60只,随机分为三组,分别为对照组、假手术组、心肌炎组,每组各20只.心肌炎组制作急性重症心肌炎模型,假手术组大鼠麻醉后手术进腹,仅翻动心脏组织.对照组不进行腹部手术.术后24h处死各组大鼠,取心脏组织.光镜下观察心脏组织病理学改变,免疫组化检测各组心脏粘膜ZO-1、Occludin、IL-18蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测各组心脏粘膜ZO-1、Occludin、IL-18 mRNA的表达.结果 光镜下可见心肌炎组心脏黏膜绒毛上皮坏死脱落,血管充血扩张,大量中性粒细胞浸润.对照组、假手术组、心肌炎组ZO-1阳性率分别为85％、70％、15％,心肌炎组ZO-1阳性率低于对照组及假手术组(P＜0.05).对照组、假手术组、心肌炎组Occludin阳性率分别为75％、65％、20％,心肌炎组Occludin阳性率低于对照组及假手术组(P＜0.05).对照组、假手术组、心肌炎组IL-18阳性率分别为15％、15％、80％,心肌炎组IL-18阳性率高于对照组及假手术组(P＜0.05).心肌炎组ZO-1、Occludin mRNA表达水平均低于对照组及假手术组(P＜0.05);,IL-18高于对照组及假手术组(P＜0.05).结论 急性重症心肌炎时,紧密连接相关蛋白Z0-1、Occludin表达降低,IL-18表达增加,可能共同参与了急性心肌炎心脏粘膜屏障功能损伤的病理过程.
-
白细胞介素-22对小鼠实验性结肠炎肠黏膜闭合蛋白的影响
UC 是一种病因未明的自发性、慢性结肠黏膜炎病变。近年来，已发现肠黏膜屏障功能在 UC 发病机制中占有重要地位［1］。闭合蛋白（occludin）是肠上皮屏障紧密连接中的重要结构蛋白质，对保持肠黏膜屏障完整性具有重要意义，并受 IL-10等多种细胞因子的影响［2］。IL-22属于 IL-10细胞因子家族中的一员，对 UC 的肠黏膜屏障具有重要的保护作用［3］，但对闭合蛋白的作用尚未明确。本研究拟通过 IL-22干预小鼠急性结肠炎模型，观察其对肠黏膜屏障闭合蛋白的影响。
-
薏苡附子败酱散对小鼠急性期溃疡性结肠炎肠黏膜的修复作用
目的:探讨薏苡附子败酱散对小鼠溃疡性结肠炎(UC)肠黏膜的修复作用.方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉秦组及薏苡附子败酱散(中药)低、中、高剂量组.除正常组以外,其余各组小鼠均制备成急性期UC模型.于造模第3天起,中药低、中、高剂量组分别给予5.24 g·kg1·d、10.48 g·kg-1·d、20.96 g·kg-1·d的薏苡附子败酱散药液,美沙拉秦组给予0.82 g·kg-1·d的美沙拉秦药液,正常组、模型组灌胃给予同体积双蒸水,均持续7d.实验过程中每日观察小鼠的一般情况,绘制每组小鼠的疾病活动指数(DAI)评分曲线.干预结束后处死小鼠,取结肠组织进行HE染色、组织病理(HI)评分,Western blot检测结肠组织中闭合蛋白(claudin)-1和claudin-2的表达.结果:模型组DAI评分显著高于正常组,药物干预后美沙拉秦组及中药高、中、低剂量组小鼠与模型组比较,DAI评分明显降低(P＜0.05).HE染色结果显示,正常组小鼠肠组织结构完整;模型组小鼠肠组织结构破坏,黏膜缺损,腺体分离,大量炎性细胞浸润;中药低剂量组病理结果类似模型组;美沙拉秦组及中药中、高剂量组肠组织结构比较完整,部分炎性细胞浸润,HI评分与模型组比较明显降低(P＜0.01).Western blot结果显示,美沙拉秦组、中药高剂量组与模型组比较,claudin-1蛋白表达明显升高(P＜0.01),claudin-2蛋白表达降低(P＜0.01),且高剂量组较低剂量组作用显著(P＜0.01).结论:薏苡附子败酱散对急性UC可以改善结肠黏膜的通透性,具有一定的黏膜修复作用.
-
TGF-β1在大鼠睾丸支持细胞的作用及对紧密连接的影响
目的:探讨TGF-β1在大鼠睾丸支持细胞增殖和凋亡中的作用以及对紧密连接相关蛋白基因表达的影响. 方法:体外分离和培养大鼠睾丸支持细胞,分空白对照组、TGF-β1受体阻滞剂组、TGF-β1刺激组和TGF-β1+受体阻滞剂组共4组.CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;建立支持细胞原代双室培养模型,应用跨上皮电阻测定法(TER)检测单层细胞两侧跨细胞电阻值;RT-PCR和Western印迹检测支持细胞闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)和紧密连接蛋白Ⅱ(ClaudinⅡ)的相对表达量. 结果:各组细胞增殖组间差异有统计学意义(F=5.05,P＜0.05),TGF-β1刺激组与空白对照组相比细胞增殖率增加(P＜0.05),而TGF-β1+受体阻滞剂组与TGF-β1刺激组相比细胞增殖率降低(P＜0.05).各组细胞凋亡率组间差异无统计学意义(F=1.13,P＞0.05);各组细胞间TER差异有统计学意义(F=38.99,P＜0.01),与空白对照组比较TGF-β1刺激组TER降低(P＜0.01),与TGF-β1刺激组比较,TGF-β1+受体阻滞剂组和TGF-β1受体阻滞剂组细胞TER升高(P均＜0.01);各组支持细胞中ZO-1、ClaudinⅡmRNA及蛋白在各组中的表达量差异均无统计学意义(FmRNA=0.49,0.93,P均＞0.05;F蛋白=0.28,1.31,P均＞0.05),而Occludin mRNA及蛋白在各组中的表达量差异均有统计学意义(FmRNA=6.86,F蛋白=6.87,P均＜0.05);与空白对照组相比,TGF-β1刺激组Occludin mRNA及蛋白表达明显降低(P均＜0.01),而加入受体阻滞剂后,Occludin mRNA及蛋白表达明显回升(P均＜0.05). 结论:TGF-β1对睾丸支持细胞的增殖有促进作用,并能通过调节Occludin蛋白的表达而影响大鼠支持细胞间的紧密连接.
-
闭合蛋白在脑缺血中的作用
血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)损伤是缺血性卒中的重要病理学改变.闭合蛋白是构成BBB紧密连接的主要组成部分,在维持BBB完整性中发挥着重要作用.脑缺血通过诱导炎性介质、活性氧和基质金属蛋白酶的激活,启动闭合蛋白降解,并使紧密连接-细胞骨架蛋白相互作用发生改变,导致BBB完整性破坏,通透性增高.文章主要阐述了闭合蛋白与BBB、脑水肿和出血性转化之间的关系以及闭合蛋白作为缺血性卒中干预靶点的可能性.
-
外源性硫化氢通过抑制闭合蛋白和闭锁小带蛋白1表达减轻脑缺血再灌注大鼠脑水肿和脑损伤
目的探讨外源性硫化氢对脑缺血再灌注后脑水肿和脑损伤的影响及其机制。方法60只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、硫化氢30 ppm组（1 ppm ＝1 mg/L）和硫化氢60 ppm组，每组15只。采用大脑中动脉闭塞法建立大鼠局部脑缺血2 h再灌注24 h模型。在脑缺血再灌注24 h后观察神经功能学评分，测定脑梗死体积、脑水肿程度以及血脑屏障通透性变化。采用蛋白质印迹法检测缺血半暗带闭合蛋白和闭锁小带蛋白1（zonula occludens protein 1, ZO－1）表达。结果与缺血再灌注组比较，吸入硫化氢30 ppm 和60 ppm 能以剂量依赖方式显著增高神经功能评分（P 均＜0.05），缩小脑梗死体积（P 均＜0.05），减轻脑水肿（P 均＜0.05）。缺血再灌注组缺血侧脑组织伊文思蓝含量较假手术组显著增高[（0.74±0.14）μg/100 mg 对（0.19±0.06）μg/100 mg；P <0.05]，硫化氢30 ppm组[（0.55±0.10）μg/100 mg]和硫化氢60 ppm组[（0.35±0.08）μg/100 mg]脑组织伊文思蓝含量均较缺血再灌注组显著降低（P 均<0.05），其中硫化氢60 ppm组显著低于硫化氢30 ppm组（P <0.05）。蛋白质印迹分析显示，硫化氢30 ppm 和60 ppm 组半暗带闭合蛋白（0.621％±0.101％对0.787％±0.087％对0.453％±0.127％； P ＜0.05）和 ZO－1（0.602％±0.118％对0.778％±0.805％对0.426％±0.146％；P ＜0.05）的表达水平均较缺血再灌注组显著增加，其中硫化氢60 ppm组闭合蛋白和ZO－1的表达水平均显著高于硫化氢30 ppm组（P 均＜0.05）。结论吸入外源性硫化氢能以剂量依赖方式显著降低脑缺血再灌注后脑水肿，缩小脑梗死体积并改善神经功能，其机制可能与抑制闭合蛋白和 ZO－1表达、下调维持血脑屏障完整性有关。
-
闭合蛋白表达异常与相关皮肤病
皮肤屏障由角质层、细胞间质和紧密连接组成.闭合蛋白是构成紧密连接的主要蛋白之一,存在于哺乳动物的皮肤、脑、神经系统和内脏组织中,在生理状态下影响紧密连接的整体性及其功能,是构成皮肤栅栏和屏障的主要功能蛋白之一.在人类组织中已发现27种闭合蛋白亚型,在上皮细胞间形成对电解质及溶质分子的屏障结构.研究表明,皮肤屏障功能受损是多种皮肤病如银屑病、特应性皮炎、家族性良性天疱疮、光线性角化病等重要的发病因素,这与闭合蛋白功能和结构的异常密切相关.闭合蛋白家族中不同成员在不同皮肤病中的表达各异.
-
3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤后闭合蛋白的保护作用
目的:研究3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤后闭合蛋白保护作用及其机制.方法:大鼠大脑中动脉栓塞制作局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,缺血后10 min,于舌下静脉注射3'-大豆苷元磺酸钠(2.0 mg·kg-1),再灌注24h后,取缺血区脑组织制成10％的匀浆,定量PCR检测法测定TNF-α,Bax,Bcl-2,Ocln mRNA的表达.结果:与模型组相比,3'-大豆苷元磺酸钠能显著降低TNF-α和Bax mRNA的表达,能显著升高Bcl-2和Ocln mRNA的表达.结论:3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用机制,可能与其降低TNF-α、Bax mRNA的表达和升高Bcl-2、Ocln mRNA的表达有关.
关键词： 3'-大豆苷元磺酸钠 脑缺/血再灌注损伤 闭合蛋白 -
α-黑素细胞刺激素对早期糖尿病大鼠视网膜血管渗漏的保护作用
背景 糖尿病视网膜病变(DR)的主要病理基础是视网膜的微血管变化和炎性改变.研究认为α-黑素细胞刺激素(α-MSH)玻璃体腔注射可对视网膜脉络膜组织发挥抗氧化应激和抗凋亡作用,从而改善血-视网膜屏障(BRB)功能,但缺乏组织学研究的验证.目的 研究α-MSH对视网膜血管渗漏的改善作用.方法 应用随机数字表法将清洁级SD大鼠90只随机分为正常对照组、糖尿病(DM)模型组和α-MSH组,DM模型组和α-MSH组大鼠采用尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)法制备模型,正常对照组大鼠同法注射枸橼酸钠缓冲液.α-MSH组大鼠分别于造模后1周和3周玻璃体腔注射3.3 μg/μl α-MSH 3 μl,正常对照组大鼠同法注射生理盐水3μl,DM模型组不行玻璃体腔注射.造模后第5周,按照45 mg/kg的剂量经鼠尾静脉注射30 mg/ml伊文思蓝溶液,注射后2h每组取2只大鼠制备视网膜铺片,于荧光显微镜下观察视网膜血管形态;收集各组8只大鼠内眦部血液,检测BRB渗漏状况;用37℃枸橼酸钠缓冲液行左心室灌流,处死大鼠,分离大鼠视网膜,透射电子显微镜下观察脉络膜和视网膜血管超微结构的变化;采用实时定量PCR法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、闭合蛋白(occludin)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的相对表达水平.结果 DM模型大鼠体质量明显降低,饮水量明显增多;造模后3d和5周,DM模型组大鼠的血糖分别为(29.69±4.77) mmol/L和(24.64±2.72) mmol/L,DM模型成功建立.视网膜铺片显示,DM模型组大鼠视网膜血管走行异常,血管壁大量伊文思蓝渗漏,而α-MSH组大鼠视网膜血管形态接近正常对照组.造模后5周,DM模型组大鼠视网膜伊文思蓝的渗漏量为(10.04±8.18) μl/(g·h),明显多于α-MSH组的(2.62±3.73) μl/(g·h)和正常对照组的(3.10±1.13) μl/(g·h),差异均有统计学意义(P=0.035、0.041).α-MSH组大鼠脉络膜和视网膜血管的超微结构接近正常对照组,而DM模型组大鼠脉络膜血管内皮细胞肿胀,视网膜色素上皮(RPE)空泡样变性.此外,DM模型组大鼠视网膜中ICAM-1 mRNA和TNF-αmRNA水平明显高于α-MSH组和正常对照组,而occludin mRNA的相对表达水平明显低于o-MSH组和正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).3个组大鼠视网膜中VEGF mRNA相对表达量的整体比较,差异无统计学意义(F=0.791,P=0.466).结论 在STZ诱导的DM模型大鼠中,玻璃体腔注射α-MSH可通过减少视网膜血管的渗漏,改善脉络膜和视网膜血管的超微结构,下调视网膜中促炎因子的表达和上调细胞间紧密连接成分的表达发挥对视网膜的保护作用.
-
地塞米松对人眼小梁细胞紧密连接相关蛋白表达的影响
病理性眼压升高多源于房水排出受阻,与小梁网内皮小梁细胞形态和功能的变化密切相关.小梁细胞间存在紧密连接,对细胞内外各种物质的交换起调节作用[1-3].紧密连接由跨膜蛋白、细胞质附着蛋白和细胞骨架蛋白组成,水控蛋白-1、闭合蛋白、连接黏附蛋白(Junctional Adhesion Molecule-1,JAM-1)组成紧密连接的跨膜结构[4-9],3种蛋白的失衡直接影响小梁细胞间紧密连接的结构和功能,从而改变小梁网的通透性.皮质类固醇性青光眼是否有细胞间紧密连接的改变尚不明了.本研究观察地塞米松对人眼小梁细胞水控蛋白-1、闭合蛋白、JAM-1表达的影响,探讨皮质类固醇性青光眼可能的发病机制.
-
紧密连接蛋白Occludin与变应性鼻炎发病机制相关性探讨
目的 研究紧密连接蛋白中闭合蛋白(Occludin)在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达,初步探讨其在变应性鼻炎发病机制中的作用.方法 按照2009年武夷山标准选取变应性鼻炎患者32例作为实验组,同时以22例单纯鼻中隔偏曲患者作为正常对照组.所有患者术前收集静脉血清,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血中IL-4、IFN-γ,术中取AR组和对照组下鼻甲黏膜,行免疫组化检测Occludin的表达,比较两组间Occludin表达强度,并对两组患者血清中IL-4、IFN-γ与鼻黏膜Occludin的表达强度进行相关性分析.结果 ①变应性鼻炎患者血清IL-4平均含量(53.65±20.63) ng/L显著高于对照组(15.65±9.50) ng/L,而变应性鼻炎组血清IFN-γ平均含量(19.38±11.28)ng/L显著低于对照组(180.26±65.10)ng/L,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);②免疫组化结果显示变应性鼻炎鼻黏膜中Occludin表达评分(2.78±1.96)较正常组(5.59±2.86)低,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);③Occludin蛋白的表达强度与IL-4含量呈负相关(r=0.783,P＜0.05),与IFN-γ含量呈正相关(r=0.748,P＜0.05).结论 紧密连接蛋白Occludin在变应性鼻炎患者鼻黏膜中表达强度明显下降,提示其表达下降在变应性鼻炎的发病机制中可能发挥关键作用.
-
MicroRNA-21靶调控NCM460细胞ROCK1基因上调occludin表达
目的:探讨微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对人正常结肠上皮细胞系NCM460中紧密连接相关蛋白——闭合蛋白(occludin)表达的影响,并分析其可能的靶基因.方法:利用miR-21过表达慢病毒建立miR-21过表达NCM460细胞系,qPCR检测miR-21表达水平,Western blot检测occludin 表达情况.生物信息学方法预测miR-21的靶基因,根据评分和文献检索选择相应靶基因ROCK1进行进一步研究,利用miR-21 mimic和inhibitor转染NCM460细胞,同时检测miR-21以及ROCK1的表达水平;采用双萤光素酶报告基因实验验证ROCK1是miR-21的靶基因.结果:在NCM460细胞中过表达miR-21后可上调紧密连接相关蛋白occludin的表达.生物信息学分析预测ROCK1可能为miR-21的靶基因.在NCM460细胞中过表达miR-21可下调ROCK1的mRNA和蛋白水平,抑制miR-21可上调ROCK1的mRNA和蛋白水平.萤光素酶报告基因验证ROCK1为miR-21的靶基因.结论:在NCM460细胞中,miR-21能上调肠屏障功能相关蛋白occludin的表达.ROCK1是miR-21的靶基因,miR-21可能通过靶调控ROCK1促进occludin的表达.
-
血管通透性增高的基本机制
血管通透性增高涉及炎症、烧伤、休克、免疫反应、肿瘤转移等一系列病理过程的发生,由于发生机制一直没有充分阐明,血管通透性紊乱的防治受到了限制.如血管通透性增高和体液丢失在烧伤性休克发生中的作用早已确定,但至今仍只能根据烧伤面积和深度进行补液,尚未找到一个降低通透性和减少烧伤输液的有效措施.
