首页 > 文献资料
-
抗纤复方含药血清对HSC-LI90细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子基因表达的影响
目的:观察抗纤复方含药血清对肝星形细胞(HSC)LI90细胞(HSC-LI90)基质金属蛋白酶及其抑制因子基因表达的影响.方法:以0.5、2.0、4.0g/kg等不同剂量抗纤复方灌胃大鼠制备的含药血清,作用HSC-LI90细胞48h,应用Northern印迹杂交的方法,检测膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶-2及其抑制因子-1(TIMP-1)基因的表达,并用酶图法检测基质金属蛋白酶-2的活性.结果:抗纤复方含药血清抑制HSC-LI90细胞TIMP-1,增加HSC-LI90细胞膜型基质金属蛋白酶基因表达,对基质金属蛋白酶-2基因表达及其活性没有影响.结论:抗纤复方抑制HSC-LI90细胞TIMP-1基因表达水平,促进胶原降解,可能是抗肝纤维化的作用机制之一.
-
抗纤复方影响大鼠肝贮脂细胞生成Ⅰ、Ⅲ型胶原的比较研究
用免疫细胞化学染色法观察抗纤复方药物血清对大鼠正常肝传代贮脂细胞和纤维肝原代贮脂细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,并对Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达量进行比较分析.结果:传代贮脂细胞Ⅲ型胶原增加显著,而纤维肝贮脂细胞Ⅰ型胶原增加明显,抗纤复方能显著抑制贮脂细胞表达胶原,且对传代贮脂细胞Ⅲ型胶原和纤维肝原代贮脂细胞Ⅰ型胶原抑制作用更明显.
-
抗纤复方药物血清对HSC-LI90细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶及其组织抑制因子-1基因表达的影响
目的:探讨抗纤复方药物血清对肝星形细胞(HSC)LI90细胞(HSC-LI90)Ⅰ型、Ⅳ型前胶原和基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMP-1)基因表达的影响.方法:以0.5、2.0、4.0g/kg等不同剂量抗纤复方灌胃大鼠,制备药物血清,作用于HSC-LI90细胞48h,应用Northern印迹杂交的方法,检测Ⅰ型、Ⅳ型前胶原、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及膜型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)及其组织抑制因子(TIMP-1)基因的表达,并用酶图法检测基质金属蛋白酶-2的活性.结果:(1)抗纤复方不同浓度药物血清能抑制HSC-LI90细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原及其组织抑制因子TIMP-1的基因表达(P＜0.05或P＜0.01);(2)能增加膜型基质金属蛋白酶基因表达(P＜0.01);(3)对基质金属蛋白酶-2基因表达及活性无影响(P＞0.05).结论:(1)抗纤复方具有抗肝纤维化作用;(2)抗纤复方抑制HSC-LI90细胞TIMP-1基因表达水平,促进胶原降解,可能是抗肝纤维化的作用机制之一.
-
抗纤复方对人α1(Ⅰ)前胶原基因启动子活性的影响
目的:探讨抗纤复方(AFC)对人α1(Ⅰ)前胶原基因启动子活性的作用及其机制.方法:以含人α1(Ⅰ)前胶原基因上流2.3kb,0.8kb,476bp,173bp启动子片段为研究靶序列,以氯霉素乙酰基转移酶(CAT)为报告基因,构建基因重组质粒,转染成纤维细胞(NIH3T3),建立稳定的α1(Ⅰ)前胶原启动子转染细胞体系,用抗纤复方和(或)转移生长因子(TGFβ1)处理NIH3T3细胞,测定CAT活性.结果:(1)抗纤复方能够抑制α1(Ⅰ)前胶原启动子报导基因质粒phCAT-Cα1(Ⅰ)2.3,phCAT-Cα1(Ⅰ)0.8,phCAT-Cα1(Ⅰ)0.4的活性,不能抑制α1(Ⅰ)前胶原启动子报导基因质粒phCAT-Cα1(Ⅰ)0.1的活性;(2)TGFβ1能促进phCAT-Cα1(Ⅰ)2.3的活性,抗纤复方能拮抗TGFβ1这一促进作用.结论:抗纤复方能够作用于胶原α1(Ⅰ)基因调控片段,抑制胶原合成.
-
抗纤复方Ⅰ号抗酒精性肝病的实验研究
目的:利用酒精性肝病的大鼠模型,研究抗纤复方Ⅰ号(KXI)对酒精性肝病的预防作用及其机制.方法:采用乙醇灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型.Wistar大鼠随机分为3组,正常组,酒精组及中药组.中药组在造模同时,给予抗纤复方I号水煎剂(生药浓度4.5 kg/L)4 mL/kg-1,2次/d灌胃,观察12 wk.实验4 wk、8 wk、12 wk末分批处死动物,HE及VG染色观察各组大鼠肝细胞变性及纤维组织增生情况,应用病理图像分析仪对纤维组织增生进行半定量分析.电镜下观察肝星形细胞形态改变.应用TBA比色法测定各组大鼠肝组织中丙二醛(MDA)含量,羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果:HE染色酒精组4 wk末即出现肝细胞坏死,脂肪变,炎性细胞浸润.12 wk末脂肪变及肝细胞坏死增多,中药组8 wk时才出现轻度脂肪变,肝细胞坏死及炎性细胞浸润均不明显.VG染色酒精组可见纤维组织增生,呈条索状向肝小叶内延伸,中药组无纤维条索形成.图像分析仪所示胶原面积百分比酒精组明显高于正常组及中药组(19.24±2.5 vs 4.6±0.7,19.24±2.5 vs9±0.9,P＜0.05).电镜下观察酒精组肝细胞失去正常结构,星形细胞增多、变形,细胞外可见较多胶原原纤维.中药组肝细胞及星形细胞形态基本正常,基质内亦可见少量胶原原纤维.酒精组MDA在实验4 wk末即已升高,与正常组及中药组比较差异显著(32±3 vs16±7,32±3 vs 23±8,P＜0.05),且随酒精摄入量的增加而进行性升高(32±3→36±4→62±2,P＜0.05).组织中SOD活性在实验4 wk末,无论酒精组还是中药组均有升高,但随着实验进程,酒精组SOD活性进行性下降(118±5→92±10→71±9,P＜0.05),而中药组仍维持较高水平(8 wk,12 wk分别为159±20,129±7)与酒精组比较差异显著(159±20vs92±10,P＜0.05).结论:抗纤复方Ⅰ号具有良好的抗大鼠酒精性肝病的作用,其作用机制与抑制脂质过氧化反应及HSC活化有关.
-
抗纤复方Ⅰ号对肝星状细胞细胞外基质及其降解酶表达的影响
目的:研究乙醛对肝星状细胞(HSC)细胞外基质(ECM)及其降解酶表达的影响及中药抗纤复方Ⅰ号(KXI)的干预作用.方法:大鼠HSC体外原代及传代培养,大鼠灌以KXI制备药物血清,用乙醛及药物血清处理HSC.以放射免疫分析法及RT-PCR分别检测培养上清中层粘连蛋白(LN)及HSC中α1(Ⅰ),α1(Ⅳ)型胶原及基质金属蛋白酶-1,2(MMP-1,2)mRNA的表达.结果:培养上清中LN含量在100 μmol/L乙醛处理24 h后显著增加(52.0±12.1 vs 10.0±0.3,P＜0.01),100 mL/L药物血清起抑制作用(19.2±7.8 vs 52.0±12.1,P＜0.01);100 μmol/L乙醛刺激HSCα1(Ⅰ)型胶原及MMP-2 mRNA的表达明显增强,100mL/L药物血清抑制其作用;100 μmol/L乙醛减弱HSCαl(Ⅳ)型胶原及MMP-1 mRNA的表达,100 mL/L药物血清则使二者表达有所增强.结论:KXI能抑制乙醛刺激的HSC中LN的分泌,αl(Ⅰ)型胶原及MMP-2 mRNA的表达;而增强乙醛所抑制的HSC中αl(Ⅳ)型胶原及MMP-1 mRNA的表达.
-
抗纤复方含药血清对HSC-L190细胞Ⅰ型、Ⅳ型前胶原、基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达影响的研究
目的 观察抗纤复方含药血清对肝星形细胞(HSC)L190细胞(HSC-L190)Ⅰ型(CoL-Ⅰ)、Ⅳ型前胶原(CoL-Ⅳ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)mRNA表达的影响.方法 以不同剂量抗纤复方灌胃大鼠制备的含药血清,作用HSC-L190细胞48h,应用Northern印迹杂交的方法,测定其对细胞HSC-L190 CoL-Ⅰ,CoL-Ⅳ、TIMP-1 mRNA表达的影响.结果 抗纤复方0.5、2.0、4.0g/kg等不同剂量含药血清对HSC-L190细胞CoL-Ⅰ、CoL-Ⅳ、TIMP-1 mRNA表达.与空白对照组比较,具有显著性(P<0.05或P>0.01).结论 抗纤复方可降低HSC-L190细胞CoL-Ⅰ、CoL-Ⅳ、TIMP-1 mRNA表达水平,具有抗肝纤维化作用.
-
抗纤复方对纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响
目的:探讨抗纤复方对体外培养纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响.方法:常规培养正常与DMN纤维肝大鼠肝细胞,然后改用抗纤复方原液与抗纤复方药物血清温育肝细胞48小时后,免疫组化S-P法显色细胞纤维连接蛋白(FN)、层连蛋白(LM)和Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)的变化.结果:正常肝细胞基底膜基质合成处于抑制状态,肝纤维化时肝细胞基底膜基质合成增加.抗纤复方能显著抑制纤维肝肝细胞FN,LM及Ⅳ-C的表达,抗纤复方药物血清效果优于原液.结论:抗纤复方具有抑制DMN纤维肝肝细胞基底膜基质的异常合成作用.
-
抗纤复方Ⅰ号对大鼠酒精性肝病的防治作用
酒精性肝病是乙醇及其代谢产物乙醛引起的肝脏代谢和内环境紊乱.实验证明肝纤维化是一个可以逆转的病理过程,因此酒精性肝病治疗的关键是抑制或逆转肝纤维化[1],目前研究表明一些传统中药如丹参、黄芪等具有抗纤维化的作用.抗纤复方Ⅰ号(KXI)是由我研究室组方,在体外证实对酒精性肝病有效.本实验通过灌胃的方法制备大鼠酒精性肝病的动物模型[2],进一步研究KX I对于大鼠酒精性肝病的防治作用及其可能机制.1材料及方法1.1实验动物:6周龄雄性Wistar大鼠80只,体质量180～220g,由中国医科大学实验动物部提供.随机分为4组:1组为健康对照组,2组为酒精性肝病组,3组为KXI治疗组,4组为KXI预防组.每笼6～8只,分笼饲养.按昼夜时程,在室温及稳定湿度条件下,用平衡饲料喂养.
-
抗纤复方Ⅰ号对大鼠酒精性肝病的防治作用
酒精性肝病是乙醇及其代谢产物乙醛引起的肝脏代谢和内环境紊乱.实验证明肝纤维化是一个可以逆转的病理过程,因此酒精性肝病治疗的关键是抑制或逆转肝纤维化[1],目前研究表明一些传统中药如丹参、黄芪等具有抗纤维化的作用.抗纤复方Ⅰ号(KXI)是由我研究室组方,在体外证实对酒精性肝病有效.本实验通过灌胃的方法制备大鼠酒精性肝病的动物模型[2],进一步研究KX I对于大鼠酒精性肝病的防治作用及其可能机制.1材料及方法1.1实验动物:6周龄雄性Wistar大鼠80只,体质量180～220g,由中国医科大学实验动物部提供.随机分为4组:1组为健康对照组,2组为酒精性肝病组,3组为KXI治疗组,4组为KXI预防组.每笼6～8只,分笼饲养.按昼夜时程,在室温及稳定湿度条件下,用平衡饲料喂养.
