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伊那普利拉对新生鼠心肌成纤维细胞增殖及作用机制的研究
目的 观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(angiotensin Ⅰ converting enzyme inhibitor,ACEI)伊那普利拉(enalaprilat,Ena)抗血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖及其对细胞周期蛋白的影响,探讨Ena抗CFb增殖及机制.方法 以培养的新生wistar大鼠乳鼠CFb为实验模型,实验分为对照组,AngⅡ组,用药组3个剂量,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFb增殖;羟脯氨酸法测定胶原量;流式细胞仪测定细胞周期和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kipl(Cyclin dependent kinase inhibitor,CKI)表达.结果 Ena能够抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P＜0.01,P＜0.05),降低羟脯氨酸含量(P＜0.01,P＜0.05),增加细胞周期中G0/G1期百分率,降低S期百分率,提高p27kipl表达(P＜0.01,P＜0.05).结论 Ena抑制AngⅡ诱导的CFb增殖与提高p27kipl表达有关.
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硒对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响
目的 研究硒(Se)和去甲肾上腺素(norepinephrine NE)对体外培养的心肌成纤维细胞(cardiacfibroblast CFbs)合成Ⅰ型胶原合成和mRNA表达的影响.方法 采用酶消化法获得Wistar大乳鼠CFbs并进行培养,与NE和Se(Selenium)作用48 h后,测定细胞培养液中Ⅰ型胶原和羟脯氨酸含量,利用RT-PCR技术半定量分析细胞中mRNA表达情况.结果 NE组上清液中的Ⅰ型胶原含量(A值)与对照组比较有显著性增加(P＜0.01);补Se组A值较NE组显著性降低(P＜0.01);补Se可降低NE引起的羟脯氨酸含量增加,且有显著性差异(P＜O.01).结论 NE可以促进Ⅰ型胶原含量和CFbs α1Ⅰ型胶原mRNA表达增加,而Se对于Ⅰ型胶原的合成具有抑制作用.
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Id3基因在心肌营养素1促心肌成纤维细胞增殖中的作用
目的 探讨在高静水压条件下分化抑制因子3(inhibitory of differentiation 3,Id3 )基因在心肌营养素-1 (cardiotrophin-1,CT-1 ) 促心肌成纤维细胞增殖中的作用.方法 3～4代心肌成纤维细胞用于实验,分为对照组( C 组)、CT-1反义寡核苷酸组 (ASODN组) 、正义寡核苷酸组 ( SODN组)、高静水压组( P 组).利用自制压力培养装置,将各组细胞置于160 mmHg压力下培养8 h.CT-1活性通过 Western印迹法分析测定,Id3基因表达通过RT-PCR方法测定,MTT测定心肌成纤维细胞增殖 .结果 高静水压明显促进心肌成纤维细胞增殖 ,CT-1表达上调,Id3 mRNA表达增加;CT-1 ASODN干预后能抑制高静水压所致的细胞增殖,CT-1表达下调,Id3 mRNA表达减少.结论 Id3 mRNA在心肌成纤维细胞中有明显表达,且与CT-1促心肌成纤维细胞增殖密切相关.
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替米沙坦联合氨氯地平对乳鼠转化生长因子－β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响
目的：探讨替米沙坦联合氨氯地平对血管紧张素（ Ang）Ⅱ诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖及细胞中转化生长因子（ TGF）－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法对 Wistar乳鼠心肌成纤维细胞行体外原代及传代培养，将培养好的细胞分为5组：对照组（加入15％小牛血清DEME培养液）、AngⅡ组（15％小牛血清DEME培养液＋1×10－6 mol／L AngⅡ），替米沙坦组（TE组，在AngⅡ组基础上加入10μmol／L替米沙坦），氨氯地平组（ AM组，AngⅡ组基础上加入1μmol／L氨氯地平）及替米沙坦＋氨氯地平组（ TE＋AM 组），在 AngⅡ组基础上加入10μmol／L 替米沙坦＋1μmol／L氨氯地平），每组3份。观察各组细胞不同时期增殖情况及TGF－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、p27蛋白表达情况。结果与对照组相比，AngⅡ组心肌成纤维细胞在S期时增殖率较高，而在G0／G1期、G2／M期时增殖率下降（P＜0．05），TGF－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、p27蛋白表达水平显著升高（P＜0．05）。与AngⅡ组相比，TE组、AM组及TE＋AM组心肌成纤维细胞在 S 期时增殖率显著下降，而在 G0／G1期、G2／M 期时增殖率升高（P＜0．05）， TGF－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、p27蛋白表达水平下降（ P＜0．05），其中 TE＋AM 组心肌成纤维细胞在 G0／G1期、G2／M 期增殖较 TE 组、AM 组显著，而TGF－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、p27蛋白表达水平低于 TE组、AM组。结论替米沙坦联合氨氯地平能有效抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖，其可能机制与抑制TGF－β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及p27蛋白过度表达有关。
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依那普利拉抑制大鼠心室成纤维细胞增殖的实验研究
目的 观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖作用及作用机制.方法 以培养的Wistar大鼠乳鼠CFb为模型,实验分为对照组、AngⅡ组、用药组三个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFb增殖;羟脯氨酸法测定胶原含量;流式细胞仪、免疫细胞荧光染色法、免疫印迹法检测细胞周期和p27kip1表达.结果 Ena能够抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P＜0.01,P＜0.05),降低羟脯氨酸含量(P＜0.01,P＜0.05),提高p27kip1表达(P＜0.01,P＜0.05).结论 Ena抑制CFb增殖与提高p27kip1表达相关.
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小窝蛋白-1反义寡核苷酸在AVP诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀的干预效应
目的 研究小窝蛋白-1反义寡核苷酸(cav1-AS ODN)在血管加压素(AVP)诱导的成年大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀(Sim)对cav1表达的干预效应.方法 采用脂质体导入法将cav1-AS ODN导入离体培养的成年大鼠CFs,用3H-TdR掺入法定量观察CFs增殖,蛋白免疫印迹法分析cav1-AS ODN对AVP诱导大鼠CFs增殖后磷酸化erk1/2 (p-erk1/2)、p21和细胞周期蛋白A(cyclin A)表达变化及Sim对cav1表达的影响.结果 cav1-AS ODN与10-7 mol/L的AVP共同干预组,大鼠CFs内3H-TdR掺入率和p-erk1/2蛋白表达量分别相当于空白对照组的(212±6)% 和(7.9 ± 0.3)%,10-7mol/L的AVP单独干预组的3H-TdR掺入率和p-erk1/2表达量分别相当于空白对照组的(172±4)%和(5.7±0.2)%,两组比较差异非常显著(P<0.01).cav1-AS ODN单独干预或与10-7mol/L的AVP共同干预大鼠CFs 24 h后,两组CFs内p21表达丰度均较空白对照组下降,cyclin A表达丰度升高.β-环糊精、黄体酮或Sim可减少CFs胞膜上cav1蛋白表达.用10、15或20 μg/ml胆固醇分别与10-7 mol/L Sim共同干预CFs 24 h后,CFs胞膜上cav1蛋白表达量分别相当于对照组的(86±3)%、(91±4)%和(94±5)%,与10-7mol/L Sim单独作用CFs组(66±4)%比较,均有显著的统计学差异(P<0.05,P<0.01).结论 cav1-AS ODN可增强AVP促CFs增殖的作用,Sim降胆固醇作用影响CFs胞膜上cav1蛋白表达,从而影响CFs增殖.
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依那普利拉通过调控TGF-β1表达对抗AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖
目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生鼠心室成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖及对羟脯氨酸水平和TGF-β1蛋白表达的影响及机制.方法以培养的新生Wistar大鼠CFb为研究对象,分为对照组,模型组,用药组三个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖；羟脯氨酸法测定胶原含量；逆转录-多聚酶链反应( RT-PCR)和流式细胞仪(FCM)检测Ena对TGF-β1转录及表达的影响.结果 Ena能够显著抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P＜0.05或P＜0.01),降低羟脯氨酸含量(P＜0.05或P＜0.01)；抑制TGF-β1转录及其蛋白表达水平(P＜0.05或P＜0.01).结论Ena抗CFb增殖的作用与抑制TGF-β1转录和表达、拮抗AngⅡ的生物效应密切相关.
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睾酮对心肌成纤维细胞表型转化的干预研究
目的 观察氧化应激对心肌成纤维细胞(CF)表型转化的影响以及睾酮的干预作用,初步探讨睾酮抗心脏老化过程中心肌纤维化的机制.方法 差速贴壁法培养雄性昆明白乳鼠心肌成纤维细胞, 用β-半乳糖苷酶瓤色检测细胞的衰老,MTT法检测细胞增殖能力,采用免疫细胞化学染色检测肌成纤维细胞的典型标记-α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA).结果 H2O2刺激下β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例增加,心肌成纤维细胞增殖率降低,α-SMA免疫化学染色出现明显强阳性;睾酮在3.0×10-9、3.0×10-8和3.0×10-7mol/L 3种浓度下均具有延缓H2O2诱导的以上效应,氟他胺(Flu)能部分阻断睾酮的各种保护作用.结论 睾酮通过受体机制可以逆转H2O2诱导的心脏成纤维细胞表型的转化,这可能是睾酮抗心脏老化过程中心肌纤维化的机制之一.
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槲皮素对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞的影响
目的：研究槲皮素（Que）对血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞（CFB）增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法采用酶消化法和差速贴壁法获得纯化的CFB，应用MTT法测定CFB增殖，羟脯氨酸法测定胶原蛋白含量，化学比色法测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活力含量，实时聚合酶链反应（RT－PCR）检测 CFB 的Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）、转化生长因子（TGF）－β1基因的 mRNA 表达。结果槲皮素在10～40μmol／L浓度范围内可明显抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原蛋白合成增加，同时可升高SOD含量、降低MDA活力，可以降低ColⅠ、TGF－β1蛋白的mRNA表达。结论槲皮素可抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原蛋白合成的作用，从而延缓心肌纤维化的发展。
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激活素A和卵泡抑素对大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积的影响
目的 探讨激活素A(Activin A)和卵泡抑素(FS)对体外培养的原代大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积的影响.方法 取出生24h内Wistar乳鼠心肌成纤维细胞进行体外培养,分别向培养液中加入Activin A或FS+ Activin A.应用MTT法检测细胞增殖情况,应用化学比色法检测培养液上清羟脯氨酸含量,RT-PCR法检测培养细胞Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA表达.结果 与对照组相比,不同浓度Activin A组心肌成纤维细胞的OD值及羟脯氨酸含量明显增高(P＜0.05 ～0.01),Col-Ⅰ及Col-ⅢmRNA表达水平明显升高.不同浓度FS组可降低心肌成纤维细胞的OD值及羟脯氨酸含量(P ＜0.05 ～0.01),下调Col-Ⅰ及Col-Ⅲ mRNA表达水平.结论 Activin A能够促进心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积,提示Activin A可能在心肌间质纤维化的发生发展中起重要作用,FS能够拮抗Activin A诱导的心肌间质纤维化.
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依那普利拉抗心肌成纤维细胞增殖的分子机制
目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(Ena)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红(Chele)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的新生鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期、Ⅰ型胶原纤维(collagen Ⅰ),PKC和细胞周期蛋白cyclinD1蛋白表达的影响,阐明Ena抗CFb增殖的分子机制.方法:培养的新生Wistar大鼠CFb分为对照组、AngⅡ组、Chele+AngⅡ组、Chele+AngⅡ+Ena组和AngⅡ+Ena组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;免疫细胞化学染色(IC)法测定collagen Ⅰ含量;流式细胞术(FCM)检测细胞周期;免疫印迹法检测PKC和细胞周期蛋白cyclinD1表达.结果:与AngⅡ组比较,Chele和Ena组及Chele+Ang Ⅱ+Ena组CFb增殖率均显著降低(P<0.05或P<0.001),collagen Ⅰ含量降低(P<0.05或P<0.01),CFb G0/G1期细胞百分率升高,S期细胞百分率降低(P<0.05或P<0.01),PKC和cyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01).结论:Ena和Chele能抑制AngⅡ诱导的CFb增殖和胶原蛋白分泌,其机制可能是通过抑制PKC-cyclinD1转导通路实现的.
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N-乙酰半胱氨酸通路对AGT-REN双转基因高血压小鼠心肌成纤维细胞中电导钙激活钾离子通道蛋白表达的影响及其意义
目的:探讨高血压过程中心肌成纤维细胞(CFs)氧化应激水平与中电导钙激活钾离子通道(KCa3.1)蛋白表达的关系,阐明KCa3.1在心肌纤维化中的作用及机制.方法:原代培养雄性AGT-REN双转基因高血压小鼠(dTH) CFs,另培养同品系野生C57B6小鼠CFs作为对照.dTH小鼠CFs随机分为高血压组(dTH)和N-乙酰半胱氨酸组(NAC),dTH小鼠CFs给予不同浓度NAC干预24 h.MTT法检测细胞增殖情况,双氯荧光素(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧(ROS)分子表达,Western blotting法检测细胞培养上清collagen Ⅰ、collagenⅢ和细胞中KCa3.1通道蛋白表达、PI3K信号通道蛋白磷酸化改变.结果:4、8和12月龄dTH小鼠CFs中ROS和KCa3.1通道蛋白表达水平与2月龄dTH小鼠比较均增加(P＜0.05或P＜0.01);MTT检测,应用1×10-6、1×10-5、1×10-4和1×10-3 mol·L-1 NAC干预后,dTH小鼠CFs增殖率分别为165.9％、138.72％、110.92％和109.82％,与dTH组比较,1×10-4和1×10-3 mol·L-1NAC对CFs增殖抑制作用明显(P＜0.01).与对照组比较,1×10-4 mol·L-1 NAC组小鼠CFs中Ⅰ、Ⅲ型胶原合成明显减少(P＜0.01);Western blotting检测,与对照组比较,1×10-4 mol·L-1 NAC组小鼠CFs中KCa3.1通道蛋白表达水平下降(P＜0.01);dTH小鼠CFs中p-Akt/ T-Akt表达水平较对照组增加(P＜0.01),而1×10-4 mol·L-1 NAC组小鼠CFs中p-Akt/T-Akt表达水平下降(P＜0.01).结论:ROS清除剂NAC抑制dTH高血压小鼠CFs中KCa3.1通道蛋白表达,可能与其上调细胞中PI3K信号通道磷酸化水平有关.
关键词： 心肌纤维化 活性氧 心肌成纤维细胞 中电导钙激活钾离子通道 -
红景天总黄酮对大鼠心肌成纤维细胞增殖的抑制作用
目的：研究红景天总黄酮对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞（CFB）增殖的抑制作用，探讨红景天总黄酮改善心肌纤维化的作用机制。方法：采用 TGF-β1（5μg· L－1）诱导大鼠CFB 增殖，构建心肌纤维化细胞模型。将正常培养的大鼠 CFB 分为对照组、模型组和25、50及100 mg·L－1红景天总黄酮组。给药48 h 后，MTT 法检测细胞活力，ELISA 法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）和Ⅲ型胶原蛋白（Col Ⅲ）的水平，检测上清液中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性以及丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）的水平。结果：MTT 法检测，与对照组比较，模型组细胞活力明显升高（P ＜0.01）；与模型组，红景天总黄酮各剂量组细胞活力均明显下降（P ＜0.05）。T-SOD 和MDA 检测，与对照组比较，模型组细胞 T-SOD 活性下降（P ＜0.05），MDA 水平明显升高（P ＜0.05）；与模型组比较，50和100 mg· L－1组细胞 T-SOD 活性明显升高（P ＜0.01），25和50 mg· L－1红景天总黄酮组MDA 水平明显下降（P ＜0.05）。GSH-Px 和 GSH 检测，与对照组比较，模型组细胞 GSH-Px 活性及 GSH 水平均明显降低（P ＜0.01）；与模型组比较，红景天总黄酮各剂量组细胞 GSH-Px 活性和 GSH 水平均升高（P ＜0.05）。ColⅠ和 Col Ⅲ水平测定，模型组 ColⅠ和 Col Ⅲ水平明显升高（P ＜0.01）；与模型组比较，红景天总黄酮各剂量组细胞2种蛋白水平均明显下降（P ＜0.05）。结论：红景天总黄酮可以抑制大鼠 CFB 的增殖，并可能经抗氧化应激途径改善心肌纤维化。
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牛磺酸对新生大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮系统的影响
目的 观察牛磺酸(Taurine,Tau)在血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblast,CFb)增殖的过程中对诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮(iNOS-NO)系统的影响,以揭示Tau抑制CFb增殖的初步机制.方法 胰酶消化法分离培养新生大鼠CFb,用AngⅡ诱导促进其增殖,采用MTT法检测细胞增殖;羟脯氨酸试剂盒检测胶原含量;ELISA法测定转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的含量;流式细胞仪检测细胞周期;硝酸还原酶法、分光光度法和免疫荧光法检测CFb NO含量、一氧化氮合酶(iNOS)活性和iNOS蛋白的表达.结果 Tau(40、80和160 mmol/L)可抑制AngⅡ诱导的CFb增殖、胶原合成增加及TGF-β1蛋白含量增多,同时使细胞G0/G1期百分率增加,S期细胞百分率降低,并明显提高CFb NO含量、iNOS的活性及iNOS蛋白的表达量,且呈现剂量依赖性.结论 牛磺酸通过提高CFb iNOS-NO系统的活性,拮抗AngⅡ的部分生物效应,致使CFb的增殖和胶原合成受到抑制.
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血脂康对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响
目的 观察血脂康对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖及胶原合成的影响,并探讨可能的分子机制.方法 采用胰酶消化法分离培养Sprague-Dawley大鼠心肌成纤维细胞,建立AngⅡ诱导CFs增殖的模型,以MTT比色法和流式细胞仪检测细胞周期分析法观察血脂康对CFs数目和细胞周期的影响.AngⅡ及不同浓度血脂康作用48 h后,用天狼星红染色法检测培养上清中胶原的含量;ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1蛋白表达;RT-PCR法检测胶原和TGF-β1 mRNA表达.结果 AngⅡ对CFs增殖有明显促进作用,血脂康可明显抑制AngⅡ诱导的CFs增殖,且呈剂量依赖性;血脂康可增加G0/G1期细胞百分率,降低S、G2/M期细胞百分率,降低胶原含量、TGF-β1蛋白及胶原和TGF-β1 mRNA的表达.结论 血脂康能抑制AngⅡ诱导的CFs增殖和胶原的产生,其作用可能是通过抑制TGF-β1 mRNA表达实现的.
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肌肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响
目的 研究肌肽(carnosine)对高糖环境下大鼠心脏成纤维细胞(cardiac flbroblasts,CFs)增殖的影响及机制.方法 以CFs为研究对象,使用Brdu-酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immu-nosorbent assays,ELISA)检测法观察肌肽抑制高糖环境下心肌成纤维细胞DNA的合成;细胞周期的测定采用流式细胞仪法;Western blot法观察不同条件下CFs中CDK2、CyclinE、PCNA、ERK1/2、p-ERK1/2及p21和p27的蛋白表达情况.结果 肌肽能够抑制高糖环境下CFs的DNA合成,通过调节细胞周期和细胞周期的相关蛋白表达来实现这种作用.与高糖组比较,20 mmol/L肌肽组明显抑制了高糖刺激的大鼠CFs中CDK2、CyclinE、PCNA蛋白的表达增加(t CDK2=6.19、t CyclinE=5.7、t PCNA=8.56,P<0.05),差异具有统计学意义;与高糖组比较20 mmol/L肌肽则使p21、p27表达水平增加了(t p21=5.16、t p27=8.558,P<0.05),具有统计学意义;与高糖组比较20 mmol/L的肌肽或20 mol/L的PD-98059(ERK1/2抑制剂)明显抑制了高糖刺激的大CFs中p-ERK1/2的表达增加(t肌肽=5.64、t PD=8.68,P<0.05),差异具有统计学意义.结论 肌肽能够通过ERK1/2 MAPK信号通路抑制高糖环境下心肌成纤维细胞的DNA合成.
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肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞增殖的影响及机制
目的 探讨肌肽(carnosine)对高糖诱导的大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖的影响及作用机制.方法 以CFs为研究对象,采用WST-1法观察肌肽抑制高糖诱导CFs的增殖；乳酸脱氢酶(LDH)法检测肌肽对细胞膜的毒性作用；Western blot法观察细胞周期蛋白P21及MAPK通路相关蛋白P38、P-p38的表达水平.结果 肌肽显著抑制了高糖诱导的CFs增殖,在5～30 mmol/L范围内呈一定的浓度依赖效应,且与p38 MAPK信号通路相关.结论 肌肽可通过P38MAPK信号通路抑制高糖诱导的CFs增殖.
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氯化胆碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响
目的 探讨氯化胆碱对异丙肾上腺素(Iso)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的影响.方法 体外培养新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞,分为对照组、Iso组和Iso+氯化胆碱组.各组药物分别作用48 h.应用MTF实验方法检测心肌成纤维细胞增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原合成.结果 10-4 mol/L Iso明显促进CFs增殖(P＜0.05),1 mmol/L氯化胆碱明显抑制10-4 mol/L Iso诱导的成纤维细胞增殖(P＜0.05)与胶原合成(P＜0.05).结论 氯化胆碱抑制异丙肾上腺素诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成.
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川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖及T型胶原合成的影响
目的:通过观察川芎嗪(tet ramethylpyrazine,TMP)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFB)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制.方法:差速贴壁法提取原代SD乳鼠CFB,采用3～4代CFB进行检测.以甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞数目,观察CFB增殖情况;收集细胞培养上清,以酶联免疫吸附测定法(enzymc-linked immunosorbent assay,ELISA)检测I型胶原的合成;提取细胞总mRNA,以逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量检测Ⅰ型胶原mRNA的表达情况.结果:(1)MTT结果显示.0.1μmol/L Ang Ⅱ组CFB光密度(optical density,OD)值高于空白对照组(P<0.05).0.1μmol/L AngⅡ+800 μg/ml TMP组和0.1 μmol/L Ang Ⅱ+600 μg/mL TMP组OD值均低于0.1μmol/L AngⅡ组,但仅0.1μmol/L Ang II+800 μg/mL TMP组与之比较差异有统计学意义(P<0.05).(2)0.1μmol/L Ang Ⅱ组CFB上清液中I型胶原含量高于空白对照组(P<0.01).0.1 μmol/LAngⅡ+800 μg/mL TMP组CFB上清液中T型胶原含量低于0.1 μmol/L AngⅡ组(P<0.05).(3)0.1 μMol/L Ang Ⅱ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组(P<0.05).0.1 μmol/L Ang Ⅱ+800 μg/mL TMP组Ⅰ型胶原mRNA表达低于0.1 μmol/L AngⅡ组(P<0.05).结论:川芎嗪可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞的增殖,减少Ⅰ型胶原的分泌与合成.
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心肌成纤维细胞分泌生长因子在心肌重塑中的作用
本文论述心肌成纤维细胞在一些理化因素刺激下，多种生长因子分泌的变化及生长因子网络失衡在心肌重塑中的作用。
