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鬼针草总黄酮对D-GalN致急性肝损伤小鼠的保护作用
目的:研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性肝损伤小鼠的保护作用.方法:以D-半乳糖胺盐酸盐(D-GalN) ip建立小鼠急性肝损伤模型.小鼠随机分为5组:模型组、联苯双酯阳性药组(120 mg·kg-1)、TFB低、中、高剂量组(60,120,240 mg·kg-1),并设正常对照组.连续ig给药7d后造模,24 h后测量各组小鼠胸腺、脾脏和肝脏指数.比色法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)以及碱性磷酸酶(AKP)活性,血清白蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC),Westernblot法检测肝脏中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达.HE染色观察肝组织病理学改变.结果:与模型组比较,TFB能明显提高D-GalN致急性肝损伤小鼠胸腺、脾脏、肝脏指数(P＜0.01),同时降低血清中ALT,AST,AKP活性(P＜0.01),并增加Alb,T-AOC含量(P＜0.01),降低iNOS的表达(P＜0.01),并减轻肝损伤程度.结论:鬼针草总黄酮对D-GalN所致急性肝损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抗氧化作用和抑制细胞毒作用有关.
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鬼针草总黄酮对过敏性紫癜患儿血清IgA1诱导血管内皮细胞损伤的保护作用
目的 探讨鬼针草总黄酮(total flavones of Bidens pilosa L.,TFB)对过敏性紫癜(HenochSch(o)nlein purpura,HSP)患儿血清IgA1诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及机制.方法 以人脐静脉内皮细胞(human umbilical venous endothelial cells,HUVECs)为研究对象,用正常IgA1和HSP患儿血清IgA1进行干预,同时加入不同浓度TFB,分为空白对照组、正常对照组、HSP IgA1组及TFB(1.0、0.5、0.25 mg/mL)组.ELISA法分别检测各组上清液IL-8和TNF-α水平,硝酸还原酶法检测各组上清液NO水平;荧光定量PCR和Western blot法检测HUVECs中NF-κB和ICAM-1 mRNA和蛋白表达.结果 与正常对照组和空白对照组比较,HSP组IL-8、TNF-α及NO水平均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与HSP组比较,TFB(1.0、0.5 mg/mL)干预后IL-8、TNF-α及NO水平均明显降低,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).荧光定量PCR和Western blot检测结果均显示:与正常对照组和空白对照组比较,HSP患儿血清IgA1诱导内皮细胞NF-κB与ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01);与HSP组比较,TFB 1.0,0.5、0.25 mg/mL干预下,NF-κB与ICAM-1mRNA和蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 TFB可能通过抑制性HSP患儿体内NF-κB高表达、减少血管内皮细胞分泌IL-8、TNF-α、NO而缓解血管损伤发生.
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鬼针草总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及机制
目的 探讨鬼针草总黄酮(TFB)对大鼠佐剂性关节炎(AA)关节肿胀指数、炎症因子水平、toll样受体4(TLR4)信号转导通路及病理评分的影响.方法 选取50只雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、TFB(40mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg)组,每组各10只.比较各组大鼠关节肿胀指数;采用放射免疫法检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blotting检测巨噬细胞中TLR4、核因子κB(NF-κB)的表达水平;HE染色进行大鼠关节病理评分.结果 模型组关节肿胀指数、炎症因子水平、TLR4及NF-κB表达均明显高于空白组,不同剂量的TFB组(40 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg)关节肿胀指数、炎症因子水平、TLR4、NF-κB表达及病理评分均显著低于模型组(P＜0.05),且TFB剂量越大,所有指标表达水平越低(P＜0.05).结论 TFB对AA大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与降低关节肿胀指数及炎症因子水平、抑制TLR4和NF-κB表达、阻碍血管翳形成有关.
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聚酰胺分离纯化鬼针草总黄酮的研究
目的 研究聚酰胺分离纯化鬼针草总黄酮的工艺. 方法 比较3种聚酰胺对鬼针草总黄酮的吸附率与解吸率,并从上样药液pH值、上样浓度、大吸附容量、洗脱溶剂的选择等方面进行了考察,确定佳纯化工艺条件. 结果 60-80目聚酰胺对鬼针草总黄酮的吸附与解吸附较好,确定其佳工艺条件为:浓度为2.0mg/ml并且pH=6的药液在60-80目的聚酰胺柱子进行吸附,聚酰胺的比吸附量达11 mg/g.实验表明用聚酰胺进行进一步精制的方法优于溶剂萃取法(乙醚、氯仿、乙酸乙酯),有较好的富集效果和较高的转移率. 结论 60-80目聚酰胺对鬼针草总黄酮有较好的分离纯化作用,且工艺简单,成本低,易于工业化生产.
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星点设计-效应面法优选鬼针草总黄酮滴丸成型工艺
目的 探讨鬼针草总黄酮滴丸的佳成型工艺.方法 以药物与基质比、滴距、Tween-80质量分数为考察因素,丸重差异、圆整度、溶散时限及总评归一值为考察指标,运用星点设计-效应面法优选鬼针草总黄酮滴丸的成型工艺,结果经多元线性回归和二项式拟合,建立指标与因素之间的数学模型,经效应面法预测佳成型工艺条件,并进行模型预测及验证实验.结果 优化滴丸佳成型工艺为药物与基质比为1.8 mL∶1 g,滴距为2.20 cm,Tween-80质量分数为3.18％,各项考察指标的预测值与实测值偏差均较小.结论 星点设计-效应面优化法适用于鬼针草总黄酮滴丸成型工艺的研究,所建立的数学模型预测性良好.
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鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究
目的:研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制.方法:二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量；氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白.结果:小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200mg/kg)灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量.TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化.在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133 mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低.相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关.结论:TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关.
关键词： 鬼针草总黄酮 急性炎症 酸敏感离子通道(ASICs) -
鬼针草总黄酮治疗血吸虫病肝纤维化的实验研究
目的:观察鬼针草总黄酮(total flavones of Bidens pilosa L,TFB)对血吸虫病肝纤维化的治疗作用.方法:将小鼠随机分为6组:正常对照组,模型组,治疗组(TFB 57.5、115、230 mg/kg)和秋水仙碱 0.15 mg/kg 阳性药对照组(n=10).除正常对照组外,其余各组每只小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴诱导肝纤维化模型,并于感染6周后灌胃(i.g.)相应的受试药物,正常组和模型组小鼠灌胃等容量生理盐水,持续治疗8周.实验结束后,取小鼠血,测血清中ALT、AST、总蛋白(TP)及白蛋白(ALB)含量;取小鼠肝脾称重,计算肝、脾指数,并观察小鼠肝脏形态;同时取部分肝组织进行虫卵计数;另取固定部位肝组织作病理组织学检查.结果:TFB 57.5 mg/kg 显著降低血吸虫病肝纤维化小鼠的肝、脾指数;TFB 115、230 mg/kg 显著降低小鼠血清中ALT、AST、ALB含量;明显改善肝脏大体形态.病理组织学检测结果显示TFB 115、230 mg/kg 明显改善血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织结构,减轻肝纤维化程度,降低血吸虫肝纤维化小鼠病理评分.结论:TFB对血吸虫病肝纤维化有明显治疗作用.
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鬼针草总黄酮抗大鼠肝纤维化的实验研究
目的:观察鬼针草总黄酮(total flavones of Bidens pilosa L,TFB)的抗肝纤维化作用.方法:将大鼠随机分为六组:正常对照组,模型组,TFB 160、80、40 mg·kg-1组和秋水仙碱 0.1 mg·kg-1阳性药对照组.除正常对照组外,其余各组采用皮下注射四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型.于造模第9周起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常对照组和模型组灌胃等容量的生理盐水,疗程10周.实验结束后,取大鼠血清测ALT、AST、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型前胶原酶(CⅣ);取大鼠肝、脾称重,计算肝、脾指数;同时取固定部位肝组织,测定组织中MDA、Hyp含量和GSH-Px活性;另取部分肝组织做病理组织学和电镜学检查.结果:TFB 160、80 mg·kg-1能显著降低肝纤维化大鼠肝、脾指数,并降低血清中 ALT、AST活性及HA、PCⅢ、CⅣ和肝组织中MDA、Hyp含量,且升高肝组织中GSH-Px活性(P＜0.05).病理组织学和电镜检查结果显示TFB 160、80 mg·kg-1组肝脏组织结构明显改善,肝纤维化增生程度减轻.结论:TFB对CCl4所致大鼠肝纤维化有明显治疗作用,其机制可能与抑制氧自由基的生成有关.
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鬼针草总黄酮对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制
目的 探讨鬼针草总黄酮(TFB)对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制.方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TFB大、中、小剂量组和秋水仙碱阳性药对照组,采用腹腔注射猪血清诱导肝纤维化模型,造模后灌服相应的受试药物.ELISA法测定大鼠血清Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)、Ⅳ型胶原酶(CⅣ)含量；免疫组化法测定肝组织中Ⅰ型胶原蛋白的表达；RT-PCR技术检测肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA的表达情况；Western blot检测肝组织中Smad2蛋白的表达.结果 与模型组相比,TFB能明显降低肝纤维化大鼠血清中PCⅢ、CⅣ含量,抑制肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA及Ⅰ型胶原、Smad2蛋白的表达.结论TFB能明显降低免疫性大鼠肝纤维化胶原含量,其机制可能与降低TGF-β1表达进而抑制肝星状细胞活化减少胶原生成有关.
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鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠肝星状细胞TGF-β1信号传导通路的影响
目的 研究外源性转移生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)对肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)的激活作用,观察鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens Bipinnata L,TFB)对HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达的影响,以探讨TFB抗肝纤维化的作用及分子机制.方法 采用Collagenase Ⅳ胶原酶原位肝灌注法分离HSC,MTT法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC增殖的作用,ELISA法检测HSC自分泌TGF-β1和产生Ⅰ型胶原的影响;RT-PCR法观察分析TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原基因表达的影响;Western blot法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2蛋白表达的影响.结果 TGF-β1明显促进HSC增殖、自分泌TGF-β1和产生胶原,促进HSC smad2、Ⅰ型胶原mRNA及smad2蛋白的表达,明显抑制smad7 mRNA表达 (P<0.05),TFB作用后,TGF-β1刺激的HSC中smads2 mRNA、蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达受到抑制,smad7 mRNA表达明显上调.结论 TFB抗肝纤维化作用可能与其阻断HSC TGF-β1通路进而阻断HSC的活化、增殖有关.
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鬼针草总黄酮抗大鼠免疫性肝纤维化作用及部分机制研究
目的 探讨鬼针草总黄酮(TFB)抗大鼠免疫性肝纤维化的作用及机制.方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TFB大、中、小剂量组和秋水仙碱阳性药对照组,采用腹腔注射猪血清诱导肝纤维化模型.造模后,给药组分别灌服相应的受试药物,正常组和模型组灌服等量的生理盐水.ELISA法测定大鼠血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)、Ⅳ型胶原酶(CⅣ)含量;取固定部位肝组织做病理组织学检查;免疫组织化学技术测定肝组织中α-SMA蛋白的表达;RT-PCR技术测定肝组织中TGF- β1 mRNA的表达情况.结果 TFB能明显降低肝纤维化大鼠血清中HA、LN、 PCⅢ、CⅣ含量;病理组织学检查结果显示TFB组肝脏组织结构明显改善,肝纤维化程度减轻;TFB大、中剂量组明显抑制肝组织中α-SMA蛋白和TGF-β1 mRNA的表达.结论 TFB对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化有明显治疗作用,其机制可能与降低TGF-β1 mRNA表达进而抑制肝星状细胞活化有关.
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鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠治疗作用及机制探讨
目的 观察鬼针草总黄酮(total flavones of bidens bipinnata L,TFB)对肝纤维化大鼠的治疗作用及机制.方法 采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型, 观察TFB对肝纤维化大鼠血清中HA、PCⅢ、CⅣ,肝组织中Hyp含量和肝脏病理组织学及肝组织中胶原增生程度的影响.同时采用α-SMA和TUNEL双重染色观察TFB对肝纤维化大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)凋亡的影响.另体外分离培养HSC,MTT法观察TFB对HSC增殖的影响, 电镜和流式细胞术法观察TFB对HSC凋亡的影响.结果 TFB能降低肝纤维化大鼠血清中HA、PCⅢ、CIV和肝组织中Hyp含量,改善其肝脏病理损伤程度,减少肝纤维化大鼠肝组织中胶原的增生, 抑制HSC的活化、增殖,促进活化的HSC凋亡.结论 TFB对肝纤维化大鼠有很好的治疗作用,其抑制HSC活化、增殖,促进活化的HSC凋亡可能是TFB治疗肝纤维化的重要机制之一.
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鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠细胞因子的影响
目的 观察鬼针草总黄酮(total flavones of Bidens pilosa L,TFB)对肝纤维化大鼠细胞因子的影响.方法 将大鼠随机分成正常组、对照组、TFB 160、80、40 mg·kg-1组和秋水仙碱(Col)0.1 mg·kg-1阳性药对照组.除正常组外,其余各组采用四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型.于造模wk 9起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和对照组灌胃等容量的生理盐水,疗程10 wk.实验结束后,股动脉采血,放免法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,同时取固定部位肝脏组织,免疫组化技术测定TFB对肝组织中TGF-β1和NF-κB蛋白表达的影响,RT-PCR技术测定TFB对肝组织中TGF-β1 mRNA表达的影响.结果 TFB 160、80 mg·kg-1能明显降低肝纤维化大鼠血清TNF-α、IL-1β含量,抑制肝纤维化大鼠肝组织中NF-κB、TGF-β1蛋白和TGF-β1 mRNA表达.结论 TFB通过降低肝纤维化大鼠炎症细胞因子而抗肝纤维化.
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鬼针草总黄酮提取工艺中试研究
目的 对鬼针草总黄酮提取工艺进行研究,确定生产工艺路线,并进行中试生产初步试验,为工业生产打下基础.方法 先以70%乙醇提取,再通过HPD100大孔树脂吸附纯化,后用乙醇进行纯化;以提取物中总黄酮和金丝桃苷含量为考察指标,考察鬼针草的提取工艺.结果 确定鬼针草总黄酮制备工艺路线,制得鬼针草总黄酮(总黄酮含量>50%),平均产率为1%.结论 该工艺稳定可行,适合于工业化大生产.
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鬼针草总黄酮的化学成分及药理作用研究进展
鬼针草是我国民间常用的中药,全国大部分地区均有分布.鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens bipinnata L.,TFB)是鬼针草的主要有效成分,包括槲皮素、金丝桃苷、槲皮素-7-O-鼠李糖苷、6,7,3',4'-四羟基橙酮、2',3',4',3,4-五羟基查耳酮(奥卡宁)、木犀草素等.本文综述了近年来鬼针草总黄酮的提取分离、含量测定及药理作用等方面的研究,特别是在抗肝纤维化方面研究取得的进展.
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鬼针草总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的探讨
目的 观察鬼针草总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 取健康雄性大鼠50只,随机分为5组:假手术组、模型组、鬼针草总黄酮高剂量组(100mg· kg-1)、中剂量组(30mg· kg-)、低剂量组(10mg· kg-1).鬼针草总黄酮组分别于术前灌胃给药,每天一次,连续3天,假手术组和模型组灌以等量生理盐水.采用在体大鼠结扎冠状动脉30 min然后松扎冠状动脉180 min造心肌缺血再灌注损伤模型.测定心肌梗死范围;测定血清磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶的活性及丙二醛含量.结果 与模型组相比,鬼针草总黄酮组不同程度降低了心梗范围和血清中丙二醛的含量,增加了血清中磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶的活性.而且随着剂量的增加保护作用尤为显著.结论 鬼针草总黄酮对心肌缺血再灌注大鼠具有抗氧化应激的作用,能够减少心肌梗死范围.
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鬼针草总黄酮对体外血小板聚集的影响
目的 探讨鬼针草总黄酮对家兔血小板聚集的影响.方法 以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)及凝血酶(thrombase,Thr)作诱导剂,体外给予不同浓度鬼针草总黄酮溶液,比浊法测定血小板聚集率,观察鬼针草总黄酮对血小板聚集的抑制作用及量效关系.结果 高、中剂量鬼针草总黄酮可降低由ADP所诱导的血小板大聚集率(P＜0.01),血小板聚集抑制率可达45.82%和28.65%;高、中剂量鬼针草总黄酮可降低由Thr所诱导的血小板大聚集率(P＜0.01),血小板聚集抑制率分别达48.36%,33.82%,作用强度呈浓度依赖性.结论 鬼针草总黄酮对体外由ADP和Thr所诱导的血小板聚集具有较强的抑制作用.
