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狭基线纹香茶菜(溪黄草)咖啡酸和迷迭香酸的薄层鉴别与含量测定
目的:建立狭基线纹香茶菜药材中咖啡酸和迷迭香酸的TLC鉴别及HPLC含量测定方法.方法:以正已烷-乙酸乙酯-甲酸(3:3:1)为展开剂,展开后取出晾干,于干燥器内放置过夜后于紫外灯(365 nm)下检视;Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.3％磷酸,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为329 nm.结果:在TLC色谱中咖啡酸和迷迭香酸斑点清晰,分离效果好;咖啡酸和迷迭香酸分别在0.045 4 ～0.908 0μg(r =0.999 9)和0.2192～4.3840 μg(r=0.999 6)具有良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为96.57％ (RSD1.32％)和99.48％ (RSD 2.53％).结论:该方法准确可靠,可用于狭基线纹香茶菜(溪黄草)药材质量控制.
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狭基线纹香茶菜对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究狭基线纹香茶菜对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、高、中、低剂量给药组、阳性药对照组6个组.给药组按15,7.5,3.75g·kg-1剂量,以狭基线纹香茶菜水提物灌胃;阳性药对照组按45mg·kg-1给联苯双酯;每天1次,连续10天.给药第1,4,7,10天(共4次),模型组和给药组按2 mL·kg-1腹腔注射10%CCl4造模.第11天,末次给药24 h后,取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及总胆红素(T-Bil),同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器系数,并取肝组织作病理观察.结果:狭基线纹香茶菜可显著降低急性肝损伤大鼠血清ALT,AST,ALP水平和T-Bil含量,对肝重量增大和胸腺萎缩有抑制作用.病理检查结果也显示有明显的保肝作用.结论:狭基线纹香茶菜对CCl4所致大鼠急性肝损伤有保护作用.
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狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮中6种碳苷黄酮的含量测定和抗肿瘤活性研究
该文建立了HPLC同时测定狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮中6种碳苷黄酮含量的方法,并对狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮进行抗肿瘤活性评价.采用Kromasil 100-5 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-乙腈-0.5％甲酸梯度洗脱;体积流量0.8 mL·min-1,检测波长334 nm;柱温为室温(25℃).以HepG2细胞为供试细胞株,采用MTT法评价水溶性总黄酮的抗肿瘤活性.新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷和芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷线性范围分别为0.25 ～2.53,0.12～1.20,0.37～3.69,0.16 ～1.63,0.19 ～ 1.92,0.14 ～ 1.42 μg;平均回收率(n=6)分另为99.6％,100.2％,99.6％,97.9％,98.8％,98.6％,RSD分别为0.87％,2.0％,1.8％,1.5％,1.2％,1.2％.以IC50值作为评价指标,测得狭基线纹香共菜水溶性总黄酮在给药24,48,72 h后抑制HepG2细胞增殖的IC50值分别为1.89,1.71,1.51g·L-1.本法快速、简便、准确,重复性好,可用于狭基线纹香共菜水溶性总黄酮的质量控制.狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对HepG2细胞增殖有一定的抑制作用.
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狭基线纹香茶菜(溪黄草)的化学成分与抗乙肝病毒作用研究
目的从狭基线纹香茶菜(溪黄草)Isodon lophanthoides var.gerardianus抗乙型肝炎病毒有效部位及其他相关部位中鉴定有效成分和其他化学成分.方法溶剂萃取部位经硅胶柱色谱分离单一成分;利用光谱技术鉴定结构.用2.2.15细胞与鸭乙肝模型测试提取物和化合物的抗乙肝病毒活性.结果鉴定了7个成分,化学结构分别确定为线型呋喃香豆素、β-谷甾醇、胡萝卜苷、熊果酸、2α-羟基熊果酸、2α,19-二羟基熊果酸和迷迭香酸.结论所有成分均为首次从该种植物中分离得到.线型呋喃香豆素系首次从香茶菜属植物中发现.首次发现醋酸乙酯部位有显著抗病毒作用,其中的2α-羟基熊果酸和2α,19-二羟基熊果酸具有体外抗乙肝病毒的作用.
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狭基线纹香茶菜水溶性成分及其抗肿瘤活性研究
目的 研究狭基线纹香茶菜Isodon lophanthoides var.gerardianus的水溶性成分及其抗肿瘤活性.方法 采用大孔吸附树脂D-101、ODS、Sephdex LH-20等色谱技术和重结晶进行分离纯化,通过ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等现代波谱技术进行结构鉴定;以HepG2为供试细胞株,采用MTT法对化合物进行体外抗肿瘤活性研究.结果 从狭基线纹香茶菜水提液中分离得到12个水溶性化合物,分别鉴定为新西兰牡荆苷Ⅱ (1)、新西兰牡荆苷Ⅲ (2)、异夏佛塔苷(3)、夏佛塔苷(4)、牡荆苷(5)、芹菜素-6,8-二-Gα-L-吡喃阿拉伯糖苷(6)、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷(7)、芹菜素-6-C-β-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(8)、芹菜素-6-C-β-D-木糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷(9)、咖啡酸(10)、迷迭香酸(11)、芦丁(12).结论 化合物1～9为首次从香茶菜属植物中分离得到;其中化合物1、6、11对HepG2细胞有较好的抑制作用.
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大孔树脂富集纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸工艺研究
目的:研究AB-8型大孔树脂富集、纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸的工艺条件及参数.方法:以狭基线纹香茶菜总三萜酸的洗脱率和精制度为指标,考察大孔树脂富集、纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸的吸附性能和洗脱参数.结果:狭基线纹香茶菜样品液20 mL(0.5 s/mL)上大孔树脂柱(D15 mm×H120 mm,干重10 g),用蒸馏水200 mL、60%乙醇80mL、90%乙醇160 mL依次洗脱,狭基线纹香茶菜总三萜酸富集于90%乙醇洗脱液部分,且除杂质能力强.通过大孔树脂富集与纯化后的狭基线纹香茶菜总三萜酸洗脱率达93.2%,90%乙醇洗脱液干燥后总固物中狭基线纹香茶菜总三萜酸纯度可达21.0%.结论:采用此法可较好地纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸.
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RP-HPLC法同时测定狭基线纹香茶菜中4个碳苷黄酮
目的 建立同时定量测定狭基线纹香茶菜中vicenin Ⅱ、isoschaftoside、schaftoside、vitexin的RH-HPLC.方法 狭基线纹香茶菜70％乙醇提取液分析采用Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长344 nm;柱温为室温(25℃).结果 Vicenin Ⅱ、isos-chaftoside、schaftoside、vitexin线性范围分别为0.38～4.18 μg、0.66 ～ 7.26 μg、0.43 ～4.73 μg、0.48 ～ 5.28 μg;平均回收率(n=6)分别为97.7％、98.8％、96.9％、100.1％,RSD分别为1.6％、2.1％、1.8％、1.9％.结论 本法的检测波长,流动相和提取溶剂的选择在狭基线纹香茶菜中黄酮碳苷类成分的定量分析上是适合的.
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从狭基线纹香茶菜中分离纯化阿魏酸与咖啡酸
目的:对唇形科香茶菜属植物狭基线纹香茶菜即中药溪黄草中的有效化学成分进行提取、分离和纯化.方法:采用体积分数为95％乙醇提取,然后将水提混悬液通过石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取,再对乙酸乙酯萃取部位运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS等柱层析手段联合HPLC进行分离、纯化.结果:通过分离纯化得到了多个组分,并采用化学方法及质谱分析鉴定了所分离成分的结构.结论:从溪黄草中成功分离得到了阿魏酸、咖啡酸,并对其结构进行了鉴定.
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狭基线纹香茶菜对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究狭基线纹香茶菜对D-半乳糖胺(D-Gal)所致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法:60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、高中低剂量给药组、阳性对照组.给药组按15、7.5、3.75 g/kg剂量以狭基线纹香茶菜水提物灌胃,阳性对照组按45 mg/kg联苯双酯灌胃,共7 d.灌胃给药第6 d,模型组和给药组按550 mg/kg体重腹腔注射D-Gal一次.第11 d末次给药24 h(腹腔注射36 h)后,测定血清生化指标,并测体重和肝脏重、脾重、胸腺重,求脏器系数,同时切取肝脏检测肝糖原,取肝组织作病理观察.结果:狭基线纹香茶菜可显著降低急性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP水平和TBA、T-Bil含量,促进血清中TP、ALB和肝组织中肝糖原的增加,对肝重量增大和胸腺萎缩有抑制作用,病理检查结果也显示有明显的保肝作用.结论:狭基线纹香茶菜对D-Gal所致大鼠急性肝损伤有保护作用,其作用与多环节有关.
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狭基线纹香茶菜低温压差式提取物对刀豆蛋白A所致肝损伤的保护作用
目的 探讨狭基线纹香茶菜低温压差式提取物对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠肝损伤的保护作用.方法 用ConA诱导小鼠肝损伤,用狭基线纹香茶菜低温压差式提取物灌胃治疗,一周后取血,测定血清ALT、AST活性,检测肝组织超氧化物岐化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)水平,同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,计算脏器指数,取肝组织做病理组织学检查.结果 狭基线纹香茶菜低温压差式提取物中、低剂量组能显著降低血清ALT、AST水平(P＜0.05或P＜0.01),高、低剂量组能显著升高血清SOD活性(P＜0.05),高、中、低剂量组均能显著降低MDA及NO含量(P＜0.01)；病理检查结果显示狭基线纹香茶菜治疗组小鼠肝脏损伤程度减轻.结论 狭基线纹香茶菜低温压差式提取物对Con A所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用.
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狭基线纹香茶菜对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
目的 研究狭基线纹香茶菜对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.方法 72只小鼠随机分为正常组,模型组,高、中、低剂量给药组(20,10,5 g·kg-1),阳性对照组(联苯双酯60 mg·kg-1),每天给药1次,连续12 d.第1天,除正常组外,各组每只小鼠尾静脉注射BCG 0.2 mL(10 mg·mL-1).末次给药后,除正常组外,各组小鼠尾静脉注射LPS 0.2 mL(37.5μg·mL-1)造模.造模16 h后取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),肝组织超氧化物岐化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量,同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器指数,并观察肝组织病理学变化.结果 狭基线纹香茶菜高、中、低剂量组均能显著降低ALT、AST值和MDA含量(P<0.05或P<0.01),对肝重量和脾重量增加及胸腺萎缩有抑制作用(P<0.05或P<0.01).病理检查结果也显示有明显的保肝作用.结论 狭基线纹香茶菜对BCG和LPS所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用,其保肝机制与其抗脂质过氧化损伤有关.
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狭基线纹香茶菜对刀豆蛋白所致小鼠免疫肝损伤的保护作用
目的 研究狭基线纹香茶菜对免疫性肝损伤的保护作用.方法 采用小鼠尾静脉注射刀豆蛋白(Con A)致肝损伤模型,小鼠108只随机分为9组,即正常对照组,模型组,狭基线纹香茶菜提取物组(提取物分为水提物、醇提物,各提取物再分为高、中、低剂量组),阳性对照组,每组12只.受试组按 18.20,9.10,4.55g·kg-1灌胃给药,阳性对照组口服联苯双酯45mg·kg-1,每天1次,连续5 d.末次给药后4 h除正常对照组外,各组动物一次性尾静脉注射ConA 20mg/kg,禁食不禁水8h后摘眼球取血处死,分离血清,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器系数.同部位肝脏(肝左叶)用4%福尔马林溶液固定,并取肝组织作病理观察.结果 狭基线纹香茶菜可显著降低免疫性肝损伤小鼠血清 ALT、AST,对肝重量增大和胸腺萎缩有抑制作用.病理检查结果也显示有明显的保肝作用.结论 狭基线纹香茶菜对刀豆蛋白所致小鼠免疫性肝损伤有保护作用.
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狭基线纹香茶菜的化学成分研究Ⅰ
目的 对狭基线纹香茶菜Isodon lophanthoides var.gerardianus的化学成分进行研究.方法 采用现代色谱方法进行分离、纯化,经现代波谱技术对化合物进行结构鉴定.结果 从狭基线纹香茶菜中分离得到五个化合物,结构鉴定为2α,3α,24-三羟基乌苏酸(1)、迷迭香酸(2)、迷迭香酸甲酯(3)、咖啡酸(4)、阿魏酸(5).结论 化合物1首次从该植物中分离得到.
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狭基线纹香茶菜对肝损伤小鼠TNF-α肝组织超微结构的影响
目的 观察狭基线纹香茶菜提取物对免疫性肝损伤小鼠TNF-α释放及肝组织超微结构的影响.方法 50只雄性NIH小鼠,随机分为5组,分别为正常对照组,模型组,狭基线纹香茶菜提取物高、低剂量组(剂量分别为18.2g/kg、4.55g/kg),与环磷酰胺(43mg/kg)对照组.除正常对照组外,其余小鼠于实验首日上午尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)20mg/Kg,并于首日、次日和第3d、第4d下午各给药1次,第5d给药后2h,模型组和各给药组小鼠再次尾静脉注射ConA 20mg/kg,4h后,每组取相同序号小鼠8只,取血检测血清TNF-α活生,每组所剩2只小鼠,8h后处死取肝组织,3％戊二醛固定,切片,染色后,透射电镜观察肝组织超微结构.结果 显示模型组TNF-α活性较正常组明显升高,肝组织超微结构发生了显著改变,肝细胞严重肿胀、线粒体破坏、毛细胆管和肝窦腔结构明显变形、中性粒细胞滞留,细胞及细胞器的完整性遭到破坏.狭基线纹香茶菜提取物高、低剂量组TNF-α活性较模型组明显降低(P＜0.01、0.05)、肝组织超微结构虽有一定程度改变,但细胞及细胞器的形态及完整性得到保护.结论 狭基线纹香茶菜具有较好的保肝作用,其作用机理与抑制TNF-α的产生密切相关.
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狭基线纹香茶菜水提部位对免疫肝损伤小鼠NF-кB蛋白表达水平及核转位的影响
目的:研究狭基线纹香茶菜水提部位对免疫肝损伤小鼠核因子кB(NF-кB)蛋白表达水平及核转位的影响.方法:小鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(ConA)25mg·kg-1复制肝损伤模型,免疫组化法检测NF-кB在肝组织的表达,以及NF-кB从细胞浆向细胞核转位的情况.结果:复制模型4、8h后小鼠NF-кB蛋白表达显著增加(P<0.01),吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)和狭基线纹香茶菜水提部位9.2 g·kg-1在4、8 h均可显著降低模型小鼠NF-кB的蛋白表达量(P<0.01).Con A能显著促进NF-кB自细胞浆向细胞核转位(P<0.01).PDTC和狭基线纹香茶菜提取物9.2 g·kg-1能显著减少NF-кB在细胞核表达,使其在细胞浆表达显著增多(P<0.01).结论:狭基线纹香茶菜可抑制免疫肝损伤小鼠NF-кB蛋白的表达,并抑制NF-кB的核转位.狭基线纹香茶菜对抗免疫肝损伤的作用机制可能与其抑制核NF-кB的激活有关.
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狭基线纹香茶菜对免疫性肝损伤小鼠TNF - αmRNA和蛋白表达水平的影响
目的:以Con A诱导小鼠免疫性肝损伤模型,研究狭基线纹香茶菜对免疫肝损伤小鼠TNF-αmRNA和蛋白表达的影响,以探讨其抗免疫肝损伤的作用机理.方法:小鼠尾静脉注射ConA 25mg/kg制备免疫肝损伤模型,灌胃给予狭基线纹香茶菜水提部位7d后,不同时间点采取肝组织,提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对肝脏TNF-αmRNA进行半定量测定,免疫组化法检测肝组织TNF-α蛋白的表达.结果:与正常组相比,模型组小鼠肝组织4h TNF-αmRNA和蛋白表达显著增强,至8h仍保持较高的表达.阳性药PDC和狭基线纹香茶菜水提部位大剂量组TNF-αmRNA和蛋白表达显著低于模型组(起效剂量9.2g/kg).结论:ConA诱导损伤后,肝组织中TNF-αmRNA和蛋白表达明显增强,狭基线纹香茶菜组可通过降低损伤肝组织TNF-αmRNA和蛋白的表达,而对免疫肝损伤小鼠起保护作用.
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狭基线纹香茶菜对免疫肝损伤小鼠ICAM-1mRNA和蛋白表达的影响
目的:以Con A诱导小鼠免疫性肝损伤模型,研究狭基线纹香茶菜对免疫肝损伤小鼠ICAM-1mRNA和蛋白表达的影响,探讨其抗免疫肝损伤的作用机理.方法:小鼠尾静脉注射ConA 25mg/kg制备免疫肝损伤模型,灌胃给予狭基线纹香茶菜水提物7d后,不同时间点取血检测血清ALT、AST水平,取肝组织,提取总RNA反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对肝脏ICAM-1mRNA进行半定量测定,免疫组化法检测肝组织ICAM-1蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,模型组小鼠血清AST、ALT水平明显高于正常组,狭基线纹香茶菜水提物9.2g/kg可明显降低肝损伤小鼠血清ALT、AST水平.肝组织4h ICAM-1 mRNA和蛋白表达显著增强,至8h仍保持较高的表达.阳性药PDTC和狭基线纹香茶菜水提物大剂量组ICAM-1mRNA和蛋白表达显著低于模型组.结论:ConA 损伤后,血清ALT、AST水平升高,肝组织中ICAM-1mRNA和蛋白表达明显增强,狭基线纹香茶菜组可通过降低损伤肝组织ICAM-1mRNA和蛋白的表达,而对免疫肝损伤小鼠起保护作用,这可能是其护肝降酶作用机理之一.
