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多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性与β-内酰胺酶相关基因的研究
目的 研究多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)的耐药性及其 β-内酰胺酶相关基因,分析其对 β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集山西大医院2013年9月-2014年3月临床感染性疾病患者的标本,应用VITEK-2鉴定所分离的菌株,并进行药物敏感性分析试验;采用K-B纸片扩散法检测超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs),同时筛选产AmpC酶菌;应用PCR及序列分析的方法分析 β-内酰胺酶基因.结果 鉴定获取55株鲍氏不动杆菌,其中41株为MDRAB,其对 β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂(氨苄西林/舒巴坦 、哌拉西林/他唑巴坦)的耐药率为87.8%~90.2%,对其余 β-内酰胺类 、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率在85.4%~100.0%;41株MDRAB中27株检出ESBLs检出率为65.9%,30株筛查出AmpC酶检出率为73.2%;产ESBLs菌株中检出TEM基因25株,检出率为92.6%,产AmpC酶菌株中检出ampC基因8株,检出率为26.7%.结论 山西大医院分离到的鲍氏不动杆菌具有多药耐药性,对 β-内酰胺类药物的耐药性与TEM和ampC基因关系密切.
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医院获得性阻塞性肺炎患者下呼吸道感染苛养菌分布及耐药特征分析
目的：探讨医院获得性阻塞性肺炎下呼吸道感染苛养菌的分布及耐药性特点，为合理使用抗菌药物提供临床治疗依据。方法用巧克力培养基对来自临床各科室的标本进行分离培养，用卫星现象鉴别流感嗜血杆菌；采用纸片扩散法进行19种抗菌药物的药敏试验，根据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）药敏试验指南判断；头孢硝噻吩纸片法检测菌株β‐内酰胺酶产生情况。结果流感嗜血杆菌对莫西沙星、左氧氟沙星、亚胺培南100％敏感；而对氨苄西林／舒巴坦、头孢呋辛、阿奇霉素的耐药率分别为93．08％、66．86％和95．38％；卡他莫拉菌对3、4代头孢菌素、氨苄西林／舒巴坦、亚胺培南、阿莫西林／克拉维酸、氯霉素、环丙沙星、磺胺甲恶唑／甲氧苄啶和利福平抗菌药物敏感率均＞90％；而对阿奇霉素耐药率为45．52％。结论阻塞性肺炎合并下呼吸道感染的病原菌以革兰阴性杆菌为主，其耐药率呈上升趋势；3、4代头孢类抗菌药物对苛养菌引起的下呼吸道感染具有很强的抗菌能力。
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凝固酶阴性葡萄球菌胞外多糖检测的临床意义
目的用粘液多糖的产生作为毒力指标鉴别临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的感染与污染情况. 方法用刚果红琼脂培养法检测CNS产生的粘液多糖,将粘液多糖β-内酰胺酶的产生及细菌多重耐药进行多因素相关性分析.结果 CNS的临床检出以表皮葡萄球菌为主,该菌种粘液多糖的产生率为71.4%;临床分离的CNS粘液多糖的检出率为53.3%,如果将其作为毒力指标判断感染,临床检出的CNS存在严重的污染;产生粘液多糖的CNS,92.9%产生β-内酰胺酶,85.7%对苯唑西林耐药,71.4%同时对5种抗生素耐药.结论粘液多糖可以作为毒力因素对临床分离的CNS的致病性进行评价,但作为唯一因素判断感染的真实性,尚缺乏大样本的观察数量和足够的临床证据;粘液多糖的产生和耐药性共同作为毒力因素同时进行多因素分析,可以作为实验室的判断依据.
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质粒型AmpC酶基因在肠杆菌属细菌的检测与研究
目的 对临床分离的26株头孢西丁高水平耐药肠杆菌属细菌进行检测,探讨其质粒型AmpC}内酰胺酶基因的分布.方法 对2014年临床分离的头孢西丁MIC≥128 μg/ml的26株肠杆菌属细菌进行检测,琼脂平皿二倍稀释法检测细菌的MIC,采用碱裂解变性法提纯质粒DNA,多重PCR法检测细菌上质粒型AmpC β-内酰胺酶基因.结果 对头孢西丁的MIC≥128μg/ml、对氨苄西林的MIC≥512 μg/ml的菌株进行研究,头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和氨曲南的MIC90分别为512、64、32 μg/ml和256 μg/ml;26株肠杆菌属细菌中仅2株阴沟肠杆菌未检测到质粒型AmpC酶基因;分别有13、11株和4株肠杆菌属细菌检测到DHA、EBC和FOX条带;其中4株肠杆菌属细菌同时检测到两种基因,3株同时扩增到DHA和EBC条带.结论 头孢吡肟可作为治疗该类细菌感染的首选药物;DHA、MIR-1、ACT-1型AmpC β-内酰胺酶在肠杆菌属细菌中的分布相对较多.
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检测生物被膜铜绿假单胞菌、克雷伯菌产β-内酰胺酶活性
目的检测铜绿假单胞菌、克雷伯菌的浮游菌,生物被膜(biofilm, BF)菌β-内酰胺酶活性;比较亚胺培南、头孢西丁、哌拉西林诱导这两种BF菌产酶能力.方法用改良法建立铜绿假单胞菌、克雷伯菌BF膜型,用银染法及扫描电镜对BF进行鉴定;用紫外分光光度法及Bio-Rad蛋白定量试剂法检测铜绿假单胞菌、克雷伯菌的浮游菌,BF菌,亚胺培南、头孢西丁、哌拉西林诱导BF菌产β-内酰胺酶的酶活性.结果铜绿假单胞菌和克雷伯菌的两种BF菌β-内酰胺酶活性均显著高于浮游菌(P<0.01),各种抗生素诱导BF菌的酶活性显著高于BF菌(P<0.01),亚胺培南诱导BF菌产酶活性均显著高于头孢西丁和哌拉西林(P<0.01),铜绿假单胞菌除浮游菌外各组酶活性均显著高于克雷伯菌各组(P<0.01).结论 BF铜绿假单胞菌、BF克雷伯菌能产生大量β-内酰胺酶,BF铜绿假单胞菌产酶能力显著高于BF克雷伯菌;亚胺培南诱导BF菌产酶的能力强,其次是头孢西丁,哌拉西林诱导能力弱.
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成年人肠道大肠埃希菌产β-内酰胺酶和高产AmpC酶的调查
为了解病原体的来源,我们对健康成年人肠道大肠埃希菌产β-内酰胺酶(ESBLs)和高产AmpC酶进行了调查.结果如下.
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析
资料报道很多,对于产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌感染的防治日益受到临床重视,为了解我院ESBLs菌的发生率和耐药特点,对我院2000年1月～2003年1月从临床标本分离到的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 206株,用纸片扩散法检测其产ESBLs情况,了解ESBLs菌的检出率,并分析其对12种抗菌药物的耐药性.
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高产AmpC酶肺炎克雷伯菌的临床报道
目的对临床分离出的高产AmpC肺炎克雷伯菌分子生物学以及耐药特性进行研究. 方法对从临床分离的1株头孢西丁高度耐药的肺炎克雷伯菌进行分析;用三维试验初步检测其高产AmpC,然后用等电聚焦以及酶抑制试验等进行确认;用接合试验检验耐药基因的转移性,后用E-TEST法进行小抑菌浓度(MIC)测定. 结果该菌株三维试验为阳性,等电聚焦以及酶抑制试验表明,该菌株产一种等电点(PI)为7.8的能够被氯唑西林抑制而不能被克拉维酸抑制的β-内酰胺酶;接合试验表明表达该β-内酰胺酶的基因具有转移性,用E-TEST法检测表明该菌株对环丙沙星、阿米卡星、青霉素类、酶抑制剂合剂及三代头孢菌素类均耐药,但它们对头孢吡肟、碳青酶烯类的亚胺培南和伊他培南均敏感. 结论我院临床分离肺炎克雷伯菌已经出现中高产AmpC菌株,其耐药性能够水平传播,并造成对多种三代头孢菌素及头孢西丁耐药,已经对临床的抗生素治疗带来重大威胁.
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耐药柠檬酸杆菌属β-内酰胺酶检测
目的 了解安徽医科大学第一附属医院临床分离的耐药柠檬酸杆菌属产β-内酰胺酶的情况.方法 采用琼脂稀释法测定17种抗菌药物对临床分离的52株柠檬酸杆菌低抑菌浓度(MIC),用改良三维试验检测31株柠檬酸杆菌ESBLs、AmpC、MBL的产酶情况,再用聚合酶链反应(PCR)法扩增β-内酰胺酶基因.结果 31株柠檬酸杆菌对多种抗菌药物耐药,三维试验检出24株菌产ESBLs,3株菌产AmpC酶,2株同时高产AmpC酶和ESBLs,未检出MBL;PCR检出20株菌携带blaTEM基因,1株菌携带blaSHV基因,8株菌携带blaCTX-M-1基因,15株菌携带blaCTX-M-13基因,5株菌携带blaCIT基因.结论 31株多重耐药的柠檬酸杆菌同时产＞1种的ESBLs及高产AmpC酶,是其对β-内酰胺类药物耐药的重要原因.
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柠檬酸杆菌属医院感染特性与多药耐药分析
目的 调查医院柠檬酸杆菌属感染的菌群分布、产酶的特性和对抗菌药物的耐药性,分析其多药耐药(MDR)特点,指导临床用药.方法 对临床分离147株柠檬酸杆菌属,采用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶(MBL),并使用K-B纸片琼脂扩散法测定其对15种抗菌药物的耐药性.结果 柠檬酸杆菌属医院感染以弗氏柠檬酸杆菌为主,其次是无丙二酸柠檬酸杆菌,ICU的分离率与内、外科、其他病区相比差异无统计学意义(P＞0.05);呼吸道与泌尿道感染率相近,明显高于其他部位(P＜0.01);柠檬酸杆菌属总分离株的ESBLs、AmpC、同产ESBLs和AmpC、MBL检出率分别为36.05%、10.20%、7.48%和2.72%,总分离株对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为4.76%、3.40%,其次是对头孢哌酮/他唑巴坦为23.81%;对其余抗菌药物的耐药率均＞40.00%;非ICU和ICU多药耐药菌分别占53.64%和81.08%,两组病房差异有统计学意义(P＜0.01).结论 医院感染的柠檬酸杆菌属ESBLs产酶率高,且大多呈多药耐药,亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/他唑巴坦对其具有良好的抗菌活性.
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两种检测超广谱β-内酰胺酶方法比较
目的 比较双纸片协同法和Vitek法检测临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的一致性。方法 用纸片扩散法从405株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中初筛出可疑产ESBLs的菌23株大肠埃希菌和51株肺炎克雷伯菌，再用双纸片协同法和Vitek法进行比较。结果 双纸片协同法检出大肠埃希菌ESBLs15株和肺炎克雷伯菌ESBLs35株；Vitek法检出大肠埃希菌ESBLs15株和肺炎克雷伯菌ESBLs34株；两种方法的符合率95.6%。结论 双纸片协同法和Vitek法均是检测ESBLs的好方法。
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铜绿假单胞菌耐药性分析
目的 了解医院铜绿假单胞菌的分布及耐药状况.方法 标本经分离培养,采用美国德灵公司WalkAway-40全自动细菌鉴定系统及配套的NC21鉴定板,对菌株进行鉴定和药敏实验.结果 62株铜绿假单胞菌中36株来源于痰对头孢噻肟、头孢曲松耐药率分别55.6%、47.5%,其他β-内酰胺类抗菌药物的头孢他啶、哌拉西林/他巴唑坦、哌拉西林耐药率分别为7.5%、11.0%、30.0%,亚胺培南的耐药率达20.0%,阿米卡星的耐药率低4.6%.结论 铜绿假单胞菌是下呼吸道感染的主要致病菌之一,其耐药机制复杂,有多重耐药的特性,能天然抵抗多种抗菌药物;希望临床医生在治疗铜绿假单胞菌的感染过程中,充分考虑其耐药机制,选用耐药率低的药物,避免诱导铜绿假单胞菌产生β-内酰胺酶而对抗菌药物广泛耐药.
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医院感染凝固酶阴性葡萄球菌分布及耐药性分析
目的 分析医院感染凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的分布及耐药性.方法 对临床分离的CNS进行鉴定,以K-B法检测药敏,Nitrocefin色原法测定β-内酰胺酶,刚果红平板法检测黏质.结果 在162株CNS中,检出表皮葡萄球菌83株,占51.2%;耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)102株,100.0%产β-内酰胺酶,黏质阳性率17.6%;苯唑西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)60株,5.0%产β-内酰胺酶,黏质阳性率1.7%;MRCNS对12种抗菌药物耐药性明显高于MSCNS(P＜0.01);所有CNS对万古霉素敏感.结论 CNS已为重要医院感染菌;CNS耐药性增高与产β-内酰胺酶和黏质有关;临床应积极进行病原学和耐药性监测,合理用药.
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金黄杆菌属连续5年耐药性监测与β-内酰胺酶的检测
目的 了解医院金黄杆菌属的分离和耐药情况,并探索其产生耐药的机制.方法 对医院5年间分离的金黄杆菌属进行鉴定和K-B法药敏试验;同时选择43株脑膜脓毒金黄杆菌、16株产吲哚金黄杆菌和10株黏金黄杆菌共69株,用琼脂稀释法检测14种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC);用三维试验和协同试验筛选超广谱β-内酰胺酶及碳青酶烯酶.结果 2001年1月-2005年12月5年间共检出金黄杆菌属1128株,其中脑膜脓毒金黄杆菌占88.3%、产吲哚金黄杆菌占8.0%、黏金黄杆菌占2.9%,其他金黄杆菌占0.8%;金黄杆菌属除了喹诺酮类抗菌药物的MIC50和MIC90较低外,其余的抗菌药物均很高;脑膜脓毒金黄杆菌金属酶阳性率为60.5%,产吲哚金黄杆菌阳性率为68.8%,黏金黄杆菌阳性率为90.0%.结论 金黄杆菌属对多种抗菌药物耐药,不同种类的金黄杆菌属对不同的抗菌药物耐药性有很大的差异,金黄杆菌属的耐药机制主要是产生了以金属酶为主的β-内酰胺酶.
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肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶类型的动态比较研究
目的动态比较研究肺炎克雷伯菌(KPN)所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况. 方法采用多底物改良相邻纸片法检测230株,S1期(2000年1月～2001年6月)70株、S2期(2001年7月～2002年7月)70株和S3期(2003年1月～2004年11月)90株;KPN所产各种β-lase. 结果 S1期Kpn总β-lase检出率为28.7%,其中产青霉素酶、头孢菌素酶各1株(1.4%),产广谱酶4株(5.7%),产ESBLs14株(20.0%);S2期70株KPN总β-lase检出率为85.7%,其中产青霉素酶4株(5.7%),头孢菌素酶3株(4.3%),产广谱酶11株(15.7%),产ESBLs 42株(60.0%);S3期KPN总β-lase检出率为64.0%,其中产青霉素酶9株(10.0%),AmpCs酶3株(3.3%),广谱酶3株(3.3%),单纯产ESBLs20株(22.2%),同时产ESBLs+AmpCs产酶株15株(16.7%),酶抑制剂耐药的β-内酰胺酶14株(15.6%,1株IRT、13株IRESBLs),ESBLs总检出率为53.3%;3期均未检出碳青酶烯酶. 结论本组KPN所产各种β-lase的总产酶率、β-lase类型数均随时间而提高.
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栖冷克吕沃尔菌耐药性及β-内酰胺酶检测
目的 研究栖冷克吕沃尔菌的耐药性及其所产各种β-内酰胺酶(β-lase) 分布情况.方法 采用琼脂扩散法分析17株该菌的耐药性,采用多底物纸片法(协同法、拮抗法)、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认试验、AmpC酶检测法检测其所产各种β-lase.结果 对AMP、GEN、CFZ和磺胺类抗菌药物的耐药率分别为100.0%、88.2%、88.2%、88.2%,对IMP、CIP和AMK的耐药率分别为0.0%、35.3%、47.1%;17株嗜冷克鲁依弗菌各种β-lase总检出率为100.0%,其中单独产青霉素酶、广谱酶、ESBLs分别为2株(11.8%)、6株(35.3%)、9株(52.9%),产AmpC酶总数1株,未检出碳青酶烯酶;持续高产AmpC酶+ESBLs复合酶1株.结论 嗜冷克鲁依弗菌耐药性严重,均为多重耐药菌;对AMP、GEN、CFZ和磺胺类抗菌药物的耐药率很高,对IMP、CIP和AMK较为敏感;本组菌产β-lase率很高,产4种酶有5种方式,以广谱酶、ESBLs为主,未检出碳青酶烯酶.
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产β-内酰胺酶葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药
目的调查本地区产β-内酰胺酶(Blac)葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况. 方法采用酸试剂纸片法检测产Blac的葡萄球菌;采用ESBLs确证试验检测产ESBLs的革兰阴性杆菌. 结果 326株葡萄球菌检出Blac阳性菌237株,检出率为72%;787株革兰阴性杆菌检出ESBLs阳性菌111株,检出率为14.1%;它们对β-内酰胺类抗生素均呈现极高的耐药性. 结论产Blac的葡萄菌及产ESBLs的革兰阴性杆菌均具有极高的耐药性及多重耐药性,检测葡萄球菌产Blac酶、革兰阴性杆菌产的状况,并探讨它们的耐药谱,有利于指导临床合理使用抗生素.
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糖尿病患者感染大肠埃希菌产β-内酰胺酶的类型研究
目的 研究糖尿病患者感染大肠埃希菌(ECO)所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况.方法 采用多底物改良相邻纸片检测糖尿病患者感染ECO 60株所产各种β-lase.结果 60株ECO总β-lase检出率为81.67%,其中产青霉素酶5株(8.33%),产广谱酶17株(28.33%),产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)27株(45.00%),未检出亚胺培南酶;27株产ESBLs菌株中头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟为底物的分别为25、25、26株.结论 糖尿病患者感染ECO所产各种β-lase以广谱酶、ESBLs为主,未检出亚胺培南酶,产ESBLs菌株的头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南检出率相同.
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烧伤创面耐药黄杆菌产β-内酰胺酶机制的初步研究
目的探讨黄杆菌临床分离多重耐药株产生β-内酰胺酶的机制. 方法质粒和染色体抽提以市售试剂盒进行;黄杆菌产β-内酰胺酶用纸片法定性;质粒和染色体携带β-内酰胺酶基因检测用PCR扩增法;PCR扩增产物进行基因测序和同源性比较. 结果纸片法定性显示该菌产β-内酰胺酶;经PCR扩增和产物序列分析表明其染色体和质粒均携带有β-内酰胺酶PSE-1基因. 结论该多重耐药株对β-内酰胺类抗生素的耐药性由染色体和质粒共同介导的PSE-1基因所决定.
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临床分离的卡他莫拉菌对抗菌药物敏感性分析
目的 探讨卡他莫拉菌(MC)的耐药现状,为临床治疗提供参考依据.方法 对临床分离的90株MC采用琼脂稀释法进行抗菌药物敏感试验,并用Nitrocefin纸片检测p内酰胺酶.结果 MC检出率高的是儿科占56.7％,其次为呼吸内科占35.6％,肿瘤科占7.7％,MC产β-内酰胺酶率为90.0％;MC对氨苄西林的敏感率低,仅8.9％；MC对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星和克拉霉素100.0％敏感.结论 临床医师应选用含β-内酰胺酶抑制剂的青霉素类,第二、三代头孢菌素或大环内酯类治疗MC引起的感染.
