首页 > 文献资料
-
益气活血方调节SRA、CD36干预THP-1源性巨噬细胞泡沫化机制
目的:探讨益气活血方(宁心痛颗粒)调节巨噬细胞(MΦ)清道夫受体A (SRA)、CD36干预人类单核细胞株(THP-1)源性MΦ泡沫化的机制.方法:采用MTT法筛选出宁心痛颗粒含药血清作用于THP-1源性MΦ的适合剂量;建立THP-1源性MΦ泡沫化模型,用该适合剂量的宁心痛颗粒含药血清进行干预,Western blot法检测干预后细胞脂蛋白受体SRA、CD36蛋白表达水平,与空白组(THP-1细胞组)、THP-1源性MΦ组、模型组(泡沫细胞组)进行比较.结果:宁心痛颗粒10倍剂量含药血清作用下的THP-1源性MΦ存活率高;与空白组比较,THP-1源性MΦ组、模型组及宁心痛颗粒10倍剂量含药血清组SRA、CD36蛋白表达均升高(P＜0.01);宁心痛颗粒10倍剂量含药血清组SRA、CD36蛋白表达水平明显低于模型组(P＜0.01).结论:益气活血方能够下调THP-1源性MΦ的SRA、CD3蛋白表达,从而阻抑泡沫细胞的形成.这可能是该药干预动脉粥样硬化易损斑块的分子机制之一.
-
宁心痛颗粒对冠心病气虚血瘀证患者左室舒张功能不全的影响
目的 观察宁心痛颗粒对冠心痛气虚血瘀证患者左室舒张功能不全的影响.方法 将76例冠心病气虚血瘀证左室舒张功能不全患者随机分为治疗组(40例)与对照组(36例),对照组采用常规西药治疗,治疗组在常规西药的基础上加用宁心痛颗粒(由黄芪、葛根、川芎、毛冬青、细辛制成,每包10 g)每次1包,每天3次,疗程4周.采用多普勒超声心动图检测治疗前后左室舒张功能指标舒张早期二尖瓣血流峰值(Emas)、舒张晚期二尖瓣血流峰值(Amas)及两者之比值(E/A),E峰减速度时间(DT)和等容舒张时间(IVRT),并观察临床疗效及中医证候疗效.结果 治疗组Emas、E/A增加,Amas、DT、IVRT降低,与治疗前及对照组治疗后比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);中医证候疗效及临床疗效亦优于对照组.结论 具有益气活血功能的宁心痛颗粒对气虚血瘀证冠心病左室舒功能不全患者具有明显改善作用.
-
宁心痛颗粒含药血清及有效组分干预THP-1源性巨噬细胞泡沫化的效应与机制
目的 探讨宁心痛颗粒含药血清及主要药物的有效组分(黄芪多糖、藁本内酯)干预THP-1源性巨噬细胞泡沫化的效应与机制.方法 采用佛波酯诱导人THP-1细胞转化为巨噬细胞,再与oxLDL共培养建立泡沫细胞模型;分为空白对照组、模型对照组、宁心痛颗粒含药血清(CMS)组、空白血清组、黄芪多糖(APS)组、藁本内酯(LIG)组、黄芪多糖合藁本内酯(APS +LIG)组7组,对巨噬细胞泡沫化过程进行干预.运用高效液相色谱法检测泡沫化程度(CE/TC比值),Western blot法检测SRA-Ⅰ、CD36、ABCA1、LXR-α、PPAR-y的表达.结果 与空白对照组比较,模型对照组CE/TC值、SRA-Ⅰ、CD36、ABCA1及LXR-α 、PPAR γ蛋白表达升高(P＜0.05);与模型对照组比较,LIG组、APS+LIG组、CMS组CE/rC值降低(P＜0.05),除APS组ABCA1外,APS组、LIG组、APS+LIG组、CMS组SRA-Ⅰ、CD36蛋白表达降低,AB-CA1、LXR-α、PPARy蛋白表达升高(P＜0.05).与APS组比较,CMS组CE/TC值降低,ABCA1蛋白表达升高(P＜0.05).结论 宁心痛颗粒含药血清、主要药物的有效组分(APS、LIG)均可不同程度抑制THP-1源性巨噬细胞泡沫化,其机制可能与调节巨噬细胞脂质吞噬-逆转运间的平衡,即下调脂蛋白吞噬受体SRA-Ⅰ、CD36的表达,上调胆固醇逆转运通路中的ABCA1、PPARγ及LXR-α的表达有关.
关键词： 宁心痛颗粒 含药血清 有效组分 THP-1源性巨噬细胞 泡沫细胞 -
宁心痛颗粒及其有效组分抑制HSP60诱导的THP-1细胞炎症反应的实验研究
目的 观察NF-κB、MAPKs信号通路在介导重组人热休克蛋白60(HSP60)诱导巨噬细胞(M(p)炎症反应中的作用,探讨益气活血方宁心痛颗粒的抗炎机制.方法 采用人急性单核白血病细胞株(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)体外培养模型,结合血清药理学与中药组分配伍方法进行论证.将THP-1细胞诱导分化为Mφ,分为对照组(Mφ+培养液)、HSP60(10 μg/m L)组、黄芪多糖(APS,200 μg/mL)组、藁本内酯(LIG,20 μg/mL)组、APS(200 μg/mL)+LIG(20 μg/mL)组、含药血清(3％)组、辛伐他汀(15 μg/mL)组,各药物干预组以相应治疗药物预处理24 h后,除对照组外,其余各组均加入终浓度为10 μg/mL的HSP60.检测磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)、MAPKs[包括p-p38、胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)]蛋白表达及TNF-α、IL-6含量.结果 与对照组比较,HSP60组的p-NF-κB及p-p38、p-JNK、p-ERK1/2蛋白表达和TNF-α、IL-6含量升高(P＜0.01);与HSP60组比较,各药物干预组检测蛋白表达和TNF-α、IL-6含量均降低(P ＜0.05,P＜0.01);与APS组比较,APS+LIG组、含药血清组和辛伐他汀组检测蛋白表达和TNF-α、IL-6含量均降低(P＜0.05,P＜0.01);与LIG组比较,APS+LIG组检测蛋白表达均降低(P ＜0.05,P＜0.01),TN F-α、IL-6含量差异无统计学意义(P＞ 0.05),含药血清组和辛伐他汀组检测蛋白表达及TNF-α、IL-6含量均降低(P＜0.05,P＜0.01);含药血清组和辛伐他汀组均较APS+LIG组蛋白表达和TNF-α、IL-6含量降低更明显(P＜0.05,P＜0.01),且辛伐他汀组降低蛋白表达的效果优于含药血清组(P＜0.01).结论 NF-κB及MAPKs信号通路是HSP60诱导THP-1源性Mp发生炎症反应的关键信号通路,宁心痛颗粒含药血清、APS、LIG、APS配伍LIG可不同程度通过调控以上通路发挥抗炎效果,其中宁心痛颗粒含药血清的效果强.
-
宁心痛颗粒含药血清及有效组分干预THP-1源性巨噬细胞泡沫化的效应与机制
目的 探讨宁心痛颗粒含药血清及主要药物的有效组分(黄芪多糖、藁本内酯)干预THP-1源性巨噬细胞泡沫化的效应与机制.方法 采用佛波酯诱导人THP-1细胞转化为巨噬细胞,再与oxLDL共培养建立泡沫细胞模型;分为空白对照组、模型对照组、宁心痛颗粒含药血清(CMS)组、空白血清组、黄芪多糖(APS)组、藁本内酯(LIG)组、黄芪多糖合藁本内酯(APS + LIG)组7组,对巨噬细胞泡沫化过程进行干预.运用高效液相色谱法检测泡沫化程度(CE/TC比值),Western blot法检测SRA-I、CD36、ABCA1、LXRα、PPAR-γ的表达.结果 与空白对照组比较,模型对照组CE/TC值、SRA-I、CD36、ABCA1及LXR-α、 PPARγ蛋白表达升高(P ＜0. 05);与模型对照组比较,LIG组、APS + LIG组、CMS组CE/TC值降低(P ＜ 0. 05),除 APS 组 ABCA1 外,APS 组、LIG 组、APS + LIG 组、CMS 组 SRA-I、CD36 蛋白表达降低,ABCA1、LXR-a、PPARγ蛋白表达升高(P ＜0.05).与APS组比较,CMS组CE/TC值降低,ABCA1蛋白表达升高(P＜0.05).结论 宁心痛颗粒含药血清、主要药物的有效组分(APS、LIG)均可不同程度抑制 THP-1源性巨噬细胞泡沫化,其机制可能与调节巨噬细胞脂质吞噬-逆转运间的平衡,即下调脂蛋白吞噬受体SRA-I、CD36的表达,上调胆固醇逆转运通路中的ABCA1、PPARγ及LXR-α的表达有关.
关键词： 宁心痛颗粒 含药血清 有效组分 THP-1源性巨噬细胞 泡沫细胞 -
宁心痛颗粒对人类单核细胞株源性巨噬细胞泡沫化的影响
目的 探讨宁心痛颗粒干预动脉粥样硬化易损斑块的可能作用机制.方法 SD大鼠分别灌胃宁心痛颗粒3、15、30、60g/ (kg·d)浓煎剂4天,制备宁心痛颗粒等剂量、5倍、10倍、20倍含药血清.实验分为巨噬细胞组、模型组及宁心痛颗粒含药血清等剂量5倍、10倍、20倍剂量组.除巨噬细胞组外其余各组采用氧化低密度脂蛋白体外诱导正常生长的人类单核细胞株(THP-1)细胞建立巨噬细胞泡沫化模型.宁心痛颗粒含药血清各剂量组分别加入相应剂量的含药血清,使合药血清终浓度为3％,每组实验重复4次.运用Western blot法检测各组细胞脂蛋白受体清道夫受体A(SRA)、CD36蛋白表达水平. 结果 模型组细胞SRA、CD36蛋白表达含量较巨噬细胞组明显增高(P＜0.05);宁心痛颗粒含药血清各剂量组细胞SRA、CD36蛋白水平均较模型组明显降低(P＜0.01);宁心痛颗粒含药血清10倍剂量组细胞SRA、CD36的蛋白表达水平低于宁心痛颗粒其他剂量组(P＜0.01). 结论 宁心痛颗粒能够下调巨噬细胞SRA、CD36蛋白表达,从而抑制泡沫细胞的形成,可能是其干预动脉粥样硬化易损斑块的分子机制之一.
-
正交试验优选宁心痛颗粒的提取工艺
目的 优选宁心痛颗粒佳提取条件.方法 以葛根总黄酮为考察指标,设计了L9(33)正交试验.结果 佳提取工艺为A1B2C2,即加醇量为药材的8倍,醇浓度(%)为70%,提取时间为2 h.此条件下提取物葛根总黄酮含量可达10 mg/g.结论 优选的工艺条件可为新药研究和工业化生产提供参考.
-
宁心痛颗粒干预兔动脉粥样硬化易损斑块效果观察
目的:观察宁心痛颗粒对模型兔动脉粥样硬化易损斑块的稳定作用;方法:将50只大白兔均分为5组,分别是A、B1、B2、B3和34组.A组10只大白兔采用普通饲料喂养,两周后采用球蘘损伤腹主动脉,对球囊损伤部分进行p53基因转染,另外4组大白兔采用高脂饲料喂养,同样在两周后进行球囊损伤腹主动脉,在第10周结束之后,对球囊损伤部分进行p53基因的转染,在12周末将其处死,在将其处死之前的24 h、48 h分别给予两次药物(中国斑点蛙蛇毒和组胺)建立兔动脉粥样硬化易损斑块模型.第3周起B1、B2、B3组分别予宁心痛颗粒高剂量,常规剂量,血脂康胶囊干预,将B4组作为本次研究的模型组,因此不对其进行药物干预.每组大白兔在实验以及处死之前均对其空腹状态下进行血样检测,检测血样中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白胆固醇的含量.并对相关的数值进行计算.结果:进行高脂饲料喂养的四组大白兔在喂养12周以后,其血样检测中的四项指标检测结果均明显高于进行普通饲料喂养的A组,且有显著差异(P＜0.05),具有统计学意义.进行高脂饲料喂养的B1、B3组大白兔的四项指标检测结果均低于本次研究的模型组B4,且有显著差异(P＜0.05),具有统计学意义.但B1、B3组大白兔的四项指标检测水平相当,不具有统计学意义(P＞0.05).B1组的总胆固醇检测结果要明显低于B2组的检测结果,两者结果比较有显著差异(P＜0.05),具有统计学意义.其中进行高脂饲料喂养和宁心痛颗粒等干预的三组大白兔的低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、三酰甘油三者分别和高密度脂蛋白胆固醇的比值,和模型组大白兔的各项比值进行比较,无显著差异(P＞0.05),不具有统计学意义.结论:宁心痛颗粒可以对炎症有一定的抑制作用,进而稳定干预模型兔动脉粥样硬化易损斑块.
-
宁心痛颗粒含药血清对THP-1源性巨噬细胞TLR4、Syk、ERK、Paxillin蛋白磷酸化水平与细胞吞噬功能的影响
目的 观察宁心痛颗粒含药血清对“轻度氧化修饰低密度脂蛋白-Toll样受体4-巨噬细胞”途径的干预作用,探讨其稳定动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)斑块、抑制AS进展的分子机制.方法 将THP-1源性巨噬细胞分为空白组、模型组、空白血清组、宁心痛颗粒含药血清组4组.采用免疫印迹法检测脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)、细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)、桩蛋白(Paxillin)磷酸化水平随时间变化情况,以及宁心痛颗粒含药血清对Syk、ERK、Paxillin蛋白磷酸化水平的影响;采用免疫沉淀联合免疫印迹法检测Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)蛋白磷酸化水平随时间变化情况,以及宁心痛颗粒含药血清对TLR4蛋白磷酸化水平的影响;采用中性红吞噬实验检测巨噬细胞吞噬功能改变.结果 TLR4、Syk、ERK、Paxillin分别于15,10,15,30min达到磷酸化水平高峰;与空白组相比,模型组及空白血清组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平升高、细胞吞噬功能增强(P＜0.05);与模型组和空白血清组相比,含药血清组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平降低、细胞吞噬功能减弱(P＜0.05),但仍高于空白组.结论 宁心痛颗粒含药血清可能通过“mmLDL-TLR4-巨噬细胞”途径影响巨噬细胞吞噬功能从而具有稳定AS斑块、干预AS作用.
-
宁心痛颗粒抑制HSP60诱导MyD88-/-THP-1细胞炎症反应
目的 利用siRNA沉默THP-1源性巨噬细胞(Mφ)的髓样分化因子88(MyD88)基因表达,论证MyD88在介导重组人热休克蛋白60 (rhHSP60)诱导Mφp炎症反应中的作用及益气活血方宁心痛颗粒含药血清的抗炎机制.方法 THP-1细胞诱导分化为Mφp,分为空白对照组、模型组、阴性对照组、RNAi组(MyD88-/-Mφ)、含药血清组、RNAi+含药血清组共6组,荧光定量PCR法测定MyD88基因表达,免疫印迹法测定MyD88及磷酸化核因子κB(p-NF-κB)的蛋白表达,酶联免疫法测定TNF-α、IL-6的含量.结果 ①模型组MyD88基因表达升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P＜ 0.01);RNAi组、含药血清组分别与模型组相比表达均下降,差异有统计学意义(P均＜0.01);含药血清可增强siRNA的抑制作用,RNAi+含药血清组与RNAi组相比,差异有统计学意义.②模型组MyD88及p-NF-κB蛋白表达升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P均＜ 0.01);RNAi组二者表达均下降,与模型组相比,差异有统计学意义;含药血清可增强siRNA的抑制作用,RNAi+含药血清组与空白对照组相比,差异无统计学意义.③模型组TNF-α、IL-6含量升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P均＜ 0.01);转染MyD88 siRNA可抑制二者升高,RNAi组与模型组相比,差异具有统计学意义(P均＜ 0.01);含药血清单独使用可抑制二者升高,并可增强siRNA的抑制效果,RNAi+含药血清组与RNAi组相比差异有统计学意义(P均＜0.01).结论 MyD88/NF-κB是人热休克蛋白60诱导THP-1源性Mφ发生炎症反应的关键信号通路,宁心痛颗粒含药血清可通过调控该信号通路发挥抗炎作用.
关键词： 宁心痛颗粒 髓样分化因子88 人重组热休克蛋白60 RNA干扰 炎性反应 -
益气活血方宁心痛颗粒治疗冠心病心绞痛的研究思路初探
益气活血方宁心痛颗粒是在中医理论指导和相关药理研究下,遵循益气活血、通脉止痛的原则,针对气虚血瘀型心绞痛研制的医院院内中药自制制剂,近年来,广泛运用于临床,使许多冠心病心绞痛患者受益.
-
宁心痛颗粒中挥发油β-环糊精包合物制备工艺研究
目的:优选宁心痛颗粒中川芎、细辛混合挥发油成分β-环糊精(β-CD)的包合工艺.方法:采用正交试验法,以川芎、细辛混合油的利用率、包合物收率为指标,考察挥发油与β-CD比例、β-CD与水量比例、包合温度、包合时间等4个因素.结果:包合物的佳工艺条件为:β-CD与油比例6:1,β-CD与水比例1:6,包合温度60℃,包合时间2h.结论:优选包合工艺条件制备的包合物包合率及收率较高.
-
宁心痛颗粒治疗不稳定型心绞痛64例临床疗效观察
目的:观察宁心痛颗粒治疗不稳定型心绞痛(气虚血瘀证)的临床疗效.方法:将64例患者随机分为对照组(32例)予常规西药治疗;治疗组(32例)在对照组的基础上加用宁心痛颗粒,每次一袋冲服,3/日,疗程4周.分别于治疗前后观察心绞痛症状、心电图情况.结果:治疗组临床总有效率为93.75%,对照组为71.86%,差异(P<0.01).治疗组心电图总有效率为87.5%,对照组为65.62%,差异有统计学意义.结论:宁心痛颗粒联合常规西药治疗不稳定型心绞痛具有良好的临床疗效,可以明显减轻心肌缺血,值得临床推广应用.
-
顾宁教授创宁心痛颗粒方治疗冠心病不稳定型心绞痛经验
顾宁教授是南京中医药大学第三附属医院心血管科主任、主任中医师、教授、博士生导师、南京市名中医,在长期临床实践中,运用中医中药治疗冠心病,疗效显著.益气活血方"宁心痛颗粒"是顾教授自创并具有自主知识产权的治疗冠心病不稳定型心绞痛的良方.笔者有幸跟师学习,对导师的学术观点、临证治疗有所感悟,现将顾师经验及个人体会总结如下.
-
宁心痛颗粒干预模型兔动脉粥样硬化易损斑块的生化指标观察
目的 观察宁心痛颗粒对模型兔动脉粥样硬化易损斑块的稳定作用.方法 42只新西兰大白兔随机分为A、B1、B2、B3和B4组,A组6只,给予普通饲料喂养,2周后采用球蘘损伤,外源性p53基因转染,B1、B2、B3和B4组每组9只,给予高脂饲料喂养,2周后采用球囊损伤腹主动脉,第10周末于球囊损伤部位转染p53基因,12周末处死,处死前48、24 h分别给予2次药物(中国斑点蛙蛇毒和组胺)触发建立兔动脉粥样硬化易损斑块模型.第3周起B1、B2、B3组分别给予宁心痛颗粒高剂量、常规剂量,血脂康胶囊干预,B4组作为模型组,不予药物干预.各组分别于实验前和处死前取空腹血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,计算LDL-C/HDL-C、TG/HDL-C及TC/HDL-C值.结果 高脂饲料喂养12周后,B1、B2、B3和B4组实验兔TC、TG、LDL-C和HDL-C水平较A组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);B1组TC、TG、LDL-C水平低于B4组,差异有统计学意义(P＜0.05)；B3组TC、LDL-C、HDL-C水平低于B4组,差异有统计学意义(P＜0.05)；B1组、B2组、B3组LDL-C/HDL-C、TG/H DL-C及TC/HDL-C比值与B4组比较无明显差异(P＞0.05)；B1组TC、TG、LDL-C、HDL-C水平与B3组相当,差异无统计学意义(P＞0.05)；B1组TC水平低于B2组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 宁心痛颗粒对模型兔动脉粥样硬化易损斑块具有一定的稳定作用.
-
宁心痛颗粒治疗冠心病气虚血瘀证左室舒张功能不全的临床研究
目的:宁心痛颗粒治疗冠心病左室舒张功能不全(气虚血瘀证)的疗效.方法:以60例左室舒张功能不全患者为研究对象,按数字法编号分组,奇数编号者给予心内科常规治疗(对照组30例);偶数编号者附加宁心痛颗粒治疗(观察组30例).观察患者中医辨证气血改善情况以及舒张功能改善情况.结果:观察组和对照组总有效率90.00％ (27/30)和73.33％ (22/30),前者优于后者(P＜0.05);2组间心率、血压、LVEF、EPFV/APFV均改善,优于对照组(P＜0.05).结论:宁心痛颗粒益气活血功能显著,有效改善左室舒张功能,可指导临床用药.
