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基于肠道黏膜免疫的“脾为之卫”理论探讨
中医典籍有“脾者主为卫”之说,中医理论认为脾为气血生化之源,滋养卫气,行使防御,即“脾为之卫”.肠道黏膜免疫是近年来炎症性肠病的研究热点,“脾为之卫”的免疫学理论与肠道黏膜免疫相一致,探讨两者之间的关系对于胃肠疾病的防治具有重要指导意义.
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灵芝多糖对H22肝癌小鼠肠道黏膜免疫功能的影响
目的 观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制.方法 将H22细胞浓度调整为 1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2 mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytoxan, CTX) 组、GLP+CTX组,另设空白对照组,每组8只.于造模后第2天,GLP组及GLP+CTX组分别以1.02 g/(kg·d)灌胃GLP,每天1次,连续12天;CTX组及GLP+CTX组分别于第1天及第6天按100 mg/(kg·d)腹腔注射CTX;空白对照组与模型组以等量蒸馏水灌胃.于造模后第14天,拉颈处死小鼠,分离小肠,取盲肠上端1 cm处回肠,4%多聚甲醛固定,石蜡切片,采用免疫组化(iHC)的方法检测免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及IL-10的表达;剩余小肠分离肠道上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes, IEL)、固有层内淋巴细胞(lamina propria lymphocytes, LPL)及PP结内淋巴细胞(peyer′s patch lymphocytes, PPL),采用免疫荧光染色及流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群的变化.结果 (1)与正常组比较,模型组肠道黏膜淋巴细胞表型及肠道内细胞因子的表达均发生改变,并且各部位的淋巴细胞表型变化不同;(2)与模型组比较,GLP、CTX及GLP+CTX均能不同程度的调节肠道黏膜淋巴细胞的表型及细胞因子的表达.结论 GLP对肠道黏膜免疫的调节作用可能是其发挥抑瘤作用的另一条途径.
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人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响
目的 观察人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响.方法 分离SD大鼠外周血单个核细胞(PBMC)、派伊尔结淋巴细胞(PPL)、肠道上皮内淋巴细胞(IEL)和黏膜固有层淋巴细胞(LPL),分别与不同质量浓度的人参多糖和猪苓多糖共同培养,检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)水平变化.结果 人参多糖和猪苓多糖均可以使PBMC和PPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;2 mg/mL猪苓多糖可以使IEL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;人参多糖和猪苓多糖可以使LPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平降低.结论 人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能具有调节作用.
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环磷酰胺和地塞米松对小鼠肠道黏膜免疫抑制的比较
目的:观察环磷酰胺和地塞米松对小鼠肠道黏膜免疫的抑制作用.方法:筛选地塞米松和环磷酰胺的给药天数和剂量;CCK-8检测肠系膜淋巴结(Mesenteric lymph nodes,MLN)细胞转化增殖；流式细胞术检测MLN及派氏结(Peyer's Patch,PPs)中T、B淋巴细胞的数量及活化比例；ELISA试剂盒检测肠道sIgA的分泌.结果:地塞米松40 mg/kg和环磷酰胺100 mg/kg腹腔注射给药一次,有效降低小鼠胸腺、脾脏脏器指数和减少派氏结个数,抑制MLN细胞增殖；与正常组相比,地塞米松降低MLN和PPs中T细胞比例,抑制T、B细胞的活化；而环磷酰胺降低MLN和PPs中B细胞的比例,对MLN中B细胞活化有明显的抑制作用；地塞米松和环磷酰胺均降低肠道sIgA的分泌.结论:地塞米松和环磷酰胺皆能对肠道黏膜免疫产生抑制作用,但地塞米松对MLN和PPs中T细胞抑制作用较强,而环磷酰胺对B细胞的抑制作用较强.
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肠道黏膜免疫耐受机制研究进展
肠道是接触外界食物抗原的主要部位,同时也是机体微生物寄居的主要场所.肠道黏膜免疫系统是机体抵抗肠道病原菌和外界抗原感染的第一道防线,其在宿主与外环境间稳态的建立和维持方面发挥关键的作用.肠道免疫系统是否能有效地区分有害抗原(病原菌)和无害抗原(食物蛋白和正常菌群)对维持肠道的稳态平衡至关重要.肠道黏膜免疫系统具有独特的免疫细胞,调节性T细胞、耐受性DC(尤其是CD103+ DC)及独特的模式识别受体的表达在维持肠道对口服抗原和肠道共生菌耐受方面发挥关键作用.本文就肠道免疫系统的组成、功能以及肠道黏膜免疫耐受的机制等方面进行阐述.
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肠道黏膜免疫在肠易激综合征发病中的作用
肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种常见的功能性肠病,以腹痛或腹部不适为主要症状,排便后可缓解,伴有排便习惯改变,缺乏可解释症状的形态学和生化学异常.IBS的病因和发病机制目前还不明确,多认为是多因素相互作用的结果,其中主要因素有胃肠道动力异常、内脏敏感性增高、脑一肠轴调节异常、精神心理异常等.近年来,肠道黏膜免疫是研究的热点,其激活后产生的低度炎症在IBS发病中具有重要作用.
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肠道黏膜免疫功能异常与IgA肾病
IgA肾病(IgAN)是我国发病率高的原发性肾小球肾炎,其确切的病因及发病机制迄今尚不明确,但越来越多的证据表明肠道黏膜免疫功能异常与IgAN的发生和发展密切相关.研究表明,食物成分、肠道微生态及肠道疾病等多种因素导致的肠道黏膜免疫功能异常,产生大量的分泌型IgA(s IgA),终沉积于肾小球系膜区,导致IgAN.本文就此作一综述.
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香菇多糖对免疫抑制小鼠肠道派氏结T细胞的影响
目的 研究香菇多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠的肠道派氏结T细胞的影响.方法 通过胸腺指数,脾脏淋巴细胞的增殖转化和迟发型超敏反应情况观察香菇多糖对免疫抑制小鼠系统免疫功能的影响;在迟发型超敏反应条件下,通过肠道派氏结T细胞比例、亚群和活化的情况观察香菇多糖对免疫抑制小鼠肠道派氏结T细胞的影响.结果 香菇多糖对环磷酰胺诱导的小鼠胸腺指数降低,脾淋巴细胞增殖和迟发型超敏反应能力下降表现出明显的恢复作用;对环磷酰胺诱导的DTH小鼠小肠派氏结数目减少,派氏结中T淋巴细胞比例升高、活化水平降低等肠道黏膜免疫系统抑制状态同样具有明显改善作用.结论 香菇多糖可以正向调节免疫抑制小鼠肠道派氏结的T细胞功能,提示香菇多糖对肠道黏膜免疫系统具有一定的免疫调节作用.
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溃疡性结肠炎中肠黏膜免疫细胞因子作用的研究进展
溃疡性结肠炎(UC)是一种以直肠、结肠黏膜及黏膜下层炎症为特征的慢性非特异性疾病,它的病因和发病机制尚不十分清楚,目前认为其可能与遗传、免疫、感染及精神等多因素相互作用有关,而免疫学因素是UC研究中的热点[1].近年来,随着肠道黏膜免疫的深入研究,逐渐认识到在UC发生发展过程中肠道黏膜免疫起着重要的作用.本文针对UC与肠道黏膜免疫因子的关系而展开论述.
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肝移植术后对肠道黏膜SIgA分泌的影响及意义
目的 观察肝移植前后,肠道黏膜分泌型免疫球蛋白(secretory immunoglobulin A,SIgA)分泌变化情况,为临床施行肝移植术后胃肠道功能的恢复提供依据.方法 选取20例肝脏病变行肝移植的患者和20例体格检查健康者作为研究对象,检测患者肝移植术前后和健康体检者粪便内的SIgA含量.结果 肝移植患者肝移植术前SIgA较健康体检者低;肝移植术后,随着肝移植实施时间的变化,SIgA水平逐渐恢复正常,与健康体检者无差异.结论 肝脏病变可导致胃肠道黏膜SIgA水平下降.随着肝移植手术的实施,肠道黏膜SIgA分泌接近正常,黏膜免疫功能得到明显的改善.
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一种改良小鼠肠道黏膜固有层淋巴细胞分离方法的建立
目的:探讨并改良肠道黏膜固有层淋巴细胞(LPL)分离方法.方法:参照Sanos等方法进行改进.用分离液和消化液处理肠组织片段后,通过100 μm的尼龙滤网过滤,行零加减速密度梯度离心,观察分析细胞获得率、细胞活率和细胞纯度.结果:每只小鼠肠道LPL的获得量为(5.5±1.7)× 106个,细胞活力＞92％;细胞平均直径为(7.5±o.8)μm,细胞平均圆度为0.93±0.03,细胞结团率为(0.4±0.2)％;流式细胞仪检测细胞活率为(94.5±3.2)％,CD4+T细胞的含量为(72.5±5.2)％.结论:与国内外其他分离方法相比较,该方法简化、高效、稳定,且获取的LPL的细胞数量多、活率高、纯度高,可为肠道黏膜免疫的研究提供可靠的方法,值得推广.
关键词： 肠道黏膜固有层淋巴细胞 肠道黏膜固有层 肠道黏膜免疫 小鼠 分离技术 -
羟基积雪草苷对胶原关节炎大鼠肠道黏膜免疫的影响
目的:考察胶原关节炎大鼠肠道黏膜免疫的改变及羟基积雪草苷的调节作用.方法:在Wistar大鼠复制胶原关节炎模型,其后将大鼠分为正常对照组、模型组和羟基积雪草苷组,灌胃给药,连续21 d.ELISA法测定大鼠肠内容物中sIgA含量及小肠组织中IFN-y含量.流式细胞术检测小肠上皮内及固有层细胞中CD4+和CD8+T细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值.实时定量PCR法检测小肠组织中CD80、CD86、IL-6、IL-12及Foxp3 mRNA的表达水平.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肠内容物中sIgA含量及小肠组织中IFN-γ含量显著升高,小肠上皮内及固有层T细胞中CD4+/CD8+比值上升,小肠组织中CD80、CD86、IL-6和IL-12 mRNA表达显著上调,而Foxp3 mRNA的表达变化无统计学意义.羟基积雪草苷灌胃给药可降低模型大鼠肠内容物sIgA和小肠组织IFN-γ含量、CD4+/CD8+比值及CD80、CD86、IL-6和IL-12 mRNA的表达,显著上调Foxp3 mRNA的表达.结论:关节炎状态下大鼠肠道黏膜免疫应答上调,抗原呈递细胞异常活化且免疫耐受状态遭到破坏,羟基积雪草苷可下调关节炎大鼠肠道黏膜免疫应答,促进肠道黏膜免疫耐受的形成和维持.
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人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠肠道黏膜免疫细胞功能的影响
目的:观察人参多糖和猪苓多糖对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响.方法:采用皮内注射Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)建立CIA大鼠模型,分离模型大鼠PP结淋巴细胞(PPL)、肠道上皮内淋巴细胞(IEL)和固有层淋巴细胞(LPL),分别与不同浓度的人参多糖和猪苓多糖共培养48 h后,检测培养上清中TNF-α和IFN-γ含量的变化.结果:与加入RPMI1640培养液的空白对照组比较,不同浓度的人参多糖和猪苓多糖,均可使PPL分泌TNF-α减少,但使IFN-γ的分泌增加;而IEL和LPL分泌TNF-α和IFN-γ的水平均有不同程度的降低.结论:人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠PPL具有不同的免疫调节作用;而对于IEL和LPL,则可导致其免疫活性降低.
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黄连素对肠道黏膜免疫功能的调节作用
黄连素(berberine)是在中国传统医药中广泛应用的广谱抗菌药物,临床上主要用于治疗肠道细菌感染性疾病.肠道黏膜免疫是机体防止感染的第一道防线,并在宿主与外环境间黏膜稳态的建立和维持上发挥着重要作用.近年来,中医药对肠道黏膜免疫的研究已成为国内外学者的研究热点,现就黄连素在肠道黏膜免疫中的调控作用作一综述.
