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坎地沙坦改善C2C12细胞胰岛素敏感性的机制研究
目的 研究血管紧张素Ⅱ和坎地沙坦对小鼠骨骼肌细胞(C2C12)胰岛素敏感性的影响及其机制.方法 C2C12诱导分化成熟后,分为对照组(C组)、模型组(M组:AngⅡ)、坎地沙坦低剂量组(CanⅠ组:坎地沙坦0.1 μM+ AngⅡ)、坎地沙坦中剂量组(Can2组:坎地沙坦1μM+ AngⅡ)、坎地沙坦高剂量组(Can3组:坎地沙坦10 μM+ AngⅡ).各组细胞给予相应药物及胰岛素处理后,检测2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)的摄取率,并用RT-PCR法和Western印记法分别检测各组细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和胰岛素受体底物分子-1(ISR-1)的mRNA及蛋白表达水平.结果 M组摄取2-NBDG较C组明显降低(P＜0.01),而Can3组摄取2-NBDG则较M明显增加(P＜0.05).M组ISR-1和Akt的mRNA表达较C组明显降低(P＜0.01),Can2组及Can3组ISR-1、PI3K和Atk的mRNA表达较M组明显升高(P＜0.05).M组p-ISR-1和p-Akt蛋白表达较C组明显降低(P＜0.01),Can2组及Can3组p-ISR-1和p-Akt较M组明显升高(P＜0.05).结论 AngⅡ通过下调胰岛素信号通路中重要因子ISR-1、Akt的mRNA及蛋白表达抑制胰岛素的生物学效应,引起骨骼肌细胞胰岛素抵抗;而坎地沙坦通过抑制AngⅡ的这种作用改善骨骼肌胰岛素抵抗.
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青钱柳叶复方对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路和GLUT4的影响
目的 通过建立高血糖动物模型,研究青钱柳叶复方对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路和GLUT4的影响及作用机制.方法 采用高脂饮食联合小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 30 mg/kg建立2型糖尿病模型,造模成功后大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、青钱柳叶复方高剂量组(复方高剂量组)、青钱柳叶复方低剂量组(复方低剂量组).正常对照组和模型组给予蒸馏水,各药物治疗组分别灌胃给予相应剂量药物.给药12周后,氧化酶法检测大鼠空腹血糖(FBG)的变化;ELISA法检测大鼠血清中的空腹胰岛素水平(FINS)的变化;计算各组大鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-IS);Western-Blot法、RT-PCR法和免疫组织化学检测骨骼肌胰岛素信号通路IRS-1、IRS-2、PI3K、AKT、GLUT4的表达情况.结果 复方(高、低)治疗组大鼠血清FBG、糖化血红蛋白(HbA1c)、FINS均显著降低(P＜0.05);HOMA-IR显著降低,HOMA-IS显著升高(P＜0.05);其中复方高剂量组大鼠血清FBG、HbA1c、FINS等含量低于复方低剂量组;但差异无统计学意义(P＞0.05).复方高剂量组糖尿病大鼠骨骼肌IRS-1、IRS-2、PI3K、AKT、GLUT4等蛋白表达量增多.结论 青钱柳叶复方能降低2型糖尿病大鼠血糖,改善胰岛素抵抗.此作用是通过增加胰岛素受体底物(IRS-1、IRS-2)数量,激活PI3K途径增加GLUT4转位,增强骨骼肌中GLUT4基因和蛋白表达实现的.
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不同剂量加减苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR大鼠胰岛素抵抗的影响
目的 建立多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(polycystic ovary syndrome with insulin resistance,PCOS-IR)动物模型,观察加减苍附导痰汤高、中、低剂量组对肥胖型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠胰岛素抵抗和血清性激素水平的影响,以及卵巢组织及骨骼肌组织胰岛素信号通路磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PI3K/PKB/mTOR)蛋白表达水平的影响.方法 选取21日龄SPF级SD雌性大鼠60只,其中12只为空白对照组,剩余48只利用经典Poresky造模方法联合高脂饲料诱导肥胖型PCOS-IR大鼠.造模成功后,随机分为模型对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组各12只,分别实施不同的干预措施.经治疗28天后,用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FPG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),酶联免疫法检测大鼠血清中促黄体生成素(LH)、促卵泡生长素(FSH)、睾酮(T);Western Blot法检测大鼠卵巢组织中PI3K、PKB、mTOR蛋白水平的表达.结果 (1)与空白对照比较,模型对照组体重、FPG、FINS、IR、LH、FSH、T、mTOR蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PI3K/PKB蛋白表达水平显著降低(P<0.05);(2)与模型对照组比较,中药中剂量组体重显著降低(P<0.05),中药低剂量组、 中药中剂量组、 中药高剂量组FPG、FINS、IR、T值显著下降(P<0.05);(3)在卵巢组织中,中药高剂量组PI3K/PKB蛋白表达比中药中剂量组、中药低剂量组显著升高(P<0.05);(4)在骨骼肌组织中,中药高剂量组、中药中剂量组PI3K/PKB蛋白表达比中药低剂量组显著升高(P<0.05),中药中剂量组、中药高剂量组mTOR蛋白表达水平比低剂量组显著降低(P<0.05).结论 (1)中药加减苍附导痰汤能够明显改善PCOS-IR大鼠体重、胰岛素抵抗情况及高雄状态.(2)中药上调PCOS大鼠卵巢组织及骨骼肌组织胰岛素信号通路PI3K/PKB/mTOR的活性,使蛋白PI3K/PKB相对表达量升高,mTOR蛋白相对表达量下降,具有浓度依赖性,推测中药改善肥胖型PCOS-IR大鼠胰岛素抵抗情况可能通过影响胰岛素信号通路PI3K/PKB/mTOR来起作用的.
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辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响
目的 以HepG2细胞为实验对象,探讨辅助降糖片的体外降糖效果及胰岛素传导关键信号胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、丙酮酸脱氢激酶-1(phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK1)的影响.方法 培养HepG2细胞,CCK-8法检测辅助降糖片对HepG2细胞增殖的影响以确定其可作用于HepG2细胞的的浓度,采用高浓度胰岛素刺激建立胰岛素抵抗模型,用葡萄糖检测试剂盒检测辅助降糖片对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,Western Blot法探讨其可能的作用机制.结果 辅助降糖片浓度高于300μg/mL时对HepG2细胞有较强的抑制作用,300、150与模型组相比葡萄糖消耗量具有极显著差异(P<0.05).Western Blot显示与正常组相比,模型组PDK1、InsR蛋白表达显著降低(P<0.05),与模型组比较给药组,PDK1、InsR表达显著升高(P<0.05).结论 辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用,其作用机制可能是通过PI3K/Akt通路来改善2型糖尿病的胰岛素抵抗.
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复方石斛合剂单次给药对db/db小鼠胰岛素信号的影响
目的:探讨复方石斛合剂单次给药对db/db小鼠胰岛素信号的影响,并探讨相关的作用机制.方法:选取30只14～16周龄雄性db/db小鼠,按空腹血糖及体重随机分成模型组、中药1方组、中药2方组;另10只db/m小鼠为正常组.以复方石斛合剂1方与2方单次给药后,从整体水平观察葡萄糖耐量(OGTT)的变化;单次给药30 min与60 min后,从细胞水平观察肝细胞6-磷酸果糖激酶-1(PFK)与丙酮酸脱氢酶(PDH)活性,胰岛素受体(InsR)与Akt蛋白磷酸化水平的变化.结果:与正常组比较,模型组db/db小鼠OGTT 0,30,60,120 min的血糖水平显著升高,肝细胞PFK与PDH活性显著降低,30 min与60 min InsR与Akt蛋白表达显著降低(P＜0.01);与模型组比较,石斛合剂1方和2方单次给药均能明显降低db/db小鼠OGTT 60,120 min的血糖水平(P＜0.05,P＜0.01),改善葡萄糖耐量;石斛合剂1方和2方单次给药均增加肝细胞PFK与PDH活性,促进InsR Tyr1150/1151与Akt Thr308和Ser473磷酸化水平,呈现药物时间依赖效应(P ＜0.05,P＜0.01).结论:复方石斛合剂1方,2方分别单次给药都能提高db/db小鼠的葡萄糖耐量,增加肝细胞PFK和PDH酶活性,其机制可能与增加InsR Tyr150/1151与Akt Thr308和Ser473磷酸化,改善胰岛素信号的快速转导有关.
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补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响
目的:研究补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠胰岛素抵抗(IR)的干预作用,探讨其对胰岛素信号通路中细胞因子及激酶等的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肾降浊饮低、中、高剂量组(10,15,20 g·kg -1)及水飞蓟宾葡甲胺组(19 g·kg-1),正常组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养并同时灌胃生理盐水或相应剂量药物干预.12周后检测各组大鼠血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转氨酶(AST),空腹血糖(FBG),胰岛素(INS)水平,胰岛素抵抗指数(IRI),胰岛素敏感指数(ISI)及肝组织中脂联素(ADP),游离脂肪酸(FFA),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色、油红O染色检测肝组织脂肪变性程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织中c-Jun氨基端激酶1 (JNK1 ),磷酸化c-Jun氨基端激酶(P-JNK)及胰岛素受体α(Irα),磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307位点(p-IRS-1)表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠 TG,TC, ALT, AST, FBG, INS, IRI,TNF-α,FFA, MDA水平及 JNKl,p-JNK及 p-IRS-1蛋白表达显著升高,ISI,ADP, SOD水平显著降低(P＜0.01);与模型组比较,补肾降浊饮低、中、高剂量组可不同程度降低大鼠血清中TG,TC,ALT,AST,FBG,INS, IRI,TNF-a,FFA,MDA水平及 JNK1,p-JNK及 p-IRS-1蛋白表达(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01),升高 ISI,ADP,SOD水平(P ＜0.05,P ＜0.01);相较于水飞蓟宾葡甲胺组,补肾降浊饮高剂量组疗效显著(P＜0.01).结论:补肾降浊饮可改善非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与提高ADP含量,减轻氧化应激,抑制JNK信号通路进而增强胰岛素受体底物活性有关.
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葛根上调肝胰岛素抵抗HepG2细胞OB-R,IRS2,GLUT1和GLUT2蛋白调节糖代谢的研究
研究中药葛根对人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型糖代谢的改善作用并初步探讨葛根降糖的分子作用机制.该实验采用课题组优化方法,1×10.-9 mol·L.-1胰岛素加3.75×10.-6 mol·L.-1地塞米松联合给药HepG2细胞48 h建立稳定的IR模型;CCK-8法检测葛根含药血清对细胞活性的影响;葡萄糖氧化酶法检测多个时间点(12,15,18,21,24,30,36 h)IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量;蒽酮法检测细胞内糖原含量;Western blot法检测胰岛素受体底物2(IRS2)、瘦素受体(Ob-R)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和GLUT2蛋白表达水平.研究结果显示葛根含药血清(5％,10％,15％)对IR-HepG2细胞的活力没有明显的影响;5％和10％葛根含药血清在给药18,21,24 h均显著上调IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量(P<0.01),15％葛根含药血清除给药15 h上调葡萄糖消耗量较弱(P<0.05),18,21,24,30 h都显著上调葡萄糖消耗量(P<0.01),呈现一定程度剂量依赖性.葡萄糖消耗时效实验确认24 h是佳时间点,进一步研究发现葛根含药血清作用24 h增加胞内糖原含量(P<0.01);上调IRS2,Ob-R,GLUT1和GLUT2蛋白表达量.葛根含药血清降糖作用可能部分通过上调Ob-R和IRS2蛋白表达来调节以PI3K/PDK为中心的胰岛素信号通路;上调IR-HepG2细胞GLUT1和GLUT2表达量,加速葡萄糖转运进入肝细胞中并增加糖原合成来增强IR-HepG2细胞的胰岛素敏感性来实现的.
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芪蛭降糖胶囊对2型糖尿病大鼠肝组织中InsR,PI3K,GLUT2,p-JNK蛋白表达的影响
观察芪蛭降糖胶囊对2型糖尿病大鼠降糖的效果,并探讨其降糖的初步作用机制.该实验采用高糖高脂配合小剂量链脲佐菌素(STZ)制备成2型糖尿病大鼠模型,连续给药6周后,检测各组动物血糖、糖化血清蛋白(GSP)水平;免疫组化法检测胰腺组织中胰岛β细胞的数量;蛋白印迹法检测肝组织中胰岛素受体(InsR)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、葡萄糖转运体2(GLUT2)及磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白的表达.结果显示,芪蛭降糖胶囊能够降低糖尿病动物的血糖和血清GSP水平,提升血清中胰岛素含量和胰岛β细胞的数量,提高肝组织中InsR,PI3K,GLUT2蛋白表达,降低p-JNK蛋白的表达.总之,芪蛭降糖胶囊降糖的作用较为稳定,其降糖机制可能与增加胰岛β细胞的数量而提升血清中胰岛素的含量,提高肝组织中InsR,PI3K,GLUT2蛋白表达并降低p-JNK蛋白表达从而减少肝组织的胰岛素抵抗有关.
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补肾化痰复方对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢内胰岛素信号传导分子的调控
目的 观察补肾化痰复方对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠糖脂代谢及卵巢内胰岛素信号传导分子表达的影响.方法 Wistar雌性大鼠孕16天时分别在颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2.5 mg/kg(其子代雌鼠随机分为给药组与模型组,每组10只)或等剂量中性茶油(其子代雌鼠为对照组,10只),每天1次,连续3天.给药组给予补肾化痰复方灌胃,模型组及对照组给予同体积蒸馏水灌胃,每天1次,连续20天.称大鼠体重、卵巢重量,计算脂体比；采用口服葡萄糖耐量试验(OG'IT)测定大鼠0、0.5、1、2h血糖水平；检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖及胰岛素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)；采用Western blot法检测卵巢内胰岛素信号传导分子蛋白激酶B(AKT2)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、葡萄糖转运蛋白4( GLUT4)和细胞外信号调节激酶l(ERKI)的蛋白表达以及AKT2、GSK3β、ERK1磷酸化(P-AKT2、P-GSK3β、P-ERKI)的蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组脂体比、OGTT试验0.5、2h血糖水平及HOMAIR均明显升高,HDL-C水平明显降低(P＜0.05).与模型组比较,给药组脂体比、OGTT试验2h血糖水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P＜0.05).模型组卵巢组织中AKT2、P-AKT2、GSK3β、P-GSK3β、GLUT4及ERK1的表达明显低于对照组(P＜0.05)；给药组GSK3β、P-GSK3β及GLUT4的表达较模型组明显增高(P＜0.05).结论 PCOS雌鼠存在胰岛素抵抗及糖脂代谢功能异常,并存在卵巢组织信号传导通路的异常.补肾化痰复方能够改善胰岛素抵抗及糖脂代谢功能,可能与胰岛素信号传导分子蛋白表达的调控有关.
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豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病大鼠血糖的可能机制研究
目的 探讨豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖的可能机制.方法 T2DM大鼠给予豹皮樟总黄酮(total flavonoids of litsea coreana,TFLC,400 mg/kg)或阳性对照药二甲双胍(MET,400 mg/kg)灌胃治疗6周.各组大鼠空腹血清作常规生化指标测定,肝脏作HE染色和透射电镜观察;肝匀浆作丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)分析;RT-PCR检测大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase1B,PTP1B)的表达.结果 糖尿病大鼠经TFLC或MET治疗后葡萄糖耐量明显改善,空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显增加,肝匀浆MDA含量下降,SOD活性升高,2个治疗组的各指标之间差异无统计学意义.光镜下T2DM组肝脏有明显的脂肪变性,电镜下肝脏线粒体肿胀,内质网断裂,TFLC组和MET组均有不同程度的改善.T2DM组肝脏中PTP1B的表达明显升高,TFLC组PTP1B表达显著降低,MET组PTP1 B的表达无明显改变.结论 TFLC可明显降低血糖和血脂,减轻肝脏组织的氧化应激,其改善胰岛素抵抗,可能与其降低T2DM大鼠肝脏中PTP1B的表达,增强胰岛素信号通路有关.
关键词： 2 型糖尿病大鼠 豹皮樟总黄酮 蛋白酪氨酸磷酸酶 1B 降血糖 胰岛素信号通路 -
胰岛素信号转导通路与骨重建
骨是一持续重建的组织.骨重建主要由破骨细胞和成骨细胞参与,以破骨细胞激活和骨吸收开始,以与之相耦联的成骨细胞激活和骨形成终结,贯穿于整个生命过程的始终[1].破骨细胞和成骨细胞功能受到全身和局部诸多因素调控,除生长激素、雌激素、甲状旁腺激素外,胰岛素信号转导途径相关因子也起着重要作用.本文就胰岛素信号通路对骨重建的作用进行综述.
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APP5肽类似物165对链脲佐菌素损伤SH-SY5Y细胞的保护作用
目的 探讨体外APP5肽类似物165(下称P165)对链脲佐菌素(STZ)损伤SH-SY5Y细胞的保护作用.方法 STZ 0.8mmol/L作用于SH-SY5Y细胞的损伤模型.通过测定噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酸(LDH)漏出率,瑞氏染色观察细胞形态,Western blot检测相关蛋白,观察P165的保护作用.结果与正常对照组细胞的MTT代谢率(1.00±0.01)和LDH漏出率(201.56±47.54)比较,STZ损伤组细胞MTT代谢率降低(0.84±0.01),LDH漏出率升高(317.83±76.95),差异有统计学意义(P<0.05),细胞胞体面积缩小,胰岛素信号通路相关蛋白IRS-1、PI3K表达减少;P165 30μmol/L组细胞MTT代谢率升高(0.91±0.01),LDH漏出率降低(228.53±35.65),细胞形态恢复正常,胰岛素信号通路相关蛋白IRS-1、PI3K表达恢复正常.结论 体外STZ与SH-SY5Y细胞共孵育,可能影响胰岛素/胰岛素受体信号转导系统对细胞的促生长作用,而P165可能通过激活该信号通路逆转这种损伤,可作为一种神经营养因子起到保护作用.
关键词： APP5肽类似物165 链脲佐菌素 SH-SY5Y细胞 胰岛素信号通路 -
磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β信号通路对胰岛β细胞凋亡调控作用的研究进展
磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β(PI3K/Akt/GSK3β)是胰岛素下游信号转导通路中重要的信号分子,其对于胰岛β细胞数量和功能的维持发挥重要的作用.本文回顾了胰岛素刺激下的PI3K/Akt/GSK3β信号通路的分子机制,及可能在胰岛β细胞凋亡过程中的作用.
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microRNAs对胰岛素合成、分泌及其信号通路影响的研究进展
microRNAs是一种长度在19～23个核苷酸左右的非编码小分子RNA,通过抑制靶mRNA的表达或翻译,调控人体30％以上基因的表达.microRNAs的表达异常可导致多种疾病,包括糖尿病.胰岛素是人体唯一降血糖激素,其分泌不足及作用缺陷会引起T2DM.胰岛β细胞中有多种microRNAs表达,这些microRNAs可调节胰岛素的合成与分泌,影响胰岛β细胞增殖.另外,胰岛素靶组织上的microRNAs可通过调节胰岛素信号通路影响胰岛素的作用.由于microRNAs具有组织特异性,并且在不同疾病中会有相应的表达改变,因此,其有作为多种疾病的生物标记及治疗靶点的“潜力”.
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胰岛素抵抗与糖尿病心肌病的研究进展
一、概述糖尿病心肌病(DC)早是由Rubler等~([1])于1972提出的.DC的可能病因包括代谢紊乱、胰岛素抵抗(IR)、心脏小血管病变、心脏自主神经系统的紊乱、心肌纤维,凋亡及坏死等,其中IR在DC的发生发展过程中起重要作用,终导致心肌细胞肥大、心肌间质纤维化、胶原沉积等病理变化.因此,DC的治疗可结合已有的有关DC的研究成果,并以其特有的发病机制为靶点,早期干预并逆转代谢异常对心肌的毒性作用将是防治DC的有效手段.
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2型糖尿病相关环状RNA的筛选与验证研究
目的 筛选T2DM相关环状RNA(circRNA)并验证其临床意义.方法 通过circRNA表达谱芯片和生物信息信分析筛选出胰岛素信号通路相关的circRNAs.收集50例新诊断T2DM患者(T2DM组)、40例IFG患者(IFG组)及50名体检健康人群(NC组)的一般资料,检测各组血生化指标及FIns、瘦素(LEP)、APN和3个候选circRNAs的水平.Logistic回归分析、多元线性回归分析和受试者工作特征曲线(ROC)分析circRNAs与T2DM、IFG潜在风险之间的相关性,并评估其对T2DM的诊断价值.结果 hsa_circ_0056891、hsa_circ_0063425、hsa_circ_0071336表达水平降低是T2DM的独立预测因子,并增加T2DM患病风险.调整多个因素后的OR(95％CI)为1.880(1.243～2.846)、1.942(1.290～2.923)、1.599(1.065～2.402).3个circRNAs联合诊断T2DM具有一定的准确性,ROC曲线下面积(AUC)的OR(95％CI)为0.803(0.719～0.886).结论 hsa_circ_0056891、hsa_circ_-0063425和hsa_circ_0071336可能在T2DM及IFG的发病机制中起重要作用.
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津力达中药颗粒对胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激及胰岛素信号通路的影响
目的 观察中药津力达颗粒对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)模型大鼠肝脏氧化应激及胰岛素信号通路的影响.方法 将36只6～8周龄雄性SD大鼠予以高脂饲料喂养12周诱导IR模型,26只成模大鼠随机数字法分为高脂组(n=8)、津力达组(n=9)、二甲双胍组(n=9),予以高脂饲料喂养,同时以健康SD大鼠设立普食组(n=9).药物干预10周后行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)测取0、60、120 min血糖及胰岛素水平,计算稳态模型IR指数(HOMA-IR)评价肝脏IR,胰岛素敏感指数(ISI)评价全身胰岛素敏感性,同时测定各组大鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及过氧化氢酶(CAT)等氧化指标表达.Western blotting法测定肝脏组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、蛋白激酶B(PKB/Akt)及胰岛素受体底物1(IRS-1)的活性变化.采用单因素方差分析进行多组间均数比较.结果 药物干预10周后,IPGTT实验结果显示,与高脂组相比,普食组、津力达组、二甲双胍组空腹及餐后血糖及血清胰岛素水平出现不同程度下降,其中在60、120 min血糖及0、120 min胰岛素水平上均存在统计学差异(t=1.76～ 5.03,均P＜0.05),HOMA-IR出现下降,ISI明显上升(t=-187.63 ～5 635.06,均P＜0.05);与高脂组相比,二甲双胍组、津力达组SOD活性分别升高了64.9％、64.4％(t=-3 831.41、-2 879.73,均P＜0.05);MDA降低了36.3％及28.1％(t=183.52、105.77,均P＜0.05);CAT和GSH分别上升了101.0％、41.5％ (t=21.47、-512.31,均P＜0.05)及111.0％、39.8％ (t=19.68、357.20,均P＜0.05);p-JNK/JNK分别下降了26.3％及15.0％(t=0.77、0.61,均P＜0.01);p-IRS-1/IRS-1分别下降了23.5％及29.4％(t=0.61、0.46,均P＜0.01),p-Akt/Akt则上升了43.7％及42.3％(t=-0.50、-0.28,均P＜0.01).但津力达组与二甲双胍组之间差异均无统计学意义.结论 津力达颗粒可显著提高IR大鼠的胰岛素敏感性,其机制可能是津力达颗粒增强了IR大鼠肝脏的抗氧化能力,抑制肝脏组织中JNK及IRS-1的磷酸化,增加了Akt的活性,从而改善胰岛素信号的转导.
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促红细胞生成素对棕榈酸诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用
目的：研究促红细胞生成素（EPO）改善棕榈酸（PA）诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用及机制。方法以PA（250 nmol/L）及EPO（10 U）或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的组蛋白去乙酰化酶（SIRT1）激动剂白藜芦醇（Rsv,10 nmol/L）干预HepG2细胞，分为6组：对照组、胰岛素组（Ins）、PA组、PA+Ins组、PA+EPO组、PA+Rsv组；将含SIRT1的小干扰RNA（siRNA）转染HepG2细胞，再分为对照组、EPO组、EPO+阴性siRNA组、EPO+siSIRT1组及相应的PA干预组。Western blotting法检测胰岛素受体底物2（IRS?2）、磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）及SIRT1蛋白水平，定量逆转录多聚酶链反应（qRT?PCR）检测SIRT1基因变化。采用独立样本t检验进行两组间均数比较。结果与对照组比较（1.00±0.03），PA组的pIRS?2(Ser731)蛋白升高，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平降低（分别为1.25±0.06、0.77±0.02、0.74±0.03，t=6.048、-13.686、-10.649，均P<0.05）。经EPO干预后，与PA组相比，pIRS?2（Ser731）蛋白降低，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平升高(分别为0.70±0.03比1.00±0.11、1.60±0.14比1.00±0.08、1.39±0.03比1.00±0.03，t=-4.853、6.330、25.868，均P<0.05)。当使用siRNA下调SIRT1后，生理及PA状态下EPO激活HepG2细胞胰岛素信号通路的作用均被阻断。结论在PA处理的HepG2细胞中，EPO能够通过促进SIRT1蛋白表达，从而激活受损的胰岛素信号通路。
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PI3K/AKT/GSK3β通路影响糖代谢与认知过程的研究进展
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3 Ks)为酪氨酸激酶和G蛋白偶联受体的主要下游分子,其催化产生第二信使3,4,5-三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3),并激活下游分子蛋白激酶B(PKB/AKT)、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)等,将多种生物信号传递到细胞内,从而对葡萄糖转运、细胞增殖、分化和凋亡等过程起调节作用,且与胰岛素抵抗相关的2型糖尿病关系密切.本文将对国内外研究中PI3K/AKT/GSK3β信号通路在糖代谢中的作用及对认知过程的影响研究进展予以综述.
关键词： 2型糖尿病 糖代谢 认知 胰岛素信号通路 PI3K/Akt/GSK3β -
游离脂肪酸致胰岛素抵抗的分子机制
胰岛素抵抗(IR)是与2型糖尿病(T2DM)、高血压、血脂紊乱等疾病有关的一种复杂的代谢紊乱性疾病,这些与IR相关的疾病均是心血管疾病的独立性危险因素.脂代谢紊乱对细胞具有脂毒性作用,会引起或加重IR,其典型表现是血浆甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平升高,其中血浆FFA升高是IR的独立致病因素.虽然FFA导致IR的具体机制还不完全清楚,但已证实FFA可通过内质网应激、氧化应激作用、凋亡和炎症作用等引发IR.本文概述了参与这些致病过程的相关分子及其作用机制,为FFA导致IR的致病机制研究提供理论依据,同时为临床治疗IR和预防T2DM提供参考.
