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基于叶绿体matK基因序列探讨10种石杉科石杉属植物的系统关系及分子鉴定
目的:利用叶绿体matK基因序列探讨10种石杉属植物的系统发育及分子鉴定.方法:分别从9种石杉属植物中提取总DNA,经扩增纯化后,用PCR产物直接测序.结果:对石杉属Huperzia Bernh.9个种的叶绿体matK基因进行了测序,序列长度为1 589 bp,并对10个种(亮叶石杉H.lucidula的matK基因序列从GenBank中下载)的matK序列进行比对,其中有35个系统发育信息位点及35个变异位点,以垂穗石松Lycopodiella cernua为外类群,利用MEGA 3.1软件计算种与种之间的遗传距离在1.59%～0.25%,并构建系统树,获得简约树和邻接树.结论:小杉兰组和蛇足石杉组植物分别聚成一枝,构成姊妹群,其靴带支持率分别为98%和99%.长柄石杉与蛇足石杉分别聚在2个不同进化枝,二者间有19个碱基差异,遗传距离为1.21%.建议应将长柄石杉单独列为一个种.
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蛇足石杉内生真菌2F09P03B产石杉碱甲发酵条件的研究
目的 研究发酵条件对蛇足石杉支项孢属内生真菌2F09P03B石杉碱甲生成的影响,并探讨发酵条件的优化.方法 通过测定2F09P03B生长曲线、石杉碱甲积累曲线和培养液pH值随时间的变化情况,了解该菌株的培养特性;考察不同碳源和氮源对石杉碱甲积累的影响.在单因素试验的基础上,利用正交试验优化培养基碳源、氮源组成;考察MgSO4、KH2PO4、NaCl、CaSO4对石杉碱甲生成的影响,确定无机盐组成;优化接种量、发酵时间、培养温度、摇床转速等发酵工艺条件.结果 菌株2F09P03B的佳培养基组成为:马铃薯150 g/L,玉米粉30 g/L,麦芽糖25 g/L,酵母膏10 g/L,麸皮30 g/L,KH2PO41.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L,NaCl 0.3 g/L,CaSO4 0.3 g/L,pH自然;佳发酵工艺条件为:接种量8%,发酵时间10d,培养温度28℃,摇床转数140 r/min.在此条件下,发酵液中石杉碱甲含量为8.17 μg/L,高达到8.32 μg/L,约为其干重的0.07%左右.结论 发酵条件对菌株2F09P03B石杉碱甲产量有明显影响.优化后的发酵条件可使该菌株石杉碱甲产量明显提高,有望成为石杉碱甲新药源.
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千层塔的23种原植物中石杉碱甲含量
目的 测定各种新鲜千层塔原植物中石杉碱甲的含量.方法 分检千层塔草药原料,核对馆藏标本确定原植物;野外采集上述原植物,从速粉碎与干燥;2%酒石酸提取总碱,HPLC测定石杉碱甲含量,外标法定量.结果 草药千层塔来源于石杉科石杉属与马尾杉属共计23种拟蕨类原植物,其中18种含有石杉碱甲,伏帖石杉中含量高,达0.200 4%,而东北石杉等5种中未检出石杉碱甲.结论 目前中国应用的千层塔原植物来源多样,且各种之间石杉碱甲含量差别较大.
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湖南省石杉属植物中石杉碱甲含量的研究
目的测定湖南产6种(含一新种)石杉属植物中石杉碱甲含量,为科学利用该植物提供可靠依据.方法于该省野外实地采集石杉属植物,以2%酒石酸溶液提取总碱,用改进的高效液相色谱法测定石杉碱甲的含量(外标法).结果所采集6种石杉属植物中,石杉碱甲在蛇足石杉、狭叶石杉、长柄石杉、四川石杉、湖南石杉(拟新种)中均有分布,长柄石杉中含量高,达0.078 9%;本实验证明皱边石杉中不含石杉碱甲,先前两篇高含量报道应为鉴定之误.结论本测定方法简便、准确;在该属中4种形态极难区分的种之间,石杉碱甲含量具有分类学意义.
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蛇足石杉生物碱成分的研究(Ⅵ)
蛇足石杉Huperzia serratum(Thunb.)Trey.为石杉科石杉属植物,自从该植物中分得一个强效胆碱酯酶抑制剂福定碱即石杉碱甲[1,2]以来,为进一步寻找生物活性成分,笔者又从中分得十几个生物碱成分[3～5].
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蛇足石杉中非生物碱类化学成分研究
目的 研究蛇足石杉Huperzia serrata全草的非生物碱类化学成分.方法 利用硅胶、反相硅胶、Sephadex HL-20等柱色谱进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等谱学数据鉴定化合物结构.结果 从蛇足石杉二氯甲烷部位分离得到11个化合物,分别鉴定为千层塔烯二醇-21β-对二氢香豆酸酯(1)、千层塔烯二醇-3,21-二乙酸酯(2)、千层塔烯二醇-3-乙酸酯(3)、21-表千层塔烯二醇-3-乙酸酯(4)、3α,21β,24-千层塔烯三醇(5)、21-表千层塔烯二醇(6)、千层塔烯二醇(7)、16-羰基-3α,21β-千层塔烯二醇(8)、3β,21β,24-千层塔烯三醇(9)、16-羰基-3α,21β,24-千层塔烯三醇(10)、1-羟基二苯并呋喃醇(11).结论 化合物1～10均为石杉型三萜类化合物,化合物11为二苯并呋喃醇类化合物;其中1为新化合物,命名为千层塔型香豆酸酯,化合物2和11首次从该植物中分离得到.
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HPLC法测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量
目的测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量.方法用2%酒石酸溶液提取总碱,HPLC法测定,外标法定量.结果石杉碱甲在所测定的5种石杉科植物蛇足石杉、皱边石杉、四川石杉、金丝条马尾杉、柳杉叶马尾杉中均有较高分布,分别达到0.048 1%,0.057 9%,O.070 6%,0.034 5%,0.196 1%,在闽浙马尾杉中含量较少,仅为0.006 1%.结论方法简便、准确,可用于石杉碱甲资源的寻找.
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昆明石杉中非生物碱类成分研究
目的 研究昆明石杉全草中非生物碱类成分.方法 使用硅胶柱层析、制备薄层及Sephadex LH-20等手段进行分离纯化,利用文献资料、理化性质、1H-NMR及13C-NMR数据鉴定各单体结构.结果 从中分离并鉴定8个化合物,3α,21β,24-trihydroxyserrat-14-en-16-one (1),serrat-14-en-3β,21β,29-triol(2),serrat-14-en-3β,21 α-diol (3),21-epi-serratenediol (4),serratenediol-3-acetate(5),21-epi-serratenediol-3-acetate (6),β-谷甾醇(7),β-胡萝卜苷(8).结论 所有化合物均为首次从昆明石杉中分离得到.
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用叶绿体trnH-psbA序列分析石杉科植物系统发育和植物条形码的初探
目的:研究石杉科17种植物的系统发育关系和石杉科植物条形码.方法:使用叶绿体trnH-psbA基因序列构建了石杉科的系统发育树.结果:表明石杉科植物高度聚类为两个分支,自展支持率达9l%.结论:支持Hol-ub和秦仁昌将石杉科分为石杉属和马尾杉属的分类学观点.17种石杉科植物种具有良好的单系性,trnH-psbA基因能在种水平很好区分石杉科植物,可以作为本科分类鉴定条形码.
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石杉碱甲的药理作用及临床应用
石杉碱甲又名福定碱,是从石杉科石杉属蛇足石杉(千层塔)中分离出的一种生物碱,化学名为(5R,9R,11E)-5-氨基-11-亚乙基-5,6,9,10-四氢-7-甲基-5,9-亚甲基环芳辛并(b)吡啶-2(1H)酮,商品名为双益平、哈伯因.1993年美国FDA批准上市,1996年我国批准为二类新药,用于治疗阿尔海默茨病(AD),是第二代乙酰胆碱酯酶抑制剂.
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石杉碱甲药理与临床研究进展
石杉碱甲(Hup-A)是我国学者从民间草药千层塔[石杉科石杉属植物蛇足石杉Huperzia serrata(Thumb.) Trev]中分离出的生物碱[6],经系统、深入的研究,Hup-A已作为一种可逆性、高效、高选择性的中枢AChE抑制剂而用于AD、VD等多种神经退行性疾病的治疗.本文对此作综述.
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千层塔原植物形态观察
目的:为千层塔原植物鉴别和药材鉴别提供参考.方法:对千层塔药材样品,蜡叶标本,浸制标本以及鲜活植物体进行分类观察.结果与结论:发现千层塔药材的原植物主要为石杉属四种植物,即蛇足石杉,皱边石杉,长柄石杉和四川石杉.四种石杉的植物形态基本相似,但是在叶形、叶缘、叶柄、叶片大小以及茎鳞叶、茎芽苞、茎大小等方面存在不同程度的差异,可以作为分类鉴别的依据.
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HPLC法测定台江产千层塔中的石杉碱甲的含量
为了合理利用和开发我省丰富的石杉属蕨类植物资源,采用HPLC法对贵州台江产千层塔[1]中石杉碱甲[2～3]的含量进行测定,本方法在参考孙远明和刘建廷等[4～5]的基础上,改用色谱柱为ZORBAX SB-C18(150mm×4.6mm,5 μm);流动相为0.02mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(89∶11).
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哈伯因与脑复康治疗颅脑外伤遗忘症的双盲对照研究
哈伯因(huperzine A)是从石杉科石杉属植物蛇足石杉(俗名千层塔)中分离得到的新结构生物碱,它是一种强效、可逆的胆碱酯酶抑制剂,适用于良性记忆障碍,可提高病人指向记忆、联想学习、图像回忆及人像回忆,明显改善脑器质性病变引起的记忆障碍.
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中药千层塔4种原植物显微构造的比较
目的 对千层塔药材的4种来源进行鉴别,为中药千层塔(.Herba Huperziae)的药材鉴定及开发利用提供新的参考资料.方法 应用光学显微镜观察中药千层塔4个来源,即蛇足石杉、皱边石杉、四川石杉及长柄石杉的根、根茎、茎、叶的组织形态及显微特征,并进行相应的比较.结果 与结论4种石杉的组织构造基本相似;茎的星状中拄原生木质部的数目,叶表皮的气孔分布、气孔指数有一定的差异,可作为显微鉴别参考依据.
