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千山活血膏质量标准研究
目的:建立千山活血膏的鉴别及含量测定方法.方法:采用薄层色谱法鉴别三七、血竭,HPLC测定三七中人参皂苷Rg1的含量.结果:人参皂苷Rg1在0.153 9～1.026 0μg线性关系良好,平均回收率为97.5%,RSD为2.1%.结论:该方法简便易行,重复性好.
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人参皂苷Rg1及其肠内菌代谢产物Rh1对小鼠免疫细胞功能的影响
目的初探人参皂苷Rg1及其肠内菌代谢产物Rh1对正常小鼠免疫功能的影响.方法用Rh1与Rg1分别处理脾T细胞,B细胞及腹腔巨噬细胞(Mφ);MTT比色法测T和B细胞增殖能力;中性红比色法测Mφ的吞噬功能;Griess法测Mφ释放NO的水平.结果 Rh1能促进脾细胞增殖、下调Con A诱导的T细胞增殖;Rh1与Rg1对LPS诱导的B细胞增殖均无明显作用;Rg1和Rh1能提高Mφ的吞噬能力和促进NO的释放.结论 Rg1及其代谢产物Rh1可共同作用于T细胞和Mφ而产生免疫调节作用.
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人参皂苷Rg1的肠内菌代谢及其代谢产物吸收入血的研究
目的:研究人参皂苷Rg1(Rg1)在人及大鼠体内经肠内菌代谢后的变化及吸收入血代谢物的确定.方法:生物样品(血、尿、粪便)经处理后分别做TLC,ESI-MS及HPLC检测分析.结果:在大鼠尿和血中有代谢物Rh1/F1存在;在人的尿中有Rh1存在.结论:在大鼠和人的血内,Rg1主要以其代谢产物形式存在.
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UPLC测定人参次苷H滴丸中人参皂苷Rh1和Rh2含量
目的:建立测定人参次苷H滴丸中人参皂苷Rh1和Rh2含量的UPLC法.方法:采用WatersAcquity UPLC HSS T3分析柱(100 mm ×2.1 mm,1.8 μm),乙腈-水二元梯度洗脱模式,流速为0.46 mL·min-1,柱温35℃,紫外检测器检测,检测波长为203 nm,外标法对人参次苷H滴丸的主要成分进行定量分析.结果:人参皂苷Rh1和Rh2的分离效果较好,人参皂苷Rh1的线性方程为y=2.500×106x+3.080×102,r=1,在1.982～198.2μg· mL-1范围线性良好;人参皂苷Rh2线性方程为y=2.400×106x+2.042×103,r =0.999 9,在6.501 ～650.1μg·mL-1范围线性良好.平均加样回收率分别为99.66％和99.38％,RSD分别为0.34％(n=9)和0.35％(n=9).结论:本方法前处理简单、准确、重复性好,且分析时间短,可以用于人参次苷H滴丸质量控制.
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人参次苷H滴丸定性与定量方法研究
目的:建立人参次苷H滴丸质量控制方法.方法:采用薄层色谱法同时鉴别人参皂苷Rh1和Rh2;采用香草醛冰醋酸-高氯酸比色法测定总皂苷含量;采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rh1和Rh2含量.结果:人参皂苷Rh1和Rh2样品分离较好,薄层色谱斑点清晰;总皂苷含量测定的平均回收率为98.81%,线性范围为0.056～0.448 mg·mL-1;人参皂苷Rh1线性回归方程y=6462.7x+2.0735,当进样量在0.208～4.16μg范围内,与其峰面积呈线性,r=0.9997;人参皂苷Rh2线性回归方程y=9867.2x+0.1204,当进样量在1.148～22.96μg范围内,与其峰面积呈线性,r:0.9999.结论:建立的人参次苷H滴丸质控方法准确、专属性及重现性好且快速简便,可用于该制剂的质量控制.
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黑曲霉Aspergillusniger对人参皂苷Re的微生物转化
目的:筛选长白山人参土壤中的活性微生物,转化单体人参皂苷产生稀有人参皂苷成份.方法:从长白山人参根际土壤中分离各类菌株,对单体人参皂苷Re进行微生物转化,通过硅胶柱层析等方法对转化产物进行分离纯化,采用波谱解析及理化常数对其进行结构鉴定.结果:从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株68株,3株真菌对三醇组人参皂苷Re具有转化作用,其中黑曲霉Aspergillus niger的转化活性较强,转化产物为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1.结论:首次报道黑曲霉能将人参皂苷Re转化为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1这一转化过程.
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白及多糖配伍对三七总皂苷中10种成分药动学的影响
目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定三七总皂苷中10种皂苷成分的分析方法,并研究白及多糖对三七总皂苷各成分药动学参数的影响.方法 大鼠分为三七总皂苷组(P组)、三七总皂苷配伍白及多糖组(BP组),分别ig给药,UPLC-MS/MS法测定10种皂苷单体成分的血药浓度,DAS软件计算各成分药动学参数.结果 分析方法符合生物样品测定要求.与P组相比,BP组人参皂苷Rb1的AUC显著降低(P＜0.01),三七皂苷R1及人参皂苷Rd、Rg1、Rf、CK、Rc、Rh1、Rg2、Rg3的AUC有所降低,但无显著性差异.10种成分总AUC为P组＞BP组,差异显著(P＜0.01).与P组相比,BP组人参皂苷Rg1的Cmax降低(P＜0.05).且BP组各成分的tmax普遍延迟,其中人参皂苷Rg1、Rb1、Rf显著延迟(P＜0.01),人参皂苷Rg2和三七皂苷R1延迟(P＜0.05).结论 所建立的UPLC-MS/MS分析方法适于10种皂苷成分在生物样品中的测定;配伍白及多糖可降低三七总皂苷的血药浓度,减少AUC暴露,延长tmax,说明白及多糖可能增加了三七总皂苷在胃肠道的暴露水平,从而增加作用于胃肠道的药效.
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人参总皂苷主要成分大鼠体内药动学研究
目的 研究人参总皂苷中9种人参皂苷Rb1、Rb2/Rb3、 Rc、Rd、 Re、Rf、 Rg1和Rh1在大鼠体内的药动学.方法 大鼠ig 200 mg/kg人参总皂苷后于不同时间点眼底静脉丛取血.生物样本采用正丁醇液-液萃取,经C18柱,应用梯度洗脱程序进行色谱分离(体积流量0.2 mL/min),应用液质联用(LC-MS)技术检测.结果 大鼠ig人参总皂苷后,血浆中可测得6种人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc、Rd、Re和Rg1),其中二醇型的人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc和Rd)的体内暴露程度及半衰期显著高于三醇型的人参皂苷(Re和Rg1).结论 建立的人参皂苷血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中各人参皂苷的测定及人参总皂苷的药动学研究.
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HPLC法测定林下山参制浆前后人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2含量的变化
目的 分析林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2含量的变化情况.方法 采用HPLC-UV法,Innoval ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水溶液进行梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样体积20μL;检测波长203 nm.结果 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2质量分数分别由制浆前的0.651、0.506、0.363、0.014、0.023、0.031 mg/g变化为制浆后的0.517、0.413、0.105、0.122、0.214、0.098 mg/g.人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2分别在2.5～100 mg/L具有良好的线性关系,r2均大于0.999 5;精密度、稳定性及重复性良好;平均加样回收率为95％～105％,RSD为1.25％～3.05％.结论 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、R93、Rh1、Rh2的含量在制浆前、后发生变化.林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量降低,稀有人参皂苷Rg3、Rh1、Rh2的含量分别增高8.7、9.3、3.2倍.基于HPLC佳分离参数建立的6种人参皂苷成分同时分析的方法具有较好的准确性和可靠性,可为林下山参浆的质量评价提供科学依据.
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咪唑类离子液体对三七中痕量成分人参皂苷Rh1的体外经皮促渗作用研究
目的 考察咪唑类离子液体([BMIM][Cl])对人参皂苷Rh1 (Rh1)的体外经皮促渗作用及促渗机制.方法 以小鼠皮和猪皮为皮肤模型,以油酸、薄荷脑、肉豆蔻酸异丙酯和离子液体[BMIM][C1]为促渗剂,采用摇瓶法测定Rh1在各促渗剂-水溶液中的溶解度;采用Franz扩散池进行体外经皮渗透实验;采用傅里叶转换红外线光谱(FTIR)法测定研究离子液体的经皮促渗机制.结果 与其他促渗剂相比,5％的[BMIM][Cl]能够显著增加Rh1在水中的饱和溶解度;同时对Rh1的体外经皮渗透有显著的促进作用.FTIR的研究结果表明,[BMIM][Cl]能够改变小鼠皮肤角质层结构.结论 [BMIM][C1]作为一种新型的经皮吸收促渗剂,在外用制剂领域有潜在的使用价值.
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不同蒸制法对三七主根中皂苷的影响
目的 研究不同蒸制法对三七主根中皂苷的影响.方法 采用比色法测定主根中总皂苷的量,采用HPLC法测定主根中单体皂苷的量.结果 蒸制后主根中总皂苷及单体皂苷三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Re、 Rb1、Rd的量均有不同程度的降低,而人参皂苷Rh1、Rh4、 RK3和20(S)-、20(R)-人参皂苷Rg3这5种单体皂苷的量均有不同程度的增加.结论 不同蒸制法对三七中皂苷成分的影响不同,总皂苷和5种主要皂苷成分的量下降程度和新产生成分的量增加程度与蒸制时间和温度相关.该方法可用于三七炮制品中皂苷类成分的定量测定和质量控制,为三七"生打熟补"与物质变化之间的相关性研究提供依据,同时为研究稀有皂苷的积累规律提供了一定的理论基础.
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稀有原人参三醇型皂苷的生物转化研究进展
人参是传统的名贵中药,其主要活性成分为人参皂苷,对心血管、肿瘤、中枢神经系统等疾病有显著的疗效.特别是原人参三醇(PPT)型皂苷Rh1具有良好的抗炎、抗过敏、提高记忆力等活性.人参皂苷Rh1仅微量地存在于人参、三七、西洋参中.生物转化方法制备稀有人参皂苷已成为一种有效的途径.综述利用生物转化方法对PPT型人参皂苷进行转化,生成稀有人参皂苷的研究进展,以期为稀有人参皂苷的进一步开发利用提供参考.
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注射用益气复脉(冻干)的质量标志物研究
注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬和五味子3味药材精制而成,临床上主要用于治疗冠心病劳累型心绞痛气阴两虚证及冠心病所致慢性左心功能不全Ⅱ、Ⅲ级气阴两虚证.根据质量标志物概念,从物质基础、药效、网络药理、药动学及药性等方面对注射用益气复脉(冻干)质量标志物进行预测分析,初步确定人参皂苷Rb1、Rg1、Rf、Rh1、Rc、Rb2、Ro、Rg3及麦冬皂苷C、麦冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、果糖、五味子醇甲13个成分为质量标志物,并以此为核心建立全程质量控制体系.基于质量标志物对注射用益气复脉(冻干)进行质控方法研究,可以为中药注射剂质量评价提供新的研究思路.
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西洋参茎叶总皂苷制取人参皂苷Rh2的应用研究
西洋参原产于北美加拿大和美国东部,现国产西洋参已种植成功.卫生部已认定国产西洋参与西洋参通用.西洋参的药理作用与人参相似,但比人参作用缓和.
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HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh1的含量
目的：建立人参发酵品中人参皂苷Rh1、Rg3的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定，色谱条件：ODS色谱柱（4.6 mm ×250 mm，5μm）；检测波长203 nm；流动相（Rh1）：乙腈-水（26.5：73.5），流动相（Rg3）：乙腈-0.05％磷酸（37：63）；柱温30℃，流速1.0 mL/min。结果人参皂苷Rh1的含量测定线性范围0.1~1.1μm，相关系数r＝0.9998，平均加样回收率96.90％，RSD 2.67％。人参皂苷Rg3的含量测定线性范围0.4~3.0μm，相关系数为r＝0.9997，平均加样回收率98.56％，RSD 2.51％。结论本方法检测灵敏度高，检测结果可靠。
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人参皂苷Rg2、Rh1对神经系统作用及相关机制的研究进展
通过检索人参皂苷Rg2和Rh1神经系统药理研究文献,综述人参皂苷Rg2和Rh1在此方面的药理作用及其相关作用机制的研究进展.现代药理学研究显示,人参皂苷Rg2和Rh1在神经系统方面具有很强的药理活性,具有保护神经细胞、抗脑缺血再灌注损伤、治疗阿尔茨海默病及血管性痴呆、抗抑郁等作用.
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促渗剂对三七中人参皂苷Rh1体外透皮的影响
目的 研究三七中人参皂苷Rh1的理化性质及其体外透皮性能.方法 采用摇瓶法测定人参皂苷Rh1的表观溶解度和油/水分配系数;采用体外扩散池法测定小鼠皮和猪皮对Rh1体外经皮渗透系数以及对不同促渗剂和质量浓度对其体外经皮促渗效果;并采用高效液相色谱法对人参皂苷Rh1进行分析.结果 人参皂苷Rh1的表观溶解度为(60.70 ±3.21)μg/mL,其油水分配系数lgp值为2.49±0.04,人参皂苷Rh1在小鼠皮上的经皮吸收性能强于猪皮,促渗剂对人参皂苷Rh1的透皮能力大小为:5％N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)＞5％丙二醇(PG)＞5％氮酮(AZ)＞5％油酸(OA);不同质量浓度的促渗剂促渗能力大小为1％ NMP ＞3％ NMP ＞5％ NMP和1％ PG ＞3％ PG＞5％ PG.结论 人参皂苷Rh1在小鼠皮肤上具有更强通透性,且1％ NMP和1％ PG可作为人参皂苷Rh1经皮吸收的促渗剂.
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RP-HPLC同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rh1、Rg3和Rh2的含量
目的:采用高效液相色谱法同时测定两洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rh1、Rg3、Rh2含量.方法:采用welchromC18柱,(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长:203 nm,柱温:30℃.结果:该方法测得人参皂苷Rh1、Rg3、Rh2分别在63.89-574.98μg/mL,78.50～706.51μg/mL,63.79～574.11μg/mL内,线性关系良好,r分别为0.999 4,0.999 9,0.999 9,且人参皂苷Rh1、Rg3、Rh2(n=6)平均回收率分别为101.70%(RSD=2.0%),98.70%(RSD=1.20%),97.57%(RSD=1.61%).结论:本法能将人参皂苷Rh1、Rg3、Rh2很好的分离,检测快速,结果准确可靠,重现性好.
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RP-HPLC 同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rg1、Rh1、Rd、Rg3和C-K 的含量
目的:建立RP-HPLC法同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rg1、Rd、Rh1、Rg3和C-K的含量.方法:采用WelchromC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;流速为1.0mL/min;柱温为30℃;检测波长为203nm.结果:人参皂苷Rg1,Rh1,Rd,Rg3和C-K的线性范围分别为0.740~7.400μg(r=0.9999);0.536~5.360μg(r=0.9999);1.128~11.280μg(r=0.9999); 0.3080~3.080μg(r=0.9999); 0.376~3.7600μg(r=0.9999).平均加样回收率分别为97.12%(RSD=1.22%),98.50%(RSD=0.87%),98.00%(RSD=1.06%),98.12%(RSD=1.66%)和96.65%(RSD=1.48%).结论:该法操作简便,结果可靠,适用于西洋参转化产物的含量测定.
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人参皂苷Rh1诱导Hela和K562细胞凋亡
目的 研究人参皂苷Rh1 诱导宫颈癌Hela 细胞系和白血病K562 细胞系的细胞凋亡作用及其机制.方法 体外培养Hela 细胞和K562 细胞,并用Rh1 的浓度梯度和时间梯度处理细胞;流式细胞术检测细胞凋亡率;荧光定量PCR 检测Bcl-2 和Bax 基因mRNA 表达区别.结果 Rh1 以浓度依赖方式诱导Hela 细胞核K562 细胞凋亡.Bcl-2 基因mRNA 的表达均出现明显下降,而bax 基因,mRNA 表达水平均明显上升.结论 Rh1 诱导Hela 细胞和K562 细胞凋亡.Bcl-2 表达下降和Bax 表达上升是其诱导细胞凋亡的重要机制之一.
