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新藤黄酸体外抗肺癌血管生成的作用机制研究
为了观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对肺癌血管生成的影响及初步的作用机制.该实验以新藤黄酸处理肺腺癌A549细胞的条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立非直接接触型细胞共培养体系;应用Matrigel胶建立HU-VEC的二维培养模型,观察新藤黄酸对血管生成的影响;DAPI染色倒置荧光显微镜下观察新藤黄酸对HUVEC细胞凋亡的影响;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术分析新藤黄酸对HUVEC凋亡率的影响;Western blot法检测新藤黄酸对HUVEC中PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,VEGF蛋白表达的影响;采用PTEN-siRNA转染细胞后,RT-PCR法检测PI3K,Akt基因的表达水平.结果表明,新藤黄酸能明显抑制血管生成,其抑制效果与剂量相关;DAPI染色荧光显微镜下可见HUVEC可出现凋亡形态特征;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测结果显示新藤黄酸诱导HUVEC细胞凋亡;Western blot法检测结果表明新藤黄酸下调了p-PI3K,p-Akt蛋白的表达水平,而对PI3K,Akt蛋白表达影响不明显.RT-PCR法检测表明PTEN-siRNA转染入细胞后,能上调PI3K,Akt mRNA基因的表达.体外研究表明新藤黄酸能抑制肺癌血管生成,抑制血管生成的机制可能与PI3K/Akt信号通路有关.
关键词： 新藤黄酸 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 肺癌A549 血管生成 细胞凋亡 -
立普妥对高糖诱导的HUVEC凋亡及PI3 K/AKT/eNOS信号通路的影响
目的 探讨立普妥对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的凋亡及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮(eNOS)信号通路的影响.方法 实验分为正常组,模型组(33.3 mol/L葡萄糖),立普妥组(33.3 mol/L葡萄糖+0.1,1,10μmol/L);MTT法检测各组HUVEC活力;倒置显微镜拍照检测各组HUVEC形态;Annexin V-FITC/PI流式双染法检测各组HUVEC凋亡;Gries法检测各组HUVEC上清NO含量;Western blot分析PI3K/AKT激活状况及eNOS的表达情况.结果 与正常组比较,高糖组中HUVEC皱缩,变圆变亮,细胞活力降低,细胞早期凋亡和晚期凋亡率显著提高,NO含量及eNOS、PI3K表达量及AKT磷酸化程度降低,差异均具有显著性(P<0.05);与模型组比较,1,10μmol/L立普妥组中HUVEC形态恢复,细胞活力上升,PI3K表达量提高,差异均具有显著性(P<0.05);0.1,1,10μmol/L立普妥组HUVEC凋亡程度下降,NO含量、eNOS表达量提高,AKT磷酸化水平上升,差异均具有显著性(P<0.05).结论 立普妥可抵抗高糖诱导的HUVEC凋亡,是通过激活PI3 K/AKT/eNOS信号通路实现的.
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姜黄素对肿瘤坏死因子-α所致人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
目的 观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用.方法 建立TNF-α致HUVEC损伤模型;MTT检测细胞的存活率;光镜观察细胞形态的改变;流式细胞术检测细胞凋亡峰;Hoechst 33258染色荧光显微镜检测凋亡的细胞核;RT-PCR检测caspase-3基因的表达.结果 姜黄素处理组与TNF-α组比较其HUVEC贴壁良好;荧光显微镜下可见凋亡小体减少;流式细胞术检测凋亡峰明显降低;caspase-3基因表达下调.结论 姜黄素对TNF-α所致的HUVEC凋亡具有保护作用,该作用可能是通过下调caspase-3的基因表达而实现的.
关键词： 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡 TNF-α -
阿魏酸钠对氧化低密度脂蛋白拮抗作用
目的 在体外培养条件下,探讨阿魏酸钠(SF)拮抗氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)的作用机制.方法 在体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中分别和同时加入SF和Ox-LDL,采用基因芯片技术分析内皮细胞中自细胞介素-1β(IL-1β)的基因表达改变;用实时PCR技术(RT-PCR)检测IL-1βmRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β蛋白表达.结果 基因芯片检测结果显示,HUVEC受Ox-LDL诱导后,IL-1β基因表达上调,比空白对照组高2.4倍;而采用SF+Ox-LDL处理后,IL-1β基因表达下调,是Ox-LDL组的2.6倍.RT-PCR与ELISA结果显示,Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1β mRNA及蛋白表达均明显增高;SF+Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1β mRNA表达差异无统计学意义;蛋白表达则明显降低.结论 结论Ox-LDL可诱导内皮细胞的IL-1β表达明显增强,阿魏酸钠能够抑制Ox-LDL活性,下调IL-1β的mRNA表达,可减少IL-1β对血管内皮细胞的损害.
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海带多糖对血管内皮细胞保护作用
目的 利用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外培养模型,探讨海带多糖L01对肾上腺素刺激状态下表达和分泌的组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制剂(PAI-1)的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞系(ECV-304),随机分成6组:空白对照组,模型组,海带多糖对照组,海带多糖L01低、中、高剂量组.培养后24,48,72 h采样,酶联免疫吸附法测定HUVEC培养上清液中的t-PA和PAI-1含量.RT-PCR检测t-PA和PAI-1mRNA的表达,其扩增产物经电泳后密度扫描及半定量分析.结果 海带多糖l01各浓度组能拮抗肾上腺素的刺激作用,给药24,48 h后t-PA抗原分泌明显降低,但对t-PA mRNA表达无明显影响;培养液中PAI-1含量给药48,72 h后明显降低,PAI-1 mRNA表达明显下调,并具有一定的量效关系.结论 海带多糖对血管内皮具有一定保护作用,使内皮细胞表面纤溶活性增高,为其发挥抗血栓作用的机制之一.
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LncRNA MALAT1对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖与凋亡影响
目的 探讨长链非编码RNA (IncRNA)肺腺癌相关转录本1(MALAT1)对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖和凋亡的影响.方法 构建MALAT1-RNAi质粒载体,应用脂质体法转染人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞;设空白细胞对照组、阴性对照组和MALAT1-RNAi转染组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各实验组细胞中MALAT1的表达水平;CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞的凋亡能力.结果 qRT-PCR检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组人脐静脉内皮细胞HUVEC中MALAT1的相对表达量为(0.051 ±0.03),均低于空白细胞对照组和阴性对照组(均P＜0.01);CCK8检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组培养48和72h的吸光度(A)值分别为(0.072 ±0.087)和(1.115 ±0.077),均低于空白细胞对照组和阴性对照组(均P ＜0.05);Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组HUVEC细胞凋亡率为(14.08±1.05)％,均高于空白细胞对照组和阴性对照组(均P＜0.01).结论 MALAT1-RNAi可抑制人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖能力,并促进其凋亡.
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pLXSN-Tum-5致人脐静脉内皮细胞凋亡作用及机制
目的 探讨pLXSN-Tum-5病毒颗粒对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的生长抑制和诱导凋亡作用及机制.方法 采用不同浓度的pLXSN-Tum-5病毒颗粒作用HUVEC,利用噻唑蓝法和Hoechst-33342染色法检测细胞生长及其形态变化;RT-PCR和Western blotting方法检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA和蛋白表达变化.结果 与对照组(pLXSN)比较,pLXSN-Tum-5病毒颗粒转染组HUVEC的存活率明显降低,呈剂量效应关系;细胞内可见凋亡小体;对照组HUVEC内Bcl-2和caspase-3 mRNA和蛋白表达分别为(0.721 ±0.041)、(0.654±0.034)和(0.956±0.032)、(0.356±0.054);与对照组比较,20 μmol/L pLXSN-Tum-5病毒颗粒转染组HUVEC内Bcl-2和caspase-3 mRNA和蛋白水平[分别为(1.134±0.0524)、(1.012±0.0641)和(1.612 ±0.067)、(0.712±0.0647)]明显上调(P≤0.05).结论 Tum-5可抑制HUVEC增殖,诱导HUVEC凋亡,其机制可能与上调Bax/Bcl-2和caspase-3表达有关.
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改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究
目的:探讨改良内皮抑素( RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对佳作用浓度和时间.方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体.表达、纯化改良内皮抑素(RGDRGD-ES),运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用.结果:1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体.2.获得了RGDRGD-ES蛋白.3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长(P＜0.01)；抑制率随着药物浓度(10 μg/ml、20μg/ml、30 μg/ml)的增加和作用时间(24 h、48 h、72 h)的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性(P＜0.01)；而30 μg/ml与40 μg/ml、50 μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异(P＞0.05).4.细胞凋亡率(作用24h)具有药物浓度(10μg/ml、20 μg/ml、30 μg/ml)依赖性(P＜0.01),30 μg/ml与40μg/ml、50 μg/ml组间凋亡率无明显差异(P＞0.05).结论:成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30 μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素( RGDRGD-ES)对HUVEC的抑制作用较ES明显提高.
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多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化损伤的影响及还原型谷胱甘肽的保护作用
目的 探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保护作用.方法 选择MODS患者20例,用其血清对HUVEC进行干预,建立体外细胞损伤模型,同时以健康血清组和胎牛血清组作对照,将细胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODS血清损伤组(MODS患者血清浓度分别为C1组5％、C2组10％、C3组20％)和GSH干预组(10％ MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓度分别为D1组0.064 mmol/L、D2组0.32 mmol/L、D3组1.6 mmol/L、D4组8.0 mmol/L、D5组40mmol/L).采用MTT法检测各组细胞生存率;荧光倒置显微镜下观察B组和C2组HUVEC形态学变化;分别检测B组、C2组和D3组药物干预24、48、72 h后细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和总抗氧化能力(T-AOC)水平,同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.结果 ①B组细胞生存率与A组比较差异无统计学意义(P＞0.05),C1、C2、C3组细胞生存率较B组明显下降(P＜0.05),D2、D3、D4组细胞生存率较C2组明显升高(P＜0.05);②C2组HUVEC显微镜下可见损伤性改变,细胞变大变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落;③C2组细胞培养上清液SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平较B组下降,而D3组各时间点较C2组均明显升高,其中以药物干预72 h后升高更明显;④C2组细胞内ROS水平较B组明显升高,D3组各时间点ROS水平较C2组明显降低,其中以药物干预72 h后下降明显.结论 MODS患者血清可造成内皮细胞损伤,GSH可通过提高SOD 、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平,降低细胞内ROS水平,从而发挥内皮细胞保护作用,减轻血管内皮细胞的氧化损伤.
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桔梗中皂苷类组分物质抑制血管生成作用实验研究
目的 研究桔梗中皂苷类组分物质对血管生成的影响.方法 采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型来研究桔梗中皂苷类组分物质抑制血管生成作用.结果 桔梗中皂苷类组分物质25、50、100μg/mL剂量组对HUVEC增殖和CAM血管生成均有抑制作用.与模型组比较,对HUVEC增殖的抑制率分别为6.31％、15.45％、31.12％；对CAM的抑制率分别为7.99％、13.49％、26.08％.结论 桔梗中皂苷类组分物质具有良好的血管生成抑制作用,并呈剂量依赖性关系.
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人工麝香对HUVEC增殖及功能的影响
目的 观察人工麝香对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及功能的影响.方法 体外培养HUVEC,采用MTT比色法测定不同浓度人工麝香溶液对HUVEC增殖的作用；Western Blot检测HUVEC中p-ERK和p-P38蛋白的表达水平；RT-PCR法测定HUVEC中eNOS、VEGFR1和VEGFR2 mRNA表达水平.结果 0.3、1μg/ml的人工麝香溶液具有促进HUVEC增殖的效应,其中1μg/ml作用显著(P＜0.01)；人工麝香可浓度依赖性地促进ERK和P38的磷酸化,且效应强于对照药硝酸甘油组；人工麝香溶液亦可浓度依赖性地促进HUVEC中eNOS和VEGFR2的mRNA表达,但对VEGFR1的mRNA表达没有影响.结论 人工麝香可通过促进HUVEC增殖,一定程度上代偿性地起到抗心肌缺血的作用.
关键词： 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 人工麝香 增殖 血管内皮生长因子 -
子痫前期患者血浆对HUVEC凋亡和增殖的影响及其与LPA受体的关系
目的:探讨子痫前期(pre-eclampsia,PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡和增殖的影响,并进一步分析其与溶血磷脂酸(lyso-phosphotidic acid,LPA)受体的关系,为其临床研究提供可参考依据.方法:收集2012年1月～2013年6月70例我院确诊的PE孕妇,其中轻度PE 38例,重度PE 32例,同时随机抽取30例正常孕妇作为对照组.所有孕妇空腹抽取静脉血,分别配成不同成分培养液对健康产妇分娩后的HUVEC进行培养,应用MTT比色法检测HUVEC的凋亡和增殖,采用免疫组化检测LPA受体Edg4、Edg7的表达.结果:重度PE组细胞增殖抑制率(IR)及LPA水平均高于轻度PE组及对照组,轻度PE组IR及LPA水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).PE孕妇HUVEC由长梭形变为圆(椭圆)形,细胞间隙增大,且细胞排列疏松,而重度PE组上述情况更明显.重度PE组Edg4阳性例数、mRNA表达及Edg7阳性例数、mRNA表达均高于轻度PE组及对照组,轻度PE组Edg4阳性例数、mRNA表达及Edg7阳性例数、mRNA表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:内皮细胞损伤是PE发生的原因之一,且血浆LPA水平升高及其受体Edg4、Edg7表达增加可能参与了PE孕妇血管内皮细胞损伤的发生、发展过程.
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三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用
目的:研究三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖作用.方法:采用体外培养HUVEC的方法,通过XTT法以及细胞计数法观察对细胞的增殖作用;细胞侵入实验观察细胞迁移的能力.结果:PNS对HUVEC有促增殖作用,XTT实验中100μg/ml浓度增殖率为(33.58±2.41)%;在细胞计数实验100μg/ml浓度增殖率为(94.15±10.96)%; 在细胞侵入实验中100μg/ml浓度侵入率为(42.64±9.50)%.结论:PNS能够促进HUVEC的增殖与侵入.
关键词： 三七总皂苷(PNS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 增殖 -
人脐静脉内皮细胞通过Wnt/β-catenin信号通路响应低切应力刺激
目的 研究不同切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的影响及其与动脉粥样硬化的关系.方法 采用切应力加载装置对HUVEC分别加载(0、1、15)达因/cm2切应力6、12、18、24h后,采用实时定量PCR检测该信号通路β-catenin和蓬乱蛋白2(Dvl2)的mRNA水平,免疫荧光技术检测β-catenin、Dvl2的表达和细胞定位.结果 低切应力不仅能够促进Dvl2在胞质中的募集,而且能够促进其β-catenin发生核转移.相反,层流切应力能够抑制Dvl2的表达、细胞定位以及β-catenin的核转移.结论 Wnt信号通路参与血管内皮细胞对低切应力的响应.
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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制
目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白L/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用.方法 用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10 μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响.结果 与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和vWF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程.结论 oxLDLβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关.
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组蛋白去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)抑制人脐静脉内皮细胞增殖及侵袭和迁移
目的 分析组蛋白特异性去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞周期、凋亡和迁移的影响.方法 合成JMJD3的小干扰RNA (siRNA)、构建JMJD3过表达载体;阴性对照siRNA、siJMJD3或质粒pMSCV-PIG、pMSCV-JMJD3转染HUVEC48 h后,通过荧光实时定量PCR检测JMJD3 mRNA的水平;流式细胞术检测各转染组HUVEC的细胞周期与凋亡的变化;TranswellTM实验和划痕实验检测转染后的HUVEC侵袭和迁移能力的变化.结果 HUVEC转染siJMJD3 48 h后JMJD3的表达水平下降,S期细胞增加、而G1期细胞明显减少.下调JMJD3后HUVEC的增殖能力增强,细胞凋亡减少,细胞侵袭、迁移能力增强.而在HUVEC转染JMJD3过表达质粒MSCV-JMJD3 48 h后,细胞内JMJD3水平增加,S期细胞显著减少,而G1期细胞则明显增加,同时HUVEC的增殖能力受到抑制,细胞凋亡增多,细胞侵袭和迁移能力减弱.结论 JMJD3具有抑制HUVEC增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡的作用.
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RNA干扰技术抑制人内皮细胞非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)表达的研究
目的:构建人MYH9(非肌肉肌球蛋白重链ⅡA)的siRNA 表达体系,抑制原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)MYH9 基因的表达.方法:针对人MYH9 基因序列,构建siRNA 表达质粒,通过酶切和测序鉴定确定其序列正确性.分别转染重组质粒pGCsi-MYH9-1/2/3 至HUVEC 细胞,通过半定量RT-PCR 和蛋白质印迹,分别检测在转染后24 h、 48 h、 72 h MYH9 在mRNA 转录水平及蛋白表达的变化.结果:在构建的3种重组质粒中,pGCsi-MYH9-2、 pGCsi-MYH9-3在转染后24 h 均表现出一定的干扰作用,转染后48 h干扰作用强,转染后72 h 干扰作用减弱;pGCsi-MYH9-3的干扰作用明显,转染后48 h,能明显下调HUVEC 的MYH9 蛋白表达,抑制率平均可达71.2%,此时MYH9 基因mRNA 转录明显减少,抑制率为86.5%.结论:在转染后48 h pGCsi-MYH9-3 可明显抑制HUVEC 细胞内源MYH9 的表达,为进一步研究MYH9在相关疾病中的功能奠定基础.
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过氧化氢处理的脐静脉血管内皮细胞miR-125b-5p水平降低但Smad4表达增加
目的 探讨miR-155、miR-125b-5p、miR-210及其靶基因蛋白在氧化应激血管内皮细胞中的表达和作用.方法 分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并通过免疫荧光染色法检测内皮细胞Ⅷ因子相关抗原、流式细胞术检测CD31的表达进行鉴定;将分离的HUVEC进行原代培养,采用子痫前期患者血清和H202建立氧化应激的血管内皮细胞的模型,实验分为正常妊娠血清组、子痫前期血清组、0 μmol/L H2O2组、100 μmoL/L H2O2组;实时定量PCR检测造模后24h细胞内miR-155、miR-125b-5p、miR-210的水平;Western blot法检测细胞内miR-125b-5p靶基因Smad4蛋白的水平;免疫荧光染色法检测细胞内Smad4蛋白的表达;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与0μmol/L H2O2组相比,100 μmol/L H202处理的内皮细胞miR-125b-5p显著降低、Smad4蛋白显著增加、细胞凋亡率和坏死率显著增加.与正常孕妇血清组相比,子痫前期血清处理的内皮细胞凋亡率和坏死率显著增加,但miR-125b-5p及Smad4蛋白变化不明显.结论 H202处理的HUVEC miR-125b-5p降低,Smad4蛋白增加.
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芍药苷对缺氧损伤内皮细胞产生NO、eNOS和细胞粘附分子的影响
目的:观察芍药苷对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和细胞粘附分子(ICAM-1、VCAM-1)的影响.方法:体外培养HUVEC,传至3代后,以不同浓度的芍药苷分别作用于HUVEC,同时进行缺氧处理.以硝酸还原酶法测定培养液上清中的NO,免疫细胞化学法检测内皮细胞eNOS的表达,细胞ELISA法测定细胞表面ICAM-1和VCAM-1的含量.结果:HUVEC在缺氧48 h后产生NO的量显著减少(P＜0.001),eNOS表达下调,而ICAM-1、VCAM-1表达上调;芍药苷可以剂量依赖性的增加内皮细胞NO生成量,上调eNOS的表达,下调ICAM-1、VCAM-1表达.结论:芍药苷可能通过增加HUVEC eNOS的表达增加NO的释放、抑制ICAM-1及VCAM-1的表达等途径对内皮细胞起保护作用.
