首页 > 文献资料
-
小叶莲化学指纹图谱研究
目的:研究小叶莲的化学成分指纹图谱,评价小叶莲商品药材质量,并比较桃儿七不同药用部分之间的主要成分差异,为临床安全、合理应用提供依据.方法:采用小叶莲HPLC指纹图谱方法,测定了12份小叶莲的指纹图谱,确定了20个色谱峰作为共有峰,并指认了其中12个色谱峰;运用该方法比较了桃儿七根及根茎与小叶莲指纹图谱的差异,通过相似度评价和聚类分析对图谱数据进行分析.结果:本研究首次报道了小叶莲中4个黄酮类成分;首次指认了小叶莲指纹图谱中11个色谱峰,包括9个黄酮和2个木脂素类成分;桃儿七不同药用部分化学成分存在较明显的差异,小叶莲主要含异戊烯基黄酮类成分,桃儿七根和根茎主要含鬼臼毒素和简单取代的黄酮及其苷类成分.结论:该指纹图谱方法可以作为评价比较小叶莲、桃儿七根及根茎中黄酮类和木脂素类成分的相对含量及其质量的依据.同时,为小叶莲、桃儿七根及根茎不同药用部分的药效学差异研究提供参考.
-
基于HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn技术的小叶莲化学成分分析
应用HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn技术对小叶莲甲醇提取物中的主要化学成分进行定性分析.采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1.质谱使用ESI离子源,正、负离子分析模式采集数据,通过高分辨质谱解析,并结合相关文献和对照品数据共指认了54个化合物,包括木脂素类成分18个和黄酮类成分36个,鉴定了其中50个化合物,其中27个化合物为小叶莲中首次报道.HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn技术能快速准确地鉴定小叶莲中所含的主要成分,研究结果为控制小叶莲药材质量、阐释其药效物质和作用机制提供了科学依据,同时对进一步开发和利用小叶莲资源具有指导意义.
关键词： 小叶莲 HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn 木脂素 黄酮 -
高效液相色谱法测定小叶莲中8种有效成分的含量
运用高效液相色谱法,对藏药小叶莲中3种木脂素(鬼臼毒素、去氧鬼臼毒素和4'-去甲去氧鬼臼毒素)和5种黄酮类成分(8-异戊烯基山柰酚、槲皮素、山柰酚、8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚、8-异戊烯基槲皮素)进行含量测定,采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱,乙腈-0.05％的磷酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱;流速1 mL/min;柱温35℃;检测波长为290 nm、370 nm.该方法呈现良好的稳定性:日内、日间精密度的RSD值分别小于3％、4％.各对照品的线性及相关性良好(R2≥0.9992),加样回收率测定值在98.29％-101.60％之间.采用上述方法测定了12份小叶莲(桃儿七果实)和5份桃儿七根及根茎中8种有效成分的含量.结果表明:8种被测成分在所测样品中的含量差异明显(总含量值从16.90 mg/g到55.68 mg/g之间不等),同时发现异戊烯基黄酮类成分是小叶莲中的代表性成分,可用于小叶莲的质量控制和鉴别研究.
-
亚毒性中药使用应加强管理
亚毒性中药是指具有毒性或有小毒而未列入国务院《医疗用毒性药品管理法》规定的有毒中药品种,临床使用过量或应用不当会中毒或产生严重不良反应,应用或药房管理上需加以注意.《药典》及《北京市中药饮片炮制规范》收载的品种《药典》2010年版收载的品种:有小毒品种:丁公藤、九里香、土鳖虫、大皂角、川楝子、小叶莲(藏药)、飞扬草、木鳖子、水蛭、艾叶、北豆根、仙茅、地枫皮、红大戟、两面针、吴茱萸、苦木、苦杏仁、草乌叶、南鹤虱、鸦胆子、重楼、急性子、蛇床子、猪牙皂、绵马贯众、紫萁贯众、蒺藜、榼藤子、鹤虱、翼首草(藏药).
-
小叶莲中graphislactone A的分离制备及其抗肿瘤作用机制研究
目的 确定小叶莲中graphislactoneA的制备分离方法;探讨graphislactoneA诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制.方法 小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取,提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分,再用重结晶法纯化.采用MTT法检测graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒活性.采用流式细胞术、RT-PCR技术和Western blotting法分别检测graphislactone A对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡、凋亡相关基因及P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达的影响.结果 建立了小叶莲中graphislactone A的制备分离方法.Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性,IC50值分别为2.38、9.35 μmol/L,且能够上调乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中p53、bax、caspase-3基因的表达,下调bcl-2基因和P-gp的蛋白表达.结论 Graphislactone A为首次从高等植物中发现的酚类化合物,该制备分离方法效率高、样品回收率高,得到的目标成分纯度高.与阳性药依托泊苷相比,Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有较强的细胞毒活性,且能够诱导其凋亡,其机制可能与p53的表达水平上调、激活caspase-3通路、调节bax和bcl-2的相对比例,下调P-gp的蛋白表达有关.
-
小叶莲化学成分的研究
目的 研究小叶莲Sinopodo-phyllum hexandrum (Royle) Ying的化学成分.方法 小叶莲95％乙醇提取物采用硅胶柱、Sephadex LH-20、ODS柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到10个化合物,分别鉴定为5-羟基麦芽酚(1)、对羟基苯甲酸(2)、香草酸(3)、2,4,6-三羟基苯甲酸乙酯(4)、对羟基苯甲酸乙酯(5)、原儿茶酸(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、5-羟甲基糠醛(9)、α-棕榈酸甘油酯(10).结论 化合物1、2、4、5为首次从该属植物中分离得到,化合物6、9、10为首次从该植物中分离得到.
-
小叶莲灌洗治疗阴道炎的临床疗效
目的 观察小叶莲灌洗治疗对细菌性和滴虫性阴道炎的临床疗效.方法 入选20～40岁已婚女性阴道炎患者70例,其中滴虫性阴道炎患者40例,细菌性阴道炎患者30例,随机各分为对照组与治疗组.对照组给予藏药方剂常规治疗,治疗组给予小叶莲灌洗治疗,治疗20 d后观察疗效和不良反应.结果 细菌性阴道炎治疗组治愈率80％,对照组治愈率26％,差异有统计学意义(P＜ 0.01);滴虫性阴道炎治疗组治愈率70％,对照组治愈率25％,差异有统计学意义(P＜0.01).未见不良反应发生.结论 小叶莲灌洗治疗细菌性和滴虫性阴道炎疗效好,安全性高.
-
小叶莲有效成分对人乳腺癌细胞增殖、细胞周期及线粒体膜电位的影响
目的:探讨小叶莲提取物、有效成分及成分组合对人乳腺癌细胞增殖的影响及机制.方法:采用酸性磷酸酶法测定小叶莲4种提取物[乙醇提取物(Xc)、乙醇提取物石油醚萃取物(Xp)、乙醇提取物乙酸乙酯萃取物(Xe)、乙醇提取物正丁醇萃取物(Xz)]、5种有效成分[鬼臼毒素(S1)、去氧鬼臼毒素(S2)、4-去甲去氧鬼臼毒素(S3)、8-异戊烯基山柰酚(S4)、8,2′-二异戊烯基槲皮素-3-甲醚(S5)]以及3种有效成分组合{组合1[S1-S2-S3-S4-S5(2:4:1:4:32),Z1]、组合2[S2-S4(1:1),Z2]、组合3[S3-S4(1:4),Z3]}对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞仪检测上述样品对MDA-MB-231、MCF-7(或T47D)细胞周期和细胞线粒体膜电位的影响.结果:小叶莲有效成分组合Z1对MDA-MB-231、MCF-7细胞具有显著抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.27±0.2)、(0.11±0.1)μg/mL;提取物Xc、Xp、Xe,有效成分S2、S4以及成分组合Z2、Z3对MDA-MB-231、MCF-7(或T47D)细胞的增殖均有较强抑制作用,IC50均小于15μg/mL;各提取物和有效成分均可阻滞MDA-MB-231、MCF-7细胞周期于G2/M期;各有效成分组合均可阻滞MDA-MB-231、T47D细胞周期于G0/G1期,并能降低MDA-MB-231、T47D细胞线粒体膜电位.结论:小叶莲有效成分及成分组合可通过影响细胞周期和线粒体膜电位,从而抑制乳腺癌细胞的增殖.
-
HPLC法测定藏药二十五味鬼臼丸中鬼臼毒素的含量
目的:建立HPLC法并对二十五味鬼臼丸中的鬼臼毒素进行含量测定.方法:采用Shim-pack VP-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相,线性梯度洗脱(0～10 min,35％乙腈;10～25 min,35％乙腈→55％乙腈;25～30 min,55％乙腈→35％乙腈),流速1.0 mL· rnin-1,检测波长290 nm,柱温30℃.结果:鬼臼毒素的线性范围为0.02～0.33 μ g(r=0.999 9),方法回收率(n=6)为100.5％(RSD=0.57％).全国7个生产企业的69批次二十五味鬼臼丸中鬼臼毒素含量范围为0.02～0.77 mg· g-1;二十五味鬼臼丸中鬼臼毒素含量限度定为0.07 mg·g-1.结论:本方法制定了二十五味鬼臼丸处方中主药鬼臼中鬼臼毒素的含量限度,为该药的质量控制提供了有力的依据.
-
桃儿七根茎HPLC指纹图谱研究
目的:采用HPLC法建立桃儿七根茎药材的指纹图谱,并测定不同产地11批药材中鬼臼毒素的含量.方法:采用Wondasil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.1％甲酸水溶液(pH 3.2)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱(0.01 min,35％B;25 min,47％ B;85 min,55％ B;95 min,60％ B;97 min,35％ B;100 min,35％ B;100.01 min,STOP),流速0.8 mL·min-1,检测波长290 nm,柱温25℃,进样量10 μL.结果:以鬼臼毒素为参照峰确立了36个共有峰,建立了桃儿七HPLC指纹图谱,共有峰面积达到总峰面积90％以上,11批次药材相似度均在0.9以上;各批次药材中鬼臼毒素含量在13.5～36.9 mg·g-1间.结论:建立的HPLC指纹图谱方法可同时用于含量测定,该方法操作简单,重复性及稳定性良好,可反映桃儿七药材质量.
