首页 > 文献资料
-
黄芩甙对百日咳菌液致离体大鼠脑组织损害的保护作用及量效关系的研究
目的:了解黄芩甙对百日咳菌液致离体大鼠脑组织损害的保护作用、量效关系及可能的机制.方法:大鼠脑组织切片分为7组:(1)正常脑组织切片培养组(正常组);(2)10%百日咳菌液脑组织切片培养组(模型组);(3)黄芩甙预处理后10%百日咳菌液脑组织切片培养组(黄芩甙组),根据预处理黄芩甙的不同剂量又将本组分为5个亚组;(4)谷氨酸脑组织切片培养组(谷氨酸组);(5)黄芩甙预处理后谷氨酸脑组织切片培养组(黄芩甙加谷氨酸组);(6)过氧化氢(H2O2)脑组织切片培养组(过氧化氢组);(7)黄芩甙预处理后过氧化氢脑组织切片培养组(黄芩甙加过氧化氢组).收集各组脑组织切片培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)含量.脑切片组织作蛋白质(pro)定量检测.结果:模型组、谷氨酸组和过氧化氢组的LDH释放量明显升高,分别依次为(15.10±4.89)、(15.49±5.66)、(16.54±5.47)u/g.pro,与正常组(6.10±2.87)u/g.pro比较差异有显著性(P<0.01);0.25mmol/L黄芩甙预处理后,LDH释放量[(8.65±2.43)u/g.pro]明显降低,与模型组比较差异有显著性(P<0.01).同时黄芩甙加谷氨酸组[(9.93±2.89)u/g.pro]和黄芩甙加过氧化氢组[(9.54±2.82)u/g.pro]培养液中的LDH释放量明显降低,与谷氨酸组和过氧化氢组比较差异均有显著性(P<0.01).结论:黄芩甙预处理后对百日咳菌所致的神经细胞损害具有保护作用,其保护作用可能与黄芩甙能减少谷氨酸和过氧化氢对离体神经细胞的损害作用有关.
-
一种小鼠离体海马脑片细胞外记录技术
离体脑片是用特制的组织切片机切制而成的脑组织切片.利用脑片进行功能研究基本的指标是突触传递引起的电活动.细胞外记录技术是进行这种记录常用的方法之一.我室20世纪60年代发现并报道了脑低氧预适应现象[1],并建立了小鼠低氧预适应动物模型.在这一独特的低氧预适应模型上,建立海马脑片诱发电位的记录方法,对于进一步深入研究低氧预适应机制是十分必要的.
-
大白鼠肝脾肺肾大脑组织切片制作方法的改进
通过对230只大鼠心、肝、脾、肺、肾、大脑石蜡切片的制作,发现由于各器官组织结构的不同,其脱水、透明、浸蜡所需的时间亦不同.因此我们反复摸索,总结出以上各器官脱水、透明、浸蜡的适宜时间,将其分别处理为三组进行脱水、透明、浸蜡.现介绍如下:
-
脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法效果比较
目的探讨脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法的效果.方法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体,同时运用漂片法和贴片法进行免疫组化ABC法染色.结果漂片法阳性神经元数目和灰度值与贴片法比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01).结论脑组织切片免疫组化技术采用漂片法效果更为可靠.
-
全脑缺血再灌流后海马神经元凋亡的初步研究
目的:观察大鼠全脑缺血再灌流后脑组织细胞的死亡是否以凋亡的形式出现,分析凋亡在海马神经元死亡中的意义.方法:选用雄性SD大鼠,随机分为二组:假手术对照组和缺血再灌流组.全脑缺血采用Pulsinelli-Brierley四血管阻塞(4VO)模型.TUNEL(Terminal deoxyribonucleotidyl-transferase mediated dUTP-fluoresein nick end labeling method)标记主要根据试剂盒的说明进行.免疫组化采用CDN-ABC漂浮法.结果:1. TUNEL标记结果:本实验观察了全脑缺血再灌流后脑组织切片,缺血再灌流后第二天阳性细胞的数量明显增多,于第3 d、第5 d为明显,且阳性细胞主要出现在海马CA1区,在CA2区及齿状回等海马部位也可见到,但细胞数量少,且显色不明显.阳性细胞内可见圆形或不规则形的凋亡小体.2.免疫组化结果:Bcl-2蛋白在海马部位的表达主要出现在缺血再灌流后6 h至24 h,72 h后它的表达基本消失.结论:脑缺血再灌流后海马迟发性死亡与细胞凋亡有关,CA1区神经细胞的死亡至少有部分是通过凋亡的形式发生的.
-
边缘系统相关膜蛋白mRNA在纹状体边缘区的转录分析
纹状体边缘区(Marginal djvision,MrD)由舒斯云教授于1988年首先发现并进行了大量研究,发现该区域与学习、记忆有关,并提出其可能为边缘系统的一部分.为证实这一假设,本研究在大鼠脑组织切片中对边缘系统特定标记分子-边缘系统相关膜蛋白(Limbic system-associated mcmbrane protein.LAMP)mRNA在该区域的转录进行了测定.实验取雄性SD大鼠10只,10%水合氯醛腹腔麻醉后,剖开胸腔,切开右心房,将穿刺针通过左心室进入升主动脉,4℃生理盐水冲洗后,4%多聚甲醛灌注固定,30%蔗糖中沉底后,应用冰冻切片机-20℃下切片,厚度为30μm.采用核酸分子原位杂交技术对LAMP的mRNA转录进行测定.原位杂交所用探针由含53个碱基的寡核苷酸构成,其序列取自大鼠LAMP的cDNA第918至970个核苷酸,由中科院上海生化所DNA合成室合成,应用地高辛标记,杂交完毕后,应用NBT显色,光学显微镜下观察.
-
治疗阿尔茨海默病药物的临床应用
阿尔茨海默病(Alzheimer'S Diseease,AD)是一种渐进性发展的老年性神经系统(NS)退行性认知和记忆等功能丧失的疾病.由1906年德国病理学家阿尔茨海默借助显微镜从痴呆患者脑组织切片中观察发现了不同寻常标志物--黏性室斑和神经纤维缠结,细胞外淀粉样蛋白沉积所造成大脑额叶皮质区、海马结构、边缘系统各区域胆碱能选择性丢失、功能降低等本质性持续损伤的病理和组织学改变的结论而故名[1].资料表明,目前全球性AD患者已超过17 000万,我国有500多万,占世界总病例的四分之一强.随着人口老龄化进程,我国2000年已进入老龄社会,AD己上升为常见死亡原因的第三位,仅次于心脑血管病和癌症,而且发病率随年龄的增长而增加.早预防、早治疗对于提高现代人们的生活质量和生命质量的重要性不言而喻.按照循证医学观点,探讨对AD的预防、治疗和延缓AD的发生及恶化,选择应用相对成熟的、高效、高选择性和副作用小的药物,十分重要.
-
免疫细胞化学法检测牛脑组织中的BSE病原
1 前言免疫细胞化学法可原位检测到牛脑组织中蓄积的特异的病理性朊蛋白(PrPsc),1999年欧盟委员会对该方法进行了评估,认为其特异性和敏感性都是100%.为防止疯牛病传入我国,我们首次在质检系统内引进建立了这种检测方法,用羊痒病脑组织切片作阳性对照,对71份国产内牛脑组织进行了疯牛病检测,被检牛全部为阴性.我们所建立的这种方法,符合OIE规定的技术要求和标准,即符合国际标准,可以满足进出境疯牛病诊断和国内疯牛病检测的需要.