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小鼠外周组织时钟基因启动子区甲基化分析
目的 应用一种简单快速经济的方法检测8个主要时钟基因PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1和BMAL2启动子区甲基化状态,检测小鼠外周组织肝、心、肾、胸腺、睾丸时钟基因启动子区甲基化状态.方法 用偏重亚硫酸氢钠和对苯二酚对基因组DNA进行修饰.修饰后的DNA为模板,两套不同的引物对:甲基化特异性引物对和非甲基化特异性引物对扩增小鼠肝、心、肾、胸腺、睾丸组织时钟基因启动子区.PCR产物进行电泳和测序.结果 扩增产物与预期片段大小相符合.PCR产物经过直接测序进一步证实小鼠外周组织时钟基因启动子区均为非甲基化状态.结论 建立了一种检测小鼠时钟基因启动子区甲基化的新方法,借此证明成年小鼠5个外周组织8个时钟基因启动子区均呈非甲基化状态.
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乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP 1和sFRP5启动子区的甲基化修饰及其分子机制的探讨
目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP 1、sFRP5启动子区的甲基化修饰分子机制,以期指导乙型肝炎病毒感染所致疾病的临床治疗. 方法 选取标本株HBV并对其进行培养,提取DNA,纯化后分别进行甲基化特异性PCR和硫化测序PCR,对目的基因进行测序. 结果 稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株sFRP1、sFRP5基因的启动子区CpG岛的甲基化程度比HepG2细胞株高,经DAC处理的稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株的sFRP1、sFRP5启动子区CpG岛甲基化程度有部分回落且呈药物剂量依赖.乙型肝炎病毒X蛋白可对sFRP1、sFRP5基因的启动子区的甲基化起到诱导作用;DAC可逆转HBV X蛋白所诱导的sFRP1启动子区甲基化程度,且呈剂量依赖;进行sFRP1基因扩增时,HBx组的甲基化程度比GFP组高. 结论 乙型肝炎病毒x蛋白通过诱导相关的甲基化转移酶以及甲基化CpG粘附蛋白而富集于sFRP1基因和sFRP5基因的启动子区,从而促进基因CpG岛的甲基化,并且还可以诱导组蛋白的脱乙酰化,终导致sFRP1基因和sFRP5基因的表达下调或沉默.
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ID4、ZO-1基因甲基化定量检测在急性白血病诊断中的意义
目的 探讨ID4、ZO-1基因甲基化定量检测作为基因标志在急性白血病(acute leukemia,AL)中的意义.方法 采用硫化测序PCR (bisulfite sequencing PCR,BSP)法及甲基化特异性PCR(methylightion specific PCR,MSP)法检测AL中NB4细胞和健康供者骨髓(normal bone marrow,NBM)细胞的ID4、ZO-1基因的甲基化状况并进行分析.结果 BSP法检测ID4基因在AL NB4细胞中甲基化阳性率为86.0％,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(4.8％),差异有统计学意义(P＜0.05);ZO-1基因在AL NB4细胞系中甲基化阳性率为88.4％,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(1.9％),差异有统计学意义(P＜0.05).采用MSP法检测9种AL细胞系,ID4、ZO-1基因甲基化水平在淋系来源的细胞系高于髓系来源的细胞系.结论 ID4、ZO-1基因甲基化水平检测可作为新的AL基因标志物.
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肾癌组织中PCDH10基因甲基化状态的检测及临床意义的研究
目的：检测PCDH10基因在肾癌组织中的甲基化状态，并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）技术检测PCDH10基因在5株肾癌细胞系和47例肾癌组织样本中的甲基化情况，同时分析47例患者的临床资料及病理信息，进行统计研究。结果5株肾癌细胞系中有2株检出PCDH10基因甲基化，比率为40%；47例肾癌样本中有31例检出PCDH10基因甲基化，比率为66.0%，6例癌旁组织中有1例检出PCDH10基因甲基化，比率为16.7%。PCDH10基因出现甲基化的患者与未出现甲基化的患者相比，二者在性别、年龄、肿瘤部位、大小、病理核分级等指标的差异无统计学意义（P＞0.05），但在Ⅰ期肾癌与Ⅱ～Ⅲ期肾癌之间PCDH10基因甲基化率的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PCDH10基因在肾癌组织中甲基化程度较高，高分期的肾癌可能具有更高的PCDH10基因甲基化率，提示PCDH10基因甲基化可能与肾癌的发生发展有关。
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急性髓系白血病患者SFRP2基因甲基化的检测及临床意义
目的 检测分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因在急性髓系白血病(AML)患者中的甲基化状态,探讨SFRP2 基因启动子区甲基化状态与AML 发生的关系.方法 收集了99 例AML 患者的骨髓或外周血样本,匹配以70 例门诊普通患者的外周血作为对照.采用甲基化特异性PCR(MSP)方法对所有研究样本进行SFRP2 基因启动子区甲基化状况检测.结果 99 例AML 患者中有27 例检测到SFRP2 基因的甲基化,甲基化率为27.3%;而正常对照组中未检出SFRP2 基因的甲基化;两者比较差异有统计学意义(P ＜0.001).SFRP2 基因的甲基化状态与AML 的年龄、性别、临床分型及样本来源(骨髓/外周血)间均未见显著关系(P ＞0.05).结论 SFRP2 基因启动子区的甲基化与AML 的发生有相关性,可能是引起AML 的分子机制之一.外周血中的SFRP2 基因的甲基化可望作为一项新的分子标记物应用于AML 的临床早期检测.
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人粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断中的意义
目的:探讨检测人粪便中抑瘤素M型受体(OSMR)基因和组织因子途径抑制子2(TFPI2)基因甲基化对于结直肠癌及腺瘤诊断的可行性及临床意义.方法:从60例结直肠癌患者和17例腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,应用甲基化特异性PCR方法检测人粪便中OSMR和TDPI2基因的甲基化状态.结果:结直肠癌患者粪便中OSMR及TFPI2基因甲基化检出率分别高于腺瘤患者和正常对照者[OSMR:35％(21/60) vs 12％(2/17),7％(2/30)；TFPI2:70％(42/60)vs 18％(3/17),3％(1/30)；均P＜0.01].二者联合检测甲基化检出率为81.7％(49/60),特异性90％.结论:检测粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断和筛查中有潜在的应用价值.
关键词： 结直肠癌 抑瘤素M型受体 组织因子途径抑制子2 甲基化 甲基化特异性PCR -
MDA-MSP技术检测粪便miR34b/c甲基化及其在结直肠癌早期诊断中的意义
目的:探讨粪便miR34b/c甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.方法:从126例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便和64例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术对经过亚硫酸氢盐修饰样本进行全基因组扩增,结合甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测组织和粪便中miR34b/c基因甲基化状态.结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为95.2％(120/126),对应的癌旁正常组织为11.9％(15/126),两者比较有显著差异(P＜0.01); miR34b/c甲基化状态与各临床病理参数无显著相关(P＞0.05).结直肠癌粪便miR34b/c甲基化阳性率为90.2％(111/123),显著高于正常对照7.8％(5/64),差异有统计学意义(P＜0.01).粪便DNA miR34b/c用于结直肠癌早期诊断的敏感性为91.2％,特异性为92.2％.结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子特征,检测粪便miR34b/c甲基化有望成为结直肠癌早期诊断的一个全新的肿瘤标志物.MDA结合MSP为miRNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.
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Caveolin-2基因甲基化状态在胃癌组织中的检测
目的:探讨Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化与胃癌发生发展的关系.方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测33例胃癌组织及5例距肿瘤5 cm以上的癌旁正常胃组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化状态.结果:5例正常胃组织Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛均为甲基化阴性.33例胃癌组织中29例甲基化阳性,甲基化率为87.9%(29/33),其中20 例癌组织(60.6%)表现为完全甲基化,9例癌组织(27.3%)表现为部分甲基化.4例癌组织(12.1%)表现为甲基化阴性.统计学结果显示癌组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率显著高于正常组织.结论:胃癌组织中存在较高的Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率,甲基化可能与胃癌的发生有关.
关键词： 胃癌 Caveolin-2基因 甲基化 甲基化特异性PCR -
DLC-1基因甲基化检测与肝细胞癌复发转移的关系
目的:研究DLC-1基因甲基化检测与肝细胞癌(hepatocelluar cardnoma,HCC)复发转移的关系.方法:73例HCC标本依据临床以及病理学特征被分为高侵袭组和低侵袭组;采用甲基化特异性PCR对不同侵袭组HCC之间DLC-1基因甲基化表达进行分析.结果:DLC-1甲基化表达率高侵袭组明显高于低侵袭组,二者之间有明显差异(χ2=4.3567,P<0.05).DLC-1甲基化阳性与阴性患者之间AFP、HBV双阳性率有明显差异(χ2=4.4224,P<0.05);TNM分期越后DLC-1甲基化程度越高(χ2=10.8478,P<0.05);短期随访发现,DLC-1甲基化的HCC患者中位生存期低于非甲基化患者(9.45 mo vs 36 mo,P<0.05).结论:DLC-1基因甲基化可作为HCC复发转移监测指标,并可作为靶向治疗HCC复发转移的新靶点.
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5-氮杂胞苷抑制肝癌细胞恶性表型和逆转甲基化状态的作用及机制
目的:探讨DNA异常甲基化与肝细胞肝癌间的相关性及5-氮杂胞苷(5-aza-CR)抑制肝癌细胞恶性表型和逆转甲基化状态的作用及其机制.方法:用5-aza-CR处理肝癌细胞株HuH-7和裸鼠移植瘤模型,然后用相差显微镜观察药物处理前后细胞形态变化,MTT法观察细胞生长速度变化,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率,甲基化特异性PCR(MSP)检测p16基因5'CpG岛甲基化状态,RT-PCR法检测p16 mRNA的表达情况.结果:5-aza-CR对肿瘤细胞HuH-7和裸鼠移植瘤细胞均有明显的抑制作用;实验组HuH-7细胞周期G0/G1期延长41.1%±3.2%,S期缩短39.0%±1.4%.G2期缩短2.2%±0.7%,凋亡细胞增加30.0%±4.5%;裸鼠移植瘤细胞周期G0/G1期延长27.4%±3.1%,S期缩短25.8%±2.1%,G2期缩短1.6%±1.8%,凋亡细胞增加2.9%±0.6%;对照组HuH-7与裸鼠细胞仅甲基化引物扩增出特异PCR条带,实验组HuH-7细胞仅非甲基化引物扩增出特异PCR条带,而实验组裸鼠细胞甲基化和非甲基化引物均扩增出特异PCR条带;实验组肿瘤细胞HuH-7和裸鼠移植瘤细胞的p16 mRNA均有表达,而对照组则无表达.结论:5-aza-CR在体外和体内均有抑制肝癌细胞生长、阻滞细胞周期G1/S和促进p16 mRNA表达的作用:5-aza-CR可抑制肝癌细胞恶性表型和逆转p16甲基化状态.
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RASAL1基因启动子甲基化及RAS活性与结肠癌临床病理的关系
目的:检测RASAL1(ras GTPase-activating-like protein 1)基因甲基化率及RAS活性在人结肠癌组织中的表达,探讨其与临床病理资料间的关系.方法:以40例结肠癌标本为研究对象,相应的正常组织标本为对照.甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测RASAL1启动子CpG岛甲基化状态,免疫共沉淀法检测RAS活性,分析肿瘤组织中RASAL1基因甲基化率及RAS活性与临床病理参数间的关系.结果:40例肿瘤组织中有26例检测出RASAL1基因甲基化(26/40,67.5％),对照组40例中有12例出现甲基化(12/40,30％),肿瘤组织甲基化率明显高于正常组织(P=0.0017).肿瘤组织中RAS活性的中位数为1.07,正常组织中RAS活性的中位数为0.52,P＜0.001,差异有统计学意义.结肠癌组织中RASAL1基因的甲基化率、RAS活性与患者肿瘤分化程度、侵袭深度、淋巴结转移、TNM分期有统计学差异(均P＜0.05).结论:RASAL1甲基化状态与RAS活性增加有关,可能在结肠癌的发生发展中起重要作用.抑制RASAL1甲基化及RAS活性,可能成为治疗结肠癌的新靶点.
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MAL基因在胃癌组织中的甲基化及其mRNA的表达
目的:研究MAL基因在胃癌和癌旁组织中的甲基化状态及其mRNA表达.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)和实时荧光定量RT-PCR法检测37例人胃癌组织及对应癌旁5 cm组织中MAL基因的甲基化状态和mRNA表达,并分别将其与各临床病理指标进行统计学分析.结果:37例胃癌组织中MAL基因甲基化率为78.4%.对应37例癌旁组织中MAL基因甲基化率为5.4%.癌组织与癌旁组织的甲基化率差异有统计学意义(P<0.01).胃癌组织中MAL基因甲基化状态与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、胃癌分化程度、临床分期无统计学意义(P>0.05).在胃癌组织与对应癌旁组织中MAL基因mRNA定量表达差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组织中MAL基因mRNA定量表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌分化程度、有无淋巴结转移、有无神经束浸润及肿瘤TNM分期无相关(P>0.05).结论:胃癌组织中MAL基因表达缺失或低下,并且存在高甲基化率,MAL基因发生甲基化可能与胃癌发生有关.
关键词： 胃癌 MAL基因 甲基化 甲基化特异性PCR 实时荧光定量RT-PCR -
启动子区甲基化对肝细胞癌锌指蛋白331表达的调控
目的:探讨启动子区甲基化对肝细胞癌中锌指蛋白331 (zinc-finger protein 331,ZNF331)表达的调控及意义.方法:采用甲基化特异性PCR(methylationspecific PCR,MSP)检测ZNF331在肝癌细胞系和50例原发性肝细胞癌组织中的甲基化状况,并采用半定量RT-PCR分析5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza)处理前后肝癌细胞系中ZNF331的表达情况.PRF/5、HepG2、BEL-7402中低表达,SNU449中表达正常.5-Aza处理后HBXF344、HepG2、BEL-7402及PLC/PRF/5中ZNF331恢复表达.50例原发性肝细胞癌标本中,ZNF331启动子区的甲基化率为80％(40/50),而10例正常肝脏组织中ZNF331均无甲基化.ZNF331启动子区的甲基化与肝细胞癌患者的性别、年龄、肿瘤直径大小、血清甲胎蛋白值、肝炎病毒感染、分化水平及TNM分期均无关联(P＞0.05).结论:ZNF331启动子区高甲基化是肝癌的频发事件,ZNF331基因表达受启动子区甲基化调控.
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Runx3、Rassf1a基因启动子在胃癌组织中的高甲基化及Dnmt1的表达
目的:探讨人类相关转录因子3(human runtrelated transcription factor 3,Runx3)、Ras相关区域家族1A(ras-association domain family 1a,Rassf1a)基因启动子区的甲基化和甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,Dnmt1)基因的表达与胃癌发生的关系及临床意义.方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测68例胃癌组织及其相应癌旁正常组织中Runx3、Rassf1a基因启动子区甲基化状态;同时应用实时荧光定量逆转录-多聚合酶链反应(real-time RTPCR)和免疫组织化学SP法分别检测基因的Runx3、Rassfla、Dnmt1 3个基因mRNA和蛋白的表达情况.结果:胃癌组织中Runx3、Rassf1a基因的甲基化阳性率较正常组织明显升高(45.59％ vs 10.29％; 64.70％ vs 7.35％).胃癌组织中Runx3 和Rassf1a mRNA阳性表达率明显低于正常组织(36.76％ vs 100％; 27.94％ vs 97.06％),而胃癌组织中Dnmt1 mRNA阳性表达率则明显高于正常组织(80.88％ vs 17.65％),差异均有统计学意义差异.胃癌组织与正常组织RUNX3、RASSF1a、DNMT1蛋白与mRNA表达基本相一致.Runx3 mRNA、Rassf1amRNA阴性表达的胃癌组织中其基因启动子的甲基化率较阳性表达者明显升高(72.09％vs0;85.71％ vs 2.94％),差异具有统计学意义.胃癌组织中RUNX3、RASSF1a与DNMT1蛋白的表达均呈负相关(r=-0.627,P＜0.0001;r=-0.477,P＜0.0001).结论:Runx3、Rassf1a基因启动子区的高甲基化及Dnmt1基因高表达可能与胃癌发生有关.
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特异性PCR法检测胰腺癌p16基因甲基化改变
目的探讨胰腺癌 p16基因启动子区5'CpG岛甲基化改变的特点及其与临床病理特征的关系.方法应用甲基化特异性PCR法进行甲基化检测.结果 14/36例胰腺癌标本的p16基因启动子区5'CpG岛检测到甲基化,甲基化频率为38.9%,5例癌旁组织、1例正常胰腺组织、7例慢性胰腺炎及2例胰腺粘液性囊腺瘤未发现相应区域的甲基化.结论 p16基因启动子区5'CpG岛甲基化是胰腺癌p16基因失活的机制之一,是胰腺癌细胞区别与正常细胞的分子事件.检测p16基因甲基化可能有助于胰腺癌的诊断及鉴别诊断.
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泛素羧基末端酯酶L1启动子区甲基化在食管癌变过程中的作用
目的 探讨泛素羧基末端酯酶L1( UCHL1)启动子区甲基化与食管癌发生的关系.方法 采用甲基化特异性PCR、半定量RT-PCR和Western blot技术在食管癌细胞系中分析UCHL1启动子区甲基化与其基因表达的关系,并应用甲基化抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5 -Aza)处理食管癌细胞系,探讨UCHL1表达是否受甲基化的调控.同时检测了51例原发食管癌的UCHL1启动子区甲基化情况.结果 8株食管癌细胞系( KYSE30、KYSE150、KYSE140、KYSE450、KYSE510、TE3、TE7、TE10)的UCHL1启动子区完全甲基化.其中7株细胞系(KYSE30,KYSE150、KYSE140、KYSE450、KYSE510、TE3,TE7) UCHL1表达缺失,TE10细胞系表达降低.5-Aza处理后KYSE150、TE3细胞系UCHL1恢复表达.51例原发食管癌组织标本中,UCHL1启动子区甲基化率为74.51％ (38/51),而在10例正常食管黏膜组织中UCHL1启动子区均未甲基化.UCHL1启动子区甲基化与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、临床病理分期、淋巴结转移等均无明显相关性.结论 UCHL1基因启动子区甲基化在食管癌患者中普遍存在,UCHL1基因表达受启动子区甲基化调控.UCHL1基因甲基化在食管癌发生发展中可能起着重要作用.
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粪便miR34b/c基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的价值
目的:探讨粪便miR34b/c基因甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.方法:从98例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便、血中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR结合变性高效液相色谱法检测患者组织、粪便和血中miR34b/c基因甲基化状态.结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为91.8% (90/98例),对应的癌旁正常组织为4.08%(4/98例),两者比较差异有统计学意义(P=0.000 1).用癌组织、粪便、血标本miR34b/c基因甲基化诊断结直肠癌的敏感度、特异度分别为:组织 91.8%(90/98例) 和95.9%(94/98例);粪便88.8%(87/98例)和91.7%(66/72例);血83.7%(82/98例) 和87.5%(63/72例).结直肠癌患者粪便miR34b/c基因甲基化检测结果与癌组织检测结果大致相同.结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子生物学特征,粪便miR34b/c基因甲基化的敏感性和特异性较高,粪便miR34b/c甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物.
关键词： 粪便 miR34b/c甲基化 甲基化特异性PCR 结直肠癌 诊断 -
CDKN2/p16基因HapⅡ位点甲基化与肺癌关系的研究
目的:通过检测CDKN2/p16抑癌基因上游调控序列及外显子E1 HapⅡ位点甲基化状态,探讨基因甲基化在肺癌发生中的作用,为肺癌的早期诊断及基因治疗提供可能的理论依据.方法:取58例肺癌患者手术切除的肺癌病理组织标本,16例肺组织良性病变并手术患者的病理标本作为对照.免疫组织化学技术检测p16蛋白表达,甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)技术分析该基因HapⅡ位点甲基化状态.结果:58例肺癌患者中,14例HapⅡ位点发现甲基化,甲基化率为24.14%,而对照组没有发现甲基化.其中,p16蛋白阳性者中2例发现甲基化,甲基化率为7.4%,而p16蛋白阴性者中12例发现甲基化,甲基化率为38.7%,差异有显著性(χ2 =7.72,P=0.006).结论:CDKN2/p16基因外显子E1及调控序列HapⅡ位点异常甲基化,可抑制p16蛋白表达,这可能是p16基因功能丧失的一个重要机制,并可能对肺癌发生起促进作用.
关键词： 肺癌 甲基化特异性PCR CDKN2/p16抑癌基因 甲基化 -
食管癌组织与外周血RASSF 1A甲基化的检测及其临床意义
目的:通过对食管癌组织及同一患者对应的术前外周血中RASSF1A基因甲基化的检测,加深食管癌变分子机制的了解并为食管癌早期诊断和高危人群预警提供候选指标.方法:采用甲基化特异性PCR方法,分别检测来自食管癌高发区的30例食管癌患者血浆、肿瘤组织及癌旁正常组织中RASSF1A基因启动子甲基化状况.结果:食管癌组织RASSF1A甲基化阳性率为40%(12/30),而这12例癌组织甲基化阳性的患者其外周血甲基化阳性共7例,癌组织和外周血RASSF1A甲基化阳性一致率为58%(7/12),18例癌组织甲基化阴性的患者其外周血也均为阴性,阴性一致率为100%(18/18).癌旁正常食管组织甲基化率为13%(4/30),明显低于癌组织(40%,12/30),P<0.05.7例外周血甲基化阳性的患者中,淋巴结转移阳性5例(55%,5/9),阴性2例(10%,2/21),两者差异有统计学意义,P<0.05.低分化鳞癌的RASSF1A甲基化阳性率(83%,5/6)明显高于中分化鳞癌(24%,5/21),P<0.05.结论:外周血RASSF1A甲基化可以反映同一个体食管鳞癌组织中RASSF1A基因甲基化的状态,可能是高危人群筛查重要候选分子标志之一.
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胃癌组织ZNF139与RUNX3基因甲基化相关性及其生物学意义探讨
目的:检测胃癌组织中钙指蛋白139(znic finger protein 139,ZNF139)基因的表达和RUNX3基因的甲基化状态,探讨两者之间的相关关系及其生物学意义.方法:对55例胃癌组织及相应的癌旁组织采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ZNF139 mRNA的表达情况,甲基化特异性PCR技术检测RUNX3基因的甲基化状态,分析两者之间的相关性.结果:ZNF139在胃癌组织中表达(0.659 2±0.229 1)明显高于癌旁组织(0.354 0±0.083 6),t=9.281,P＜0.001;胃癌组织ZNF139表达与肿瘤大小有关,t=2.453,P=0.017;与分化程度有关,t=5.162,P＜0.001;与浸润深度有关,t=4.145,P＜0.001;与淋巴结转移有关,t=4.279,P＜0.001.胃癌组织Runx3甲基化率为54.55％,明显高于癌旁组织(7.27％),x2=28.778,P＜0.001;胃癌组织Runx3基因的甲基化水平与肿瘤分化程度有关,x2 =3.911,P=0.048;与浸润深度有关,x2 =7.333,P=0.007;与淋巴结转移有关,x2=10.530,P=0.001.发生Runx3基因甲基化的胃癌组织ZNF139表达强度(0.803 0±0.195 2)明显高于未发生Runx3甲基化的为胃癌组织(0.486 6±0.123 1),t=7.017,P＜0.001,胃癌组织中Runx3基因的甲基化状态和ZNF139的表达强度呈明显正相关性,t=1.000,Kappa=0.707.结论:胃癌组织中存在ZNF139表达上调及Runx3基因甲基化率增高现象,且两者存在高度相关的一致性,提示ZNF139表达上调及Runx3基因甲基化可能通过协同作用参与了胃癌的进展及转移.
