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肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原表达降低
肥胖对人体的健康已构成严重威胁.增食欲素(orexins)A和B是2种主要由下丘脑分泌的神经肽,均来源于同一前体--前增食欲素原(prepro-orexin)的蛋白水解产物,通过功能性受体增食欲素受体-1和2(orexin receptor-1 OX1R;orexin receptor-2 OX2R)参与摄食和能量代谢调节.
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血管紧张素转换酶2的研究进展
血管紧张素转换酶相关羧肽酶(angiotensin-converting enzyme related caeboxyy peptidase),又称血管紧张素转换酶2(ACE2),为肾素-血管紧张素系统(RAS)的新成员,在RAS中有拮抗ACE并减少血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)形成的作用,因此在高血压、心力衰竭、心肌梗死、肾病的发生发展中有着重要的病理生理意义.同时ACE2为SARS-CoV S蛋白的功能性受体,对其的深入研究对重症急性呼吸综合征(severe acute respiratoty syndrome SARS)的防治也有重要价值.
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瘦素及瘦素受体在大鼠胰腺纤维化组织中表达的变化
瘦素(leptin)是一个具有多项功能的细胞因子,与机体的许多生理功能及疾病的发生关系密切.瘦素的生物学效应是由瘦素受体(leptin receptor,ob-R)介导的.ob-R为单跨膜细胞表面受体,目前已发现的有全长型(ob-Rb)及不同剪接型(ob-Ra、c、d、f、e)等至少6种形式,其中ob-Rb是主要的功能性受体.瘦素参与肝纤维化[1-2]、肾脏纤维化[3]、心肌纤维化[4]的过程.目前研究显示,瘦素及ob-Rb在胰腺组织中表达[5-6].为此,本实验检测胰腺纤维化大鼠胰腺组织中瘦素及ob-Rb的表达,探讨两者的关系.
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缺氧对C57BL/6J小鼠瘦素及其受体基因表达的影响
目的研究缺氧对小鼠瘦素及其受体(包括转运性受体Ra、Rc和功能性受体Rb)mRNA表达变化的影响,以进一步明确瘦素和呼吸功能的关系.方法利用医学自动测控缺氧仓(XQ-Ⅰ型)复制机体常压缺氧状态,将小鼠分为正常对照组、缺氧24 h组、缺氧48 h组,然后利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别定量检测瘦素及其受体mRNA表达水平.根据cDNA条带的灰度值计算其相对含量,各种产物与磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)的比值表示其相对表达水平.结果(1)缺氧24 h组和缺氧48 h组瘦素mRNA表达水平分别为0.903±0.190、0.856±0.336,显著高于正常对照组(0.508±0.207,P均＜0.05);(2)缺氧24 h组和缺氧48 h组Ra mRNA表达水平分别为0.724、0.700,分别为正常对照组(0.630)的115%、111%;(3)缺氧24 h组和缺氧48 h组Rb mRNA表达水平分别为0.381±0.038、0.345±0.042,与正常对照组(0.258±0.049)比较差异均有统计学意义(P均＜0.05);(4)缺氧24 h组和缺氧48 h组Rc mRNA表达水平分别为0.299、0.292,分别为正常对照组(0.133)表达水平的224%、219%.结论缺氧作为一种独立因素可在一定范围内刺激机体瘦素、瘦素受体Ra、Rb、Rc基因表达增加,从而在正向调节机体呼吸功能中发挥重要作用.
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脑源性神经营养因子对RPMI8226细胞表达和分泌血管内皮生长因子的调控作用
脑源性神经营养因子(BDNF)是神经营养因子超家族成员之一,多项研究证实BDNF及其功能性受体TrkB高表达于多种恶性肿瘤,包括人类多发性骨髓瘤(MM)[1].
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冰冻切片应用SP免疫组化染色法的体会
链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法(streptavidin peroxidlase coiliugateti method,SP法)[1、2]是美国ZYMED公司于1986年首创的免疫组化方法.我们用SP法研究了SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠内脏尤其在胰腺内外分泌腺的表达,效果满意.现结合我们所做的实验对免疫组化程序中的一些主要技术问题总结如下.
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SARS-CoV S蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达
目的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合,近已鉴定出SARS-CoV S蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶2(angiotensin-convertingenzyme 2,ACE2).本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达,由此来初步推断SARS-CoV由眼部入侵的可能.方法分别采取:(1)成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织;(2)4～6月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织;(3)兔眼角膜、结膜、心、肺组织;(4)培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞.分别采用RT-PCR和免疫组化方法检测各组织、细胞中ACE2的表达.取尸体解剖的成人心、肺组织作为对照.结果RT-PCR法在上述各种组织和细胞中均检测到ACE2的扩增条带,其中胎儿、成人和兔的角膜、结膜扩增条带较心、肺稍弱,兔各组织的扩增条带亮度与对应的人体组织的扩增条带亮度相近.ACE2免疫组化反应产物主要位于胞浆和胞膜,呈棕黄色或棕褐色.角膜和结膜的上皮细胞及角膜内皮细胞呈明显的阳性表达,角膜和结膜的成纤维细胞呈弱阳性表达,培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞亦可见阳性表达.兔组织中的ACE2表达强度及组织定位与人相近.结论本研究从mRNA和蛋白质水平证实了眼组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE2,由此初步推断SARS-CoV存在由眼部入侵的可能,为临床进一步研究SARS的防护和致病机制提供了线索.同时,为新西兰大白兔可能成为研究SARS-CoV入侵途径的动物模型提供了初步的实验依据.
关键词： SARS-CoV S蛋白 功能性受体 血管紧张素转化酶2 角膜 结膜 -
SARS-CoV S蛋白功能性受体ACE2在人角膜、结膜中的表达
目的检测人角膜、结膜中血管紧张素转化酶2(ACE 2)的表达,由此来初步推断重症急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒由眼部入侵的可能.方法取成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织及4～6个月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织,分别采用RT-PCR和免疫组化方法检测组织中ACE 2的表达.取成人尸体解剖的心、肺组织作为对照.结果在上述各种组织中均检测到了ACE.2的表达.结论眼角膜、结膜是人体暴露于SARS冠状病毒的一个重要部位,研究结果从mRNA和蛋白质水平证实了眼部组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE 2,由此初步推断SARS-CoV存在由眼部入侵的可能,为临床进一步研究SARS的防护和致病机制提供了线索.
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微小病变型肾病综合征患者外周血单个核细胞中热休克蛋白90α、90β和糖皮质激素受体α的检测
微小病变型肾病综合征(MCNS)的预后在很大程度上取决于患者对糖皮质激素(GC)治疗的反应.糖皮质激素受体α(GRα)是功能性受体,热休克蛋白90(HSP90)的变化可改变GRα的活性[1],推测不同激素治疗反应和不同病程时期的MCNS患者存在GRα和HSP90表达水平的差异.为此,我们测定外周血单个核细胞(PBMC)的细胞质和细胞核的HSP90α、HSP90β和GRα蛋白表达水平,并探讨其临床意义.
