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未成熟卵母细胞在TCM199与P1培养体系体外成熟的比较
目的 探讨人未成熟卵母细胞适宜的培养体系及培养时间.方法 将卵母细胞-卵丘复合体(0CC)332枚和裸卵(DO)393枚随机置入TCM199和P1两种培养体系体外成熟.OCC体外培养48 h,观察其成熟情况.DO分别在24、30、48 h观察第1极体排出情况,计算体外成熟率.OCC和DO成熟后称为成熟的卵母细胞,成熟的卵母细胞行精子卵浆内注射技术(ICSI)受精,比较其在两种培养体系的受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果 在TCM199和P1培养体系中,OCC的成熟率、成熟后成为成熟的卵母细胞的受精率和卵裂率的差异无统计学意义(P均>0.05),但成熟的卵母细胞的囊胚形成率为53.7%比37.8%(P<0.05).DO在TCM199和P1培养体系中体外培养24、30、48 h时成熟率的差异无统计学意义;由DO成熟后形成的成熟的卵母细胞在P1培养体系中的受精率、卵裂率和囊胚形成率高于其在TCM199培养体系中,但只有受精率差异具有统计学意义(73.5%比62.9%,P<0.05);DO在两种培养体系中体外培养48 h和30 h的成熟率均明显高于24 h(P<0.05),但48 h与30 h的成熟率相比无差异.结论 OCC适宜在TCM199培养体系的培养;DO适官在P1培养体系的培养.DO体外成熟形成成熟的卵母细胞的时间可以缩短至30 h.
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体外成熟卵母细胞受精方式及发育能力的影响因素
目的 探讨体外成熟卵母细胞的受精方式及影响其胚胎发育的因素.方法 收集本院2008年7月至12月因男性因素需进行卵母细胞胞浆内单精子注射术(ICSI)助孕的135对夫妇未成熟的卵母细胞(DO)354枚,置入P1培养体系中观察培养20～24、26～30、36～40 h后的成熟情况.去除了退化的成熟卵母细胞,随机分为常规体外受精(IVF)和ICSI组,比较2组的正常受精率、卵裂率、第3天优质胚胎率及各组优质胚胎和非优质胚胎的患者年龄、不孕年限、促排时间及卵母细胞体外成熟时间.结果 卵母细胞体外成熟率为82.5%(292/354),IVF组正常受精率56.5%(70/124)低于ICSI组69.9%(107/153)(P<0.05).两组卵裂率和优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05).2组组内优质胚胎的患者年龄、体外成熟时间均小于非优质胚胎(P<0.05);不孕年限及促排时间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ICSI能够提高体外成熟卵母细胞的受精率.体外成熟卵母细胞具有常规受精的能力,第3天胚胎质量与ICSI相似.患者年龄和卵母细胞体外成熟时间是体外成熟卵母细胞发育能力的主要影响因素.
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体外受精胚胎移植中选择性短时受精的临床研究
目的 研究受精失败高风险患者采用选择性短时受精联合补救单精于显微注射(ICSI)的胚胎质量与妊娠结局.方法 回顾性分析2010年9月至2011年 1月本中心助孕患者的临床资料.采用短时受精患者为A组(93例),其中受精率正常的患者为A-IVF(体外受精)组(58例),完全补救为A-ICSI组(21例),部分补救为A-half组(14例)；过夜受精为B组(466例)；非补救射精ICSI为C组(94例).对各组的受精率、临床妊娠率、多胎率、流产率、早产率及出生缺陷率进行比较.结果 A-IVF组和B组的受精率、2PN率和OPN率差异有统计学意义[74.4％(588/790)比80.8％ (4674/5782),45.7％(361/790)比64.1％ (3707/5782),14.1％(111/790)比,2.6％ (149/5782),均P＜0.05],但两组的临床妊娠率、多胎率、流产率、早产率及出生缺陷率差异无统计学意义(P＞0.05).A-ICSI组和C组的临床妊娠率、多胎率、流产率、早产率及出生缺陷率差异无统计学意义(P＞0.05)；A-half组IVF部分的受精率为72.7％,低于B组80.8％ (P＜0.05).结论 选择性短时受精保障了大部分存在受精失败高风险患者的利益,可以采用.
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Y染色体多态性对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响
目的 研究Y染色体多态性(Yqh+)对体外受精(IVF)-胚胎移植(ET)结局的影响.方法 回顾性比较2005年8月至2011年5月在武汉大学人民医院生殖医学中心进行体外受精/单精子卵泡浆内注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗的Yqh+携带者和非携带者IVF/ICSI-ET的妊娠结局.其中Yqh+携带者72例,非携带者986例；Yqh+携带者中29例进行IVF助孕,43例进行ICSI助孕.结果 IVF治疗周期组,与非携带者相比,Yqh+携带者妊娠结局较差.Yqh+携带者组的受精率(50.05％vs.66.01％；P＜0.05；OR 0.61；95％ CI 0.49～0.57)、着床率(8.33％vs.20.87％；P＜0.05；OR 0.35；95％ CI 0.14～0.87)、优质胚胎率(44.70％vs.57.89％；P＜0.05；OR 0.59；95％ CI 0.43～0.80)和临床妊娠率(17.39％vs.39.59％；P ＜0.05;OR 0.32;95％ CI 0.11～0.96)明显降低.ICSI治疗周期组,Yqh+携带者与非携带者妊娠结局相似.两组间的周期取消率(4.65％vs.4.79％;P＞0.05；OR 0.97;95％ CI 0.22～4.35),受精率(77.29％vs.79.46％;P＞0.05;OR 0.88；95％ CI 0.69 ～ 1.12),卵裂率(94.36％vs.95.21％；P＞0.05；OR 0.84;95％ CI 0.51～1.38),着床率(25.30％vs.23.69％；P＞0.05；OR 1.09;95％ CI 0.65～ 1.84),优质胚胎率(52.22％vs.54.79％；P＞0.05；OR 0.90；95％ CI 0.58～1.39)和临床妊娠率(41.46％vs.39.35％；P＞0.05;OR 1.09;95％ CI 0.57 ～2.11)无明显差异.结论 Yqh+可能对男性生育能力有一定的影响；对于IVF治疗结局不良的Yqh+患者,ICSI受精可能会改善其助孕治疗结局.
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取卵日因手淫取精失败改行手术取精及时干预对于卵胞浆内单精子注射结局的影响
目的 使用促性腺激素探讨取卵日因手淫取精失败改行手术取精对卵胞浆内单精子注射(ICSI)结局的影响.方法 回顾性分析了2007年1月至2010年7月行ICSI治疗,在取卵日因男方手淫取精失败而改行手术取精(PESA/TESA)的病例共25例,对照组选取因梗阻性无精子症行手术取精的病例共215例.比较两组ICSI治疗的受精率、卵裂率、优胚率、种植率、临床妊娠率、流产率、活产率以及畸形率.结果 两组患者的基本情况:女方年龄、不孕年限、使用促性腺激素(Gn)的总量以及Gn的天数两组之间相比差异无统计学意义(P＞0.05).两组患者的妊娠情况:受精率、卵裂率、种植率、临床妊娠率、流产率、活产率两组之间相比差异无统计学意义(P＞0.05).两组患者的优胚率相比差异有统计学意义(P =0.032).两组的畸形率均为0.结论 (1)手术日体外取精失败,改行手术取精后行ICSI妊娠结局相似,说明取卵日手淫取精失败进行PESA/TESA及时干预是一种有效的方法,可以避免错失治疗的佳时机；(2)精神心理因素对于ICSI的妊娠结局有一定的影响,会造成受精率、卵裂率、优胚率、种植率以及临床妊娠率降低.
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IVF/ICSI中取卵后无胚胎可移植的原因探讨
目的 探讨取卵后无胚胎可移植的原因及应对方法,为今后类似病例助孕方式和处理方法的选择提供依据. 方法 对在本院生殖中心接受助孕治疗并行采卵术的无胚胎可移植的142对夫妇的原因及影响因素进行统计分析. 结果 2 324个取卵周期中无胚胎可移植的周期数是146个,占取卵周期总数的6.3％ (146/2324).146个无胚胎可移植周期中常规体外受精完全受精失败61个,占总数的41.8％ (61/146),是无胚胎可移植的主要原因,而其他原因中非正常受精、取卵失败、正常受精后受精卵不分裂、正常受精胚胎质量差、ICSI完全受精失败、取精失败分别占总数的20.5％ (30/146)、15.1％ (22/146)、8.9％ (13/146)、6.8％ (10/146)、5.5％ (8/146)、1.4％ (2/146).146个无胚胎可移植周期与同期有胚胎可移植周期总数比较,前者除了获卵数显著低于后者外,女方年龄、不孕年限、促性腺激素Gn天数和Gn用量均显著高于后者的(P＜0.05). 结论 IVF/ICSI中取卵后无胚胎移植的原因多而复杂,其中常规IVF受精失败是其主要原因.
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采用新鲜和冻融精子进行卵母细胞胞质内单精子注射的临床效果比较
目的 比较采用新鲜和冻融的睾丸及附睾精子进行卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的临床效果.方法 选择2006年9月-2007年5月因无精症于北京大学第三医院生殖医学中心行ICSI的患者208例,按患者意愿分为冻融组37例和新鲜组171例.冻融组在行ICSI前将冻存的睾丸或附睾精子解冻并复苏.观察冻融组睾丸和附睾精子的临床利用率;比较两组患者的临床结局(包括正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率及胚胎着床率等)和妊娠结局(包括流产率、分娩孕周及新生儿出生体重等).结果 (1)冻融组睾丸精子的临床利用率为92%(23/25),附睾精子为100%(12/12).(2)新鲜组患者的正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率及胚胎着床率分别为62.25%(973/1563)、78.9%(768/973)、44.4%(60/135)和29.3%(84/287),分别与冻融组[分别为64.53%(282/437)、79.1%(223/282)、46.9%(15/32)和33.3%(23/69)]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)新鲜组患者的流产率、单胎妊娠分娩孕周、双胎妊娠分娩孕周、单胎妊娠平均新生儿出生体重及双胎妊娠平均新生儿出生体重分别为11%(6/55)、(39.0±1.4)周、(36.8±1.7)周、(3409±393)g和(2584±266)g,分别与冻融组[分别为7%(1/15)、(38.7±0.6)周、(36.3±1.2)周、(3350±383)g和(2635±171)g]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 采用冻融的睾丸或附睾精子行ICSI安全、有效,值得在临床推广.
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血脂异常对多囊卵巢综合征患者IVF/ICSI妊娠结局的影响
目的 探讨血脂异常对多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精或卵母细胞胞质内单精子注射(IVF/ICSI)妊娠结局的影响.方法 选择南京医科大学第一附属医院2013年7月至2016年3月行IVF/ICSI、采用促性腺激素释放激素拮抗剂方案诱导排卵的PCOS不孕患者共468例,根据血清胆固醇、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平分为血脂异常组(108例)及血脂正常组(360例).回顾性分析两组患者的一般情况及临床妊娠结局,并采用分层分析及多因素logistic回归分析校正体质指数(BMI)的影响.结果 (1)血脂异常组与血脂正常组患者的基础资料:年龄、不孕年限、基础FSH、基础LH、基础雌激素水平等两组间比较均无差异(P＞0.05),但血脂异常组患者的BMI显著高于血脂正常组,分别为(25.0±3.0)、(23.1±3.0) kg/m2,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)两组患者的高评分胚胎率、hCG日子宫内膜厚度、hCG日孕激素及LH水平、中重度卵巢过度刺激综合征发生率、流产率,分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);血脂异常组患者的优势卵泡数、获卵数、hCG日雌激素水平、胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率均显著低于血脂正常组(P均＜0.05),促性腺激素(Gn)使用总量、Gn使用天数显著高于血脂正常组(P＜0.05).(3)分层分析显示,无论在BMI＜24 kg/m2还是BMI≥24 kg/m2,血脂异常组患者较血脂正常组,Gn使用总量、Gn使用天数均显著增高(P＜0.05);获卵数、hCG日雌激素水平有下降趋势,且在BMI≥24 kg/m2中两组有差异(P＜0.05);多因素logistic回归分析显示,即使校正了BMI,血脂异常仍然对胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率有负面影响(P＜0.05).(4)进一步分析临床妊娠者与未获得临床妊娠者的不同血脂组成成分显示,未获得临床妊娠者的TG水平显著高于妊娠者(P＜0.05),logistic回归分析也显示,TG水平升高与PCOS患者的临床妊娠率负相关(P＜0.05).结论 血脂异常的PCOS患者具有更高的BMI,增加了Gn的用量,降低了患者的胚胎种植率、临床妊娠率及活产率,特别是TG水平升高,对PCOS患者的IVF/ICSI结局有不良影响.
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青海地区不孕症患者基础促甲状腺素水平对IVF/ICSI结局的影响
目的 探讨青海地区不孕症患者基础促甲状腺素(bTSH)水平对体外受精(IVF)或卵母细胞胞质内单精子注射法(ICSI)治疗结局的影响.方法 前瞻性分析2012年1月1日至2013年12月31日青海省人民医院生殖中心282个IVF周期和93个ICSI周期,根据患者的bTSH水平分为4个区间(≤1.7、＞1.7～≤2.5、＞2.5～≤3.5、＞3.5 mU/L),观察不同bTSH水平不孕症患者行IVF/ICSI治疗后的种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、流产率、活产率等结局的差异.结果 (1)在375个IVF/ICSI周期中,bTSH水平与流产率呈正相关(r=0.42,P=0.04),与活产率和种植率呈负相关(r=-0.42、-0.28,P=0.04、0.03),而与获卵数、受精卵数、可移植胚胎数、优质胚胎数、生化妊娠率、临床妊娠率、移植当日子宫内膜厚度均无明显相关性(P＞0.05).(2)bTSH水平≤1.7、＞1.7～≤2.5、＞2.5～≤3.5、＞3.5 mU/L患者的种植率分别为28.7％、27.3％、37.7％、19.2％,活产率分别为80.9％、75.0％、82.7％、59.8％,流产率分别为19.0％、15.0％、16.7％、40.1％,4者的种植率、活产率、流产率分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),bTSH水平低的患者流产率较bTSH水平高者低,其种植率、活产率相对较高.结论 当bTSH水平＞3.5 mU/L时,不孕症患者的流产率升高,活产率、种植率降低,需关注IVF/ICSI治疗前患者的甲状腺功能变化.
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体内成熟与体外成熟的卵母细胞纺锤体位置及其与胚胎发育的关系
目的 研究体内成熟与体外成熟卵母细胞的纺锤体位置及其与胚胎发育的关系.方法 对134个体内成熟卵母细胞在卵母细胞胞质内单精子注射法(ICSI)操作时用纺锤体实时观察仪进行纺锤体位置的观察,体内成熟卵母细胞来自单纯因男性不育而进行ICSI治疗的患者15例(体内成熟组).另外对45个体外成熟的卵母细胞观察纺锤体位置,体外成熟卵母细胞来自因多囊卵巢综合征致不孕而进行治疗的患者5例(体外成熟组).纺锤体的位置按照其与第一极体之间的角度不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ级.并观察两组成熟卵母细胞的受精及其胚胎发育情况.结果 体内成熟组和体外成熟组患者的卵母细胞中可观察到纺锤体的分别占83.6%(112/134)和82.2%(37/45).体内成熟组患者卵母细胞纺锤体的位置Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ级分别为22.4%、55.2%、3.0%、3.0%、16.4%,体外成熟组则分别为17.8%、51.1%、8.9%、4.4%、17.8%,两组各级间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).在体内成熟组卵母细胞中,纺锤体离第一极体较近(Ⅰ级)者受精率较高(93.3%),显著高于其他各级(分别为73.0%、2/4、1/4、63.6%,P＜0.05).结论 体内成熟与体外成熟卵母细胞间纺锤体位置未见显著差异;纺锤体的位置与卵母细胞受精率有一定相关性.
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每取卵周期的累积活产率在IVF/ICSI妊娠结局评估中的价值
目的 以每取卵周期的累积活产率(CLBR)作为评价体外受精或卵母细胞胞质内单精子注射技术(IVF/ICSI)妊娠结局的指标,探讨不同卵巢刺激方案IVF/ICSI妊娠结局的影响因素.方法 回顾性分析2014年1月1日至2015年12月31日在南京医科大学第一附属医院接受IVF/ICSI治疗的不孕症患者,共6142个取卵周期,分析不同卵巢刺激方案(长方案、拮抗剂方案、温和方案)的临床及实验室指标,比较患者年龄、不同获卵数、可移植胚胎数对每取卵周期CLBR的影响.结果(1)长方案和拮抗剂方案患者的每取卵周期CLBR分别为69.0%(2004/2906)和67.4%(644/955),两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);温和方案患者每取卵周期的CLBR为53.2%(1215/2281),显著低于前两者(P均<0.05).(2)对不同年龄段的患者进行比较发现,对于20~25岁的患者,3种方案的每取卵周期CLBR均无差异(P均>0.05);而对于26~35岁的患者,长方案和拮抗剂方案的每取卵周期CLBR均显著高于温和方案(P均<0.05).(3)随着获卵数的增加,3种不同卵巢刺激方案患者的每取卵周期CLBR均呈上升趋势,当获卵数≥6个,每取卵周期的CLBR上升趋于平缓.按不同获卵数比较发现,在获卵数为0~4个时,拮抗剂方案每取卵周期的CLBR(50.0%)高于温和方案(37.0%);获卵数为5~9个时,长方案和拮抗剂方案的每取卵周期CLBR(分别为66.3%、65.6%)均高于温和方案(54.5%),分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);而当获卵数≥10个时,3种不同方案的每取卵周期CLBR均无差异(P均>0.05).(4)随着可移植胚胎数的增加,3种不同卵巢刺激方案患者每取卵周期的CLBR均呈上升趋势.(5)中~重度卵巢过度刺激综合征的发生率在长方案患者中(5.2%,152/2906)显著高于拮抗剂方案者(4.4%,42/955),拮抗剂方案显著高于温和方案者(1.5%,34/2281),分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 每取卵周期的CLBR是评估IVF/ICSI妊娠结局的重要指标,与常规单个移植周期的活产率相比更能反映辅助生殖技术的助孕效能.年龄、获卵数和可移植胚胎数是影响每取卵周期CLBR的重要因素.针对不同年龄和卵巢反应的患者,应设计个体化的促排卵方案,可获得较高的每取卵周期CLBR,减少药物费用和促排卵并发症的发生风险.
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双胚胎移植后发生双胎妊娠的影响因素分析
优胚胎发育速度评分高以及卵巢反应性好的患者发生双胎妊娠的风险较高,可尝试进行单胚胎移植.
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体外受精-胚胎移植与单精子卵胞浆内注射妊娠结局的比较与分析
目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和单精子卵胞浆内注射(ICSI)的妊娠结局及围产儿结局.方法回顾性分析1999年1月至2001年6月,行IVF-ET获得妊娠的143例(IVF-ET组)及行ICSI获得妊娠的173例(ICSI组)的临床资料,比较两组的生化妊娠、流产、异位妊娠、多胎分娩发生率及新生儿出生体重、胎儿孕龄、先天性畸形、围产儿死亡率的情况;并对两组单胎、双胎妊娠的结局分别进行比较.结果 IVF-ET组与ICSI组两组患者的年龄、不孕年限、产次、移植胚胎数、流产率(16.1%、13.3%)、分娩率(65.7%、74.6% )、多胎分娩发生率(27.3%、31.8%)比较,差异均无显著性(P>0.05).单胎妊娠中,IVF-ET组与ICSI组低体重儿的发生率分别为 1.8%、6.8%,小于胎龄儿的发生率分别为7.3%、8.1%,早产的发生率分别为 5.5%、14.9%;双胎妊娠中,IVF-ET组与ICSI组低体重儿的发生率分别为34.2%、 42.6%,小于胎龄儿的发生率分别为30.3%、38.0%,早产的发生率分别为42.1%、46.3%.两组间上述各发生率比较,差异均无显著性(P>0.05).但双胎妊娠中,上述各发生率均明显高于单胎妊娠.两者比较,差异均有极显著性(P<0.01).先天性畸形的发生率,IVF-ET组与ICSI组分别为2.2%、1.6%.结论两组的妊娠结局、围产儿结局相似;双胎是引起低体重儿、小于胎龄儿及早产的主要原因.
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经皮睾丸精子抽吸术结合卵浆内单精子注射治疗严重男性因素不育的研究
目的了解经皮睾丸精子抽吸术(PTSA)结合卵浆内单精子注射(ICSI) 技术治疗严重男性因素不育的治疗效果.方法于1998年10月10日至2000年12月31日,我中心采用PTSA结合ICSI技术治疗162对严重男性因素不育的夫妇,短方案超排卵,对处于细胞分裂中期(MⅡ期)的成熟卵母细胞行ICSI.结果 185个周期共注射1 517个MⅡ期卵母细胞,其中990个正常受精,正常受精率为65.3%,移植胚胎周期152个,54例妊娠,临床妊娠率为35.5%.结论 PTSA结合ICSI技术为严重男性不育症患者提供了一种快速、方便、无痛、有效的治疗方法.
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超排卵周期卵巢反应性与体外受精、卵胞浆内单精子注射结局的关系
目的探讨超排卵周期中卵巢反应性与体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)结局的关系.方法回顾分析1999年3月至2000年12月间,474对不孕夫妇在本中心按常规方法行IVF-胚胎移植(ET)及ICSI治疗的510个周期.采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)/高纯促卵泡激素(FSH-HP)/人绒毛膜促性腺激素(hCG)长、短方案促排卵,以注射hCG日血清雌二醇(E2)>11 010 pmol/L(160个周期)为A组,获卵数>15个(148个周期)为B组,A、B两组为卵巢高反应组;E2≤11 010 pmol/L(350个周期)为C组,获卵数≤15个(362个周期)为D组,C、D两组为正常反应组.结果高反应组与低反应组间,年龄、不孕时间、基础FSH水平及FSH用量差异有显著性(P<0.01,P<0.05).A组着床率、妊娠率分别为18.9%(94/498)与38.8%(62/160),C组分别为20.7%(212/1 026)与 41.4%(145/350),两组比较,差异无显著性(P>0.05);B组分别为22.5%(103/457)与46.6%(69/148),D组分别为19.0%(203/1 067)与38.1%(138/362),两组比较,差异无显著性(P>0.05).卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率,A组为6.9%(11/160),C组为2.6%(9/350),B组为8.1%(12/148),D组为2.2%(8/362),A组与C组比较、B组与D组比较,差异均有极显著性(P<0.01).结论高E2水平或获取多个卵子不影响IVF、ICSI的结果,但OHSS发生率高.
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兔卵母细胞胞质内单精子注射后二次辅助激活对兔卵母细胞发育能力的影响
目的 观察兔卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)后2次辅助激活对兔卵母细胞发育能力的影响.方法 采集兔卵母细胞500枚,玻璃化冷冻后解冻,行ICSI后培养1 h,将存活的156枚卵母细胞分为10634激活1次组(30枚,加入浓度为5 μmoL/L的钙离子载体10634激活5 min)、氯化锶激活1次组(26枚,加入浓度为10 mmol/L的氯化锶激活20 min)、10634激活2次组(33枚,加入浓度为5μmoL/L的钙离子载体10634激活5 min后培养30 min,采用同样方法再次激活)、氯化锶激活2次组(28枚,加入浓度为10 mmol/L的氯化锶激活20 min后培养30 min,采用同样方法再次激活)和对照组(39枚,未加入任何激活剂)共5组,观察各组卵母细胞的受精率、卵裂率和囊胚形成率.结果 各组兔卵母细胞的受精率、卵裂率和囊胚形成率,氯化锶激活1次组分别为54%、27%和8%,均高于10634激活1次组(分别为33%、17%和3%)和对照组(分别为33%、18%和3%),但差异均无统计学意义(P>0.05);10634激活2次组分别为82%、55%和15%,均高于10634激活1次组,差异均有统计学意义(P<0.05);氯化锶激活2次组的受精率(61%)高于氯化锶激活1次组,卵裂率和囊胚形成率(分别为21%和7%)均低于氯化锶激活1次组,但差异均无统计学意义(P>0.05);10634激活2次组的受精率、卵裂率和囊胚形成率均高于氯化锶激活2次组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 冻融的兔卵母细胞ICSI后行2次辅助激活,可能会提高卵母细胞的受精率和胚胎早期的发育能力,但是激活后的卵母细胞分裂速度较快.
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钙离子载体A23187联合嘌呤霉素激活行卵母细胞质内单精子注射后未受精卵母细胞的研究
目的观察钙离子载体A23187联合嘌呤霉素对卵母细胞质内单精子注射(ICSI)后未受精卵母细胞的激活作用.方法将体外成熟(IVM)-ICSI和常规ICSI后未受精卵母细胞,按行ICSI后体外培养的时间,分为IVM-ICSI 22 h组(33个)、IVM-ICSI 44 h组(18个)、ICSI 44 h组(37个)、ICSI 68 h组(25个),分别采用钙离子载体A23187联合嘌呤霉素进行激活处理.应用荧光原位杂交(FISH)技术,对来源于双原核合并第二极体合子的激活胚胎进行性染色体分析.结果钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能激活行ICSI后22～68 h未受精的卵母细胞.其中IVM-ICSI 22 h组卵母细胞激活率为88%(29/33)、总卵裂率为62%(18/29)、4细胞阶段胚胎发育率为28%(5/18),1个胚胎发育到桑椹胚阶段;而IVM-ICSI 44 h组、ICSI 44 h组、ICSI 68 h组的未受精卵母细胞激活率分别为56%(10/18)、65%(24/37)、52%(13/25);总卵裂率分别为20%(2/10)、42%(10/24)、46%(6/13),仅ICSI 44 h组有1个胚胎发育到4细胞阶段.FISH对激活胚胎的分析显示,4个胚胎为XX,9个胚胎为XY.结论钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效激活行ICSI失败的卵母细胞;行ICSI后22 h内,是对未受精卵母细胞进行辅助激活较为理想的时机.激活的双原核合并第二极体胚胎中有雄原核的存在.
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卵子玻璃化冷冻的临床应用
目的 探讨卵子玻璃化冷冻的临床应用可行性.方法 选择2011年7月至2016年5月,于江苏省苏北人民医院生殖医学中心采用玻璃化冷冻技术保存的卵子,进行卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的13例患者,共计15个冷冻卵子ICSI周期为研究对象,纳入冷冻卵子组.选择同期于本院生殖医学中心进行新鲜卵子ICSI的252例患者,共计288个新鲜卵子ICSI周期作为对照,纳入新鲜卵子组.回顾性分析2组ICSI周期的临床病例资料,统计学比较2组受试者一般临床资料,受精情况及胚胎质量,以及临床妊娠结局.本研究遵循的程序符合江苏省苏北人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试者知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.结果 ①2组患者的年龄、不孕年限、人体质量指数(BMI)、ICSI卵子数比较,差异均无统计学差异(P＞0.05).②冷冻卵子组中,卵子解冻后复苏存活率为87.1％(108/124).冷冻卵子组卵裂率、优质胚胎率,均较新鲜卵子组显著降低,2组卵裂率与优质胚胎率分别为89.0％比98.2％与35.4％比50.7％,2组比较,差异均有统计学意义(x2=27.274,P＜0.001;x2 =5.871,P=0.016).2组正常受精率、可利用胚胎率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).③2组平均移植胚胎数比较,差异无统计学意义(P=0.822).冷冻卵子组体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期的胚胎种植率、活产率,均显著低于新鲜卵子组IVF-ET周期,并且差异均有统计学意义(x2=5.534,p=o.017;x2=7.005,P=0.011);2组IVF-ET周期的临床妊娠率、自然流产率分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 卵子玻璃化冷冻、解冻后,再进行IVF-ET,可获得一定临床妊娠率,但卵子玻璃化冷冻技术仍会对卵子质量产生影响,进而影响胚胎质量和临床妊娠结局,此技术有待进一步改善.因本研究纳入样本量相对较小,卵子玻璃化冷冻技术保存的有效性,仍有待多中心、大样本、随机对照研究进一步证实.
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不同治疗方案在体外受精-胚胎移植患者中的临床疗效比较
目的 探讨采用长方案与超长方案对不孕症患者进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的临床疗效.方法 选择2012年7月1日至2017年1月31日,在济宁市第一人民医院生殖中心接受IVF/卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)-ET辅助生殖治疗的386例不孕症患者为研究对象.按照受试者接受GnRH-a方案的不同,将其分为长方案组(n=249)与超长方案组(n=137).长方案组与超长方案组受试者年龄≤30岁者分别为192、30例,>30～35岁者分别为21、68例,≥35岁者分别为36、39例.采集所有受试者的年龄、人体质量指数(BMI)、促性腺激素(Gn)使用剂量、Gn使用时间、获卵数、移植胚胎数、生化妊娠率、临床妊娠率、自然流产率和异位妊娠率.采用独立样本t检验,对不同年龄段受试者中,2组受试者的年龄、BMI、Gn使用剂量、Gn使用时间、移植胚胎数等进行比较.采用秩和检验,对不同年龄段受试者中,2组受试者获卵数等进行比较.采用x2检验,对不同年龄段受试者中,2组受试者的生化妊娠率、临床妊娠率、自然流产率和异位妊娠率等进行比较.结果 ①不同年龄段受试者中,2组受试者的年龄、BMI等一般临床资料分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).②年龄≤30岁不孕症患者中,超长方案组与长方案组患者Gn使用剂量分别为(3290.0士1113.6)g vs(1848.2士684.8)g,Gn使用时间分别为(12.3士2.3)d vs(9.7士1.9)d,获卵数分别为(2.1士0.3)个vs(2.0士0.2)个,超长方案组上述指标均大于或长于长方案组,并且差异均有统计学意义(t=5.489,P<0.001;t=6.254,P<0.001;t=3.072,P=0.016).超长方案组患者自然流产率为3.3％,显著低于长方案组的20.6％,并且差异亦有统计学意义(x2=4.969,P=0.026).③年龄>30～35岁不孕症患者中,超长方案组与长方案组患者Gn使用剂量分别为(3800.0士1310.5)g vs(2149.0士603.8)g,Gn使用时间分别为(12.7士2.9)d vs(9.5士1.9)d,超长方案组Gn使用剂量和时间均大于或长于长方案组,并且差异均有统计学意义(t=5.632、4.991,P<0.001).④年龄≥35岁不孕症患者中,超长方案组与长方案组患者Gn使用剂量分别为(3991.7士944.5)g vs(2701.7士987.3)g,Gn使用时间分别为(12.4士2.9)d vs(9.7士1.8)d,获卵数分别为7个(4～9个)vs 10个(8～15个),超长方案组Gn使用剂量和时间均大于或长于长方案组,获卵数少于长方案组,并且差异均有统计学意义(t=7.226,t=4.872,Z=5.121;P<0.001).结论 对于年龄≤30岁不孕症患者,建议应用超长方案进行IVF-ET治疗.对于年龄>30～35岁不孕症患者,应用超长方案进行IVF-ET治疗无明显优势,故建议应用长方案治疗.对于年龄≥35岁不孕症患者,应慎重使用超长方案治疗.
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部分卵母细胞胞浆内单精子注射周期中影响其常规体外受精受精率的相关因素分析
目的 探讨部分卵母细胞胞浆内单精子注射(half-ICSI)周期中,影响该周期常规体外受精(IVF)受精率的相关因素.方法 选择2010年8月至2012年8月,于四川大学华西第二医院生殖医学中心接受half-ICSI助孕的180例不孕患者的共计180个half-ICSI周期为研究对象.按照常规IVF受精率高低,将ICSI受精率＞50％且常规IVF受精率≤25％的46个周期,纳入低受精率组;ICSI受精率＞50％且常规IVF受精率＞50％的134个周期,纳入高受精率组.回顾性分析可能影响常规IVF受精率的因素,包括女方年龄及不孕年限等9项,以及涉及男方的包括精子浓度和前向运动精子百分率等8项,并对这17项因素进行单因素分析.根据临床经验及上述单因素分析结果,将精子浓度、前向运动精子百分率、弱精子症、畸形精子症及正常形态精子百分率等5项影响常规IVF受精率的相关因素,进行多因素非条件logistic回归分析,了解其独立危险因素.结果 ①低受精率组男方精子浓度、前向运动精子百分率及正常形态精子百分率均较高受精率组低,而弱精子症和畸形精子症患者所占比例,则较高受精率组高,且差异均有统计学意义(P＜0.05).两组女方9项因素,包括年龄、不孕年限、不孕类型构成比、既往夫精人工授精(AIH)助孕率、子宫内膜异位症(EMS)发生率、多囊卵巢综合征(PCOS)发生率、自然流产率,以及年龄≥35岁者所占比例、不孕年限≥3年者所占比例比较,以及男方其他3项因素,包括精子总数、少精子症患者所占比例及精子全部畸形患者所占比例比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).②多因素非条件logistic回归分析结果显示,影响half-ICSI周期常规IVF受精率的独立危险因素为男方弱精子症(OR=6.476,95％CI:1.621～25.877,P＜0.05).结论 男方弱精子症可能增加half-ICSI周期常规IVF受精失败风险,而男方畸形精子症及女方不孕相关因素,不能确定为half-ICSI或ICSI指征.
