首页 > 文献资料
-
miR-451与脑胶质瘤
脑肿瘤中的胶质瘤为颅内发病率高的恶性肿瘤，并具有高度恶性和侵袭性生长的生物学特性，治疗后常常迅速复发。近年来 miRNA 针对恶性肿瘤的重要作用成为医学界重大发现，这使得在基因分子水平上对胶质瘤的有效治疗获得希望。 miR-451针对众多恶性肿瘤均存在明确的生物学活性，国内外针对胶质瘤的研究也较为突出，能对肿瘤侵袭性产生明显抑制作用，显示了 miR-451在针对胶质瘤的诊断及治疗上拥有重要的研究价值。
-
miR-451对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响
目的:探讨miR-451对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法:化学合成miR-451 mimics,脂质体包裹转染EC9706细胞为miR-451组,同时设立无关序列(Scramble-miR)对照组、脂质体对照组和空白对照组.转染后48 h,荧光定量RT-PCR检测miR-451表达量的变化,Western blot检测Bc1-2、AKT和磷酸化AKT蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变;MTT法检测转染后1、2、3、4、5、6d各组细胞增殖率.结果:miR-451组的miR-451表达水平显著上调(P＜0.01,F=69.26),为空白对照组的15.84倍;miR-451组细胞Bc1-2、AKT和磷酸化AKT蛋白表达均显著下调(P＜0.05,F=5.83)；miR-451组细胞凋亡率为12.07％±1.12％,与3个对照组比较显著升高(p＜0.01,F=26.72)；miR-451组平均侵袭细胞数为47.4±7.4,与3个对照组比较显著降低(P＜0.01,F=34.55).miR-451组细胞的生长在转染后2d出现显著抑制(P＜0.05,F=5.95),并且随时间的延长而日益显著.结论:上调miR-451表达可抑制食管癌EC9706细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡.
-
膀胱癌组织miR-451表达及其与E-cadherin和Vimentin表达相关性
目的 侵袭与转移是影响膀胱癌患者疗效及导致死亡的主要因素,其具体机制尚不明确;研究表明miR-451与多种肿瘤的发生、发展密切相关.本研究分析miR-451在膀胱癌中的表达及其临床意义,观察miR-451表达改变对上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)和间质型骨架蛋白(Vimentin)表达的影响.方法 收集2012-01-01-2015-12-31江西省人民医院收治的47例膀胱癌患者的癌组织及10例正常膀胱组织标本,运用实时荧光定量PCR (quantitative Real-time PCR,qPCR)检测miR-451的表达及运用免疫组织化学技术检测E-cadherin和Vimentin的表达,分析miR-451表达与膀胱癌临床病理因素,以及E-cadherin和Vimentin表达的关系.利用脂质体将miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染入膀胱癌5637细胞,采用蛋白质印迹法检测E-cadherin和Vimentin的表达.结果 miR-451在膀胱癌组织中的表达为0.14±0.017,明显低于正常膀胱组织(1.0),其表达和膀胱癌临床分期及病理分级密切相关,P＜0.01;E-cadherin在膀胱癌组织较正常组织中低表达,分别为36.17％和84.50％;Vimentin在膀胱癌组织及正常膀胱黏膜层中表达不明显.癌组织中miR-451表达与E-cadherin表达正相关,r=0.67,P=0.023;miR-451过表达后,E-cadherin蛋白表达上调(P＜0.001),Vimentin蛋白表达无明显改变,P＞0.05.结论 MiR-451是膀胱癌潜在的调控子,可能是通过调控E-cadherin蛋白表达进而影响膀胱癌发生及进展.
关键词： 膀胱癌 miR-451 E-cadherin Vimentin -
miR-451对U251细胞迁移运动能力的影响及其潜在机制
目的 观察miR-451对人脑胶质瘤细胞系U251迁移运动能力的影响,探讨miR-451影响U251细胞运动的潜在机制.方法 qRT-PCR检测人脑胶质母细胞瘤组织标本及正常脑组织标本miR-451相对表达量.利用U251细胞系进行miR-451对人脑恶性胶质瘤细胞迁移运动能力影响的体外实验研究,实验分为转染miR-451抑制物组(miR-451 inhibitor)和空白对照组(N.C.).运用脂质体Lipofetmiane 2000将miR-451抑制物序列(5'-AACUCAGUAAUGGUAACGGUUU-3')转染进入U251细胞中,同时设立空白对照组.应用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验观察各组细胞迁移运动能力的强弱,明确miR-451对U251细胞迁移能力的影响.Western blot检测各组细胞GTP-Rac1及Rac1蛋白水平,从其表达水平与miR-451相对表达量的相互关系探讨miR-451影响U251细胞迁移运动能力的可能机制.结果 qRT-PCR检测显示胶质母细胞瘤组织标本中miR-451的相对表达量较对照脑组织标本降低(P＜0.01).Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验发现转染miR-451抑制物组U251细胞迁移运动能力较对照组显著提高(P＜0.01).Western blot检测表明转染miR-451抑制物组U251细胞中GTP-Rac1含量较对照组升高(P＜0.01)而Rac1蛋白水平没有差异(P＞0.05).结论 miR-451可通过抑制U251细胞中Rac1的激活限制细胞迁移运动能力.
-
miR-451抑制NF-κB信号通路并拮抗骨肉瘤侵袭和上皮间质转化的研究
目的 微小RNA(micro RNA)是一类长度约20bp的非编码RNA,在多种疾病包括肿瘤的发生发展中发挥重要作用.miR-451在多种恶性肿瘤中呈低表达,并且与肿瘤发生发展密切相关.已有研究发现miR-451在骨肉瘤组织中表达显著降低,且miR-451低表达提示患者预后较差,总生存期和无瘤生存期较短.但是,miR-451促进骨肉瘤发生发展的分子机制尚未阐明.方法 本研究检测了miR-451过表达对骨肉瘤细胞侵袭和上皮间质转化(EMT)的作用.我们首先构建miR-451过表达的慢病毒载体,然后将慢病毒转染U2OS细胞以提高miR-451的表达水平;采用划痕试验、Transwell实验观察miR-451过表达对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响;采用Westernblot实验检测miR-451过表达对上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、Vimentin以及转录因子NF-κB活性的影响.结果 miR-451过表达在体外可以显著抑制U2OS细胞迁移和侵袭,可以上调U2OS细胞内E-cadherin蛋白表达而下调Vimentin蛋白表达,并且可以显著下调NF-κB关键亚单位IKK-β蛋白水平.结论 miR-451可能通过调控NF-κB活性从而发挥其抑制骨肉瘤细胞迁移、侵袭和EMT作用.
-
血浆miR-451水平与子宫内膜异位症的关系
目的:探讨血浆微小RNA451(miR-451)与子宫内膜异位症(EMs)的关系,并观察miR-451对体外培养的子宫内膜基质细胞的增殖和迁移的作用.方法:选取2014年1月-2015年5月于深圳市罗湖区人民医院就诊的EMs患者(EMs组)54例,正常对照组59例,采血并提取血浆总RNA.采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)检测血浆miR-451的表达强度.通过CCK-8实验检测miR-451对异位子宫内膜基质细胞增殖的调控作用;采用损伤愈合实验探讨过表达miR-451后异位子宫内膜基质细胞的迁移变化.结果:EMs患者血浆miR-451表达水平低于对照组[(0.53±0.14) vs.(1.00±0.20),t=14.50,P＜0.01];过表达miR-451后EMs基质细胞的相对迁移活性下降[(1.00±0.12) vs.(0.74±0.02),t=4.73,P=0.001].结论:EMs患者血浆miR-451水平减低;miR-451可能通过抑制异位内膜基质细胞增殖和迁移发挥作用.
-
miR-451在胃癌组织中的表达及其临床意义
目的：研究miR-451在胃癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集胃癌组织标本92例，癌旁正常组织47例，制成组织芯片。采用原位杂交技术检测胃癌组织及癌旁组织中miR-451的表达情况，分析miR-451在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理参数以及预后的关系。结果 miR-451在胃癌组织中的高表达率比癌旁正常胃黏膜组织明显降低（38.04%vs 76.60%，χ2=18.503，P＜0.001）。Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者miR-451的高表达率低于Ⅰ~Ⅱ期胃癌患者（27.3%vs 54.1%，P=0.009），有淋巴结转移胃癌组织中miR-451的高表达率亦低于无淋巴结转移者（27.1%vs 57.6%，P=0.004），而不同年龄、性别、组织分化程度、T分期患者间miR-451高表达率差异无统计学意义（P>0.05）。miR-451高表达者总生存率明显高于低表达者（69.2%vs 39.1%，P=0.003）。结论 miR-451与胃癌的恶性转变、浸润转移以及预后明显相关，可能是胃癌新的潜在诊断和预后分子标志物及治疗靶点。
-
miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响
目的 研究miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响.方法 实验分为普通组、增强组和抑制组,增强组和抑制组肝癌MHCC97细胞分别转染miR-451的模拟物mimics和阻遏物inhibitors,普通组常规培养.采用RT-PCR法检测3组肝癌细胞中miR-451和AMPK/mTOR、Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、胰岛素样生长因子(IGF-1)表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测3组肝癌细胞增殖情况,通过检测3组细胞葡萄糖摄取和乳酸分泌情况评估肝癌细胞糖酵解情况.结果 增强组肝癌细胞中miR-451表达量明显高于普通组(P<0.05),抑制组肝癌细胞中miR-451表达量明显低于普通组(P<0.05).MTT结果显示转染后各时间点增强组吸光度(OD)明显低于普通组和抑制组(P均<0.05).转染后增强组肝癌细胞mTOR、Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1 mRNA表达量和葡萄糖消耗值、乳酸分泌值均明显低于普通组和抑制组(P均<0.05),而AMPK mRNA表达量明显高于普通组和抑制组(P均<0.05).结论 miR-451参与调控肝癌细胞增殖及糖酵解,其调控机制可能通过影响AMPK/mTOR信号通路,进而影响细胞中Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1的表达而实现.
-
胃癌组织中miR－451与MIF的表达及与临床病理的关系
目的：探讨胃癌组织中microRNA－451（miR－451）与巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的表达及与临床病理的关系。方法收集2013年3月至2014年3月该院接受治疗的30例胃癌患者，取其肿瘤及肿瘤旁相关组织，采用RT－PCR法检测组织内的miR－451与MIF的表达水平，并分析其与胃癌临床病理的关系。结果肿瘤组织中的 miR－451相对表达为（0．287±0．143），显著低于肿瘤旁组织的（0．520±0．257）（ t＝－4．021， P＜0．05）；肿瘤组织中的MIF相对表达为（1．542±0．023），显著高于肿瘤旁组织的（0．631±0．027）（t＝－23．183，P＜0．05）；miR－451与 MIF的相对表达呈现显著负相关性（t＝－0．721，P＜0．05）；肿瘤组织中miR－451及MIF与胃癌的组织类型（高、中、低分化）、TNM 分期（Ⅰ＋Ⅱ、Ⅲ＋Ⅳ）、浸润深度（T1＋T2、T3＋T4）及淋巴结转移（有、无）相关（均P＜0．05）。结论胃癌组织中miR－451及 MIF的表达与胃癌的组织类型、TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移相关，推测miR－451反向抑制 MIF，进一步调控胃癌在人体内的发生及发展。
关键词： 胃癌组织 miR-451 巨噬细胞游走抑制因子 表达 临床病理 -
MiR-451在肺癌细胞A549及肺癌癌组织中的表达及其意义
目的:观察微小RNA (miRNA) mir-451在肺癌组织、肺癌细胞株A549中的表达,同时检测该miRNA在正常肺组织及肺细胞癌组织中的表达,探讨其在肺癌发生及发展中的作用和意义.方法:应用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测mir-451在正常细胞株及肺癌细胞株中的表达,同时收取肺细胞癌手术患者正常组织、癌周组织、癌组织,检测其表达并分析其意义.结果:mir-541在肺癌细胞(A549)中的表达比正常肺细胞显著降低,分别为0.294±0.066和0.894±0.023,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),在癌组织中表达显著低于正常组织与癌周组织,分别为0.124±0.002、0.870±0.034、0.896±0.008,差异有统计学意义(P＜0.05),正常组织及癌周组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:mir-145在肺癌细胞及肺癌组织中的低表达,可能与肺癌发生和发展密切相关,并可能作为肺癌的诊断及预后的指标.
-
miR-451靶向调控肾小球系膜细胞Ywhaz基因的表达
目的 探讨miR-451对肾小球系膜细胞Ywhaz基因表达的靶向调控.方法 应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3'UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTM vector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-Ywhaz-3'UTR.将miR-451 mimics和NC mimics分别转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,将miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,采用Real-time RT-PCR和Western blot法检测miR-451和Ywhaz的表达水平；将miR-451 mimics和NC mimics分别与pmiR-Ywhaz-3'UTR共转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别与pmiR-Ywhaz-3'UTR共转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,检测各组细胞荧光素酶活性.结果 Ywhaz基因3'UTR区有11个碱基与miR-451种子序列匹配,其中7个碱基呈高度保守性；荧光素酶报告质粒经测序鉴定构建正确；miR-451在miR-451 mimics组呈高表达,在miR-451 inhibitor组表达降低；miR-451可抑制Ywhaz的蛋白表达；荧光素酶活性检测发现,miR-451可通过与Ywhaz3'UTR的结合,抑制Ywhaz的表达.结论 miR-451可直接靶向糖尿病相关基因Ywhaz,抑制其蛋白表达,为进一步研究miR-451调控早期糖尿病肾病发生发展的机制提供了依据.
-
miR-451与人类肿瘤关系的研究进展
MicroRNAs (miRNA)是一类在转录后水平调控基因表达的小分子非编码RNAs,通过调节细胞的增殖、分化、凋亡使机体维一个动态平衡.近年来,大量研究表明许多miRNA可作为原癌基因或者抑癌基因参与肿瘤的发生、发展,进一步研究发现,通过检测和调控这些miRNA,可用于肿瘤的早期诊断和治疗.近一系列研究发现miRNA-451(miR-451)在许多肿瘤中存在差异性表达,与这些肿瘤的发生、发展、治疗有着密切的联系.本文对人类肿瘤中miR-451表达、调控的相关研究做一综述,为miR-451在肿瘤的诊断、治疗及预后中的应用提供重要资料.
-
miR-451抑制肝癌HepG2细胞增殖及其在肝癌诊断和预后中的作用
目的:寻找用于肝癌诊断的miRNA分子靶标,探讨其在肝癌细胞增殖及细胞周期中的作用及其机制.方法:通过对TCGA数据库中377例肝癌样本和37例癌旁样本的miRNAs表达数据资料进行统计分析,得到一组包含33个差异表达的miR-NA.对差异表达的miRNA采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)和Kaplan-Meier生存分析进行进一步的筛选,同时结合现有文献终选择miR-451作为研究目标.向人肝癌细胞株HepG2转染pLVX-shRNA2-miR-451,使之过表达miR-451,通过CCK-8细胞增殖实验检测其对HepG2细胞增殖能力的影响,用流式细胞术观察对HepG2细胞细胞周期的影响.结果:miR-451在肝癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织[(473.40±390.24) vs(1 990.47±2 118.04),P＜0.05],且可以作为肝癌诊断的标志物,ROC值为0.91(敏感度0.89,特异性0.87).体外实验结果表明,过表达miR-451后肝癌HepG2细胞增殖能力明显降低[48 h:(0.69±0.04)vs(1.08±0.05);72 h:(0.76±0.07) vs (1.52±0.02);均P＜0.01],大量细胞被阻滞于S期(P＜0.05).结论:miR-451不但可以作为诊断肝癌和指示预后的生物标志物,还具有抑制肝癌细胞增殖的作用.
-
K562细胞红系分化过程中miR-451表达的变化
目的:观察K562细胞红系分化过程中miR-451表达的变化,探讨miR-451在红细胞(RBC)形成过程中的作用.方法:应用Northern印迹法分析小鼠不同组织细胞(肝、骨髓、红细胞、白细胞)及人RBC、鸡RBC中miR-451的表达情况.采用氯高铁血红素(hemin,50 μmol/L)诱导K562细胞红系分化,诱导36 h后应用联苯胺染色及血红蛋白mRNA RT-PCR鉴定K562细胞红系分化结果,采用Northern印迹法及茎环RT-PCR分析K562细胞经hemin诱导不同时间点(24、48、72、96 h)miR-451表达的变化.结果:除红细胞外,小鼠白细胞、肝脏及骨髓Northern印迹均未检测到miR-451表达;人RBC及具有细胞核的鸡RBC亦检测到miR-451表达.小鼠及人RBC检测到2种miR-451,发现了1条较Sanger中心报道的序列3′端多1个尿嘧啶的miR-451序列.50 μmol/L hemin诱导后K562细胞出现红系分化,与诱导前相比,诱导36 h后联苯胺染色阳性细胞增多(P＜0.05),γ、δ及ε血红蛋白表达增加(P＜0.05).Northern印迹未能检测到K562细胞诱导前后miR-451表达变化,但更敏感的茎环RT-PCR分析显示,诱导前K562细胞本身低丰度表达miR-451,hemin诱导24 h后,miR-451表达丰度开始增加,随着血红蛋白(δ-globin)表达增加,miR-451表达进一步增加,72 h达高峰.结论:miR-451是红系分化终末特异高表达的miRNA,在人及小鼠RBC中均存在相差1个碱基的2种序列,其在K562细胞红系分化过程中表达升高.
-
miR-451与造血细胞分化和肿瘤相关性的研究进展
miRNA是广泛存在于真核生物的一种内源性的小分子RNA,作为一种关键因素与肿瘤的发生、发展及细胞分化密切相关.miR-451在造血细胞成熟分化及维持红细胞稳定中起着关键的调控作用,并在胶质瘤、胃肠癌、肺癌等多种肿瘤组织中明显低表达.上调miR-451可以显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,增加肿瘤细胞的凋亡率,提高肿瘤放、化疗敏感性等诸多生物学效应.本文对miR-451与造血细胞分化及肿瘤发生发展的相关研究进展作一综述.
-
miR-451及MIF在大肠癌和大肠腺瘤中的表达及临床意义
目的:检测大肠癌及大肠腺瘤组织中miR-451及巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的表达水平,并分析其与大肠癌相关临床病理因素的关系.方法:收集25对大肠癌组织和大肠癌旁组织,10例大肠腺瘤组织,应用RT-PCR方法检测miR-451的表达水平(以U6为对照),应用免疫组化检测MIF蛋白的表达情况,并分析二者与大肠癌相关临床病理因素的关系.结果:miR-451在大肠癌及大肠腺瘤组织中明显下调(P＜ 0.01,P＜0.05).其中在大肠癌组织中上调6例,下调19例,下调比率76％(19/25).在大肠腺瘤组织中上调3例,下调7例,下调比率70％(7/10).MIF蛋白在大肠癌组织中阳性表达18例,阳性率72％,在大肠腺瘤组织中阳性表达5例,阳性率50％；癌旁组织阳性表达8例,阳性率32％,差异有统计学意义(P＜0.05),并且miR-451与MIF表达水平与大肠癌的分化相关(P＜0.05),与年龄、性别、Dukes分期、组织类型、浸润深度、淋巴结转移等无明显相关.结论:miR-451在大肠癌组织及大肠腺瘤组织中低表达,可能通过抑制MIF负向调控了大肠癌的发生和发展.
-
miR-451与MIF在胃癌组织中表达的相关性研究
目的观察 miR-451与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集25例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR法检测miR-451及MIF mRNA的相对表达水平,分析其相关性并探讨与胃癌相关临床因素的关系。结果miR-451在胃癌组织中明显低表达(P<0.01),而MIF mRNA在胃癌组织中明显高表达(P<0.01),在胃癌组织中,miR-451与 MIF mRNA 表达呈显著负相关( P <0.01),miR-451及 MIF mRNA 与胃癌的分化程度、TNM 分期、浸润深度及淋巴结转移相关(P <0.01)。结论miR-451及MIF mRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,miR-451可能通过抑制MIF负向调控了胃癌的发生、发展作用。
关键词： 胃癌 微小RNA miR-451 巨噬细胞游走抑制因子 -
MiR-451对癌症诊断价值的Meta分析
目的：评价MiR-451在癌症诊断中的价值。方法检索Pubmed，Elsevier外文数据库以及中国知网、维普、万方等中文数据库2015年10月之前发表的MiR-451用于诊断癌症的相关文献；采用Meta Disc 1.4软件对统计数据进行分析，通过计算合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比以及受试者工作特征曲线（sROC曲线）等指标综合分析评价MiR-451对癌症的诊断价值；采用stata 12.0软件分析纳入的参考文献是否存在发表偏倚。结果收集文献123篇，其中8篇参考文献纳入研究，样本量为927例，其中病例组557例，对照组370例。异质性检验显示纳入研究的文献有异质性，采用随机效应模型计算合并灵敏度为0.831，合并特异度为0.865，合并PLR为4.971，合并NLR为0.191。合并DOR为29.671。SROC曲线显示AUC为0.9151，Q指数为0.8478。亚组分析显示。盲法合并敏感度为0.768，合并特异度为0.848，合并PLR为4.242，合并NLR为0.296，AUC为0.8633。非盲法组合并敏感度为0.945，合并特异度为0.9898，合并PLR为7.914，合并NLR为0.075，AUC为0.9770。绘制漏斗图提示已有的研究存在发表偏倚的可能性小。结论 MiR-451诊断癌症有较高的灵敏度和特异度，可作为一项潜在的筛查生物标记物用于辅助诊断癌症。
-
miR-451对胶质瘤LN229细胞YWHAE表达的影响
目的 观察micro RNA-451(miR-451)对胶质瘤LN229细胞YWHAE表达的影响,旨在验证YWHAE基因为miR-451的直接作用靶点.方法 将细胞分为miR-451转染组、无义序列组、对照组,分别加入5 pmol miR-451mimics、无义序列、PBS与5μ,L Lipofectamine 2000混匀20 min,继续培养48 h.将细胞分6组,A组只转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒,B组共转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒与无义序列,C组共转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒与miR-451 mimics,D组只转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR,E组共转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR与无义序列,F组共转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR与miR-451mimics,均与5μL Lipofectamine 2000混匀20 min,继续培养48 h.实时定量PCR法检测细胞miR-451、YWHAE基因表达,Western blot法检测YWHAE蛋白表达.结果 对照组、无义序列组、miR-451转染组LN229细胞miR-451基因相对表达量分别为1、1.045、98.534.A～F组荧光素酶相对活性分别为5.042±0.177、5.588±0.684、4.980±0.268、5.265±0.692、5.370±0.443、3.272±0.351,F组与其他各组两两比较,P均＜0.01.miR-451转染组细胞YWHAE蛋白相对表达量为0.283±0.081,较对照组(1.612±0.113)、无义序列组(1.833±0.195)明显降低(P均＜0.01).对照组、无义序列组、miR-451转染组LN229细胞YWHAE基因相对表达量分别为1、0.941、0.618.结论 miR-451可以明显抑制YWHAE基因的表达,YWHAE是miR-451的直接作用靶点.
-
miR-451在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 观察miR-451在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系.方法 收集18例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR技术检测miR-451的表达水平(以U6为对照),并分析其与胃癌相关临床因素的关系.结果 与胃癌旁组织相比,miR-451在胃癌组织中明显下调(P＜0.05).其中上调6例,下调12例,下调比率66.67％ (12/18).miR-451的表达水平与胃癌的分化相关(P＜0.05),与年龄、性别、TNM分期、Borrmarn分型、浸润深度、淋巴结转移等无明显相关.结论 miR-451在胃癌组织中低表达,并与胃癌的分化程度密切相关,表明其可能参与了胃癌的发生和发展过程.
