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Survivin mRNA反义寡核苷酸诱导胰腺癌细胞凋亡
目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制.方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin V-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶活性检测法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)活性的变化早期细胞变化情况.结果:脂质体介导SurvivinASODN转染胰腺癌细胞后细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高(55.3% vs2.9%,3.2%,4.5%,4.8%respectively,P<0.05).细胞出现典型的凋亡形态学特征,细胞凋亡率较对照组明显增加(8.81±1.33vs47.87±2.91,and 14.73±1.36 vs 23.47±3.61,P<0.05).结论:脂质体介导转染Survivin ASODN可以诱导细胞激活,诱导活化进而诱导细胞发生凋亡.
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应用CBA方法检测一例SARS患者血清Th1/Th2类细胞因子
细胞因子(Cytokine,CK)是由机体的免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的多肽类小分子,分子量在15 kD~80 kD之间.CK能调节多种细胞产生生理效应,在异常情况下也可导致病理反应.检测细胞因子的技术大致可分为3类:1.生物活性检测法;2.免疫学细胞因子直接定量法;3.分子杂交检测法.
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TGFβ1生物活性检测法的建立及其在肝病中的应用
转化生长因子β1(TGFβ1)是一种具有广泛生物学效应的多肽细胞因子,参与细胞的增殖分化、代谢和内外间质的形成,在组织创伤、修复、炎症、骨质再生、肿瘤发生等病理生理过程中起重要作用[1,2].
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疟原虫乳酸脱氢酶活性检测法和有限稀释法在筛选和建立恶性疟原虫克隆株时的应用
建立恶性疟原虫克隆株存在着两个技术难点:一是怎样对原虫感染率、原虫绝对数均小的标本进行疟原虫检测;二是怎样从一个疟原虫分离株中选择一个疟原虫.针对这两个问题,我所在建立恶性疟原虫克隆株过程中,检测微量疟原虫时采用乳酸脱氢酶活性检测法.在分离疟原虫个体时采用有限稀释法,对疟原虫高度且有限地稀释,以实现对疟原虫个体的分离,获得成功,为建立疟原虫克隆株奠定了基础.现报告如下: