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豚鼠鼻粘膜一氧化氮合酶表达
一氧化氮（nitric oxide, NO）是新近发现的一种具有多种而复杂生物学活性的小分子物质，是生物体内重要的信使分子和效应分子，参与体内众多的生理病理过程。NO具有松弛血管平滑肌、调节血液循环、抑制血小板聚集等作用，并被认为是一种重要的神经递质［1］。催化NO的生物合成酶称一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS），本检测旨在探索NOS在鼻粘膜上的分布及其生理学意义。 一、材料和方法 1.豚鼠12只，发育营养正常，雌雄不论，体重350 g左右（本校动物实验中心提供）。 2.制片：豚鼠灌注固定处死后，迅速取下双侧鼻甲粘膜，分别置入10%中性甲醛固定，1侧鼻粘膜6 h后移入15%蔗糖过夜，鼻粘膜包埋在OCT水溶性包埋剂中，做5 μm厚的冰冻切片；另1侧硅烷化载玻片行4 μm石蜡切片。 3.酶组织化学染色：冰冻切片过0.01 mol/L 的磷酸缓冲溶液（pH 7.4）后，待其干燥，加入含有0.8 g/L的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸钠（nicotinamide dinucleotide phosphate-Na4,NADPH-Na4, 美国Sigma公司）、0.6 g/L的硝基四氮醋蓝和0.3% Triton-X100的孵育液，置于37℃恒温箱内孵育1.5 h，显色后0.01 mol/L磷酸缓冲溶液冲洗3次，终止反应，常规酒精脱水、透明、封片。阴性对照：孵育液内不含NADPH-Na4。 4．内皮型NOS(endothelial NOS, eNOS)原位杂交检测步骤：采用eNOS原位杂交检测试剂盒（武汉博士德公司）。石蜡切片脱腊至水，蛋白酶K消化5 min，暴露mRNA核酸片段，cDNA双链探针变性后，每张切片加10 μL含地高辛标记探针的eNOS原位杂交液，湿盒中37℃杂交18 h，充分洗涤后，用免疫组化ABC法显示探针与鼻粘膜靶核酸形成的杂交体。阴性对照为省去滴加eNOS探针杂交液，其余方法和步骤不变。
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谷氨酸脱羧酶抗体的检测方法及临床意义
谷氨酸脱羧酶(Glutamic Acid Decarboxylase,GAD)是抑制性神经递质γ-氨基丁酸的生物合成酶,广泛存在于人和动物的脑、胰岛等组织内,有两种同工酶形式,分别为GAD65和GAD67,GAD65的基因位于10号染色体短臂,GAD67的基因位于2号染色体长臂,脑和胰岛组织中与GAD65、GAD67相应的cDNA完全相同[1].在人类胰岛仅表达GAD65[2].1982年Beakkeskov等人发现了β细胞中的64K蛋白质自身抗原[3],1990年又鉴定出该抗原为GAD,并且是IDDM自身免疫反应的关键抗原[4].本文就GAD抗体的检测方法及临床意义做一综述.
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氨基糖苷类药物生物合成基因研究新进展
近年来,有关氨基糖苷类药物生物合成的研究进展显著.利用放射性同位素,酶反应分析,蛋白质重组以及基因分析等技术,陆续了解了许多氨基糖苷类药物生物合成基因簇.在本文中,利用新霉素、布替罗星的生物合成途径中的相关酶功能与遗传信息的关系,我们对有关2-脱氧链霉胺(2DOS)氨基糖苷类抗生素(如卡那霉素、庆大霉素等)的生物合成基因的研究进展做了综述.对未知功能酶的研究将使我们更好地掌握这类药物复杂的生物合成机制.
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糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体测定结果分析
谷氨酸脱羧酶(CAD)足抑制性神经递质－氨基丁酸的生物合成酶，存在于人和动物的脑、胰岛等组织内。目前认为血清GAD抗体的检测是临床上诊断1型糖尿病，特别是成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)的主要指标，并对糖尿病的正确分型及指导治疗有重要价值。笔者对70例糖尿病患者及17例正常对照用ELISA试剂盒进行血清GAD抗体的检测，现就测定结果分析报告如下。……
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侧脑室注射L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠运动能力和运动疲劳后下丘脑一氧化氮表达的影响
一氧化氮(NO)作为一种不同于经典递质的信息传递物质,介导了许多生理过程.在运动中,它对运动系统、心血管系统、免疫系统以及神经系统的功能都有重要影响.一氧化氮合酶(NOS)作为NO的生物合成酶广泛存在于下丘脑[1-4].
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1例运动神经元病的护理体会
运动神经元病（motor neuron disease，MND）是一组病因尚未明确的选择性累及脊髓前角运动神经细胞、脑干颅神经、运动神经核细胞以及大脑皮质锥体细胞为主的一组慢性进行性变性疾病[1]。运动神经元病与癌症、艾滋病齐名，只要患了这种病，先是肌肉萎缩，后在患者有意识的情况下因无力呼吸而死，所以这种患者也叫"渐冻人"。可能的病因有遗传、自身免疫、某些神经递质生物合成酶活性降低及慢性病毒感染、金属类中毒等。MND的临床表现为不同组合的肢体肌肉萎缩无力、肌束震颤、肌张力增高、反射亢进、病理征阳性、发音障碍、言语含糊、进食呛咳、呼吸困难等，一般感觉和括约肌功能不受影响。根据病变部位不同可分为下运动神经元型（进行性脊肌萎缩症）（progressive spinal muscular atrophy，PSMA）、上运动神经元型（原发性侧索硬化）与混合型（肌萎缩侧索硬化症）（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）等。
