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跌打伤科酒质量标准分析与研究
目的 为了更好的控制跌打伤科酒的产品质量,建立相关药材的薄层色谱鉴别和高效液相含量测定.方法 采用薄层色谱法,对泽兰和两面针二味药材进行薄层鉴别；用高效液相法,对徐长卿药材中的丹皮酚进行含量测定.结果 鉴别方法:操作简单,专属性强,阴性对照无干扰；含量测定方法:操作简单,准确,丹皮酚在1.9266～123.3000g之间呈良好的线性关系,丹皮酚的回收率为98.44％.结论 方法简便,结果可靠,对跌打伤科酒质量标准的分析与研究提供科学的依据.
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跌打药酒质量标准提高研究
目的 研究提高跌打药酒的产品质量,建立相关药材的薄层色谱鉴别和高效液相含量测定.方法 采用薄层色谱法,对当归、川芎、赤芍三味药材进行薄层色谱鉴别;用高效液相法,对牡丹皮药材中的丹皮酚进行含量测定分析.结果 鉴别方法:薄层斑点清晰,专属性和重复性强,阴性对照无干扰;含量测定方法:操作简单,准确,丹皮酚在2.5272～ 160.1742μg之间呈良好的线性关系,丹皮酚的回收率为 97.79 %.结论 定性、定量方法准确、简便,对跌打药酒质量标准的提高研究提供科学的依据.
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丹皮酚的心血管系统药理作用研究及临床应用
综述近几年有关丹皮酚在心血管系统方面的文献,并对其机制做初步探讨,证明了丹皮酚在实验性动脉粥样硬化、血栓、再灌注损伤、心律失常等方面有显著的疗效.
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反相高效液相色谱法测定麦味地黄丸中丹皮酚的含量
目的 建立反相高效液相色谱法测定麦味地黄丸中丹皮酚的含量.方法 采用迪马C18色谱柱(DiamnosilTMC18,250×4.6 mm,5μm),甲醇-水(70:30)为流动相;检测波长为274nm;柱温35℃.结果 丹皮酚进样量在0.102～0.510 μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.4%,(RSD为0.3%).结论 此法用于测定麦味地黄丸中丹皮酚的含量,方法简便、专属性高,结果准确可靠.
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类丹皮酚的结构修饰与其在模拟体液中的稳定性考察和抗炎活性研究
目的:丹皮酚及其类似物通过1,4-二溴丁烷连接,与萘普生反应合成一系列目标产物,研究其抗炎活性.方法:丹皮酚、2-羟基-5-甲氧基-苯乙酮、3-羟基苯乙酮、2-羟基苯乙酮和2,4-二羟基苯乙酮先与1,4-二溴丁烷合成缩合物,再与萘普生合成系列目标化合物.建立了HPLC的含量测定的方法在温度为37℃,pH分别为1.2,5.0和7.4的3种不同缓冲溶液条件下的降解情况,用二甲苯致小鼠耳肿胀模型对其进行抗炎活性筛选.结果:合成了5个目标化合物,经MS和1 H-NMR确证其结构.降解试验说明这些化合物在不同pH的缓冲溶液体系中保持稳定.小鼠实验表明,目标化合物具有较强的抗炎作用.结论:目标化合物在胃肠道pH值中稳定,抗炎活性较强,值得进一步研究.
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HPLC法同时测定牡丹皮中4种化学成分的含量
目的:建立牡丹皮中没食子酸、芍药苷、五没食子酰葡萄糖和丹皮酚4种化学成分的HPLC含量测定方法.方法:采用Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2％甲酸为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,芍药苷检测波长为230 nm,其余3种成分检测波长为274 nm,柱温30℃.结果:没食子酸、芍药苷、五没食子酰葡萄糖和丹皮酚进样量与峰面积分别在0.106 6 ～ 1.066 μg(r =0.999 7),0.138 0～1.380 μg(r=1.000 0),0.105 6～1.056 μg(r=1.000 0),0.542 4～ 5.424μg(r =0.999 5)线性良好;平均回收率(n=6)分别为103.2％,97.0％,100.7％,97.8％.结论:该方法准确可靠、重复性好,可为牡丹皮的质量控制与评价提供参考.
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丹皮酚对健康和高血脂大鼠肾动脉和冠状动脉的舒张作用
目的:研究丹皮酚对健康和高血脂模型大鼠肾动脉及冠状动脉的舒张.方法:高脂乳剂灌胃法制备大鼠高血脂模型.以离体微血管动力描记技术,分别记录丹皮酚对健康和高血脂模型大鼠肾动脉及冠状动脉的舒张.结果:丹皮酚可浓度依赖性地舒张健康和高血脂模型大鼠的肾动脉及冠状动脉;其扩血管作用对动物病理状态、预收缩剂品种及动脉系别无明显选择性.结论:丹皮酚能够无选择性地扩张健康和高血脂模型大鼠的肾动脉及冠状动脉,有望成为治疗缺血性血管疾病的有效药物.
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知柏地黄泡腾颗粒的质量标准研究
目的:建立知柏地黄泡腾颗粒的质量标准.方法:采用TLC方法对知柏地黄泡腾颗粒中牡丹皮、山茱萸、黄柏进行定性鉴别;采用HPLC法测定了马钱苷和丹皮酚的含量,色谱柱为Hypersil C_(18)柱(250mm×4.6 mm,5μm),马钱苷的流动相为乙腈-水(14:86),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为240 nm.丹皮酚的流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(47:53),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为274 nm.结果:TLC法可检出牡丹皮、山茱萸、黄柏,斑点清晰,阴性对照无干扰,专属性强.马钱苷的平均加样回收率为99.14%,RSD为0.87%.线性范围为0.181 2～1.359 0μg(r=0.999 9).丹皮酚的平均加样回收率为101.21%,RSD为2.00%.线性范围为0.099～0.495μg(r=0.999 6).结论:本方法准确可靠,可作为知柏地黄泡腾颗粒的质量控制方法.
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超高效液相色谱法同时测定丹蛭降糖胶囊中丹皮酚和芍药苷含量
目的:建立一种超高效液相色谱法同时测定丹蛭降糖胶囊中丹皮酚、芍药苷的含量.方法:色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(50mm×2.1mm,1.7μm)柱,以乙腈-0.1％磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速为0.25Ml·min-1,柱温为30℃,检测波长为230nm.结果:丹皮酚和芍药苷的线性范围分别为0.653 ～1.959μg(r=0.9997)和0.108～0.324μg(r=0.9999),平均加样回收率分别为99.46％,RSD=0.46％(n=6)和99.19％,RSD=0.49％(n=6).结论:新建方法简便、快速、准确、易行,可用于控制制剂质量.
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丹皮酚/β-环糊精包合物的研究
目的:制备丹皮酚/β-环糊精包合物.方法:采用沉淀法制备丹皮酚/β-环糊精包合物.并通过薄层色谱法与差示扫描量热分析(DSC)等方法对包合物进行鉴定;用高效液相色谱法考察包合物中丹皮酚的溶解度和体外溶出度并对丹皮酚包合前后对胃黏膜的刺激性进行了研究.结果:丹皮酚与环糊精形成物质的量之比为1:1的包合物.薄层层析图谱显示,丹皮酚被β-环糊精包合前后的主成分没有发生变化,包合物的DSC图谱与丹皮酚、丹皮酚β-环糊精混合物的图谱差异具有显著性.包合物中丹皮酚在0.1 mol-L-1盐酸溶液、水和pH值6.8磷酸盐缓冲液中的溶解度及体外溶出速率均显著提高,包合物能显著减少对胃黏膜的刺激性.结论:丹皮酚被β-环糊精包合后呈现出新的物相特征,与丹皮酚相比其理化性质与生物学性质有较显著的改变.
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丹皮酚对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用
目的 探讨丹皮酚对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 建立H2O2致PC12细胞损伤模型,采用MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞内活性氧含量,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞内丙二醛(MDA)含量.结果 PC12细胞经H2O2 100 μmol·L-1处理10 h可致细胞存活率下降,并能诱导细胞凋亡,LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量明显增加;丹皮酚(12,25和50 μmol·L-1)预处理1 h可提高细胞存活率,减少细胞凋亡、LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量.结论 丹皮酚对H2O2诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关.
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丹皮酚对高脂血清损伤的人内皮细胞的保护作用
目的 观察丹皮酚对高脂血清损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并探讨其作用机制.方法 20%高脂血清作用于HUVECs细胞24h制备高脂血清损伤模型.丹皮酚组细胞加入20%高脂血清24h后再分别加入丹皮酚124,247和495 μmol·L-1.采用倒置显微镜观察HUVECs形态学变化；MTT法检测细胞存活率；用硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量；用RT-PCR法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,模型组中大部分细胞出现片状分离和脱落,然而丹皮酚干预后细胞形态趋于正常.丹皮酚能够显著提高细胞存活率(P＜0.01).经丹皮酚124,247和495 μmol·L-1干预后,细胞存活率从模型组的(53.0±10.1)%依次升高至(68.4±9.1)%,(84.5±6.7)%,(98.1±7.5)%.丹皮酚能够显著提高NO含量和eNOS mRNA水平(P ＜0.01).NO含量从模型组的(54±4)μmol·L-1依次升高至79±6,115±5和(136±6) μmol ·L-1；eNOS mRNA的表达水平由模型组的0.215±0.060增加至0.451 ±0.045,0.563 ±0.013,0.704±0.068.结论 丹皮酚可能通过上调高脂血清损伤人脐静脉内皮细胞eNOS的表达促进NO的合成,从而发挥其对高脂血清损伤内皮细胞的保护作用.
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丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响.方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率.HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率.HSC与丹皮酚1.66 ～69.7 mg·L-1作用48h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性.丹皮酚1.66 ～49.8 mg·L-1与HSC作用24h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48h用流式细胞术检测细胞周期.结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6 ～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P＜0.05),作用48h时IC50值为105.4 mg·L-1.锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P＜0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P＜0.05).丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48h无明显细胞毒性.流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24h能显著促进HSC细胞凋亡(P＜0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P＜0.05).丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48h可调节细胞周期,Go/G1期细胞增加(P＜0.01),S期细胞减少(P＜0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P＜0.05).结论 丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一.
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风湿定胶囊质量标准的研究
目的:完善风湿定胶囊的质量标准并建立丹皮酚的含量测定方法.方法:采用HPLC法,Alltech C18柱(150mm×4.6mm,5 μm);流动相为甲醇-水(45:55);流速1.0 mL·min-1;检测波长274 nm.结果:丹皮酚进样量在0.0500～0.8000 μg范围内,呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为102.2%,RSD为1.0%(n=6).结论:本方法简便,灵敏,准确,重现性好,可用于风湿定胶囊的含量测定和质量控制.
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明目地黄丸中牡丹皮、白芍的含量测定
目的:建立紫外分光光度法测定明目地黄丸中牡丹皮、白芍两味中药总丹皮酚含量.方法:按<中国药典>2000年版一部收载六味地黄丸中牡丹皮含量测定方法,以水蒸气蒸馏丹皮酚,通过测定274nm大吸收波长处紫外吸收进行含量测定.结果:该方法的线性范围2.00～10.00μg/ml(r=0.9996,n=5),平均回收率为99.7%RSD=0.8%(n=5).结论:本法简便,准确,灵敏度高,重现性好,结果稳定可靠.
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复方胃痛胶囊质量标准研究
目的:修订完善复方胃痛胶囊的质量标准.方法:修订原标准的显微鉴别和薄层鉴别;用高效液相色谱法对金果榄中的古伦宾和徐长卿中的丹皮酚进行含量测定.结果:显微鉴别增加了徐长卿、吴茱萸、拳参的显微特征;修订后的吴茱萸薄层色谱中斑点清晰,专属性强;含量测定中古伦宾在9.24～92.4 μg·mL-1范围内线性关系良好(r= 0.9999),平均加样回收率96.3%(n=9),RSD为1.5%;丹皮酚在18.84～188.4 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率100.8%(n=9),RSD为2.4%.结论:修订后的标准可有效控制复方胃痛胶囊的质量.
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反相高效液相色谱法测定丹栀逍遥片中丹皮酚的含量
目的:建立丹栀逍遥片中丹皮酚的反相高效液相色谱测定法.方法:采用Polaris C18柱,流动相为甲醇-水(45∶55);检测波长为274 nm.结果:丹皮酚的进样量在0.0517 μg～0.4653 μg范围内与其峰面积有良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.0%,RSD为1.4%.结论:该方法简便易行、准确可靠,可用于丹栀逍遥片的质量控制.
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HPLC双波长梯度洗脱法同时测定退热解毒注射液中绿原酸、连翘苷、丹皮酚的含量
目的:建立同时测定退热解毒注射液中绿原酸、连翘苷、丹皮酚含量的HPLC双波长梯度洗脱法.方法:色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(25:75)为流动相A,0.3%磷酸为流动相B,梯度洗脱.检测波长λ1＝327nm,λ2＝276 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温为30℃.结果:绿原酸、连翘苷、丹皮酚分别在8.34～66.69、8.01～64.08、4.01～32.05μg·mL-1范围内线性关系良好(r＝0.999 9).平均回收率分别为99.14%、99.01%、99.00%.相应的RSD分别为0.72%、0.47%、0.82%(n＝6).结论:方法简便可靠,结果重现性好,为控制退热解毒注射液的内在质量提供了科学依据.
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舒痔丸质量标准研究
目的:提高舒痔丸的质量标准.方法:采用TLC法对舒痔丸中黄芩、大黄、当归、牡丹皮进行定性鉴别;用HPLC法对舒痔丸中黄芩苷、丹皮酚进行含量测定.结果:在TLC色谱中均能检出黄芩、大黄、当归,牡丹皮;黃芩苷进样量在0.076 8～0.640 0 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.4%,RSD为0.32%;丹皮酚进样量在0.041 68~0.416 8 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为99.0%,RSD为0.53%.结论:所建立的方法快捷,重现性好,专属性强,可用于舒痔丸的质量控制.
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咽炎片中丹皮酚的提取方法及其含量测定
目的:考察不同提取方法对丹皮酚提取率的影响,建立咽炎片中丹皮酚含量测定的方法.方法:对比回流法和超声法进行前处理,重点考察溶剂用量、超声时间、水浴温度等因素对超声法提取率的影响.含量测定采用反相HPLC法,以C18柱分离,甲醇-水(45:55)为流动相,检测波长274 nm.结果:温水浴超声法为咽炎片中丹皮酚含量测定的佳提取方法,加样平均回收率为99.47%,RSD=0.81%(n=6),含量数据重复性好,RSD=1.04%(n=6).结论:建立咽炎片中丹皮酚的含量测定方法:温水浴超声法是准确性、稳定性、可行性俱佳的方法.
