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川黄柏高效遗传转化系统建立和植株再生研究
目的:建立发根农杆菌高频转化川黄柏的有效方法.方法:利用发根农杆菌R1601转化川黄柏带子叶下胚轴,并将获得的毛状根,置于含不同生长调节物质配比的培养基上诱导产生再生植株.结果:建立的高频转化系统为选择生长10 d的川黄柏带子叶下胚轴,经过36 h的预培养,农杆菌菌液(OD600=0.6)浸染15 min、共培养4d,浸染菌液佳配制方法是在菌液培养阶段添加60 μmol/L的乙酰丁香酮.经PCR检测证明发根农杆菌Ri质粒的T-DNA片段已整合进入川黄柏毛状根和再生植株的基因组.结论:通过改善转化条件,发根农杆菌R1601可以高效诱导川黄柏长出毛状根,并具有进一步再生完整植株的能力.
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川黄柏染色体制作和核型分析研究
采用川黄柏茎段诱导的新生愈伤组织为试验材料,染色制片作核型分析,结果显示:川黄柏体细胞染色体数为2n＝80,中部着丝点染色体(m)34对(有一对带有随体),近中部着丝点染色体(sm)3对,端部着丝点染色体(T)3对.核型公式为K(2n)＝80＝68m(2SAT)+6sm+6T.
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黄柏与伪品黄柏的鉴别
黄柏是芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.或黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮,前者习称"川黄柏",后者习称"关黄柏".具有清热、解毒等作用[1],是常用的中药材,近年时有发现伪品和掺假现象,笔者近在抽查中发现伪品率高达70%,且有不断上升趋势.本文按中国药典(95版)一部黄柏项下对黄柏及伪品黄柏从性状、显微、薄层色谱三方面进行比较鉴别,现报道如下.
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川黄柏抗炎活性部位的筛选研究
目的：探究川黄柏发挥抗炎作用的抗炎活性部位。方法应用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀、1%冰乙酸改变小鼠腹腔毛细血管通透性、鸡蛋清诱导大鼠足趾肿胀进行急性炎症造模，探讨川黄柏提取物的抗炎作用，观察不同提取物的抗炎效果。结果不同的急性炎症模型通过给予川黄柏提取物进行治疗，均有一定程度的改善；但是与其他抗炎药物或其他川黄柏提取物相比较，川黄柏的生物碱提取物效果较优，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论川黄柏中的提取物均有一定程度的抗炎作用，其中川黄柏生物碱提取物发挥的抗炎作用更加明显。
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HPLC法同时测定川黄柏中盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱的含量
目的:建立同时测定川黄柏中盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为WatersXTERRA(R) MS C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(每100 ml中加0.1g十二烷基磺酸钠,梯度洗脱),检测波长为284 nm(盐酸黄柏碱)和265 nm(盐酸小檗碱),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃.结果:盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱的质量浓度分别在9.45～236.15、74.77～1 869.25 mg/L范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 1、0.999 8);二者精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.55％;平均加样回收率分别为97.47％～98.24％、95.03％～95.63％,RSD分别为0.39％～0.93％ 、0.42％～0.93％(n均为3).结论:该方法简便、快速、专属性强,可有效评价川黄柏中盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱的质量.
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不同产地和生长年限川黄柏中小檗碱的含量测定
黄柏为著名的川产道地药材,始载于《神农本草经》,原名"蘖木",列为上品,味苦,寒,无毒.黄柏的主要成分是生物碱,其中小檗碱具有抗菌、消炎等作用.《中国药典》2005年版第一部将川黄柏与关黄柏分别收载,黄柏即黄皮树(Phellodendron chinense Schneid.)的干燥树皮,习称"川黄柏",具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮等功能.为了提高黄柏的质量,保证临床用药的安全性、有效性,我们测定了四川三个产地与不同生长年限的黄柏中小檗碱的含量.
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川黄柏醇提物的抗炎作用及机制的研究
目的 观察川黄柏醇提物(AEPC)的抗炎作用并探讨其机制.方法 采用乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加和角叉菜胶诱导大鼠胸膜炎模型来观察AEPC的抗炎作用;测定胸膜炎大鼠胸腔渗出液中前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量及肺组织中TNF-α、IL-1β、丙二醛(MDA)的含量,探讨其抗炎机制.结果 与模型组比较,AEPC中、高剂量可显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增加;还可抑制胸膜炎大鼠胸腔液中PGE2、TNF-α、IL-1β含量的升高;AEPC高剂量能抑制胸膜炎大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β、MDA含量的升高,中剂量能抑制肺组织中IL-1β含量的升高.结论 AEPC具抗炎作用,其抗炎机制可能与影响炎症介质的产生和抗氧化作用有关.
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川黄柏抗炎活性部位的筛选研究
目的 研究川黄柏提取物的抗炎效果.方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、1％冰乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性模型、鸡蛋清诱导大鼠足跖肿胀和大鼠肿胀足炎性组织中PGE2的影响等急性炎症模型,观察川黄柏提取物的抗炎作用.结果 川黄柏提取物对4种急性炎症模型均有不同程度的抑制作用,其中,生物碱部位与模型组比较有显著性差异.结论 川黄柏提取物的生物碱部分具有良好的抗炎作用,其他各部位也具有不同强度的抗炎作用.
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比较两种黄柏组方二妙胶囊的抗炎作用
目的 研究由关黄柏和川黄柏组成的二妙胶囊对急性炎症模型的影响.方法采用组织胺诱发大鼠皮肤通透性增加、二甲苯诱发小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等急性炎症模型,观察两种黄柏组成的二妙胶囊对3种炎症模型的抗炎作用.结果 由关黄柏组方的二妙胶囊(A组)有抑制组胺所致大鼠皮肤通透性增加、二甲苯所致鼠耳肿胀、角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等作用.由川黄柏组方的二妙胶囊(B组)仅有抑制二甲苯所致鼠耳肿胀的作用.同剂量下,B组作用弱于A组.结论 A组抗急性炎症作用强于B组.
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RP-HPLC测定不同采收期川黄柏中小檗碱、黄柏碱的含量
目的 测定不同采收期川黄柏雌、雄株中的小檗碱和黄柏碱含量,探索小檗碱和黄柏碱在不同采收期的含量变化规律.方法 采用RP-HPLC法,选用Luna C18(2)色谱柱(6.0 mm×150.0 mm,5 μm);测定小檗碱的流动相为甲醇-磷酸缓冲液-十二烷基硫酸钠(60: 40: 0.1),检测波长350 nm,流速1 ml·min-1,柱温30℃.测定黄柏碱的流动相为乙腈-0.4 mol·L-1氯化氨(12: 88),检测波长286 nm,流速1 ml·min-1,柱温30℃.结果 雌株中小檗碱、黄柏碱的含量在6～8月份含量降低,而雄株中两者无明显变化.结论 川黄柏雌株在6～8月小檗碱、黄柏碱含量骤降,与川黄柏的花果期密切相关.
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层次分析法结合正交试验优化川黄柏炒炭工艺
目的:优化川黄柏炒炭工艺.方法:利用HPLC法测定盐酸小檗碱、 盐酸小檗红碱、 盐酸药根碱、 盐酸巴马汀的含量.以这四种成分的含量作为指标,基于层次分析法赋予各指标相应的权重系数.再采用正交设计试验考察川黄柏厚度(A)、 炒制温度(B)、 炒制时间(C)对工艺的影响.结果:正交设计试验确定的川黄柏佳炒炭工艺为厚度1mm的川黄柏50 g,在270℃温度条件下炒制25 min.结论:此实验方法可行且稳定,优化了川黄柏饮片炒炭工艺.
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不同方法对黄柏中盐酸小檗碱的提取比较
采用包括药典法定方法在内的3种提取方法分别对黄柏中盐酸小檗碱进行提取并比较这3种方法的提取效率.方法:以乙腈-0.1%磷酸(十二烷基磺酸钠)、甲醇分别采用超声提取法与用1%甲醇盐酸连续回流提取法进行提取,用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量作为提取效率的考察指标进行比较.结果:用乙腈-0.1%磷酸(十二烷基磺酸钠)作为提取溶剂测定结果含量高.结论:以乙腈-0.1%磷酸(十二烷基磺酸钠)进行的超声提取工艺简单,快速且提取效率高,但用1%甲醇盐酸连续回流提取法,在考虑经济节约的条件下,也是不错的选择.
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黔产川黄柏果实中挥发油化学成分研究
目的:研究黔产川黄柏(Phellodendron chinense Schneid.)果实中挥发油化学成分.方法:采用《中国药典》方法提取黔产川黄柏果实中挥发性成分,用气相色谱-质谱连用法进行分离、鉴定和用峰面积法计算相对百分含量.结果:从黔产川黄柏果实中检出35色谱峰,鉴定出29个化学成分.结论:黔产川黄柏果实中主要成分有柠檬烯、右旋大根香叶烯、β-榄香烯、β-月桂烯、α-蛇床烯和β-石竹烯.
关键词： 川黄柏 挥发油 水蒸气蒸馏法 气相色谱-质谱连用法 -
川黄柏的化学成分及药理活性研究进展
目的 为川黄柏的药效物质基础及综合开发利用提供参考依据.方法 通过查阅国内外相关文献进行总结,对川黄柏化学成分及药理作用进行综述.结果 川黄柏主要含有生物碱类、酚酸类、三萜类和黄酮类等成分,具有抗炎、抗菌、降血压和免疫抑制等药理活性.结论 川黄柏树皮以外的药用部位化学成分及其药效活性研究较少,值得进一步研究.
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皮肤瘙痒的家庭药浴疗法
老年性皮肤瘙痒症的药浴疗法常见的老年性瘙痒症是由于皮肤退行性变化、皮肤分泌功能减退所致。病部皮肤易变得干涩、粗糙、表皮易脱落，皮内神经末梢易受刺激而发痒。防治老年性皮肤瘙痒症可选用下列药浴疗法。1取苍耳草、艾叶各509，蜂房、白藓皮、苦参、地肤子、川槿皮各309，川黄柏、白矾各209。每口1剂，将上述药料加水煎，滤渣取汁，倒人盆中，趁热熏洗患处，每日1-2次，每次熏洗后，再搓擦15-20分钟，7天为1疗程。该方剂具有清热燥湿、祛风止痒的功效。一般连用2-3周即有效或痊愈。注意不可用碱性强的肥皂洗澡，同时忌饮酒，戒鱼虾、蟹等发物食品。
