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正交设计在何首乌组织培养中的应用
用正交设计法考察了 4 种激素对何首乌嫩茎、叶诱导愈伤组织产生的影响.方差分析结果显示:2,4-D、IBA 作用极显著,6-BA作用显著,NAA 作用不显著,它们作用大小依次为:2,4-D＞IBA＞6-BA＞NAA,诱导何首乌愈伤组织产生的佳激素配比为:MS+2,4-D 1mg/L (以下单位同)+6-BA 1+IBA 0.5.
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药用植物粉花绣线菊的组织培养的建立与快速繁殖研究
目的建立了粉花绣线菊Spiraea japonica L.f.愈伤培养系统和快速繁殖方法.方法通过用MS、6,7-V、B5等3种不同的培养基对粉花绣线菊植株的茎尖、嫩叶、叶柄等不同部位进行愈伤组织诱导和成苗诱导.结果 通过本研究,建立了愈伤培养系统,实现了快速繁殖.结论 MS培养基诱导愈伤效果好,在MS+2,4-D 2.0mg/L+KT 0.3 mg/L培养基中,幼叶、茎尖、叶柄等外植体均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖外植体诱导的效果好;茎尖外植体在MS+2 mg/LBA+0.1 mg/LNAA能长出丛生苗,将丛生苗转入培养基1/2MS+0.25 mg/LBA+0.5 mg/L NAA可生根成小苗.
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天麻的组织培养及快速繁殖
目的利用组织培养方法快速繁殖成米麻作为种麻,为寻找出一条简便可行的快繁天麻种麻的新途径提供理论依据.方法天麻块茎或茎尖无菌离体培养,米麻块茎诱导培养基为1/2 MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/ L+香蕉50 mg/L;箭麻茎尖诱导培养基为1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L.结果小米麻经50 d无菌培养后开始生长出新米麻,70 d后原小米麻块茎上生长出多个分枝的新米麻;箭麻茎尖超过140 d组织培养,茎尖分化、诱导形成原球茎,超过160 d 培养原球茎长大并开花.结论天麻可以用组织培养方法快速繁殖成米麻作为种麻.
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植物生长调节剂对多花黄精芽体外发生过程中性状的影响
目的研究不同植物生长调节剂组合对多花黄精芽体外发生过程中每块外植体上的平均芽数、叶片发生频率、根的自然发生率及生根外植体上的平均根数、根茎发生率等性状的影响;探索通过组织培养快速繁殖该植物的佳途径.方法多花黄精的不定芽切块在MS+BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L的培养基上可被诱导产生颗粒状愈伤组织,将该愈伤组织继代于不同植物生长调节剂组合的MS培养基上,2个月后观察并统计不同植物生长调节剂组合对各性状的影响.结果TDZ 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L对芽增值有利,平均每块外植体上可长出8.6个芽;BA1.0～2.0 mg/L+NAA 1.0～2.0 mg/L促进叶片形成,95%以上的外植体长出形态正常的叶片;在BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L的培养基上,根的自然发生率高,达到51.9%,但不及单独生长素如NAA、IAA、IBA或2,4-D等以0.5～1.0 mg/L对根的诱导作用,后者可使90%以上的再生芽生根,且根生长繁茂;BA 2.0mg/L+2,4-D 1.0～2.0 mg/L组合适合根茎生长,直径大于0.5 cm的根状茎超过100%.结论多花黄精的体外快速繁殖可通过如下途径实现:TDZ 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L诱导不定芽扩增,BA 1.0～2.0 mg/L+NAA1.0～2.0 mg/L诱导健康叶片的发育,1/2 MS+NAA,IAA,IBA或2,4-D 0.5～1.0 mg/L诱导再生芽生根;BA2.0 mg/L+2,4-D 1.0～2.0 mg/L用于以繁殖药用器官为目的的根茎的生长.
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杭菊花花瓣组织培养
为了实现杭菊花优良种苗的有效快繁,用杭菊花始花期刚露白花蕾的花瓣为材料,按不同接种方向接种于不同激素配比的培养基上诱导分化.结果表明:以 MS+NAA 0.2 mg/L +KT 2 mg/L 培养基较好,培养 40 d 后芽分化率为 72.2%～81.8%,不同的 KT 浓度与不同接种方向对花瓣组培形成不定芽有显著影响;不同品种类型间花瓣组培结果也有明显差异.
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铁皮石斛研究进展
综述了20余年来国内有关铁皮石斛的组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等研究工作,并对其产业化开发的有关问题作了初步的探讨.
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雪莲的研究进展
雪莲是我国珍稀名贵的中药材,具有很高的药用价值,应用前景广阔.雪莲生长环境恶劣,自然资源十分有限.由于近年来野生雪莲乱采滥挖现象严重,加之人工栽培困难,雪莲已被列为国家三级濒危物种而受到保护.综述雪莲的有效成分、药理作用、开发利用现状及解决雪莲资源短缺的途径,并对雪莲今后研究发展的方向进行了展望,以期更加有效地保护和合理开发利用雪莲资源、满足医药市场需求、保护西部生态环境和促进西部经济发展.
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刺五加组织培养与细胞工程进展
综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状.分别从体细胞胚胎发生的影响因素:外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议.
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杜仲次生代谢物的研究进展
详细介绍了贵重药材杜仲所含的各种次生代谢物以及各自的功效,其中重要次生代谢物松脂素二葡萄糖苷是降压的主要成分,环烯醚萜类的桃叶珊瑚苷具有预防和治疗肿瘤、强效抗菌、利尿等功效,绿原酸抗菌作用明显,对消化系统、血液系统和生殖系统均有药理作用;重点阐述了运用植物组织培养法这一新兴生物技术生产杜仲有效成分(桃叶珊瑚苷、绿原酸)的研究现状,为解决杜仲药源紧缺问题提供了科学依据;同时对这些领域存在的问题及发展前景进行了展望.
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桃儿七的研究进展
主要综述了国内外对桃儿七的研究进展.介绍了桃儿七的地理分布、系统发育、化学成分、生物学特性、资源现状及解决办法,特别介绍了利用植物组织培养、细胞培养、生物反应器、毛状根培养等生物技术方法来生产鬼臼毒素的研究新进展.
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库页红景天的研究进展
库页红景天Rhodiola sachalinensis是一种珍贵稀有的药用植物,除了主要药效成分红景天苷和酪醇外,还含有丰富的其他苷类化合物、氨基酸、微量元素、挥发油、多糖等成分.药理研究证明其具有免疫调节、抗病毒、抗缺氧、降血糖、神经细胞保护、肝脏保护、益智、抗氧化、防辐射等多种药理学作用.由于花粉败育、生境恶劣和人工采挖,野生库页红景天已濒临灭绝.随着相关技术的快速发展,通过细胞、组织和器官的大规模培养定向生产红景天的有效成分具有广阔的前景,本文对该领域的研究进展进行了回顾、归纳和综述.
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生物工程技术与药用植物资源保护
随着我国中医药产业的快速发展及世界范围内天然药物的不断发展,国内外对中药资源的需求迅速增加.使我国中药资源的消耗加大,给濒危的药用植物资源带来毁灭性的危险.中药材栽培和野生抚育等手段不能完全解决资源的压力问题,生物工程技术可以在解决中药资源紧缺的问题上发挥作用.采用生物技术中的快速繁殖技术,可以达到快速生产优质种苗的目的.一种方法是通过愈伤组织诱导出种苗的地上部分和根,形成许多小的植物株;另一种方法是利用体细胞胚的途径,由体细胞胚再形成大量的小植株,形成的这些植物株可以用于栽培和野生抚育增加种群数量.利用生物工程技术,在反应器中培养药用植物的细胞、组织或者器官,可以直接快速地获得药用植物的活性成分,节约对原料药材的使用;同时在大规模培养条件下,生产成本可以大大降低.生物工程技术在药用植物资源上的应用,特别是对濒危药用植物资源保护方面的应用,对中国有着特殊的意义,一方面中药资源是整个中医药的基础,另一方面中国是世界上使用和出口药用植物原料多的国家.
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药用植物生物工程研究进展Ⅰ.组织和细胞培养研究
药用植物生物工程--组织和细胞培养在濒危物种保护、重要资源快繁、退化种质脱毒改良和次生代谢物生产等领域应用前景广阔.分别从药用植物组织培养的外植体、培养基和培养条件、诱导子、抗逆性、产物药效成分、脱毒培养等方面和细胞培养的培养基和培养条件、高产细胞系的筛选、诱导子、产物药效成分、生物反应器、固定化培养等方面进行了总结研究.
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不同理化因素对天山雪莲组培苗生长及总黄酮量的影响
目的 研究不同理化因素对天山雪莲组培苗生长和总黄酮生物合成的影响.方法 测定不同理化因素影响下天山雪莲组培苗干质量和总黄酮量.结果 利于天山雪莲生长及黄酮积累的培养条件:MS培养基附加6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.05mg/L,氮源浓度40 mmol/L,NH4+-NO3-比例为15∶25,碳源蔗糖质量浓度40g/L,pH值5.0～6.0,光照强度2500lx,温度25℃.结论 各项佳培养条件的组合总体上可以促进天山雪莲生长和总黄酮生物合成,氮源、碳源和温度对天山雪莲生长及总黄酮量的影响为明显.
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脂肪组织提取液促进大鼠皮肤生长的实验研究
目的观察脂肪组织提取液对大鼠皮肤体外培养生长的影响.方法将2 mm×2 mm大小的新生大鼠皮肤接种到24孔培养板内,分别加入含有体积分数为10%脂肪组织提取液(提取液组)或体积分数为10%磷酸盐缓冲液(PBS组)的胎牛血清Dulbecco改良Eagle培养基培养6 d,测量皮肤培养后的面积.结果两组皮肤培养后均有生长,脂肪组织提取液组皮肤培养后面积为(8.43±1.40)mm2,而PBS组为(4.18±1.11)mm2,脂肪组织提取液组皮肤培养后面积约是PBS组的2倍,两组间差异有显著性(P<0.05).结论脂肪组织提取液对皮肤生长有促进作用,其机制可能是脂肪组织提取液内含有促细胞增殖的某些生长因子和其他有利于细胞生存的物质.
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组织工程化人工肌腱修复喙锁韧带损伤及其体内检测
目的总结组织工程化人工肌腱修复喙锁韧带的早期临床效果。方法用自愿中止妊娠健康妇女捐赠的12周引产健康胚胎肌腱分离培养肌腱细胞，以5×106／ml细胞密度种植在碳纤维和聚羟基乙酸的复合支架材料上，体外培养5～7d后植入体内，修复5例锁骨外端Ⅱ、Ⅲ度骨折和肩锁关节Ⅲ度脱位伴喙锁韧带损伤。全部病例随访7～13个月，平均9.3个月。其中2例分别于术后3个月、6个月行内固定取出术时，取微量组织行组织学检查及短串联重复位点检测。结果全部病例早期均无局部及全身反应，伤口一期愈合，上肢功能恢复正常，可从事原工作。组织学检查证实无明显淋巴细胞浸润，细胞呈梭形，纤维组织排列整齐、均匀，可见毛细血管增生。用法医物证技术检测D3S1754、Cyar04，TH01基因座，发现2例均存在非自体组织等位基因，表明植入细胞保持了活力。结论用组织工程学原理构建的人工肌腱修复喙锁韧带损伤是可行的手术方法，植入的同种异体细胞至少在6个月内保存了活力，无明显排斥反应。
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组织工程软骨种子细胞来源的研究进展
创伤、退变等造成的关节软骨病变较为常见.终末分化的软骨细胞包裹在细胞外基质中,通过关节液渗透营养,因此软骨损伤后缺乏自愈能力.近十余年来,软骨组织工程在支架材料[1]、种子细胞[2]、局部微环境[3]等方面进行了深入研究.
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青蒿愈伤组织的诱导及化学成分变化规律研究
[目的]建立青蒿愈伤组织快速繁殖的适宜培养基,测定其生长过程中次生代谢产物奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量变化.[方法]无菌条件下切取花序、叶和叶柄为外植体,接种于MS添加不同激素组合的培养基,进行诱导及继代增殖培养,测定奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量.[结果]建立了青蒿花序、叶和叶柄愈伤组织快速繁殖的适宜培养基,绘制相对应的生长曲线,并确定了生长过程中次生代谢产物奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量变化及佳采收期.[结论]通过组织培养方式可以成功获得青蒿愈伤组织生长曲线和生长过程中次生代谢产物的变化规律,对传统中药青蒿培养体系优化及工业化规模生产进行探索提供了一个新途径.
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辽东楤木体细胞组织培养研究
通过查阅和整理国内外相关文献资料,简述了辽东楤木体细胞组织培养研究的现状与进展.目前辽东楤木可以通过两种途径获得再生苗,一条途径是胚状体成苗,另一条途径是分割丛生芽诱导生根成苗.而在辽东楤木体细胞胚和丛芽的诱导过程中,外植体、培养基、生长调节物质、培养条件(接种量、pH值、糖浓度、光照等)均为其关键因素.
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人早孕绒毛膜与蜕膜组织体外培养方法的研究
目的:探讨体外培养人绒毛膜组织和蜕膜组织的方法,并对其体外生长规律进行研究.方法:分别采取组织切割和胰酶消化处理两种人流组织,置RPMI-1640培养液,组织细胞可维持存活四周以上.结果:正常人流组织可在体外分离出绒毛膜组织和蜕膜组织,并能生长出单层细胞.结论:分离培养的两种组织细胞可供体外基础与临床的实验研究.
