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产生聚γ-谷氨酸发酵的条件分析
微生物合成的聚γ-谷氨酸(γ-PGA)是一种可生物降解的,水溶性的聚合物,它将在食品,化妆品,涂料,土壤保护,医药等领域有很好的应用.本文利用本实验室筛选的枯草芽孢杆菌NX-2,探讨发酵制备聚γ-谷氨酸过程的佳发酵条件.
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杜氏盐藻对不同价态铁的吸收机制研究
目的 通过向培养液中添加不同浓度的硫酸亚铁和三氯化铁,研究其对盐藻生长的影响,及盐藻对不同价态铁的吸收机制.方法 紫外分光光度计检测其对盐藻生长的影响,原子吸收检测盐藻胞外溶解态、吸附态和胞内吸收态铁的富集规律,并用红外光谱检测盐藻富集前后红外吸收的变化.结果 当硫酸亚铁的浓度为12.5 μmol·L-1、三氯化铁的浓度为25 μmol·L-1时,盐藻生长较旺盛.随着培养周期的延长,胞外溶解态铁逐渐降低,膜吸附态和胞内吸收态铁呈现增长趋势,整个培养周期,铁的总量保持不变.另外,铁离子的添加并未对盐藻细胞分子官能团产生伤害.结论 当硫酸亚铁浓度为12.5 μmol·L-1时,盐藻具有好的生长状态,Fe2+是盐藻的主要吸收形式,盐藻对铁的吸收是1个循序渐进的过程.
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牛眼小梁细胞体外培养技术的改进
目的改进体外培养牛眼小梁细胞的方法.方法分别采用常规和改进的方法对牛眼小梁细胞进行体外原代及传代培养,比较两者在组织成活率、细胞贴壁率、生长曲线上的差异,并做组织学特异染色鉴定,应用光学显微镜、电子透射显微镜对原代及传代培养的细胞进行形态学及生长特性的观察.结果牛眼小梁细胞培养成功,两种方法对培养无明显影响.结论应用加有小牛血清的培养液可在不影响培养效果前提下明显降低实验成本,而且选择性的收集小梁组织块是培养成功及0证成活率的有效手段.
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身材矮小儿童378例病因分析
身材矮小是指在相似环境下,儿童身高低于同种族个体正常身高2个标准差以上,或者低于正常儿童生长曲线第三百分位.为进一步了解儿童身材矮小的病因,2000年9月～2007年8月,我们对378例身材矮小患儿的临床资料进行整理、分析.现报告如下.
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孩子矮小找准原因对症治疗是关键
如何判断孩子生长是否正常矮小症是指小儿身高处于同年龄、同性别、同种族正常健康儿童生长曲线第三百分位数以下或低于两个标准差.婴幼儿期(3岁以下)生长速度低于每年7厘米,儿童期(3岁-青春期)低于每年4～5厘米,青春期低于每年5.5～6.5厘米,则为生长迟缓;如果持续生长迟缓,则会导致身高偏离正常范围逐渐增大.
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孕期焦虑胎儿生长不给力
在孕期中,准妈妈们爱相互比肚子,比着比着,一些准妈妈就焦虑了:都6个月了,我的肚子怎么还不明显?别的妈妈肚子好大哦,我的怎么会小好多?体检时医生总说肚子里的宝宝长得太慢了,和孕周不符.胎宝宝生长不给力,我该怎么办啊?胎儿生长不给力,临床上称作“胎儿生长迟滞”,是指胎儿在子宫内没有达到预定周数的体重,造成胎儿体重与相同怀孕周数的胎儿体重相比,落在体重分布生长曲线的10％以下.
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随机分层抽样订立河北省新生儿胎龄体质量参考标准的研究
目的 了解河北省不同孕龄新生儿出生体质量情况,制定河北省新生儿出生体质量标准,绘制不同孕龄新生儿出生体质量曲线,为胎儿生长发育状况的监测和评价提供参考依据.方法 根据河北省各地区社会经济环境,随机分层抽样选取各级市县医疗机构,连续收集2014年全年新生儿胎龄和出生体质量数据.结果 共纳入48 692例单胎活产儿进入本次研究,其中男性胎儿22 059例,占45％,女性胎儿26 633例,占55％.新生儿总体平均出生体质量为(3 314±508)g,其中男性胎儿平均出生体质量为(3 370±510)g,女性胎儿平均体质量为(3 267士502)g.新生儿出生体质量P3、P5、P10、P25、P50、P75、P90、P95、P97百分位数r2值均＞0.98,提示拟合满意.结论 本研究统计数据可代表河北省地区新生儿出生情况,统计得出不同胎龄、性别新生儿出生体质量参考标准,并绘制出参考曲线.
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不同脑区来源的成体大鼠神经干细胞体外增殖特性
目的:探讨成年大鼠神经干细胞的脑内分布及体外培养条件、增殖特性,为自体神经干细胞移植修复神经损伤提供理论依据.方法:分离成年大鼠纹状体、室区(VZ)和室下区(SVZ)的细胞,利用无血清培养技术培养并观察神经干细胞的生长规律,采用SABC法进行神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测,并作姬姆萨染色,对细胞进行鉴定.结果:由成年大鼠纹状体、VZ和SVZ区获得的细胞群,均可在体外分裂增殖形成神经球,Nestin阳性,进一步分化后分别呈现NSE和GFAP阳性.结论:成年大鼠脑内特定区域具有存在神经干细胞.
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扶正解毒方对肺腺癌 A549细胞生长及凋亡的影响
目的：探讨扶正解毒方对肺腺癌 A549细胞生长及凋亡的作用。方法：将10只大耳白兔随机分为扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组，对照组，环磷酰胺（ CTX）组5组，每组各2只。扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组分别按16 g·kg -1、8 g·kg -1、4 g·kg -1剂量口服灌胃；对照组给予相同剂量生理盐水，每日1次，连灌1周；环磷酰胺（CTX）组第1天予20 mg ·kg -1腹腔注射。末次用药后1 h，各组均在无菌条件下心脏采血，分离血清。采用血清药理学方法，对 A549细胞株进行体外培养，然后分别加入扶正解毒方高剂量、中剂量、低剂量含药血清、对照组含药血清、CTX 含药血清，通过光学显微镜直观法、细胞计数法、MTT 法、流式细胞仪法等对 A549细胞生长及凋亡指标进行测定。结果：A549细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变；细胞生长曲线提示，扶正解毒方对 A549细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系；MMT 法提示，扶正解毒方对 A549细胞生长的抑制率随浓度的增加而增加，呈效应-剂量依赖关系；流式细胞仪检测显示，细胞凋亡率随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增加，药物作用72 h 后，扶正解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为（6.30±1.01）%、（15.72±1.54）%、（23.40±1.34）%，与对照组比较，差异均有统计学意义（P <0.05）。结论：扶正解毒方可抑制肺腺癌 A549细胞生长、诱导细胞凋亡。
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双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌抑制作用的实验研究
目的:探讨双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌的抑制作用.方法:选择SHV型产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用微量肉汤稀释法,依据不同浊度液体内细菌含量不同的原理,绘制时间-浊度曲线（生长曲线）,并对结果进行分析.结果:不同浓度双黄连作用下,肺炎克雷伯菌呈现不同的生长状态.对SHV型肺炎克雷伯菌标准株(ATCC700603)而言,当双黄连浓度＜12.5 g/L时,对菌株生长无明显作用,当浓度为12.5 g/L时,对其生长有明显抑制作用；而对于SHV型产ESBLs肺炎克雷伯菌临床株,不同浓度的双黄连均显示抑制细菌生长的作用,抑制作用随着浓度的增加而增强；当双黄连浓度为50 g/L时,所有细菌均不生长.结论:双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌生长具有明显的抑制作用.
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宝宝不够壮辅食找原因
据统计,我国婴儿出生后前4个月的体重增长曲线与西方发达国家的很接近,但在4～5个月以后,生长曲线变平,而西方国家则仍能保持原来的上升趋势.很多妈妈都会有这样的疑问,我家宝宝也精心喂养了,为什么没有洋宝宝们那么强壮呢?其原因何在呢?
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半边旗提取物5F对人鼻咽癌CNE-2Z细胞生长的抑制作用
目的 研究半边旗提取物5F对人鼻咽癌CNE - 2Z细胞的抑制作用及可能机制.方法 以台盼蓝活细胞计数法测定生长曲线;用MTr比色法检测给药后鼻咽癌细胞的增殖抑制情况；采用FCM检测5F对细胞周期和凋亡的影响；用PI/Hoechst33258荧光双染法和DNA ladder检测凋亡.结果 5F作用后,生长曲线测定和MTr比色法实验结果显示,5F对CNE - 2Z细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间-剂量依赖关系；流式细胞仪、DNA ladder和荧光双染法结果提示5F可诱导CNE - 2Z细胞凋亡.结论 半边旗提取物5F能抑制CNE - 2Z细胞的增殖效应,其机制可能与诱导细胞凋亡和引起细胞周期阻滞于G2/M期有关.
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大蒜辣素致肝癌细胞HepG2凋亡研究
目的 研究大蒜辣素(Allicin)导致肝癌细胞HepG2凋亡的现象及其影响规律.方法 运用CCK-8试剂盒研究Al-licin对HepG2细胞增殖的影响,运用流式细胞仪检测其对细胞凋亡、DNA代谢的影响,运用免疫印迹(Western blot)研究肝癌细胞凋亡基因表达的影响.结果 Allicin能抑制HepG2细胞的增殖,细胞倍增时间延长为4 d,同时Allicin也能导致细胞出现大量凋亡,实验结果表明其凋亡率高为4.13%,死亡率达到70.38%.细胞周期实验结果表明Allicin能使大部分细胞处于DNA合成期的S期及G0/G1期,延缓细胞增殖.Western blot实验结果表明Allicin能激活细胞凋亡基因提高药物的治疗效果.结论 Allicin能抑制肝癌细胞的增殖可导致细胞大量死亡并引起细胞凋亡,并能引起细胞DNA代谢发生紊乱,细胞大部分被阻滞在DNA合成的G0/G1期,细胞分裂被抑制,Western blot实验结果表明细胞凋亡基因大量表达,细胞发生凋亡.
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表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒的构建及特性
提取马立克氏病毒I型疫苗毒株CVI988的总DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒生长非必需的US2基因并克隆入T-easy载体.将CMV启动子和增强子控制的含GFP基因表达盒克隆入US2基因中,成功构建了含GFP基因的转移质粒载体pGUS2GFP.用脂质体将其与CVI988 株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法得到纯化的表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒株rCVIGFP,并分别测定其在体内和体外的生长情况.表达EGFP基因的重组病毒在细胞上生长曲线与亲本毒CVI988类似,体外实验表明,1日龄腹腔接种该重组毒后,可以从鸡体内分离到表达绿色荧光的病毒.
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成人骨髓间充质干细胞对K562细胞生长的影响
目的:研究成人骨髓间充质干细胞(MSCs)对K562细胞生长的影响.方法:从成人骨髓中分离、培养MSCs,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度,观察其电镜下的超微结构.将分离培养的MSCs置于24孔板中,72 h待其贴壁后,以丝裂霉素处理,与K562细胞共培养,计数法测定细胞增殖,观察成人骨髓MSCs对K562细胞生长的影响.结果:和单独的K562细胞生长曲线相比,与骨髓MSCs共孵育的K562细胞生长缓慢,无明显的指数生长期.结论:成人骨髓MSCs抑制K562细胞的生长,提示其可能有潜在的抗肿瘤作用,但其作用机制如何有待于进一步探讨.
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人白细胞干扰素对子宫内膜腺癌细胞系的作用研究
目的 观察人白细胞干扰素(IFN-α)对我们建立的子宫内膜腺癌细胞系(JEC)的细胞生长和细胞周期的影响.方法 将不同浓度:2000 u/ml、500 u/ml、100 u/ml2的IFN-α与JEC共同培养7天,检测JEC细胞生长曲线、细胞的凝集素受体表达,并用流式细胞仪分析细胞周期的变化.结果和结论 IFN-α对JEC细胞的增殖有抑制作用,浓度越大,抑制作用越明显,但不影响凝集素受体的表达;IFN-α可使JEC细胞G1/G0期增加、S期增加和G2/M期阻滞,前者与IFN-α浓度呈正相关,而后者则为负相关.
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血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线及细胞内钙离子浓度的影响
目的:研究血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis P.g)生长曲线的影响.探讨血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响.方法:通过低温高速离心,超声破碎等方法提取血链素,使血链素作用P.g,于37℃厌氧培养:采用微量液体对倍稀释法测定血链素对P.g的小抑菌浓度(MIC).选用不同浓度的血链素作用P.g,分别于0、4、8、12、16、20、24、48 h时测定各组细菌悬液在590 nm波长处的A值,并绘制生长曲线.用Fluo-3/AM负载P.g细胞内钙离子,在激光共聚焦显微镜下观察Ca2+荧光强度变化.结果:血链素对P.g有显著抑制作用,其MIC为0.0625 g/L.血链素作用后,P.g的生长曲线在8～16 h发生显著改变,对数生长期被延迟了8h.血链素作用后,P.g细胞内钙离子浓度显著降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌有明显的抑制作用,在本实验范围内,随着血链素浓度的升高其抑制作用逐渐增强.血链球菌细菌素可导致牙龈卟啉单胞菌细胞膜钙离子通透性增强.
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血链球菌细菌素对白色念珠菌及热带念珠菌菌体形态影响的研究
目的:研究血链球菌细菌素对白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)的抑制作用及形态学影响.方法:通过低温高速离心,超声破碎等方法提取血链素,使血链素分别作用于单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃下80r/min振荡培养.培养12h时,以平板菌落计数法测定不同浓度血链素的抑菌活性；每2h测1次各组菌悬液的A值,并绘制生长曲线,观察血链素对C.a及C.t生长曲线的影响.在血链素对C.a及C.t的作用过程中,利用光学显微镜及扫描电镜对菌体形态进行观察.结果:单独及混合培养的C.a及C.t在1 g/L血链素作用后菌落数低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).血链素作用后,C.a及C.t的生长曲线在6～14 h发生显著改变,对数生长期被推迟8h.血链素作用后,C.a及C.t的孢子及菌丝表面出现“盘状凹陷”形态.结论:血链素对单独及混合培养的C.a及C.t具有显著抑制作用.血链素使C.a及C.t的对数生长期推迟.血链素可导致念珠菌C.a及C.t的菌体形态发生改变.
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柠檬提取物对口腔致龋菌生长影响的研究
目的:检测柠檬提取物的生物安全性,研究柠檬提取物对主要致龋菌生长的影响,为进一步机制研究提供依据.方法:柠檬提取物ICR小鼠急性毒性试验(LD50试验):实验分两组,实验组柠檬水提浓缩液按0.05 ml/10g· bw灌胃,空白对照组室温、阳光等饲养条件与实验组相同.饲养14 d观察动物反应,第15天处死,解剖检查脏器情况；采用琼脂稀释法研究柠檬提取物对5种主要致龋菌(变异链球菌、血链球菌、内氏放线菌、远缘链球菌、嗜酸乳杆菌)生长的抑制作用,并采用菌落计数法检测柠檬提取物对5种细菌生长的影响.结果:ICR小鼠在14 d观察期中未发现死亡现象,处死后检查各脏器无异常现象.柠檬提取物对变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌的小抑菌浓度MIC(minimum inhibitory concentration)为4.5 g/L,对嗜酸乳杆菌和内氏放线菌的MIC为2.25 g/L.5种致龋菌在柠檬提取物作用下,其生长曲线均在第6小时左右出现明显的转折点,实验组与阴性组的细菌菌量均有显著性差异(P＜0.05).结论:柠檬提取物样品LD50大于5000 mg/kg· bw,属于实际无毒物质；柠檬提取物对口腔致龋菌的生长有抑制作用.
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噻唑蓝法测定香菇多糖体外对癌细胞毒作用
目的 评价香菇多糖对癌细胞的体外细胞毒作用.方法 采用噻唑蓝(MTr)法测定香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的细胞毒作用.结果 香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的半数抑制浓度(IC50)值分别为(25.8±3.4),(90.0±7.8),(63.3±4.2),(33.1±3.3) μg·mL-1,生长曲线显示香菇多糖100μg· mL-1对PC-3细胞及HepG2细胞的抑制率随着时间增加而增强,表现出一定的时-效关系.结论 香菇多糖对癌细胞具有一定的体外细胞毒作用.
