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壳寡糖对乳酸杆菌体外生长的影响
目的:研究壳寡糖对乳酸杆菌体外生长的影响.方法:将乳酸杆菌MRS培养基中的葡萄糖替换为壳寡糖及向原培养基中加入适量的壳寡糖,通过测定OD值比较乳酸杆菌的生长状况.结果:以壳寡糖完全代替葡萄糖的培养基中乳酸杆菌的生长状况不如MRS培养基,而少量壳寡糖与葡萄糖协同的培养条件使乳酸杆菌的生长适应期明显减短,促进其生长.结论:乳酸杆菌对壳寡糖的利用不如对葡萄糖的利用,Ig/1壳寡糖与葡萄糖协同作用时可明显缩短乳酸杆菌的生长适应期,促进细菌生长.
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诱变后混合菌在锌矿中生长的研究
为了研究诱变后混合茵的生长情况,我们采用Leathen和9K培养基,培养保存2年的诱变菌群和连续传代的诱变菌群,做出它们的生长曲线.结果表明:连续传代的诱变菌群2天达到稳定期,而保存2年的诱变菌群生长达到稳定期,需要多生长2天;每培养基中,加入矿浆浓度(2%、4%、8%、16%、32%)的硫化锌矿,矿浆浓度在32%时E菌群生长量高;矿浆浓度4%、8%、16%时3菌群生长量高;矿浆浓度2%时D菌群生长量高.实验结果说明:混合菌诱变可以大大提高菌群在锌矿中生长能力.
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三氧化二砷对人肺腺癌Anip973细胞内[Ca2+]i的影响
目的研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响.方法培养人肺腺癌Anip973细胞,用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察As2O3对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响;用生长曲线法测药物对肿瘤细胞增殖的影响.结果①LSCM显示As2O3 作用后的人肺腺癌细胞Anip973细胞内[Ca2+]i显著升高(P<0.001).②As2O3 对人肺腺癌细胞株Anip973细胞内[Ca2+]i升高作用具有剂量依赖性.③As2O3 能明显抑制人肺腺癌Anip973细胞的增殖.结论 As2O3 可能是通过升高人肺腺癌细胞内[Ca2+]i 来启动细胞凋亡机制,诱导肺癌细胞凋亡,从而抑制其增殖.
关键词： 三氧化二砷 细胞内游离钙 激光扫描共聚焦显微镜 生长曲线 -
双黄连冻干粉对大肠埃希菌直接抑制作用的实验研究
目的:探讨双黄连冻干粉对大肠埃希菌的直接抑制作用.方法:采用微量肉汤稀释法,依据不同浊度液体内细菌含量不同的原理,绘制时间-浊度曲线(生长曲线),并对结果进行分析.结果:不同浓度双黄连作用下,细菌的生长曲线不同.双黄连浓度为12.5mg/mL时细菌生长为特殊,浓度为50mg/mL时细菌不生长.结论:生长曲线可以反映药物的直接抑菌作用;一定浓度范围内的双黄连冻干粉对大肠埃希菌标准株ATCC25922的生长有促进作用.
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藏药绿萝花体外抑制肿瘤细胞生长的实验研究
目的 探讨藏药绿萝花的体外抗肿瘤细胞作用,为其临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.方法 以k(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以来源于不同组织器官的人肺腺癌细胞株A549、肝癌细胞株HepG2、胃癌细胞株SGC7901、恶性黑色素瘤细胞株MM-A375、神经母细胞瘤细胞株SHEP1为研究对象,采用瘤细胞生长曲线、细胞形态、软琼脂克隆实验及细胞凋亡检测方法,研究绿萝花体外抗肿瘤细胞生长的作用.结果 绿萝花对5种肿瘤细胞生长均有抑制作用,其IC50分别为1 708.58、550.04、467.39、1 084.25、1 805.42μg/mL,其中对肝癌细胞株HepG2、胃癌细胞株SGC7901抑制效果好,且500 μg/mL绿萝花干膏制剂能引起SGC7901瘤细胞皱缩、细胞形态变圆、细胞周围变亮、细胞克隆数量减少和克隆体积变小,并能引起38.41％的SGC7901瘤细胞凋亡.结论 绿萝花干膏制剂在体外通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而产生抗肿瘤作用,并具有剂量、时间依赖性.
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人型支原体的分离培养和生长特性的研究
目的 研究人型支原体(Mh)的生长曲线、菌落形态演变等生物学特性及临床分离方法.方法 取临床妇科阴道标本58例,同时接种液体培养基与固体培养基.在固体培养基上挑单菌落放人液体培养基进行纯化.选一株纯化的Mh接种于液体培养基,每隔4 h看颜色变化测pH值,并取10μL液体滴种在固体培养基上,计数菌落得出生长曲线.对不同生长时间的菌落拍照.从生长曲线得知对数生长期,并可在此期间进行保种.结果 妇科阴道标本临床分离的Mh阳性率为8.62%;明确了在固体培养基上Mh菌落的生长演变过程;得到了Mh特有的生长曲线,并由此推出Mh在液体中大生长数量及其时间、繁殖一代所需的时间和对数生长期及液体生化反应的pH值颜色改变规律.结论 Mh的分离诊断,应该以固体培养基为基础,显微镜下看到典型的Mh特征性"油煎蛋"菌落为准.在液体培养基中Mh的传代以及保种在40 h左右,即1/2对数生长期好.
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spo0A基因在艰难梭菌生长及芽孢形成中的作用
目的 了解spo0A基因对艰难梭菌临床分离株生长和芽孢产生的影响.方法 采用ClosTron敲除技术构建艰难梭菌临床分离株C25的spo0A基因突变株,分光光度计检测菌液浓度并绘制生长曲线,孔雀绿染色法计数芽孢和营养细胞.结果艰难梭菌临床分离株C25的spo0A基因敲除突变株和敲除前亲代株的48 h生长曲线无明显差异,但突变株不再产生芽孢.结论 spo0A基因是艰难梭菌芽孢形成过程中的关键基因,但并非其生长过程中的主要基因.
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肺炎链球菌适应性评价的方法学探索
目的 测定肺炎链球菌在无抗菌药和有抗菌药选择压力下适应性实验方法 的评价.方法 选用肺炎链球菌国际耐药克隆Taiwan19F-14、Spain23F-1各1株和肺炎链球菌标准菌株ATCC49619,采用分光光度法和菌落计数法分别测定肺炎链球菌生长曲线和杀菌曲线,以修正的Gompertz方程拟合曲线,计算生长动力学参数,对两种方法 测定的生长曲线和杀菌曲线进行比较.结果 两种方法 测定的生长曲线在肺炎链球菌对数生长期所测的结果 基本一致,同时还发现肺炎链球菌菌液的A600值和菌落计数之间,在对数生长期有很好的相关性,并确定了两者的函数关系.两种方法 测定的杀菌曲线,分光光度法拟合1/2MIC,1MIC药物浓度杀菌曲线与对照曲线相比,随着药物浓度升高无明显下降趋势.分光光度法所测定杀菌曲线中达到99.9%杀菌率的2MIC浓度曲线,基本与X轴相重合.结论 分光光度法作为测定肺炎链球菌生长曲线、计算生长动力学参数的实验方法 ,与菌落计数法比较结果 一致,且更为简便,可以替代后者用于评价肺炎链球菌在无抗菌药条件下的适应性.但分光光度法测定肺炎链球菌杀菌曲线、评价杀菌效果,无法替代菌落计数法评价肺炎链球菌在抗菌药选择压力下的适应性.
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布鲁菌在 Bact／Alert 血培养仪上生长曲线特点
目的：观察布鲁菌在 Bact/Alert 血培养仪上生长曲线特点，帮助预测该菌株生长，协助临床快速诊断布鲁菌病。方法对血培养阳性，经血清学检测布鲁菌凝集试验阳性确诊的15例布鲁菌病患者的流行病学、临床资料、实验室资料进行回顾分析。结果15例患者均有不规则发热、动物接触史。15例患者的血培养细菌生长曲线具有相同的特点：阳性报警时间72 h 左右，迟缓期较长，生长期较短，生长期对应的纵轴较短，稳定期平缓。结论布鲁菌病临床表现多样，临床医师对该病的认识不足容易误诊，因此对发热患者应重视血液病原学检验。实验室工作人员通过观察血培养细菌生长曲线有助于加快对该菌的预测。工作人员应增强自身防护意识，防止实验室感染。
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第4讲：身材矮小的鉴别诊断和处理
身材矮小(shortstature)是指在相似环境下,儿童身高低于同种族个体正常身高2个标准差以上,或者低于正常儿童生长曲线第三百分位.在众多因素中,内分泌的生长激素(GH)对身高的影响起着十分重要的作用.患儿因GH缺乏所导致的矮小,称为生长激素缺乏症,又称为垂体性侏儒症.
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再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞分离及培养
目的 分离再生障碍性贫血(再障)患儿骨髓间充质干细胞,进行体外培养,为进一步研究打下实验基础.方法 从再障患儿及正常志愿者骨髓中分离骨髓间充质干细胞,进行体外培养,诱导向成骨细胞、成脂细胞分化和流式细胞仪检测表面标志CD34、CD45、CD73和CD90.绘制生长曲线描述原代和传代细胞生长情况.结果 分离的贴壁细胞经向成骨细胞和脂肪细胞分化诱导培养,分别显示茜素红染色和油红染色阳性;CD73和CD90阳性.生长曲线显示,与正常志愿者相比再障患儿体外培养的骨髓间充质干细胞传代培养中生长能力减低.结论 再障患儿骨髓间充质干细胞存在异常,可能在再障发病机制中起着重要作用.
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西藏自治区拉萨市0～6岁藏族儿童体格发育正常值的建立
目的 建立拉萨市0～6岁藏族儿童体格发育的正常参考值.方法 以横断面调查的方法,选取西藏自治区人民医院妇产科生后24～48 h的健康新生儿、西藏自治区人民医院妇幼保健院儿保科1～6岁和拉萨市5所幼儿园3～6岁的健康藏族儿童为调查对象.所有研究对象均为藏族常驻居民且无先天畸形.依据年龄分为新生儿、1、2、3、4、5和6岁组.估计每个年龄组男女至少各需300名.统一配置测量工具,参考《儿童保健学》提供的方法直接测量体重、身高(长)、头围(顶臀长)、坐高、胸围、上臂围和皮脂厚度7项体格发育指标,并间接计算BMI.对纳入分析的体格发育指标数据剔除极值数据.应用LMS软件构建不同性别年龄组的8个体格发育指标的百分位数及百分位数曲线图.按照2005年中国九城市城区儿童推荐的标准和2006年WHO推荐标准,采用标准统计量检定法(Z值法),分别计算各个体格发育指标的Z值.结果 2012年1月至2013年6月符合本文纳入标准的4 330名0～6岁藏族儿童30 310个体格发育指标数据进入分析,其中男童2 114名,女童2 216名.删除对模型干扰的极值数据84(0.28％)个.LMS法构建的百分位数曲线光滑,表明每组样本量基本满足拟合曲线要求.建立了拉萨市0～6岁藏族男、女童的8个体格发育指标的x±s及百分位数(P3 ～P97).各年龄组男童有18个体格发育指标显著大于女童,女童有6个体格发育指标显著大于男童,总体上藏族男童的体格发育指标高于藏族女童.拉萨市藏族儿童的8个体格发育指标总体上落后于2006年WHO推荐标准,更落后于中国九城市城区儿童的体格发育水平.随年龄增长,藏族2～5岁儿童的BMI值逐渐走低.结论 建立的0～6岁藏族儿童体格发育指标的x±s及百分位数将为藏族儿童临床科研实际应用和不同民族儿童体格发育指标之间的比较提供科学依据.
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BCSC-1基因异位表达对人小细胞肺癌细胞增殖的抑制效应
背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象.该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异位表达对NCI-H446细胞增殖的抑制效应.方法:用PCR扩增BCSC-1 cDNA,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1.通过脂质体把pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染入野生型NCI-H446细胞.以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的NCI-H446细胞为对照组,野生型NCI-H446细胞为空白对照组.采用流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测细胞增殖;免疫组化确认BCSC-1基因和CD44分子在NCI-H446细胞中的表达.结果:成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,制备了BCSC-1基因异位高表达的NCI-H446稳定细胞株.细胞周期分析显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞大部分阻滞在G0/G1期,明显高于对照组和空白组(P<0.01).MTT法检测显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞与对照组、空白组相比,生长速度明显减慢(P<0.05).免疫组化显示异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞CD44表达增高.结论:BCSC-1基因的异位表达对NCI-H446细胞的恶性增殖行为有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与细胞周期阻滞和黏附分子CD44表达增高有关.
关键词： BCSC-1基因 NCI-H446细胞 生长曲线 细胞周期 CD44 -
浅析微生物计数方法的回收率
回收率是衡量微生物方法验证中微生物恢复试验成功与否的关键指标,回收率限度标准设置是否合理,直接决定了微生物恢复试验是否可以被接受,也决定了微生物方法验证的成败.
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采用SPSS软件快速构建儿童生长曲线
目的 建立通过SPSS软件快速构建儿童生长曲线的方法.方法 根据2005年中国九省市7岁以下儿童横断面调查获取的体格生长发育数据,应用SPSS软件计算17 721名上海市0～7岁儿童中男童年龄别体质量指标的均值、标准差以及第3百分位(P3)、第10百分位(P10)、第50百分位(P50)、第90百分位(P90)和第97百分位(P97)数值,通过软件曲线估计功能选择合适的多项式拟合模型;绘制体质量百分位数曲线,修改曲线的相关属性以实现曲线的佳拟合效果,通过调用模板功能实现曲线叠加.结果 应用SPSS软件,通过数据计算、曲线估计、曲线拟合、模板调用与曲线叠加等过程,成功构建了形态光滑、趋势一致的上海市0～7岁男童年龄别体质量的P3、P10、P50、P90、P97生长曲线.结论 应用SPSS软件可快速构建儿童生长曲线,操作简单,实用性强,值得推广应用.
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两种群东方田鼠生长发育及繁殖性能观测
目的 测定和比较东方田鼠洞庭湖种群(DTH)(长江亚种)和青铜峡种群(QTX)(指名亚种)的繁殖及生长特性.方法 东方田鼠雌雄1∶1长期同居法饲养繁殖,观察两种群东方田鼠的窝产仔数、胎间隔、初生体质量、离乳体质量等繁殖指标.两种群田鼠雌雄各选30只,测定不同时间点的体质量,并用Von Bertalanffy模型方程拟合其生长曲线.结果 DTH窝产仔数(4.70±1.15)只,胎间隔(30.78±10.21)d,出生体质量(4.09±0.13)g,离乳体质量(27.31±1.10)g;QTX窝产仔数(3.58±1.00)只,胎间隔(35.60±12.48)d,初生体质量(4.37±0.09)g,离乳体质量(28.22±0.46) go从生长曲线可见,两种群东方田鼠的体质量性二型分化分别出现在14d和28 d,雄性田鼠的体质量显著高于雌鼠.拟合结果显示,两种群田鼠雌性体质量生长曲线体质量拐点出现时间比雄性鼠早.结论 DTH田鼠繁殖能力较QTX高,两个种群田鼠雌雄鼠的体质量均有明显的性二型分化特征,雌体较雄体早熟.
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两种模型分析中国实验用小型猪生长曲线的拟合与比较研究
目的 运用Logistic和Gompertz模型对中国实验用小型猪(CEMP)早期生长发育进行拟合并比较分析,找出对CEMP适宜的生长曲线模型.方法 测定CEMP封闭群所选个体不同周龄的体质量,离乳前按每周统计;离乳后按每2周龄统计体质量数据.用Logistic和Gompertz模型对封闭群种猪体质量早期生长发育进行拟合分析.结果 通过对比Logistic和Gompertz模型分别拟合CEMP的生长过程发现,Gompertz模型生长曲线估测的结果与实际情况更为接近.Gompertz模型估测本研究建立的封闭群大体质量是31.13 kg,拐点日龄101.31 d,拐点体质量11.45 kg,从估测日增重看,从7日龄的0.0343 kg/d,逐渐增加到101.3日龄的大值0.1603 kg/d,而后逐渐减小,表现为生长速率先增加后减少.结论 本研究为CEMP封闭群选育和饲养工作建立了适宜的生长曲线模型,对改善饲养管理方法和繁殖育种等方面都有参考意义.
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免膀胱平滑肌细胞的分离培养与鉴定
目的 建立分离、培养高纯度兔膀胱平滑肌细胞的方法,并进行细胞学鉴定与分析.方法 正常成年新西兰白兔共6只,运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层.然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞.在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况,同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析,并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴定分析.后根据细胞计数绘制细胞生长曲线和增殖曲线.结果 24 h可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,7 d可进行传代,传至第10代时细胞仍迅速生长.倒置显微镜下观察细胞相互交叉、重叠生长形成多层,高低起伏呈"谷和峰"样结构.至第12代时,细胞开始变形.至第15代时细胞已失去平滑肌细胞的典型形态特点,细胞生长杂乱且不规则.至第20代时细胞已死亡.以第4代细胞进行形态学细胞爬片H-E染色和透射电镜观察分析,以及平滑肌特有的α-肌动蛋白免疫荧光染色分析均证实,该分离培养的细胞为膀胱平滑肌细胞,且纯度高达100%.结论 酶分离法在短时间内成功培养大量高纯度的膀胱平滑肌细胞,为深人研究膀胱平滑肌细胞的病理生理及分子生物学奠定了基础.
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超声测量评估胎儿主要生长参数的研究
目的 应用超声获得不同孕周胎儿主要生理参数(双顶径、头围、腹围、股骨长)的正常值范围及其生长曲线,并与10年前的数据进行比较.方法 正常足月单胎妊娠胎儿1 100例,于孕17～41周测量主要生理参数(双顶径、头围、腹围、股骨长)共计2522次,应用相关回归分析并建立各参数与孕龄的回归公式,得出参考值,建立生长曲线,并与10年前的数据进行比较.结果 与10年前数据比较后发现,孕28周以后胎儿的腹围、股骨长、双顶径数值大多显著增加(P值分别＜0.05、0.01),孕36周后头围显著增加(P值分别＜0.05、0.01).各生理参数均与孕周呈正相关(GA即孕周):双顶径=2.386 012 GA+3.674 827,r=0.970 936,P＜0.000 1;头围=5.161 372 GA+11.432 831,r =0.968 883,P＜0.000 1;腹围=6.326 809 GA-29.361 569,r =0.973 708,P<0.000 1;股骨长=2.051 687 GA-8.661 862,r=0.976 82,P＜0.000 1.结论 孕28周后胎儿的主要生理参数大多较10前显著增加,且与孕周呈正相关,并据此建立了新的生长曲线.
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伴放线放线杆菌光滑株与粗糙株生长及磷酸胆碱表达的比较研究
目的 绘制伴放线放线杆菌同一菌株不同表型的生长曲线,测定菌体蛋白表达上的差异.方法 采用液体培养基TSB培养伴放线放线杆菌分离株D7S及其光滑型菌株D7SS,紫外分光光度计检测细菌密度,连续观测30 h,绘制生长曲线.聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳后考马斯亮蓝染色比较两种表型的细菌蛋白的差异.免疫印迹法(Western Blot)观察两种表型细菌蛋白对单克隆抗体TEPC-15的反应情况.结果 D7SS菌株比D7S菌株更早进入对数期和衰亡期;两型细菌全细胞蛋白电泳考马斯亮蓝染色时蛋白带未见明显差异; 免疫印迹分析 D7S菌株在分子质量接近10 ku的蛋白中存在磷酸胆碱,而D7SS中未发现.结论 伴放线放线杆菌D7S和其光滑型菌株D7SS的生长曲线以及对TEPC-15抗体的反应性明显不同.
