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产生物碱和石杉碱甲蛇足石杉内生真菌的初步研究
目的 筛选产生物碱和石杉碱甲的内生真菌.方法 以分离自健康蛇足石杉植株组织中的14株内生真菌为材料,采用酸性染料比色法筛选产生物碱的菌株;在此基础上,对内生真菌发醇液进行HPLC测定,分析是否产生石杉碱甲;并利用形态学和rDNA ITS序列分析进行菌种的初步鉴定.结果 筛选出8株产生物碱的菌株,并从中筛选出一株产生石衫碱甲的内生真菌SY-02,初步鉴定内生真菌SY-02为1株炭角菌.结论 在分离自蛇足石杉的内生真菌中,能产生生物碱的真菌比例较高,内生真菌菌株SY-02能在发酵条件下产生石杉碱甲.以产生物碱的菌株为出发菌株,结合活性及结构检测,可以使产石杉碱甲内生真菌的筛选更具有方向性.
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盐酸苯海拉明片含量测定方法的改进
盐酸苯海拉明片的含量测定［1］采用溴甲酚绿与其定量生成离子对化合物，用氯仿萃取离心后进行分光光度测定，操作比较繁琐费时。本实验采用高效液相色谱法，以醋酸氟氢可的松为内标，测定盐酸苯海拉明片的含量，快速、准确、灵敏度高。1 仪器与试药 高效液相色谱仪，包括SP8810泵、SC-100检测器、SP4400积分仪(美国光谱物理公司)；UV-2100型紫外可见分光光度计(日本岛津公司)；盐酸苯海拉明对照品(批号：0066-9204)与醋酸氟氢可的松对照品(批号：009-9003)，由中国药品生物制品检定所提供，盐酸苯海拉明片，批号981118江苏省金潭制药厂，批号95096江苏省徐州制药厂，批号960723河南省许昌地区第二制药厂；甲醇(色谱纯)，北京昌化精细化工厂；硫酸铵(分析纯)，天津南开化工厂。
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高铁血红蛋白测定波长的校正
高铁血红蛋白(MetHb)的检测有化学法及仪器法…，其测定原理是利用MetHb特殊吸收波长完成。因此波长的选择是测定结果准确与否的重要条件。但文献报道，测定MetHb波长为630～634 nm[2]、630 nm[3]、635 nm[4]、632 nm[1]等，为保证实验结果准确可靠，我们利用自身实验室条件校正比色计波长并确定MetHb佳比色波长。1．仪器：722光栅分光光度计。2．试剂：(1)溴甲酚绿溶液：取溴甲酚绿0．1 g，溶于体积分数为20％的乙醇溶液100ml中，微微加热至完全溶解，过滤后10倍稀释。(2)次甲基蓝溶液：取次甲基蓝0．1 g，溶于100ml重蒸馏水中，微微加热溶解，过滤后稀释1 000倍。(3)0．02 mol／L pH 7．2磷酸盐缓冲液。(4)质量浓度为10％的高铁氰化钾。
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溴甲酚紫与溴甲酚绿法测定血清白蛋白效果比较
目的比较和评价溴甲酚紫(BCP)法和溴甲酚绿(BCG)法测定血清白蛋白(ALB)的效果.方法用BCP法和BCG法同时测定混合血清ALB,进行重复性、回收率、干扰试验、线性范围、方法对比试验等.结果用BCP法测定血清ALB,批内试验S=0.465,CCV=1.18%;批间测定S=1.162,CCV=2.91%;平均回收率为99.3%;线性范围5.0～85.0g/L; BCG法测定ALB,批内试验S=1.023,CCV=2.15%;批间测定S=2.635,CCV=5.66%;平均回收率为94.7%;线性范围5.0～59.5g/L.BCP和BCG两种方法测定血清ALB有显著性差异(P<0.001),且呈正相关(r=+0.936).结论 BCP法测定血清ALB较BCG法测定的重复性较好,回收率高,线性范围稍宽,抗干扰性强.
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溴甲酚绿法检测血清白蛋白应注意的问题
目的探讨溴甲酚绿(BCG)法检测血清白蛋白时出现的问题,提高白蛋白检测的准确性.方法采用BCG法和电泳法分别测定急性炎症组、非急性炎症组、正常对照组血清白蛋白,计算出相差数值进行比较.结果在对照组和非急性炎症组患者样品中,两种方法测出的血清白蛋白差异无显著性,而在急性炎症组患者样品中,BCG法测定值比电泳法测出的数值明显偏高(P＜0.01).并且随α-球蛋白升高而增高(P＜0.01).结论BCG法检测急性炎症患者样品血清白蛋白,有明显误差,应采用血清蛋白电泳法测定,以提高检测准确性.
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复合染料在嗜酸性粒细胞计数中的应用
嗜酸性粒细胞计数临床常见的是直接计数、涂片白细胞分类计数和血球计数仪分类计数3种方法.但是临床上为了解疾病进展过程,需要动态观察嗜酸性粒细胞的变化,往往采用嗜酸性粒细胞直接计数.
关键词： Hinkemann液 复合染料 溴甲酚绿 甲基红 嗜酸粒细胞 -
溴甲酚绿光度法测定曲美胶囊中的盐酸西布曲明
在pH7.5的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲介质中,盐酸西布曲明(SH)与溴甲酚绿(BCG)染料反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变,大吸收波长在614 nm处,从而建立测定SH的光度法.在大吸收波长处,SH的浓度在0～2.31×10-5mol/L范围内遵守比尔定律,表现摩尔吸光系数∈614为1.15×104L/(mol·cm),检出限为1.46×10-6mol/L.方法具有较高的灵敏度和良好的选择性,用于曲美胶囊中盐酸西布曲明的测定,结果满意.
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催化动力学分光光度法测定痕量铜
我们发现在氨水介质中痕量Cu2+对H2O2氧化溴甲酚绿的反应有强烈的催化作用.采用固定时间法,非催化反应与催化反应的吸光度值比的对数值lg(A0/A)与Cu2+的浓度在一定范围内呈现良好的的线性关系.由此建立的痕量铜的催化光度分析的新方法的灵敏度与有关文献[1～3]相当,检出限为7.0×10-11g/ml,测定范围为0～0.75μg/25mg.重现性较好.用本法测定人发、指甲中的痕量Cu2+,结果令人满意.
关键词： 催化动力学分光光度法 铜离子 溴甲酚绿 -
Brij-35:BCG比值对测定血清白蛋白非特异性反应的影响
目的探讨Brij-35:BCG比值对测定血清白蛋白非特异性反应的影响.方法配制Brij-35:BCG不同比值BCG试剂测定血清反应不同时间的白蛋白结果和吸光度变化.结果非特异性反应随Brij-35:BCG比值的增高而减低.结论手工操作的实验室应采用Brij-35:BCG为22.8:1的BCG试剂,以减低非特异性反应对白蛋白测定结果的干扰.
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清/球蛋白比值可靠性的探讨
近20年来临床一直抱怨检验科的清/珠蛋白比值(A/G)有错误,尤其是肝科医生普遍感觉许多健康者的A/G都低于1.5,因此对检验科工作不满意,认为不可信.为此我们随机对60例病人血清用经典盐析法及全自动分析仪的溴甲酚绿(BCG)比色法作清蛋白测定,并由总蛋白值减去清蛋白值得球蛋白值,再求出各自A/G.
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罂粟壳生物碱的可见分光光度法测定
目的:探讨罂粟壳药材的含量测定方法.方法:采用溴甲酚绿显色,可见分光光度法测定罂粟壳中总生物碱的含量.结果:平均回收率为101.2%,RSD为2.46%.结论:各批次样品总生物碱的含量差别较大,应采取措施加强罂粟壳及其制品的质量控制.
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溴甲酚类试剂在测定肾病综合征和血液透析患者血清白蛋白时的偏差
目的探讨溴甲酚类试剂在肾脏疾病患者血清白蛋白(Alb)测定中的偏差.方法用溴甲酚绿(BCG)、溴甲酚紫(BCP)与免疫散射比浊法(ITM)测定肾病综合征和血液透析患者血清Alb,并对测定值作比较.结果肾病综合征患者血清Alb的BCG测定值偏高,高差值达 7.8 g/L,偏高值可用方程Y=0.678Xα2球蛋白-2.405表达.血液透析患者血清Alb的BCP测定值约偏低3.1 g/L.结论当肾病综合征患者血清α2球蛋白增高、Alb/球蛋白(A/G)＜0.8时,α2球蛋白对BCG法测定有明显影响,BCP法则由于血液透析患者血清中的3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(CMPF)的影响导致测定值偏低.
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两种染科结合法测定血清白蛋白的差异
目的了解溴甲酚绿(BCG)和溴甲酚紫(BCP)染料结合法测定血清白蛋白结果的差异.方法在日立仪器上使用BCG和BCP试剂,对体检人员、急性胆囊炎和骨折病人、肝硬化或晚期肿瘤病人的血清进行对比测定.同时以免疫散射比浊法予以验证.结果在任何情况下,BCP的白蛋白结果均和免疫散射比浊结果一致.体检人员BCG的白蛋白均值较BCP白蛋白均值低3.5 g/L(BCP均值为47.8 g/L).手术病人的BCG白蛋白均值为32.9 g/L,和BCP白蛋白均值无明显差异.肝硬化和肿瘤晚期病人BCG的白蛋白均值较BCP白蛋白均值高2.1 g/L(BCP均值为23.5 g/L).结论 BCP的染料结合法的白蛋白测定结果较BCG方法可靠性强.尽管大多实验室已经采用BCG速率法,以克服血清中非白蛋白组分参与显色,使白蛋白结果偏高;但是在低白蛋白的状况下,结果仍偏高.同时在参考区间内的白蛋白含量处,白蛋白结果偏低.应该引起临床重视.每个实验室必须自行建立白蛋白的参考区间,不可任何方法用相同的参考区间.
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溴甲酚绿与溴甲酚紫法测定白蛋白的差异比较
目前,用于白蛋白(albumin,Alb)测定的方法主要有溴甲酚绿(bromcresol green,BCG)法和溴甲酚紫(bromcresol purple,BCP)法.但BCP法和BCG法测定血清Alb在结果上有一定的差异,会引起Alb及白/球蛋白(A/G)比值的不一致,给临床应用带来了很大的困扰.为此,我们比较了2种方法测定不同年龄段血清Alb的差异.
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电泳图谱中白蛋白的疏散现象对白蛋白测定结果的影响
对大量蛋白电泳图谱的分析过程中,发现在某些患者的白蛋白区域存在疏松增宽现象,即在白蛋白带的阳极侧边缘出现粗糙的淡染区,这里称之为疏散现象,报道如下.
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血清白蛋白检测方法对糖化白蛋白的影响
随机抽取306份不同白蛋白( Alb)浓度的新鲜血清标本,分别用溴甲酚绿法( BCG)、改良溴甲酚紫法( mBCP)、免疫比浊法( ITA )检测 Alb 浓度,液态酶法检测糖化白蛋白( GA) ,并计算GA值[ GA%(%) =GA/Alb × 100%]. 正常Alb浓度( Alb≥ 40 g/L )时, BCG 与 mBCP 法、BCG 与 ITA法、mBCP与ITA法检测结果比较,临床差异不明显,而且GA% BCG与GA% mBCP比较,差异无统计学意义( P=0. 537 );低Alb浓度( Alb<40 g/L)时,BCG法分别与mBCP、ITA法比较差异有统计学意义( P < 0. 01 ) , GA% BCG明显低于GA% mBCP ( P <0. 01 ). 故正常 Alb 浓度时, BCG、mBCP 与ITA 法三者结果差异无明显临床意义,各法用于GA%计算无明显差异;但低Alb浓度时,mBCP与ITA法二者一致性优于BCG与ITA法,若使用BCG法则GA%结果可能被低估.
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槟榔提取物F57中槟榔碱的含量测定
目的:测定促胃肠动力有效部位F57中槟榔碱的含量.方法:采用酸性染料比色法测定促胃肠动力有效部位F57中槟榔碱的含量,测量波长为618 nm.结果:槟榔碱在19.7～115.3 μg范围内呈线性关系,回归方程为y=8.900×10-3x-0.077 8,r=0.999 8.加样回收率为100.3%, RSD为0.731%(n=6).结论:该法简便、灵敏,可为以后类似实验提供方法学借鉴.
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三种不同方法测定人和动物血清白蛋白的比较分析
目的探讨三种不同方法在测定人和动物血清白蛋白之间的关系.方法随机抽取健康体检者血清73份、家兔血清40份、孕妇血清40份,采用溴甲酚紫(BCP)、溴甲酚绿(BCG)和电泳法测定血清白蛋白.结果健康体检组BCP法、BCG法和电泳法无显著性差异,孕妇组BCP法与BCG法相比,有显著性差异,BCG与电泳法高度相关且无显著性差异,家兔组BCP法与BCG法结果显著差异.结论BCG法和电泳法测定人或动物血清白蛋白两者更接近实际含量,有利于各方法学的相关比较,为动物血清作为校准物或质控物时提供科学的依据,BCP法不宜作动物血清白蛋白的检测.
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BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响
目的探讨BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响.方法用不同BCG和Brij-35浓度的七种BCG试剂在生化分析仪上测定白蛋白浓度20.0～60.0g/L五份血清结果,按NCCLS制定的线性评价方案评价线性. 结果 Brij-35:BCG为11.4:1,BCG从0.056g/L增加到0.158g/L,直线回归方程斜率由0.765提高到0.992,截距由8.06下降到0.22,线性由不可接受(F＞Fo.o1)成为良好(F＜F0.05),增加Brij-35:BCG比值,使斜率下降,截距增高,F值增大.结论在生化分析仪上试剂与标本量为100:1测定,建议应用BCG浓度为0.158g/L,Brij-35为1.8g/LBCG试剂.
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两种方法测定血清白蛋白的临床应用评价
目的 分析电泳法和溴甲酚绿法检测白蛋白及白蛋白/球蛋白比值的相关性.方法 本院健康体检人员及相关疾病人员102例,采用Helena全自动电泳仪和日立7600-020全自动生化分析仪分别进行测定,得出总蛋白、白蛋白及A/G比值,对上述结果进行相关性分析.结果 溴甲酚绿法与电泳法进行比较:健康组ALB及A/G相关系数r分别为0.98、0.97,(P＞0.05);肝病组ALB及A/G相关系数r分别为0.90、0.91(P＞0.05);肾病组ALB及A/G相关系数r分别为0.74、0.73(P＜0.05);多发性骨髓瘤组ALB及A/G相关系数r分别为0.52、0.55(P＜0.05).结论 对健康人和肝病患者两种方法检测白蛋白有相关性,电泳法依据物理性质分离蛋白质,结果更具客观性,在肾病和多发性骨髓瘤病人的测定结果更加稳定可靠.
