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壮族与汉族载脂蛋白E基因频率的比较
人类血浆载脂蛋白E(ApoE)基因对脂蛋白代谢的调控具有重要意义.ApoE具有3种等位基因(e2,e3,e4)和6种基因型(e2/2,e2/3,e2/4,e3/3,e3/4,e4/4)[1,2].其基因型的分布在不同种族群体中差异显著[2].我们应用限制酶切变异型基因检测法,利用多聚酶链式反应技术结合限制酶切片段长度多态性,首次对壮族人群ApoE基因频率进行研究,并将之与汉族人群进行比较.
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系统性红斑狼疮患者肿瘤坏死因子α基因多态性研究
肿瘤坏死因子α(TNFα)是由HLA Ⅲ类基因编码的重要的炎症前期细胞因子,SLE患者血清中其浓度可表现为升高或正常,且与狼疮活动性及狼疮肾的发生相关[1]。TNFα基因启动子-308位点有鸟嘌呤和腺嘌呤的互换,西欧白人及我国台湾汉人SLE患者中均发现有TNFα*2等位基因频率明显增加[2.3]。为探讨湖南地区汉族TNFα基因-308位点多态性与SLE的关系,我们采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性PCR-RFLP分析了62例湘籍汉族SLE患者及51例健康对照者。并初步分析了TNFα*2等位基因与SLE的发病,症状及自身抗体的相关性。
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旋毛虫分类的分子生物学技术研究进展
旋毛虫病是一种人畜共患病,可在人和 150多种动物中广泛传播,其病原体是旋毛形线虫(简称旋毛虫).旋毛虫属分类较为复杂,目前尚无统一的分类标准.传统的旋毛虫分类主要依据成虫、囊包的形态等指标,但这些指标在旋毛虫分类应用时易受外界环境等多种因素影响,使旋毛虫分类的准确性和可靠性受到一定限制. 20世纪 70年代以来,随着分子生物学技术,尤其是 PCR技术和核酸序列分析相关技术的迅速发展,分子生物学技术成为旋毛虫分类鉴定的有力工具,推动了旋毛虫分类发展.常用的分子生物学技术有限制性酶切片段长度多态性及核酸探针技术、随机扩增性 DNA、 PCR-单链构象多态性分析、多重 PCR、 DNA序列分析及分子系统发生研究.本文就以上技术的研究进展进行综述.
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微卫星体简单重复序列锚定PCR扩增技术(SSR-PCR)及其在寄生虫基因研究中的应用
寄生虫基因变异现象是普遍存在的,了解其变异情况有助于寄生虫的防治控制及疫苗研制.早期的限制性酶切片段长度多态性(RFLP)等分子生物学技术的运用极大地推动了寄生虫遗传变异研究的深入发展.
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荧光素和地高辛标记探针在聚合酶链反应-微孔板杂交检测TTV DNA中应用比较
目前聚合酶链反应(PCR)扩增产物常规检测采用琼脂糖凝胶电泳法,其敏感度、特异性均不能满足临床要求.对PCR产物进行限制性内切酶酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)分析、变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE或PCR-SS-CP)及PCR产物直接测序,虽可特异性检测PCR产物,但因操作繁杂,且需特殊试剂和仪器,无法在临床普遍开展.刊用特异性探针与扩增产物杂交,引用微孔板杂交酶呈色技术,由于其特异性和敏感度高而被应用于临床.我们采用荧光素和地高辛分别标记探针,建立荧光素-抗荧光素、地高辛-抗地高辛酶偶联系统微孔板杂交酶呈色技术检测TTV DNA的方法,并对其检测效果进行了比较.