首页 > 文献资料
-
使用沃特世超高效合相色谱分析短杆菌肽
短杆菌肽是由芽孢杆菌产生的一种常见和已被良好表征的跨膜肽物质,被用作对抗革兰氏阳性和某些革兰氏阴性细菌的局部用抗生素.用反相液相色谱(RPLC)分析疏水性肽和蛋白质难度很大.因为溶液中经常需要使用洗涤剂保持疏水性物质的稳定性,而这些洗涤剂容易发生聚集或沉淀,严重影响它们的回收,这些因素及其他原因使得难以用RPLC分离疏水性肽和蛋白质.在ACQUITY UPC2 TM系统上使用沃特世(Waters(R))超高效合相色谱技术分离典型跨膜肽-短杆菌肽的方法,可得到线性和可重复的结果,测定的OTC制剂浓度为标示量的98.4％,是准确、高精度分析短杆菌肽的方法.
-
利用ACQUITY UPC2分析大豆油中VD2、VD3
随着油类产品质量安全问题的日益严重，其分析检测也备受关注。使用常规反相液相色谱进行分析时，考虑到溶解性与兼容性的问题，常常需要进行相对较为繁琐的样品制备过程，且可能存在分析回收率问题，不利于此类产品的检测与控制。
-
反相HPLC测定培养基中莫西沙星含量的方法学研究
目的建立特定培养基中莫西沙星的HPLC测定法.方法取样品100μL,以加替沙星作内标,采用乙腈沉淀蛋白;常温下氮气吹干,用0.01mol·L-1盐酸200μL复溶后进样.色谱柱:Alhech Nucleosil 100(C18)柱(10μm,4.6mm×250mm);流动相:缓冲液-甲醇-乙腈(66.8:15.1:18.1),缓冲液为三乙胺-磷酸-水(0.37:0.30:99.3);流速1.3 mL·min-1,荧光检测器的激发波长和发射波长分别为295和418nm.结果在1.0～50.0μg·mL-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 9(n=7).高低2个浓度质控样品的日内RSD在0.67%～0.81%之间,日间RSD在0.48%～0.89%之间,方法学回收率为98.43%～1∞.51%.结论本法灵敏、可靠、耐用、操作简便易行、分析时间短,并成功地应用于莫西沙星体外模型的细菌耐药性发展研究.
-
油浸食品中防腐剂反相高效液相色谱法测定
对于油浸食品中的防腐剂检测,国标GB/T5009.29-2003中没有明确规定处理与检验方法,实验室一般采用酸性乙醚萃取、浓缩,气相色谱法检测.该方法由于填充柱的吸附及柱效能差别较大,使标准系列线性差,低检出限较高,对于含量低或稀释倍数大的样品无法检测.本方法采用乙醇氢氧化钠混合液萃取,反相液相色谱紫外检测器检测,有效消除萃取中乳化现象,提高分析灵敏性和准确性.
-
反相高效液相色谱法测定雷美替胺的含量及有关物质
目的 建立反相高效液相色谱法测定雷美替胺的含量及有关物质.方法 采用Diamond ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),含量测定以0.1 mol·L-1磷酸二氢钾(稀磷酸调pH值至3.0)-乙腈(体积比为70∶30)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为288nm,柱温为30℃.有关物质测定采用Diamond ODS-C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以0.1 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(稀磷酸调pH值至3.0)-乙腈(体积比为80∶20)(A)、0.1 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(稀磷酸调pH值至3.0)-乙腈(体积比为60∶40)(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为217 nm,柱温为30℃.结果 雷美替胺与相关杂质及其降解产物均分离良好.雷美替胺在4.13 ～31.00 mg·L-1内具有良好的线性关系(Y=1.281×104x+5.605×103,R2=0.9993),检测限为1.6 ng,定量限为4.8ng.结论 本法可用于雷美替胺的含量测定及有关物质检查.
-
扶正化瘀胶囊的TLC鉴别和丹酚酸B含量测定方法研究
目的：完善扶正化瘀胶囊的质量标准。方法：建立了其主要组分丹参、桃仁和五味子的薄层层析鉴别方法；采用反相液相色谱法（RP-HPLC），在C18色谱柱上，以甲醇-乙腈-水-甲酸（30：10：59：1）为流动相，检测波长286 nm，测定了丹酚酸B的含量。结果：薄层图谱斑点清晰，空白对照无干扰。丹酚酸B在4.83～145.05μg/ml范围内有较好的线性关系。平均回收率（n=9）为99.33%，RSD为1.76%。结论：本方法操作简便、快速，结果可靠，重复性好，可作为该产品的质量控制方法。
-
反相高效液相色谱法测定盐酸米多君及其有关物质含量
目的建立一种反相高效液相色谱法检查盐酸米多君有关物质及测定其含量.方法通过调节流动相pH值,三乙胺浓度及甲醇比例,确定流动相组成为甲醇-水(1:3)[1‰三乙胺用冰醋酸调节pH＝4],检测波长为225nm,同时考察了方法的专属性与灵敏度.结果对本品有关物质的混合样品、粗品、降解产物和多批产品的检查结果表明,该法专属性强、灵敏度高.结论本法能有效检查和控制盐酸米多君有关物质并可准确测定其含量.
-
反相液相色谱法同时测定消毒产品中克霉唑和三氯新
[目的]对含有可霉唑、三氯新的消毒产品进行质量控制.[方法]采用高效液相色谱法,以甲醇、醋酸铵为流动相,反相C18柱分离,可变波长检测.[结果]在本实验条件下可霉唑、三氯新保留时间分别为6.66、8.06 min达到完全分离,线性范围为24～2 400 μg/ml.两者检出限分别为10 μg/ml和1 μg/ml.回收率分别为98.4%～114.2%、97.6%～109.3%,对样品平行测定6次,两者的相对标准偏差分别为1.26%和0.70%.[结论]本法适合消毒产品中可霉唑、三氯新的快速测定,方法精密度好,回收率高,分离速度快,选择性好.
-
扇贝多肽对淋巴细胞的保护作用和反相液相色谱分析
为进一步研究扇贝多肽(海洋肽,PCF)对淋巴细胞的作用及其成分.采用地塞米松(DEX)与脾脏和胸腺淋巴细胞共同培养,建立了淋巴细胞免疫抑制实验模型.并利用反相液相色谱法(RPLC)对PCF进行了分析.结果表明,DEX能显著降低脾脏和胸腺淋巴细胞的活性,DEX组吸收度值明显降低(P＜0.01);而PCF不仅能显著地减轻其对免疫细胞的抑制作用,同时还可以促进免疫细胞的活性,使DEX+PCF组吸收度值明显增高(P＜0.01).相对分子质量为800～1000D的PCF经RPLC分析含有保留时间为3.923,4.865,5.033,5.441等4个组分.实验证明,PCF对DEX引起的淋巴细胞抑制具有保护作用.
-
月饼中常用抗氧化剂、防腐剂和甜味剂同时测定的方法研究
目的:建立同时测定抗氧化剂、防腐剂和甜味剂的反相液相色谱方法.方法:以 50 mmol/L 磷酸二氢钾溶液作为流动相,采用梯度洗脱.结果:可在 30 min 内将11种组分完全分离并且测定.方法的线性范围:甜味剂 0.5～150 μg/ml(r=0.9997～0.9999);防腐剂和抗氧化剂 1.0～300 μg/ml(r=0.9996～0.9999),回收率:78.0%～106.7%,相对标准偏差为 2.2%～12.7%,定性检出限:0.04～0.18 mg/kg,定量检出限:0.13～0.60 mg/kg.结论:建立了同时测定月饼中11种化合物的反相液相色谱法.
-
液相色谱色谱填料选择性的研究方法
反相液相色谱(RPLC)是药物分析和分离纯化过程检测的首选方法,选择合适的色谱柱是检测方法的关键.本文综述了C18色谱柱及高交联度聚合物色谱柱选择性研究的一些方法,包括溶剂三角形法,相似系数法,选择性比较法,logK值法和类正相模式法.这些研究方法从本质上研究了色谱柱选择特性的物质基础和影响选择性的因素.高交联度聚苯乙烯色谱柱的研究也可以为分离纯化中常用的吸附树脂选择特性的研究提供借鉴.
-
多维色谱-质谱联用技术分析胰腺癌血清差异表达蛋白
目的:探讨胰腺癌患者血清和健康人血清之间蛋白质的差异表达,寻找特异性的肿瘤生物标志物.方法:应用多维色谱-基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( MALDI-TOF MS)方法,检测23例胰腺癌患者和30例健康人血清蛋白质谱图表达.结果:与健康人血清比较,胰腺癌患者血清谱图中显示1个特异性蛋白质峰明显增高,相对分子质量为5734D,其特异性和敏感性高.结论:人胰腺癌血清特异性蛋白质的发现,对进一步研究肿瘤发生机理及其临床特异性生物标志物的检测等具有重要意义.
-
苦豆子总碱注射液中苦参碱和槐果碱的含量测定
目的 用反相液相色谱法测定苦豆子总碱注射液中苦参碱、槐果碱的含量.方法 用YMC-packed ODS-A(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以V(乙腈)∶V(0.05 mol/L KH2PO3)∶V(三乙胺)=12∶88∶0.18为流动相,紫外检测波长210 nm,流速1.0 mL/min,柱温为25℃.结果 在所确立的色谱条件下,两种生物碱得到很好地分离,标准曲线显示苦参碱、槐果碱分别在5～60 μg/mL和2～40 μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.4%和95.2%,RSD分别为2.2%和1.2%.结论 测定方法简便、快速、准确,可用于苦豆子总碱注射液中苦参碱、槐果碱的含量测定.
-
箭叶淫羊藿提取液的高效液相色谱分离及淫羊藿苷的色谱制备
目的:分离制备淫羊藿苷,为箭叶淫羊藿及其制品的质量检测以及箭叶淫羊藿液相色谱指纹图谱的建立奠定了良好的分离分析基础.方法:分析Shim-pack VP ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)柱,柱温:室温,流速:1.0 mL·min~(-1);制备Shim-pack PREP C_8(250 mm×20 mm,15μm,100 A),流速:5.0 mL·min~(-1),检测波长:270 nm,进样量:35 mL,柱温室温.结果:反相色谱制备可以一步达到95%以上纯度,梯度分离能更好地将各组分分离.结论:反相高效液相色谱可用于制备箭叶淫羊藿中的淫羊藿苷;梯度分离可用于箭叶淫羊藿及其制品的质量检测.
-
异硫氰酸苯酯柱前衍生法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液含量
目的:建立一种用异硫氰酸苯酯柱前衍生的高效液相色谱方法测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量.方法:选用Dia-monsil(TM)钻石C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A为0.1 moL·L-1醋酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(93:7);流动相B为乙腈-水(80:20),进行梯度洗脱.检测波长为254 nm.结果:门冬氨酸鸟氨酸溶液在101.06～303.18μg·mL-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9990),回收率为99.1%(RSD=0.60%).结论:本方法重复性好,定量准确,可用于门冬氨酸鸟氨酸注射液的含量测定.
关键词： 门冬氨酸鸟氨酸注射液 异硫氰酸苯酯 柱前衍生 反相液相色谱 -
柱前衍生 HPLC 法测定脯氨酸含量
目的：建立一种异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生化测定脯氨酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法测定脯氨酸的含量；色谱柱为 Phenomenex Gemini C18柱（250×4．6mm，5μm）；流动相：A12．5mmol ／L 磷酸钠溶液（用磷酸调 pH 值至6．8）B 乙腈－水（80：20），进行梯度洗脱，流速为1．0ml ／min；检测波长为254nm。结果脯氨酸在20．0－200．0μg ／ml 范围内呈良好的线性关系（ r ＝0．9997），平均回收率（n ＝9）为99．73％（ RSD ＝1．6％）。结论该方法准确、专属性强，稳定且无干扰，可用于脯氨酸的含量测定。
