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胶束在药物分析中的应用
胶束是表面活性剂浓度超过其临界浓度时形成的分子聚合体.一般由10～50个碳原子单位的长链分子组成,通常头部(或外层)亲水,尾部(或内层)疏水.胶束的形成是疏水效应的结果,并使体系的自由能减少.表面活性剂,大体有4类,即阴离子,阳离子,两性离子和非离子表面活性剂,其典型化合物及主要性质如表1所示,应用多的是前两类,且尤以十二烷基硫酸钠(SDS)等使用为普遍.
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一种表面活性剂在解决片剂生产难题中的应用
目的几种片剂产品提高收率或溶出度、储存期等生产难题的解决.方法产品处方中加入十二烷基硫酸钠并调整工艺,以中国药典为检测标准.结果提高和解决了实际生产中一个片剂产品的生产收率、一个片剂产品的溶出度及临床药效、一个微克级剂量生产产品的均一性和另一生产产品留样观察项目指标下降等难题.结论重视十二烷基硫酸钠在解决片剂生产难题中的作用,合理使用.
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亚甲蓝分光光度法测漱口水中十二烷基硫酸钠
目的 建立了漱口水中十二烷基硫酸钠的化学分析方法.方法 样品在一定pH值条件下,与亚甲蓝生成可被三氯甲烷萃取的蓝色化合物经,该蓝色化合物浓度与样品中十二烷基硫酸钠的浓度成正比关系.结果 本方法中十二烷基硫酸钠标准质量在5.μg～50 μg范围内,具有较好线性＞0.999,方法的低检测质量浓度为0.05 mg/L,回收率为100％～105％,Rsd为1.54～1.69.结论 本方法具有灵敏度高,操作简单等优点,适用于基层实验室对漱口水中十二烷基硫酸钠含量的日常检测工作.
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共振光散射技术测定水中十二烷基硫酸钠
目的:在Britton-Robinson缓冲体系中,十二烷基硫酸钠对鱼精蛋白与DNA产生的共振散射有明显的增强作用,其散射光强度与十二烷基硫酸钠的浓度有线性关系,据此建立了测定十二烷基硫酸钠的新方法.方法:用普通荧光分光光度计,在激发和发射波长相同的条件下扫描光谱即得共振光散射光谱.在选定的佳波长(△λ=0)下测定标准系列和样品溶液的光散射强度.结果:体系的灵敏共振光散射波长为334.4 nm.实验结果显示:在pH 6.0,测定波长334.4 nm处,共振光散射强度与十二烷基硫酸钠浓度在2×10-6～3.5×10-5 mol/L范围内呈线性关系.在1×10-5～3.5×10-5 mol/L范围内回归方程为Y=289.9808X-94.3949;在0.2×10-5～1×10-5 mol/L范围内回归方程为Y=26.5435X-2.289.结论:该方法具有良好的精密性和准确性.
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高档名酒中微量氰化物的测定方法
现行国标法(GB/T5009.48-2003蒸馏酒及配制酒卫生标准的分析方法)测定酒中氰化物时浑浊产生的干扰问题主要是由乳酸乙酯所致,为消除干扰,采用十二烷基硫酸钠(SLS)作增溶剂,成功地建立了在胶束条件下测定酒中氰化物的分析方法[1].但该方法是否适用国外名酒未做研究,国内酱香型白酒(如茅台、郎酒等)存在回收率低的问题尚未解决.为了使方法的测定范围更具广泛性,适应国内外名酒检测的需求,以便更好地与国际标准接轨,本文继续对高档名酒中氰化物的测定方法进行了探讨,获得了满意的结果.
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质粒消除方法及消除效果的评价研究
目的:比较不同质粒消除方法的消除效果.方法:分别以十二烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠、紫外线处理大肠埃希菌,将电泳检测质粒消除菌株PCR扩增检测Ⅰ类整合子,检测Ⅰ类整合子存在情况,并检测未检出Ⅰ类整合子的菌株质粒是否恢复.结果:十二烷基硫酸钠法消除率为27%,十二烷基磺酸钠法消除率7%,紫外线消除率为0.结论:同一菌株的质粒对不同消除剂敏感性不同,同种质粒消除方法对不同的菌株质粒消除效果不同;质粒消除试验后的菌液需接种平板排除未消除菌株的影响;判断质粒是否消除应该用灵敏度高的PCR法检测质粒上的特异性片断或通过检测质粒决定的生物学特性.
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十二烷基硫酸钠提取姜黄素的工艺优化
目的 筛选出利用十二烷基硫酸钠(SDS)提取中药姜黄中姜黄素的佳工艺条件.方法 采用正交实验对提取溶剂乙醇的浓度、提取时间、SDS的浓度等条件进行优化.结果 与传统乙醇回流提取方法比较,乙醇浓度由80%降低至65%,提取时间由2 h缩短至0.75 h.结论 提取姜黄中姜黄素时,加入0.3%SDS,乙醇浓度为65%,两次回流提取时间为0.75 h为佳工艺条件.
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载辛伐他汀大孔磷酸钙骨水泥的制备及其理化性质的研究
目的 制备载辛伐他汀(simvastatin,SIM)大孔磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)支架,并对其理化性质进行评价.方法 以十二烷基硫酸钠(sodiumdodecyl sulfate,SDS)作为液相,将不同量SIM粉末加入CPC作为固相,制备载辛伐他汀大孔磷酸钙骨水泥支架.并对其初始凝固时间、力学性能、孔隙率、相转化等理化性质进行评价.结果 SDS对CPC的初始凝固时间无明显影响,但其可显著降低其压缩强度;SDS可促使CPC内部形成均匀分布的大孔,大孔的直径在50～120μm之间,当SDS浓度为300mM时,孔隙率可达26.7％;沉积羟基磷灰石结晶的尺寸随着SDS浓度增加而减小.SIM对CPC初始凝固时间无显著影响;支架内SIM含量达10％时可显著降低CPC的压缩强度;扫描电镜结果显示SIM表面有羟基磷灰石结晶沉积,SIM对大孔形状、结晶尺寸无影响;X射线衍射检测结果表明:理盐水浸润7天后,所有样本的主要成分为羟基磷灰石结晶.结论 SDS对CPC的初始凝固时间、相转化无显著影响;SDS可抑制羟基磷灰石结晶的生长,产生更多、尺寸更小的结晶,这些小的结晶相互缠绕可部分补偿大孔导致的CPC力学性能的下降.少量的SIM对CPC的理化性质无显著干扰,当含量达到10％时,可显著降低CPC的力学性能.
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外源性胃泌素在胃癌细胞增殖和凋亡中的作用
我们应用MKN45胃癌细胞株通过四唑蓝(MTT)比色分析法及流式细胞仪观察胃泌素在细胞增殖、凋亡中的作用，同时观察丙谷胺对胃泌素的拮抗作用，并与5-氟尿嘧啶(5-Fu)作比较，结果报道如下。 一、材料与方法 1.细胞培养：MKN45胃癌细胞株(上海市消化疾病研究所提供)培养于RPMI 1640培养液中，加入体积分数为10%小牛血清，置37 ℃5%CO2恒温培养箱，隔天换液，3 d传代。 2.试剂配制及实验分组：用5%的小牛血清的1640液将胃泌素(上海丽珠东风生物技术公司)配为25 mg/L浓度，丙谷胺(江苏金坛制药厂)浓度为32 mg/L，5-Fu浓度为10 mg/L。实验共分5组：空白对照组、胃泌素组、丙谷胺组、胃泌素＋丙谷胺组和5-Fu组。 3.MTT比色分析法：取传代后72 h的细胞，用含10%小牛血清的培养液调整细胞浓度为1× 108个/L，接种于96孔培养板，每孔100 μl，待细胞贴壁后弃去培养液，空白对照组加5 %小牛血清培养液100 μl，胃泌素组加胃泌素液100 μl，丙谷胺组加丙谷胺液100 μl ，胃泌素＋丙谷胺组二者各加50 μl。5-Fu组加5-Fu液100 μl，每组设8个复孔，培养72 h，结束培养前6 h加质量分数为5%MTT(Sigma公司)20 μl/孔，继续培养6 h,离心，弃上清，每孔加质量分数为20%十二烷基硫酸钠(SDS)100 μl，震荡5 min，室温30 min后，在酶标仪上测定570 nm波长处的吸光度值(A)。 4.流式细胞术：传代后72 h细胞用含体积分数为10%小牛血清培养液调整细胞浓度为1×10 9个/L，接种于6孔培养板，每孔1.2 ml，细胞贴壁后弃去培养液，空白对照组加5%小牛血清培养液2.0 ml，胃泌素组加胃泌素液2.0 ml，丙谷胺组加丙谷胺液2.0 ml，胃泌素＋丙谷胺组二者各加1.0 ml。培养48 h后，分别收集每孔细胞，磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤2次，2 ml 1640液制成细胞悬液，测定前离心弃上清，碘化丙啶(PI)染色，ANNEX IN-V(Boehringer mannheim公司)标记，测定凋亡细胞百分率。 5.统计学方法：两组间吸光度值采用t检验；凋亡百分率采用U检验。 二、结果 1.胃泌素对MKN45胃癌细胞的增殖作用：对照组吸光度A值为0.561±0.056；胃泌素组为0.767±0.065与对照组比较，MKN45增殖作用明显加快；丙谷胺组0.556±0.040与对照组间差异无显著性(P＞0.05)；胃泌素联合应用丙谷胺可抑制细胞的增殖［A值为0. 583±0.032，与胃泌素组比较，P＜0.01，但不如5-Fu (0.453±0.045)强( P＜0.01)］。 2.胃泌素对MKN45胃癌细胞凋亡的影响：胃泌素对MKN45细胞的凋亡有明显的抑制作用，胃泌素组细胞凋亡百分率仅为1.39%，明显低于对照组的9.58%(P＜0.01)，联合应用丙谷胺后凋亡增加(表1)。
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提取豚鼠内耳膜迷路蛋白时十二烷基硫酸钠用量的研究
目的:探讨有效提取膜迷路蛋白时十二烷基硫酸钠(SDS)的用量.方法:用二喹啉甲酸(BCA)法测定含不同浓度SDS的提取液所提取的豚鼠内耳膜迷路蛋白含量,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析其蛋白组分.结果:0.23% SDS、1% SDS、2% SDS组所提取的蛋白量大于0.1% SDS组,同时电泳显示的条带更多,染色更深.1% SDS组与2% SDS组效果又好于0.23% SDS组,其中2% SDS组提取的量与1% SDS组差别不大,但去垢剂-蛋白质之比明显升高. 结论:蛋白提取液中含1% SDS,去垢剂-蛋白质比为5～6左右时对充分提取膜迷路蛋白较为合适.
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不同促渗剂对氨氯地平凝胶透皮作用的比较
目的:考察十二烷基硫酸钠(SLS)、丙二醇(PG)作为单一促渗剂和二元促渗剂对氨氯地平体外透皮作用的影响.方法:用两室扩散池体外实验装置,以鼠皮为屏障,选用1%SLS、2%PG和1%SLS+2%PG为促渗剂,在各时间下测定氨氯地平的单位面积累积渗透量.结果:1%SLS、2%PG和1%SLS+2%PG均可促进氨氯地平的透皮吸收(P<0.01),其促渗效果顺序为1%SLS+2%PG>2%PG>1%SLS.结论:1%SLS和2%PG均可不同程度地促进氨氯地平凝胶的透皮吸收效果,且二者联用效果更佳.
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肤康霜的制备及临床应用
浅部真菌病是皮肤科常见病、多发病。我们根据发病特点，制备了肤康霜，经多年临床使用，疗效明显，现介绍如下。1 处方和制备 1.1处方 硝酸咪康唑1 0 g ， 醋酸曲安奈德 1 g ， 尿囊素 1 00 g ， 硬脂酸 1 13 g ， 单硬脂酸甘油酯 ( 单 甘酯 ) 63 g ， 白凡士林 5 0 g ， 甘油 1 50 ml ， 蒸馏水 5 25 ml ， 三乙醇胺 3 ml ， 十二烷基硫酸钠 1 g ， 2 ， 6 - 二 叔丁基对甲酚 ( BHT)0.25 g ， 月桂氮芯 卓酮(氮酮)10 ml，羟苯乙酯0.5 g，共制成1000 g。1.2 制备 取油相成份硬脂酸、单甘酯、白凡士林混合置水浴上加热至80 ℃，并加入BHT和羟苯乙酯保温。 另取水相成份蒸馏水、甘油、三乙醇胺及十二烷基硫酸钠加热至80 ℃，此时加入尿囊素搅拌溶解后至温度再升至80 ℃， 将油相缓缓加入水相中，向同一方向不断搅拌至即将冷凝时，加入事先用适量甘油湿润均匀的硝酸咪康唑及醋酸曲安奈德与月桂氮芯 卓酮的混合物，继续搅拌至冷凝，即得。
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不同产地半夏及其混淆品的SDS PAGE电泳鉴别
目的 建立不同产地半夏与其混淆品的蛋白质电泳鉴别方法.方法 采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对不同产地半夏与其混淆品(英山滴水珠、本院药园掌叶半夏、蛇山半夏、钟祥半夏、钟祥掌叶半夏及戟叶犁头尖)进行鉴别分析.结果 不同产地的半夏具有相似的电泳图谱,但半夏与其混淆品图谱之间具有显著性差异.结论 SDS-PAGE电泳鉴别可以对不同产地的半夏进行初步鉴别,并可鉴别半夏及其混淆品的特征,方法简便、可靠.
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改进硝基四氮唑蓝比色法用于黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选
目的：建立简单方便的测定黄嘌呤氧化酶的方法。方法：在现有方法的基础上，采用十二烷基硫酸钠（SDS）为终止剂，改进硝基四氮唑蓝法测定了黄嘌呤氧化酶的方法。SDS浓度为10%。酶反应时间为25min。结果：与原方法相比，改进的方法具有不产生蓝色沉淀、不必离心就可直接测定，准确度、精密度好的优点。适合于测定在紫外区有吸收的化合物对黄嘌呤氧化酶的作用。结论：以SDS为终止剂的硝基四氮唑蓝法简单易行，适合于黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选。
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十二烷基硫酸钠提取大黄总蒽醌的工艺优化
目的:筛选出了利用十二烷基硫酸钠(SDS)提取大黄中总蒽醌的佳工艺.方法:采用正交试验对提取溶剂乙醇的浓度,SDS的浓度、提取时间等条件进行优化.结果:与传统乙醇回流提取方法比较,新的提取方法中大黄总蒽醌的提取率可以增加35%,提取时间由2h缩短至1h.其佳工艺为:SDS浓度0.6%,乙醇浓度60%,两次回流时间为1h.结论:方法简便、省时,节约成本且提取率高.
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几种线粒体DNA提取方法的比较
目的:将提取线粒体DNA的碱变性法、Triton法、改进高盐沉淀法加以比较,以得到方便快速提取线粒体DNA的方法.方法:采用健康成年雄性Wistar大鼠,取回肠上皮细胞样本18 份,每份含3×10?6细胞,每6份分别用碱变性法、Triton法、改进高盐沉淀法提取线粒体DNA ,紫外分光光度法定量.再用琼脂糖凝胶电泳和线粒体ATPase 6亚基基因PCR扩增产物鉴定所提取的线粒体DNA.结果:3种方法提取线粒体DNA量差别明显:改进高盐沉淀法量多,为(1.26±0.23) μg;碱变性法次之,为(0.52±0.18) μg;Triton法为 (0.31±0.16) μg.A260/A280均大于1.7.说明改进高盐沉淀法提取线粒体D NA具有操作简单,产量多的优点.将改进高盐沉淀法提取线粒体DNA用于PCR扩增,测定出了线粒体DNA ATPase 8亚基基因序列,说明该法所提取mtDNA可用于mtDNA测序.讨论和结论: 线粒体在细胞凋亡,衰老及程序化死亡中发挥重要作用.已在多种疾病中发现mtDNA突变.对线粒体疾病的分子遗传机理的研究可以进一步阐明这些疾病的病因,并为治疗提供理论指导.胡义德、Tamura和Palva等用碱变性法提取了人血白细胞、心肌等组织中mtDNA;戴纪刚等建立的Triton法先除去细胞核,再分离提取胞浆中mtDNA.而高盐沉淀法通过SDS(十二烷基硫酸钠)破坏细胞膜、核膜,使蛋白质变性,从而游离出核酸,EDTA抑制细胞中DNA酶的活性, 蛋白酶K进一步将蛋白质降解成小肽,加入饱和乙酸钠后,绝大部分线性大分子量DNA和蛋白质在SDS作用下变性形成沉淀,环状mtDNA仍为自然状态,通过高速离心,即可得到mtDNA.3种方法各有优缺点:碱变性法操作时间较短,要求条件比较严格,不易重复; Triton法通过核质分离提取mtDNA操作时间短,但产量低,易降解.而高盐沉淀法操作简单,易重复 ,产量多,可依需用量扩大反应体系,使mtDNA质量得以容易控制.
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鱼肝油红汞乳膏的配制
我院采用十六醇、十二烷基硫酸钠[1]作O/W乳剂基质制备红汞乳膏.经多年的临床应用,疗效比较理想.现报道如下.
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新型两亲性壳聚糖衍生物的合成、表征及对黄芩苷的增溶作用
目的 合成一种新型两亲性壳聚糖衍生物并考察其对黄芩苷的增溶作用.方法 壳聚糖与十二烷基硫酸钠反应生成SCS,对SCS进行羧甲基化后,得到两亲性壳聚糖衍生物(CMSC).用红外光谱和核磁共振氢谱表征了衍生物的结构,并探讨了CMSC溶液对黄芩苷的增溶作用.结果 黄芩苷在CMSC溶液中于8～12 h达溶解平衡,且溶解度随着CMSC浓度的增加而增大.当cMSC的浓度为2 mg/mL时,黄芩苷的溶解度达到1.5046-mg/mL,是其在水中溶解度的5.88倍.结论 CMSC在水溶液中可自组装形成胶束,并对黄芩苷有明显的增溶作用,有潜在的应用价值.
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吸烟者纤维蛋白原亚组分测定的意义
长期吸烟可致血浆纤维蛋白原(Fg)水平升高的现象已被证实,但其亚组分的改变如何,尚未见资料报道.笔者用十二烷基硫酸钠--聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳法对吸烟者血浆进行了测定和分析,现将研究结果报告如下.
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十二烷基硫酸钠抗HSV-1效应的研究
目的为了证实十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)抗HSV-1的效应,初步确定其有效浓度与安全性.方法用体外细胞培养法观察不同浓度SDS对HSV-1的抑制作用,同步进行ACV对照观察.结果SDS对HSV-1的低有效抑制浓度为0.015 625mg/mL,0.156 25mg/mL的SDS抑制作用与0.1 mg/mL阿昔洛韦组无明显差异(P＞0.05);且低有效抑制浓度的SDS对培养细胞的影响甚微,较此高8倍浓度的SDS仍然安全.结论SDS在体外对HSV-1有明显抑制作用,对培养细胞的安全性好.
