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SYSMEXXT-1800i全自动血球分析仪的主要构成及故障维修
SYSM EX XT‐1800i全自动血球分析仪在本院至今已使用5年多，其操作简便，结果准确，而且保养维护方便，故障率极低，该仪器主要由采样单元、白细胞（WBC ）检测单元、红细胞（RBC）检测单元、压力单元、水路单元等组成。SYSMEX XT‐1800i全自动血球分析仪能提供24个参数报告，采用半导体激光器，通过鞘液机制包裹细胞，以流式细胞原理分析细胞使细胞计数的准确性和重复性有了进一步提高；通过核酸荧光染色对有核细胞进行染色分类，有效地对疑问细胞进行提示；采用经典的小孔阻抗计数法分析红细胞和血小板，分析血红蛋白采用十二烷基硫酸钠（SLS）血红蛋白检测法，此方法汇集了氰化高铁血红蛋白法和氧合血红蛋白法两种方法的优点［1］。现针对仪器各系统出现的故障具体介绍如下。
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表面活性剂对硫糖铝胶囊药剂学的影响研究
目的:考察表面活性剂对硫糖铝胶囊的药剂学指标的影响,并筛选出其在处方中的用量.方法:分别加入不同表面活性剂,制备硫糖铝胶囊,并测定成品的崩解度、溶出度和分散性,用威布尔分布模型拟合溶出曲线,比较各种表面活性剂及其不同用量对硫糖铝溶出的影响.结果:十二烷基硫酸钠对硫糖铝的溶出促进作用大,当其加入量为2%时,胶囊的各项药剂学指标优.结论:硫糖铝胶囊宜选用2%十二烷基硫酸钠为表面活性剂.
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十二烷基硫酸钠对白色洗剂质量的影响
目的 探讨添加十二烷基硫酸钠(SDS)对白色洗剂质量的影响.方法 以白色洗剂的性状、沉降系数和重新分散性为评价指标,考察添加SDS对其质量的影响.结果 添加SDS后,白色洗剂的颜色呈乳白、均匀,外观与未添加SDS的配方无异,但显微图显示颗粒呈均匀的链状成簇,前6 h沉降速率明显变慢,反应前添加SDS与反应后添加SDS所得制剂前1 h沉降速率相当,但1 h后前者沉降系数明显大于后者.反应前添加SDS 48 h沉降系数为0.684,重新分散平均次数为1.3次;反应后添加SDS为0.578,重新分散平均次数为2.3次;未添加SDS为0.502,重新分散平均次数为4.6次.结论 添加SDS会对白色洗剂质量产生明显影响,反应前添加优于反应后添加,能降低药物沉降系数和重新分散次数,可制得性状符合规定且质量较佳的白色洗剂.
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消旋山茛菪碱滴眼液含量测定方法研究
消旋山莨若碱滴眼液标准源于国家药品标准,其标准含量测定项下有消旋山茛菪碱的高效液相色谱法测定方法,但由于其流动相[0.2%十二烷基硫酸钠的甲醇溶液-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.5)(60∶40)]对色谱系统损伤较大,且操作繁琐,故对其含量测定方法进行改进.
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硫磺乳膏的制备及稳定性试验
硫磺软膏的杀菌、杀疥虫作用较强,临床用于治疗疥疮、脂溢性皮肤病及牛皮癣症疗效显著.我院根据硫磺的理化特性,筛选不同的乳化剂,将硫磺制备成硫磺乳膏剂,并进行稳定性试验,结果以十二烷基硫酸钠为主的乳化剂制成的硫磺乳膏,成品细腻、均匀,质量稳定,长期保存不破乳,不分层.现介绍如下.
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两种细胞洗涤剂制备脱细胞同种生物带瓣管道支架的研究
目的比较去氧胆酸钠(deoxycholic acid, DOA)和十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulphate, SDS)两种细胞洗涤剂制备脱细胞的同种生物带瓣管道(homograft bioprosthetic tube valved, HBTV)支架的效果,为体外构建组织工程瓣(tissue-engineering heart valve, TEHV)提供同种生物瓣支架材料. 方法对同种带瓣主动脉管道和带瓣肺动脉管道,分别用含0.5% DOA或0.03% SDS的Tris低渗缓冲液共同孵育48 h,脱去经液氮保存、具有活性的HBTV表面的内皮细胞,固定剂固定后分别进行HE、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜观察,以及扫描电镜观察,摄片. 结果两种洗涤剂均完全地脱去了HBTV表面的内皮细胞,中心部位的成纤维细胞有部分存留;细胞外基质,如胶原纤维和弹力纤维等均较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变. 结论 0.03%～0.1% SDS或0.5% DOA的低渗缓冲液对制备HBTV脱内皮细胞支架效果均较佳,有利于HBTV再内皮化时种植细胞的黏附和扩增,可进一步应用于体外构建TEHV的研究.对于脱主动脉壁的细胞,SDS浓度应增至0.1%为佳.
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Tricine-SDS-PAGE法分析腮腺唾液蛋白
多种口腔疾病或系统性疾病的发生、发展过程中,唾液成分的质和量都可能发生改变[1].唾液蛋白作为唾液的主要有机成分,与唾液的多种生理功能密切相关[2].因此研究唾液蛋白对于了解机体的生理及病理状况具有重要意义.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是常用的唾液蛋白的分离方法.传统的SDS-PAGE系统由Laemmli建立,该系统对分子量在20 kD以下的蛋白分离欠佳[3],需通过繁琐的操作制备梯度凝胶.而腮腺唾液的主要成分富脯蛋白和富组蛋白的分子量为10～40 kD和3～5 kD,故分析腮腺唾液蛋白需要对Laemmli的方法进行改进.既往研究发现经SDS-PAGE电泳后,唾液富脯蛋白难以着色.但可去除乙酸脱色液中的其他有机溶剂成分,使富脯蛋白发生变色效应呈紫红色,与其它蛋白区分[4].
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LVLX-SDS体系的荧光特性及左氧氟沙星的测定
目的 研究不同表面活性剂对左氧氟沙星(levofloxacin,LVLX)荧光强度的影响,建立表面活性剂增敏,荧光光度法测定左氧氟沙星含量的新方法.方法 比较不同表面活性剂对左氧氟沙星荧光特性的影响,发现在pH6.0的缓冲溶液中十二烷基硫酸钠(SDS)对左氧氟沙星荧光强度有显著的增敏作用,建立SDS增敏,荧光光度法快速测定左氧氟沙星的新方法.结果 将该方法用于左氧氟沙星片剂和注射液的测定,结果与国标检测方法高效液相色谱(HPLC)法一致,样品平均回收率为100.4%,RSD为0.64%,检出限为18.9μg/L.结论 该方法简便、快捷、准确.
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胶束增敏荧光分析法测定痕量Cu
研究发现,在pH 6.4的tris-HCl缓冲介质中,表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)对Cu与头孢羟氨苄(CFD)生成的配合物的荧光有显著的增敏作用.据此建立了SDS胶束增敏荧光分析法测定水中痕量Cu的新方法.在佳实验条件下其浓度线性范围为0.02～1.28 μg/ml,检出限为5.82×10-10g/ml.将新建方法应用于实际水样中Cu的测定,相对标准偏差为小于1.68%,样品加标回收率为94.60%～102.10%,结果满意.
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PCR检测血液中结核分枝杆菌三种标本处理方法的比较
为了早期快速诊断结核病,已有很多文献探索通过PCR从血液中检出结核分枝杆菌[1-3].但是多种血液成分对KPCR具有强烈的抑制作用,即使是用酚-氯仿法提取纯化亦难以去除[4,5].应用十二烷基硫酸钠(SDS)处理标本能有效去除痰、胸腹水、脑脊液中PCR抑制物[5],亦能有效去除血液中的抑制物[6].
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结核分枝杆菌标本的不同处理方法对PCR扩增敏感性的影响
目的探讨检测标本中血红蛋白(Hb)浓度对PCR扩增管中Taq酶活性的影响及消除影响的方法;探讨胰酶消化痰液的应用价值;比较淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、十二烷基硫酸钠(SDS)溶血液处理全血标本对检测结果敏感性的影响;观察SDS在结核分枝杆菌DNA(TB DNA)提取液中存在的价值及对Taq酶的影响.方法将经梯度稀释的Hb标准品与结核分枝杆菌(TB)定值质控品混匀制备成待检标本进行PCR检测;将定值Hb标准品与TB质控品混匀制备成待检标本,观察提取时100℃煮沸时间对Hb抑制Taq酶能力的影响;将结核患者的痰液分成两管,分别用4 g/dl NaOH消化、1 g/dl胰酶消化、1 g/dl胰酶消化+4 g/dl NaOH处理,比较PCR检测结果的敏感性;将结核患者的外周抗凝血分别用淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、SDS溶血剂处理,比较PCR检测结果的敏感性;用10 g/LSDS、1%(v/v)Triton、1 g/LSDS的1%(v/v)Triton、0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton提取液对相同的TB质控品进行TB DNA提取,观察PCR检测结果敏感性;56份痰液、34份全血按痰液、全血标本的方法处理,进行PCR扩增,比较检测结果的阳性率.结果当Hb≥10-5g/L时,Hb对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强;提取时100℃煮沸40 min与煮沸10 min的对照管结果完全一致;痰液标本处理方法的敏感性顺序为:胰酶消化+NaOH处理＞胰酶消化＞NaOH消化;全血标本处理方法的敏感性顺序为:红细胞裂解液法=淋巴细胞分离法＞SDS溶血法;提取方法PCR检测结果敏感性顺序为:0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞1%(v/v)Triton＞1 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞10 g/L SDS,SDS对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强.56份痰标本按上述方法处理的阳性率分别为57.1%(32/56),82.1%(46/56),91.0%(51/56),通过配对资料卡方检验,胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理与NaOH消化法之间具有显著性差异(P＜0.005),胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理之间差异无显著性(0.1＜P＜0.25);34份全血标本按上述方法处理的阳性率分别为79.4%(27/34),79.4%(27/34),47.0%(16/34),通过配对资料卡方检验,红细胞裂解液法和淋巴细胞分离法与SDS溶血法之间具有显著性差异(0.005＜P＜0.01).结论检测TB DNA标本的预处理有必要规范化.
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用过氧乙酸-吐温20洗液洗血凝反应板
用过的血凝反应板如何洗涤,一直没有令人满意的方法.我们曾试用过尿素法、加酶洗衣粉法、十二烷基硫酸钠加甲醛法,但结果都不理想.洗过的反应板干燥后用显微镜检查,底部仍有蛋白膜和残留血细胞.用20 g/L联苯胺(冰醋酸配)过氧化氢溶液检查,均出现蓝色反应.
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3％十二烷基硫酸钠斑贴试验刺激后的皮肤反应
目的:通过在不同时间点测量皮肤经表皮失水率(Transepidermal water loss,TEWL)、皮肤角质层含水量和皮肤红色素的值,观察随时间的变化,3％十二烷基硫酸钠(Sodium lauryl sulphate,SLS)对皮肤的刺激反应.方法:招募26例受试者,用3％SLS、水和空白对照进行斑贴试验.通过测量不同时间间隔的皮肤角质层含水量、经表皮失水率和皮肤红色素的值,观察皮肤随时间变化的反应.结果:3％SLS刺激过的皮肤,皮肤角质层含水量、经表皮失水率和皮肤红色素值,在斑贴去除后24h内一直高于水和空白对照组.在去除24h时,皮肤角质层含水量、经表皮失水率和皮肤红色素值达到高值.水和空白对照组处理过的皮肤,在斑贴去除后,皮肤角质层含水量、经表皮失水率和皮肤红色素值在24h后基本能恢复到初始状态.3％SLS刺激过的皮肤,在斑贴去除6h内,皮肤红色素值不稳定,6h后,皮肤红色素值持续升高,在24h时达到高值.结论:在3％SLS斑贴封闭24h后,至少在斑贴去除6h后,才测量皮肤角质层含水量,经表皮失水率和皮肤红色素的值.皮肤角质层含水量,经表皮失水率和皮肤红色素的值在斑贴去除后24h达到高值.
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不同斑试材料和加样剂量对斑试皮肤反应结果的影响
目的:评估斑试材料、剂量、时间、抗原、浓度等因素对斑贴试验结果的影响.方法:采用国际标准(国际标准芬兰小室,Finn-chamber)、日本POLA、中国中亚牌三种材料,对男、女各22名受试者背部进行斑贴试验,浓度为十二烷基硫酸钠(2%、1%、0.5%)、丙二醇(20%、10%)、戊二醇(20%、10%)、原浓度腮红,对照物为生理盐水和蒸馏水.结果:Finn-chamber加样剂量为0.015 ml/0.015 g,阳性率为15.76%;日本POLA加样剂量为0.05 ml/0.05 g,阳性率为17.69%;中国中亚牌斑试器加样剂量为0.03 ml/0.03 g,阳性率为14.11%.日本POLA和中国中亚牌斑试器两组间阳性率有显著差别,其余各组间无差别.十二烷基硫酸钠在24h的反应高,男性阳性反应率较女性高.结论:按不同的加样剂量检测,国际标准Finn-chamber斑试器加样剂量小、敏感性高,斑贴后的观察时间、抗原浓度以及受试者性别等因素对斑试皮肤反应阳性结果也有影响.
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十二烷基硫酸钠对人牙周膜细胞活性影响的实验研究
目的:观察不同浓度十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)对人牙周膜细胞(periodontal ligament cell,PDLC)活性的影响,探讨牙膏中存在的去垢成分SDS是否对人体健康存在着潜在危害.方法:采用细胞培养技术及四唑盐(MTT)比色方法,检测加入SDS后与对照组比较细胞活性的变化.结果:PDLC在加入100μg/mL SDS后,细胞活性与正常组比较已明显降低,在SDS浓度≥200μg/mL时PDLC已全部死亡.SDS浓度≤25μg/mL对PDLC生长无明显影响.结论:SDS在低浓度时即对PDLC有明显的细胞毒作用.
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抑制大鼠血浆羧酸酯酶对伊立替康代谢的体外研究
目的 研究抑制大鼠血浆羧酸酯酶对伊立替康代谢的体外方法.方法 建立伊立替康含量测定方法,考察不同pH和高中低质量浓度十二烷基硫酸钠对羧酸酯酶的抑制效果.结果 降低血浆pH可以部分抑制羧酸酯酶的活性;随着十二烷基硫酸钠质量浓度的增加,羧酸酯酶活性逐渐降低,当质量浓度达到0.4 g·mL-1时完全抑制活性.结论十二烷基硫酸钠可以抑制羧酸酯酶活性,提高药物血浆稳定性,便于分析测定.
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复方盐酸曲马多片裂片问题的探讨
复方盐酸曲马多是一个新型的解热镇痛药,每片含对乙酰氨基酚325 mg,盐酸曲马多37.5 mg,预胶化淀粉为填充剂,十二烷基硫酸钠为表面活性剂及润滑剂,质量分数10%PVP K30和质量分数8%PVPK90为混合黏合剂.由于对乙酰氨基酚为疏水性药物,成型性差,易出现裂片[1].笔者在该产品的工艺研究中,对黏合剂的选用进行了筛选.
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不同肾病尿蛋白电泳的临床应用
蛋白尿是肾脏病常见的临床表现,本文采用十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳对肾脏病蛋白尿进行分析,对帮助临床诊断、治疗肾脏疾病有较大的协助作用.
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十二烷基硫酸钠质量控制研究
目的:研究十二烷基硫酸钠的质量问题.方法:采用HP-5(30 m×0.53 mm,1.50 μm)毛细管柱,以氮气为载气,FID检测器,程序升温,直接进样,采用面积归一化法测定十二烷基硫酸钠水解产物十二烷醇的气相纯度,以十二烷醇为对照品外标法测定十二烷基硫酸钠的含量.结果:十二烷醇在6.16 μg·mL-1～6.16 mg·mL-1的浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9999.不同企业的相同标示含量的产品纯度存在较大差异.结论:本方法简便,结果准确,重现性好,可用于十二烷基硫酸钠气相纯度和含量的测定.
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高效液相色谱-质谱联用测定非布司他片剂中十二烷基硫酸钠含量
目的:建立了高效液相色谱-质谱联用技术测定非布司他片剂中十二烷基硫酸钠(SDS)含量的方法.方法:采用Eclipse plus C18(100 mm ×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1 mol·L-1乙酸胺(50∶50)为流动相,采用电喷雾电离(ESI-)、单一离子(SIM)检测模式.结果:在优化的条件下,SDS的保留时间为8.5 min,浓度在0.1007 ～1.007 μg·mL-1范围内线性关系良好(r =0.9999),回收率在98％ ～ 102％之间(RSD=1.1％).结论:本方法操作简便、快捷、准确,重复性好,适用于片剂中十二烷基硫酸钠的含量测定.
