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羊膜提取液对兔准分子激光角膜切削术后角膜上皮下雾状混浊的影响
目的 探讨羊膜提取液(AE)对兔PRK术后haze的影响及机制.方法 实验研究.36只新西兰白兔(72只眼)用随机数字表法随机分为3个组(实验组、激素组与空白组),构建PRK动物模型,术后实验组滴用AE,激素组滴用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组滴用不含AE的赋形剂眼液.用裂隙灯眼前节照相记录haze的形态,荧光素钠染色观察角膜上皮的修复,TUNEL法观察角膜基质细胞的凋亡,免疫荧光法观察角膜基质细胞α-SMA的表达.用Kruskal-Wallis H检验对haze 分级评分进行统计学分析,用方差分析及LSD-t检验进行多组间均数的比较,用Spearman等级相关分析对haze形成与TUNEL阳性细胞及α-SMA表达量进行相关性分析.结果 72只兔眼角膜上皮均在PRK术后6d内完全修复,实验组、激素组及空白组角膜上皮平均修复时间分别为(4.12±0.62)、(5.25±0.78)及(4.96±0.73)d,组间比较差异有统计学意义(F=14.144,P<0.01).3个组术后1周均开始出现不同程度的haze,3~4周时尤其明显,术后8周减轻.实验组角膜haze程度与激素组和空白组比较,术后1周(H=3.995,12.77;P<0.05)、4周(H=4.468,9.003;P<0.01)及8周(H=4.397,5.744;P<0.05)均较低.术后1周实验组、激素组及空白组TUNEL阳性细胞数分别为(2.2500 ±0.3750)、(4.5000±0.7500)和(7.1250 ±0.9063)个/高倍视野,实验组与空白组和激素组比较差异均有统计学意义(t =4.26,8.13;P<0.01);术后4周空白组仍有表达,但实验组、激素组未见明显阳性细胞表达;术后8周3个组均未见明显TUNEL阳性细胞表达.术后1~8周,α-SMA在空白组、激素组的角膜基质浅层均有阳性表达,且2个组术后4周阳性细胞数目较1周增高,术后8周较4周的阳性细胞数目减少.术后1~8周,α-SMA在实验组均为阴性表达.实验组与激素组、空白组相比,术后1周(t=28.62,36.55;P<0.01)、4周(t=30.40,35.96;P<0.01)、8周(t=34.02,38.32;P<0.01)差异均有统计学意义.Spearman等级相关分析,显示haze形成与TUNEL阳性细胞表达量(r =0.881,P<0.01)及α-SMA表达量(r=0.710,P<0.01)呈正相关.结论 AE可有效抑制PRK术后haze的形成,其机制可能与AE能够降低角膜细胞的凋亡,减少肌成纤维细胞的生成与聚集,从而减少胶原与瘢痕形成有关.
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义眼座植入同期利用羊膜移植结膜囊重建术的临床观察
目的探讨结膜囊狭窄患者义眼座植入同期利用羊膜移植重建结膜囊的临床效果.方法对23例结膜囊狭窄患者行义眼座植入同时行结膜囊重建术.术中下穹隆采用埋线法固定在眶下壁骨膜,保存羊膜移植于结膜缺损区,上下睑缘褥式缝合.每周打开眼睑并用荧光素试纸染色,观察结膜上皮生长情况.术后2个月拆除上下眼睑缝线,定制合适的义眼.结果术后第4周20只术眼羊膜表面全部被结膜上皮覆盖,其余3只术眼发生羊膜融解,结膜上皮未愈.术后2个月4只Ⅰ度结膜囊狭窄患眼全部治愈;10只Ⅱ度结膜囊狭窄患眼中8只治愈,2只好转;9只Ⅲ度结膜囊狭窄患眼中3只术眼痊愈、3只术眼好转,余3只术眼无效,其中1只术眼半年后重新行结膜囊成形术.完成治疗的21例患者无义眼座暴露、感染及睑球粘连等并发症,对术后眼座的活动度和外观比较满意.结论对于Ⅰ和Ⅱ度的结膜囊狭窄采用保存羊膜移植同期行眼座植入术是安全可行的.对于Ⅲ度结膜囊狭窄采用保存羊膜移植疗效欠佳.(中华眼科杂志,2005,41:1005-1008)
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羊膜和细胞外基质对兔眼小梁切除术后滤过泡的影响
目的 探讨羊膜和结膜细胞外基质(ECM)对兔眼小梁切除术后滤过泡的影响.方法 对27只新西兰白兔右眼后房注射α-糜蛋白酶,制备青光眼动物模型.将兔随机分为对照组、羊膜组、结膜ECM组,每组9只兔,行右眼手术.对照组行单纯小梁切除术,羊膜组行小梁切除联合羊膜移植术,结膜ECM组行小梁切除联合ECM移植.术后第1、7、14、21、28、35、42、56天观察小梁滤过泡形态及功能并测量术眼眼压,光学显微镜下观察小梁滤过泡下细胞的形态.结果 对照组术前平均眼压(34.59±4.44)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),术后第1、7、14、28、42、56天眼压分别为(11.31±2.76)mm Hg、(19.20±5.27)mm Hg、(21.17±4.36)mm Hg、(22.22±1.39)mm Hg、(23.90±1.97)mm Hg、(23.67±1.73)mm Hg.羊膜组术前平均眼压(34.38±4.20)mm Hg,术后第1、7、14、28、42、56天眼压分别为(10.48±2.45)mm Hg、(12.80±3.41)mm Hg、(13.50±2.25)mm Hg、(16.17±1.73)mm Hg、(17.22±1.32)mm Hg、(16.71±1.52)mm Hg.结膜ECM组术前平均眼压(34.66±4.49)mm Hg,术后第1、7、14、28、42、56天眼压分别为(10.94±2.75)mm Hg、(11.29±2.40)mm Hg、(13.93±3.55)mm Hg、(15.63±3.54)mm Hg、(15.70±2.44)mm Hg、(15.12±3.65)mm Hg.术后对照组与羊膜组和结膜ECM组眼压比较,差异有统计学意义(P<0.01);羊膜组与结膜ECM组眼压比较,差异无统计学意义(P>0.05).羊膜组、结膜ECM组术后第42、56天滤过泡轻微隆起并弥散,有较好的滤过功能.对照组术后第14、21天滤过泡区瘢痕形成,滤过功能差.组织学切片观察显示羊膜组、结膜ECM组滤过泡未形成瘢痕,成纤维细胞少,但有炎性细胞浸润.结论 羊膜和结膜ECM能改善小梁切除术后滤过泡功能,减少瘢痕形成.
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羊膜的应用与生物学改良
羊膜特有的结构和生物学活性,使其成为较理想的生物材料;而羊膜的生物学改良为羊膜的应用开辟了新的研究领域,具有广泛的临床应用前景.本文就羊膜的组织结构、生理特性、免疫学特点、羊膜应用的历史与现状、羊膜眼部应用的手术种类和作用机制以及羊膜的生物学改良及分类等方面进行综述与探讨.
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角膜基质内羊膜移植治疗兔大泡性角膜病变
大泡性角膜病变(bullous keratopathy,BK)由多种机械、理化因素及眼部疾病引起,严重损害患者视力,部分可发展为久治不愈的溃疡而继发感染[1].虽然角膜移植疗效肯定,但受角膜材料来源紧张的限制,目前仍在寻找治疗BK的其他方法.
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羊膜移植治疗蚕蚀性角膜溃疡的临床观察
蚕蚀性角膜溃疡是一种慢性、疼痛性、进行性、非感染性的角膜周边溃疡.其病因和发病机制仍不明确,近年来的研究结果显示与眼局部及全身免疫功能异常有关[1,2].我们自1998年1月以来采用羊膜移植治疗16例蚕蚀性角膜溃疡患者,获得较好的临床效果,现报告如下.
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一种快速制作以羊膜为载体培养角膜上皮细胞切片的方法
以羊膜为载体培养细胞已经被证明有利于细胞的分化和生长,临床上可能有较好的应用前景[1-3].但是,在研究载体上培养细胞形态时,获得良好的侧切面,观察细胞侧面形态、细胞基底面与羊膜基质的关系,一直是较为困难的工作.在实践中,我们使用一种简易、快速制作以羊膜为载体培养角膜上皮细胞切片的方法,供同仁参考.
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《常用眼表手术》光盘出版
为了推广和规范眼表手术技术,帮助临床医师提高手术技能,减少手术并发症,更好地为眼病患者服务,史伟云和高华教授将多年临床工作经验并结合文献资料,制成光盘。由中华医学电子音像出版社出版发行。本套光盘包括三种常用的眼表手术操作技术(翼状胬肉手术、结膜瓣手术、羊膜手术)和角膜移植联合结膜瓣及羊膜手术。特精选8例手术进行演示,对手术方法和技巧、手术适应证、手术后注意事项等进行详细描述和规范操作,希望真实反映此领域的学术水平。本套光盘适合从事眼科手术的临床医师、研究生及眼科医护人员学习参考。常用眼科手术( DVD)共2碟,光盘定价:120元,欲购买者请与中华医学电子音像出版社联系。电话:010-65133608;地址:北京东四西大街42号,邮政编码:100710。
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《常用眼表手术》光盘出版
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人羊膜不同位置上皮细胞的类胚胎干细胞性质差异研究
目的 了解足月人羊膜上皮不同位置上皮细胞在类胚胎干细胞性质方面的异质性.方法 分层消化收集人羊膜上皮近表层与近基底层细胞,运用流式细胞术、免疫荧光、免疫组织化学等方法观察测定其干细胞表面抗原及分子标记物Nanog、Oct4、Sox2、SSEA1、SSEA3、SSEA4、TRA1-60、TRA1-81、CD73的表达情况;同时将足月人羊膜全层及经胰酶消化去上皮后的人羊膜行组织学染色,测定SSEA3、TRA1-60、TRA1-81表达情况.结果 人羊膜上皮近基底层细胞表达Nanog、Oct4、Sox2、SSEA3、SSEA4、TRA1-60、TRA1-81普遍高于近表层细胞;表达SSEA4强、显著的细胞主要为较小的近圆形细胞,分布于羊膜上皮近基底层处.结论 人羊膜上皮不同位置细胞的干细胞特性不同,近基底层细胞比近表层细胞具有更强的类胚胎干细胞性质,因而有望成为临床干细胞的来源.