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  • 维生素C和E与哺乳动物生殖的关系

    作者:陶勇;张美佳;谢辉蓉;夏国良

    维生素在哺乳动物各个系统的生长发育中和正常的生理功能发挥过程中起着举足轻重的作用,具有调节代谢、调节渗透压、调节免疫力、维持酸碱平衡等功能.同样,维生素对哺乳动物的生殖也具有非常重要的作用,尤其是维生素E(生育酚)和维生素C(抗坏血酸),在抗氧化、抗自由基、抗不育、抗衰老、抗癌变等过程中发挥重要作用.

  • 缝隙连接在小鼠卵泡发育过程中的作用

    作者:王路鹏;夏国良

    缝隙连接广泛分布于各组织细胞中,由其构成的胞间通道允许小分子在胞间直接传递,在胞间通讯方面起着重要的作用.缝隙连接由连接蛋白(Cx)组成,已发现Cx家族有20多个成员.在哺乳动物卵泡发育过程中,卵母细胞与周围的颗粒细胞之间形成的缝隙连接,介导胞间通讯,对原始生殖细胞迁移、卵母细胞减数分裂能力恢复、颗粒细胞分层、卵泡成腔、黄体形成、促性腺激素信号传递均有非常重要的调节作用.本文根据近年来相关的研究报道,总结了不同的缝隙连接在小鼠卵泡发育过程中的调节作用.

  • 中枢内存在谷氨酸型神经元

    作者:

      谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中重要的兴奋性神经递质,然而 对其转运蛋白的研究至今还不十分清楚。Reinhard Jahn等在纯化谷氨酸转运蛋白BNPI(依赖 Na+的磷酸转运囊泡结合蛋白)后,发现它的底物选择性和能量依赖性与突触囊泡对谷氨 酸的摄取非 常相似。他们首先确定BNPI定位于脑中含有谷氨酸的囊泡中,并且,在非洲蟾蜍的卵母细胞 中,BNPI的确是作为一种囊泡谷氨酸转运物而发挥其功能的。在表达BNPI的神经细胞内,谷 氨酸的释放是量子式的,其能量来源为质子型ATP酶产生的电化学质子浓度梯度。  另外,一些含有GABA的神经元也表达BNPI。当刺激这些神经元时,可导致突触后电流的出现 。当加入AMPA受体(谷氨酸受体亚型之一)拮抗剂NBQX时,这种突触后电流被大幅度地抑制; 而加入GABAA受体拮 抗剂荷包牡丹碱时,则不会改变这种电流。由此说明,这种突触后电流是由谷氨酸介导的。 当刺激外源性表达BNPI的GABA神经元时,可导致兴奋性神经递质谷氨酸和抑制性神经递质GA BA的同时释放。  以上结果提示,BNPI是作为囊泡谷氨酸转运物而存在的,它的表达足以表明该神经元为谷氨 酸型神经元。而且,BNPI代表了一类有功能的囊泡谷氨酸转运蛋白家族。

  • 未成熟卵母细胞在TCM199与P1培养体系体外成熟的比较

    作者:石宇;龙晓林;杜红姿;黄玉玲;张伟良;刘凤华

    目的 探讨人未成熟卵母细胞适宜的培养体系及培养时间.方法 将卵母细胞-卵丘复合体(0CC)332枚和裸卵(DO)393枚随机置入TCM199和P1两种培养体系体外成熟.OCC体外培养48 h,观察其成熟情况.DO分别在24、30、48 h观察第1极体排出情况,计算体外成熟率.OCC和DO成熟后称为成熟的卵母细胞,成熟的卵母细胞行精子卵浆内注射技术(ICSI)受精,比较其在两种培养体系的受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果 在TCM199和P1培养体系中,OCC的成熟率、成熟后成为成熟的卵母细胞的受精率和卵裂率的差异无统计学意义(P均>0.05),但成熟的卵母细胞的囊胚形成率为53.7%比37.8%(P<0.05).DO在TCM199和P1培养体系中体外培养24、30、48 h时成熟率的差异无统计学意义;由DO成熟后形成的成熟的卵母细胞在P1培养体系中的受精率、卵裂率和囊胚形成率高于其在TCM199培养体系中,但只有受精率差异具有统计学意义(73.5%比62.9%,P<0.05);DO在两种培养体系中体外培养48 h和30 h的成熟率均明显高于24 h(P<0.05),但48 h与30 h的成熟率相比无差异.结论 OCC适宜在TCM199培养体系的培养;DO适官在P1培养体系的培养.DO体外成熟形成成熟的卵母细胞的时间可以缩短至30 h.

  • 卵巢反应不良患者的流产分析

    作者:龙晓林;吴乙璇

    目的 通过分析卵巢反应不良(POR)患者早期自然流产的情况,研究成功妊娠的POR患者卵巢反应不良与卵母细胞数量及质量的关系.方法 收集2005年1月至2009年4月广州医学院第三附属医院生殖医学中心1371例体外受精-胚胎移植妊娠患者,其中58例发生POR,1313例卵巢反应正常(NOR),对比卵巢反应不良与正常患者一般临床情况和各年龄组的流产率.结果 POR组年龄稍高于NOR组](33.2±3.5)岁比(31.5±3.8)岁,P<0.05],所需促性腺激素剂量较大,而取卵数、移植胚胎数和可用胚胎数较少(均P<0.05).两组的不孕年限、原发不孕比例、促排卵天数、受精率、种植率差异均没有统计学意义.POR组的多胎妊娠率低于NOR组(15.5%比34.1%,P<0.05).POR组流产率为20.7%(12/58),NOR组流产率为12.6%(165/1313),差异无统计学意义(P>0.05).POR组≤30岁、31~35岁、≥36岁组的流产率分别为13.3%、26.9%、17.6%,与NOR组同年龄组10.7%、13.8%、14.4%相比差异无统计学意义(均P>0.05).结论 成功妊娠的POR患者流产率较NOR患者无明显升高.成功妊娠的POR患者卵巢反应不良是卵母细胞数量的减少,并不是卵母细胞质量的下降.

  • 体外成熟卵母细胞受精方式及发育能力的影响因素

    作者:石宇;龙晓林;杜红姿;黄玉玲;许海燕;刘见桥;张伟良

    目的 探讨体外成熟卵母细胞的受精方式及影响其胚胎发育的因素.方法 收集本院2008年7月至12月因男性因素需进行卵母细胞胞浆内单精子注射术(ICSI)助孕的135对夫妇未成熟的卵母细胞(DO)354枚,置入P1培养体系中观察培养20~24、26~30、36~40 h后的成熟情况.去除了退化的成熟卵母细胞,随机分为常规体外受精(IVF)和ICSI组,比较2组的正常受精率、卵裂率、第3天优质胚胎率及各组优质胚胎和非优质胚胎的患者年龄、不孕年限、促排时间及卵母细胞体外成熟时间.结果 卵母细胞体外成熟率为82.5%(292/354),IVF组正常受精率56.5%(70/124)低于ICSI组69.9%(107/153)(P<0.05).两组卵裂率和优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05).2组组内优质胚胎的患者年龄、体外成熟时间均小于非优质胚胎(P<0.05);不孕年限及促排时间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ICSI能够提高体外成熟卵母细胞的受精率.体外成熟卵母细胞具有常规受精的能力,第3天胚胎质量与ICSI相似.患者年龄和卵母细胞体外成熟时间是体外成熟卵母细胞发育能力的主要影响因素.

  • 微流体装置线性去除猪MⅡ期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究

    作者:周新丽;杨云;戴建军;张德福;邵文琪;衣星越;陶乐仁

    低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤.为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MⅡ期卵母细胞低温保护剂时在不同时间(6、8、10 min)下卵母细胞的体积变化,以及对卵母细胞存活率与发育率的影响;并与传统的去除方法(一步法和分步法)进行比较.结果表明,采用微流体装置线性去除冷冻保护剂,8 min为实验中的优去除时间;线性法能够明显减小细胞的渗透损伤,其大归一化渗透膨胀体积为1.12±0.07,卵母细胞的存活率、卵裂率及囊胚率分别达到83.6%、72.4%、21.5%,均显著高于一步法和分步法(P<0.05).因此,微流控线性去除冷冻保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供新思路.

  • 纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响

    作者:李维杰;周新丽;刘宝林;戴建军;吕福扣;张德福;徐利

    纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少.本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞,使用形态观察和荧光染色的方法,研究其对细胞存活率和发育率的影响.结果显示在实验浓度范围内,HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低,当浓度低于0.5%时,细胞发育率为100%;低温保护剂中添加0.1%HA纳米颗粒,发育率比其它组显著提高,可以达到22%,且HA的粒径对结果影响不大;当低温保护剂中添加0.05%粒径为60 nm的HA颗粒时,卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14.7%提高达到30.4%.在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒,可以减少复温过程中的重结晶现象,促进细胞的冷冻存活率和发育率,保存效果与浓度相关,而与纳米颗粒的粒径关系不大.

  • 自然周期未成熟卵体外培养治疗多囊卵巢综合征性不孕症的临床研究

    作者:李海仙;马文敏

    目的 研究在自然周期获取未成熟卵母细胞体外培养成熟(IVM)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)性不孕症的临床疗效.方法 57例行体外受精-胚胎移植助孕的PCOS患者,共62个周期,获取434个未成熟卵母细胞进行体外培养,成熟后行单精子卵胞浆内注射,受精后取优质胚胎移植宫腔,统计获卵数、受精率、卵裂率和妊娠率.结果 62个周期共培养出成熟卵子293个,成熟率为67.5%;271个卵子受精,受精率92.5%,卵裂率81.2%,其中52个周期进行胚胎移植,周期取消率为16.1%;17例患者妊娠,移植周期妊娠率32.7%.结论 IVM是治疗多囊卵巢综合征性不孕症的有效方法.

  • 猪卵母细胞 OPS玻璃化冷冻保存的研究

    作者:杨喜;李筱贺;汪剑威;吴静

    猪卵母细胞由于脂肪含量高,对低温敏感,相较其他动物卵母细胞的冷冻保存更加困难,因此在种质的保护保存、胚胎工程研究产生极大的阻碍。本试验研究了猪卵母细胞的OPS玻璃化冷冻保存方法,研究乙二醇、甘油和聚乙烯吡咯烷酮( PVP)作为冷冻保护剂,对比不同的浓度梯度和两种冷冻保护剂联合使用对冷冻效果的影响。研究未经体外成熟培养和不同时间体外成熟培养的猪卵母细胞的冷冻保存效果。对比改良优化的OPS玻璃化冷冻方法和传统的程序化冷冻方法的保存效果。实验表明,体外成熟12 h ( GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮( PVP)进行玻璃化冷冻,解冻后体外成熟率、细胞的形态正常率与未经体外成熟的的卵母细胞相比差异显著,与成熟48 h ( MII期)卵母细胞相比差异不显著。但卵裂率和桑椹胚囊胚率体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷的保护剂组要好于其他组。

  • 小鼠单个不同阶段卵母细胞新抑癌印迹基因RB1的表达

    作者:黄品秀;李蓉;王俊豪;林洪波;赵善飞;郭梁洁

    目的 研究新抑癌印迹基因RB1 在小鼠单个不同阶段卵母细胞中的表达.方法 采用改良 单细胞RT-PCR 方法检测RB1 在单个不同阶段卵母细胞中的mRNA 表达.结果 RB1 在小鼠单个卵母细胞 GⅤ、MⅠ、MⅡ均有检测到正常表达,不同卵母细胞的RB1 表达量不同,其中8 个MⅡ期卵母细胞,3 个卵母 细胞明显表达,1 个表达较弱,其余4 个无明显表达.结论 RB1 在小鼠不同阶段卵细胞中均有表达,但是不 同细胞RB1 存在明显表达的差异.新印迹基因RB1 的研究有助于研究卵母细胞成熟及胚胎生长发育,尤其 使用单细胞进行研究,更有利于对表观遗传学深入研究探讨.

  • 植入前遗传学诊断的方法及应用

    作者:任秀莲;陈贵安

    植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)是指对体外受精胚胎的遗传物质进行分析,诊断胚胎是否有某些遗传异常,确定该胚胎是否适合移植,选择不致造成遗传学疾患的胚胎植入宫腔,从而获得正常胎儿的诊断方法.PGD的步骤包括激素诱导超促排卵,获得卵母细胞,用常规体外受精(in vitro fertilization,IVF)或卵母细胞单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精,体外培养至6~8个细胞期或囊胚期,在此期间通过显微操作对胚胎或卵母细胞进行活检,取得单个或多个细胞进行遗传学检测,再将2~3个经分析正常的胚胎移植入子宫腔内.PGD是一种更早期的产前诊断方法,避免了选择性流产和多次流产可能造成的危害以及伦理道德观念的冲突.

  • 乙型肝炎疫苗的不良反应

    作者:李雅娟;庄辉

    乙型肝炎(乙肝)疫苗是预防并终控制乙肝病毒复制的有效手段.目前,全球已有150个国家将乙肝疫苗纳入计划免疫.乙肝血源疫苗(PDV)于1981年被正式批准使用;重组酵母乙肝疫苗(YDV)于1986年被获准使用.我国于1992年批准乙肝中国仓鼠卵母细胞(CHO)重组疫苗试生产,1996年正式生产.这些疫苗对控制乙肝同样有效,免疫应答均在90%以上.由于乙肝血源疫苗有一定的潜在危险性,且我国乙肝基因重组疫苗的生产量已能满足需要.因此,卫生部决定于2000年起停止使用乙肝血源疫苗.

  • 微创取精术结合卵母细胞单精子显微注射治疗阻塞性无精子症的研究

    作者:王嵩;李晓红;武学清;张晓;陈菲;郭应禄

    我们采用微创手术,从阻塞性无精子症患者获取精子再进行卵母细胞单精子显微注射(ICSI)治疗,观察其妊娠效果.资料与方法1.一般资料:2001年9月至2002年11月在我院就诊的男性阻塞性无精子症患者20例,平均年龄(30.3±2.9)岁.病因检查:输精管先天缺如8例,输精管道炎症8例,输精管部分切除术后4例.患者配偶平均年龄(29.2±2.4)岁,女方的不育因素为:输卵管阻塞3例,子宫内膜异位症1例,16例未发现异常.

  • 双胎妊娠染色体非整倍体产前筛查及诊断

    作者:SOGC;石晓梅

    1 双胎妊娠流行病学、合子性质及绒毛膜性自从20世纪80年代以后,在加拿大和其他发展国家多胎妊娠的发生率大幅度的增加.在1995~2004年期间,多胎妊娠的出生率从2.2%稳定增长到3.0%[1].主要的2个原因是妇女生育年龄普遍提高、辅助生殖技术的普及与不规范的卵巢刺激.合子性质反映了胎儿的遗传同一性,而绒毛膜性指的是胎盘的分布.在单合子双胎中,单个受精卵在多次卵裂后分裂成2个独立的个体,几乎所有这样的双胎基因完全相同,因此性别是一样的.在极少数情况下,由于基因突变或染色体不分离可引起单合子双胎基因不一致,引起双胎表型和染色体不一致[2].当2个独立的卵母细胞同时受精时,形成双合子双胎,这种双胎遗传基因是截然不同的,而且染色体也常常不一致.单合子双胎的发生率非常稳定,约为4/1000.辅助生殖技术使单合子双胎的发生率增加了2~12倍[3-5],具体机制尚不清楚[6].双合子双胎的发生率随着孕妇年龄、种族及不孕治疗(机制等同于母体血清卵泡雌激素水平的升高)的影响变化很大.总的来说,约66%的双胎妊娠为双合子双胎,33%为单合子双胎.

  • 两种人工激活剂对卵胞浆内单精子注射后未受精卵母细胞激活效果的比较

    作者:张晓慧;曹云霞;章志国;吴娟;邢琼;赵济华

    目的 观察两种不同的人工激活剂对行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后未受精卵母细胞的激活作用及效果.方法 收集ICSI后24 h未受精的人类成熟卵母细胞,分别采用乙醇和离子霉素进行激活处理.16~18 h后观察第二极体排出及原核形成情况.激活后正常受精的胚胎继续培养3~5d.统计两组的激活率、原核形成情况、卵裂率及后期胚胎发育情况.结果 乙醇处理组的激活率为65.6%(21/32),离子霉素处理组的激活率为83.7%(36/43),离子霉素处理组的激活率显著高于乙醇处理组(P<0.05);乙醇激活处理后共有10个卵母细胞表现为2PN+2PB,占被激活卵母细胞的47.6%(10/21),离子霉素激活处理后有24个卵母细胞表现为2PN+2PB,占被激活卵母细胞的66.7%(24/36),两组差异无统计学意义(P>0.05);乙醇激活组卵母细胞有4个发育到2~4细胞,2个发育到5~8细胞,1个发育到8细胞以上阶段,获1枚桑葚胚;离子霉素激活组卵母细胞有9个发育到2~4细胞,5个发育到5~8细胞,3个发育到8细胞以上阶段,终获得2枚囊胚和1枚桑葚胚.结论 两种激活剂均能激活ICSI后24 h未受精的人类成熟卵母细胞恢复受精,并继续发育成胚胎;离子霉素比乙醇更适宜对ICSI后未受精卵母细胞的激活.

  • 采用新鲜和冻融精子进行卵母细胞胞质内单精子注射的临床效果比较

    作者:张秋芳;乔杰;白泉;李明;廉颖;吴昱琪;刘平

    目的 比较采用新鲜和冻融的睾丸及附睾精子进行卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)的临床效果.方法 选择2006年9月-2007年5月因无精症于北京大学第三医院生殖医学中心行ICSI的患者208例,按患者意愿分为冻融组37例和新鲜组171例.冻融组在行ICSI前将冻存的睾丸或附睾精子解冻并复苏.观察冻融组睾丸和附睾精子的临床利用率;比较两组患者的临床结局(包括正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率及胚胎着床率等)和妊娠结局(包括流产率、分娩孕周及新生儿出生体重等).结果 (1)冻融组睾丸精子的临床利用率为92%(23/25),附睾精子为100%(12/12).(2)新鲜组患者的正常受精率、优质胚胎率、临床妊娠率及胚胎着床率分别为62.25%(973/1563)、78.9%(768/973)、44.4%(60/135)和29.3%(84/287),分别与冻融组[分别为64.53%(282/437)、79.1%(223/282)、46.9%(15/32)和33.3%(23/69)]比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(3)新鲜组患者的流产率、单胎妊娠分娩孕周、双胎妊娠分娩孕周、单胎妊娠平均新生儿出生体重及双胎妊娠平均新生儿出生体重分别为11%(6/55)、(39.0±1.4)周、(36.8±1.7)周、(3409±393)g和(2584±266)g,分别与冻融组[分别为7%(1/15)、(38.7±0.6)周、(36.3±1.2)周、(3350±383)g和(2635±171)g]比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 采用冻融的睾丸或附睾精子行ICSI安全、有效,值得在临床推广.

  • 冷冻保存人类未成熟卵母细胞对其发育潜能的影响

    作者:高姗姗;李媛;陈子江;李梅;胡京美;马水英

    目的 评价冷冻保存人类未成熟卵母细胞对其发育潜能的影响.方法 收集常规胞质内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)中不成熟的卵母细胞168个,根据成熟程度分为生发小泡期(GV)卵母细胞103个和第1次减数分裂中期(M Ⅰ)卵母细胞65个,再将各期卵母细胞分别分为冷冻组和对照组,冷冻组细胞经慢速冷冻-快速融解(慢冻-速融)后在体外培养成熟,对照组直接进行体外培养成熟.后进行免疫荧光染色并观察.结果 GV冷冻组和GV对照组卵母细胞之间体外成熟率(分别为69.1%、74.3%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);GV冷冻组和GV对照组卵母细胞之间纺锤体形态正常率(分别为28.9%、53.9%)和染色体形态正常率(分别为23.7%、50.0%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);MⅠ冷冻组和MⅠ对照组卵母细胞之间体外成熟率(分别为68.6%、88.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05).MⅠ冷冻组和MⅠ对照组卵母细胞之间纺锤体形态正常率(分别为20.8%、54.6%)和染色体形态正常率(分别为25.0%、63.6%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);GV冷冻组和M Ⅰ冷冻组之间各项结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 应用常规慢冻-速融方案并不能很好地保存未成熟卵母细胞的体外成熟后的纺锤体形成能力,未成熟的卵母细胞的发育潜能从而受损.

  • 未成熟卵母细胞体外成熟与常规体外受精-胚胎移植技术治疗多囊卵巢综合征不孕的疗效比较

    作者:余蓉;林佳;赵军招;王佩玉;肖仕全;张巍

    目的 比较未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)与常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术治疗多囊卵巢综合征( PCOS)不孕患者的实验室结果和临床结局.方法 回顾性分析2007年1月-2010年12月在温州医学院附属第一医院生殖医学中心接受辅助生殖技术治疗的PCOS患者701个周期,其中行IVM治疗293个周期(IVM组),行IVF或卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗408个周期(IVF/ICSI组),比较两组的周期移植率、平均获卵数、卵母细胞成熟率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、移植周期妊娠率、妊娠结局及卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生率.结果 IVM组293个周期中,移植周期275个,周期移植率为93.9%;IVF/ICSI组408个周期中,移植周期342个,周期移植率为83.8%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).IVM组卵母细胞成熟率(56.64%)、卵裂率(88.08%)、优质胚胎率(38.72%)、胚胎种植率(17.8%)均显著低于IVF/ICSI组(分别为91.09%、94.91%、51.50%、25.4%),分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).IVM组和IVF/ICSI组的移植周期临床妊娠率分别为37.8%(104/275)和44.2%(151/342),两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).IVM组平均获卵数为(12.9±6.5)个、受精率为76.52%,IVF/ICSI组分别为(12.9±7.9)个、70.75%,分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).IVF/ICSI组有87个周期发生轻、中度OHSS,发生率为21.3%( 87/408),8个周期发生重度OHSS,发生率为2.0%(8/408).而IVM组无OHSS发生.结论 IVM与IVF/ICSI用于治疗PCOS不孕患者,可以获得相似的临床妊娠率.同时,IVM能完全避免OHSS的发生.

  • GDF9和BMP15在PCOS患者刺激周期卵母细胞不同成熟阶段的表达变化及意义

    作者:魏莉娜;方丛;黄睿;李俐琳;张敏芳;梁晓燕

    目的 探讨卵源性因子——生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者及因男方因素不孕的卵巢功能正常妇女刺激周期卵母细胞不同成熟阶段的表达变化及意义.方法 收集12例PCOS患者(PCOS组)的25个卵母细胞[9个胚泡(CV)期,9个MⅠ期和7个M Ⅱ期]和56例卵巢功能正常妇女(对照组)的82个卵母细胞(29个GV期,26个MⅠ期和27个MⅡ期),采用巢式实时定量PCR技术,检测两组妇女不同成熟阶段的卵母细胞中GDF9和BMP15 mRNA的表达水平.结果(1)GDF9 mRNA的表达水平:PCOS组GV、MⅠ、MⅡ期卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平分别为44.8(4.2 ~529.0)、27.6(9.8~172.7)和49.0(0.2~65.9),对照组GV、MⅠ、MⅡ期卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平分别为149.9(55.4 ~ 387.9)、29.9(2.5 ~205.8)和657.8(149.4 ~1376.2),两组妇女MⅡ期卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平分别比较,差异有统计学意义(P<0.01),但两组妇女GV、MⅠ期卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);PCOS组不同成熟阶段卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),对照组不同成熟阶段卵母细胞GDF9 mRNA的表达水平分别比较,差异均有统计学意义(P <0.05、P<0.01).(2)BMP15 mRNA的表达水平:PCOS组GV、MⅠ、MⅡ期卵母细胞BMP15 mRNA的表达水平分别为0.1(0.1 ~22.0)、3.2(0.6~55.0)和6.4(3.2~8.5),对照组GV、MⅠ、MⅡ期卵母细胞BMP15 mRNA的表达水平分别为41.6(6.5 ~96.1)、4.0(2.0~10.4)和49.7(2.3 ~139.5),两组妇女GV期卵母细胞BMP15 mRNA的表达比较,差异有统计学意义(P<0.01),但两组MⅠ、MⅡ期卵母细胞BMP15 mRNA的表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);PCOS组不同成熟阶段卵母细胞BMP15 mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),对照组不同成熟阶段卵母细胞BMP15 mRNA的表达水平比较,GV期高于MⅠ期(P<0.05),MⅠ期低于MⅡ期(P<0.01).结论在刺激周期中,PCOS患者成熟卵母细胞中卵源性因子表达水平降低,可能影响细胞质成熟,从而导致PCOS患者卵母细胞质量下降和发育潜能受损.

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