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精子脱尾温育降低小鼠卵胞浆内单精子显微注射的受精率
目的 脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响.方法 首先,用机械吹打法处理小鼠精子悬液,使得部分精子脱尾,于不同温度下孵育,观察孵育温度对ICSI的受精率和卵裂率的影响；然后比较精子化学破膜与吹打脱尾处理后温育一定时间对显微授精的受精率、卵裂率的影响.结果 相对于对照组,对小鼠精子进行吹打脱尾,经37℃下温育12h后的显微授精双原核形成率和卵裂率显著下降(75.6％ vs 15.1％,P＜0.01；91.1％ vs 18.9％,P＜0.01),而4℃下温育12h的结果未见正常受精率和卵裂率受显著影响.用Triton-100精子进行化学破膜后温育,尽管其没有机械脱尾法效果显著,也同样明显降低了受精率和卵裂率(P＜0.01).结论 该研究初步提示,精子脱尾等破膜损伤在经37℃较长时间温育后会降低小鼠ICSI的受精率,常规小鼠ICSI操作中小鼠精子批量脱尾处理后不宜在37℃下放置过久.
关键词： 卵胞浆内单精子显微注射(ICSI) 受精率 卵裂率 脱尾 小鼠 -
冻融精子培养时间对受精率及胚胎质量的影响
目的 分析冻融精子培养时间对受精率和胚胎质量的影响.方法 随机对照研究供精-体外受精-胚胎移植49个取卵周期.根据精子解冻后培养时间的不同分为3组,A组(13例),培养时间＞2h,＜4h;B组(18例),培养时间＜30 min;C组(18例),培养时间＜1h,＞30 min.比较3组的受精率、卵裂率、2PN率和优胚率.结果 B、C组与A组比较受精率(91％、90％和24％)、卵裂率(92％、90％和69％)、2PN率(73％、78％和42％)和优胚率(44％、36％和19％),有显著性差异(P＜0.05),而B组与C组比较,受精率、卵裂率、2PN率和优胚率无显著性差异(P＞0.05).结论 冻融精子培养1h内,好30 min内进行授精,可以获得较为理想的优胚率.
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常规体外受精失败的相关因素分析
目的 探讨常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中受精失败(包括全卵受精失败和受精率低于30％)的相关影响因素.方法 回顾性分析2009年9月至2012年12月在唐山市妇幼保健院生殖中心接受IVF-ET治疗的1339个周期.根据受精率情况分为全卵受精失败组(A组)82例,受精障碍组(B组,受精率＜30％)116例与受精正常组(C组,受精率＞30％)1 141例进行比较,分析三组的女方年龄、促排卵方案、获卵数、卵子成熟率、不孕原因等情况.结果 A、B两组患者的年龄、不孕年限、促排卵方案、获卵数、卵子成熟率与C组比较差异无统计学意义,但是不明原因性不孕比率明显高于C组,原发不孕并伴有男方因素患者受精失败危险性明显增高.结论 不明原因性不孕、原发不孕并伴有男方精子因素包括少、弱、畸精子症,精子功能缺陷等的患者在行体外受精(IVF)助孕时存在较大受精失败的风险.
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短时受精后早剥卵对胚胎质量及妊娠结局的影响
[目的]探讨短时受精后早期剥除颗粒细胞对体外受精胚胎质量及妊娠结局的影响.[方法]回顾性分析2012年在本中心助孕的有早剥卵的103个IVF周期与74个ICSI周期,以ICSI组为对照,比较两组的2PN受精率、多PN受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率,再以IVF周期中的卵子是否进行早剥分为两组,比较早剥对IVF周期中2PN受精率、多PN受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率的影响.[结果]在IVF周期中共有1 181枚卵子纳入研究,其中早剥卵子513枚,非早剥卵子668枚,在ICSI周期中共有619枚成熟卵子纳入研究.结果显示,IVF组的2PN受精率、卵裂期优质胚胎形成率低于ICSI组,多PN受精率高于ICSI组,差异有统计学意义(P＜0.05);其余比较均无统计学差异.而IVF的全部卵子中,早剥卵子组的2PN受精率、多PN受精率、可利用胚胎形成率、优质胚胎形成率、种植率、临床妊娠率与非早剥组相比,均无统计学差异(P＞0.05).[结论]与传统ICSI相比,短时受精后早期剥除卵丘颗粒细胞并未降低可利用胚胎形成率;与常规IVF相比,早剥也未提高多PN受精率;早剥卵是安全的,并能够使受精情况不明的患者受益.
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小鼠精子激活力减弱模型制备技术的初步研究
[目的]:人类辅助生殖技术中,低受精率的发生机理及辅助激活提高受精率的安全性尚不清楚,缺乏激活力减弱的精子模型是其中一个主要研究障碍.本研究拟探索减弱小鼠精子激活力的新技术.[方法]首先,分别对精子进行化学破膜、机械脱尾及其联合操作于37℃孵育12h,比较各操作对显微授精后的受精率的影响;然后进一步结合时间因素,观察处理时间与精子激活力减弱程度的联系.同时,对操作后的胚胎早期发育的影响也进行了相应观察.[结果]①化学破膜法与机械脱尾法对精子破膜并温育后,均能有效降低精子受精率;②相对于正常的精子,对小鼠精子进行吹打机械脱尾,37℃下温育2、4、8、12h后,受精率和卵裂率均出现程度逐步增加的显著降低(P＜0.01);③与对照相比,以吹打机械脱尾并37℃下温育后的精子进行显微授精后,其受精卵的囊胚率和孵出率也显著降低(P＜ 0.001).[结论]将小鼠精子机械脱尾并在37℃下温育,精子激活力随温育时间增加而显著降低,同时其胚胎发育能力下降.本研究初步探索了程度可控的降低精子受精激活力的新技术,其安全性及导致精子激活力下降的机制尚需进一步研究.
关键词： 精子激活力 卵胞浆内单精子显微注射 卵子激活 受精率 小鼠 -
卵母细胞第一极体形态对受精结局的影响
目的：分析人类卵母细胞第一极体的形态与卵母细胞的受精率、卵裂和发育潜能的关系。方法行卵胞浆内单精子注射技术治疗的63周期765枚卵母细胞，观察MⅡ期卵母细胞第一极体，并根据第一极体形态将卵子分为圆或椭圆（A组），形态碎片化（B组），极体巨大、卵周隙大（C组）等3组。统计卵母细胞的正常与异常受精率、卵裂率和优质胚胎率，分析第一极体形态与卵母细胞受精和发育的关系。结果 A、B两组卵母细胞的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率明显高于C组，B组与A组相比，卵母细胞的正常与异常受精率、卵裂率没有明显差异，但优质胚胎率显著降低。结论卵母细胞第一极体与卵母细胞的受精和发育潜能相关。第一极体形态可能作为评价人类卵母细胞发育潜能的可能指标。
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继发性不孕患者行部分卵子单精子卵泡浆内显微注射139周期分析
目的 探讨继发不孕患者行部分卵子单精子卵泡浆内显微注射(half intracytoplasmic sperm injection,half-ICSI)的适应证.方法 回顾性分析继发不孕患者行部分卵子单精子卵泡浆内显微注射共139个周期,按体外授精(IVF)受精率≤50% 和＞50%分组,比较两组患者年龄、不孕年限、受精率、临床妊娠率等情况;分析IVF受精失败12周期的相关情况.结果 IVF受精率≤50%组的女方年龄较大,男方因素比例高,ICSI受精率低,获卵数及冷冻胚胎均少于受精率>50%组(P<0.05).IVF受精失败的12周期与IVF受精率>50%组比较也得出相似结果.结论 对于继发不孕患者,女方年龄大,男方精液为临界值,若为原发不育者,行half-ICSI可能帮助其减少受精失败的概率.
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精子形态和处理后精液参数与体外受精率的关系
目的 探讨优化处理后前向运动精子比率、前向运动精子总数、精子正常形态百分率与IVF受精率之间的关系.方法 回顾性分析生殖医学中心进行常规试管婴儿273个周期,研究精子正常形态率和处理后精液参数与受精率之间的关系.结果 当处理后前向运动精子比率＜50%和前向运动精子总数＜5×106时,体外受精(IVF)受精率显著低于其他组(P<0.01);处理后前向运动精子总数＜5×106时精子正常形态率＜5%组与≥5%组IVF受精率差异有统计学意义(P<0.01).结论 优化处理后精子前向运动率和前向运动精子总数与IVF受精率相关,当处理后前向运动精子比率＜50%时IVF受精率显著降低,而处理后前向运动精子总数＜5×106且正常精子形态＜5%时IVF受精率明显降低.
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精子形态与体外受精
体外受精-胚胎移植(in vitro ferti1ization-embryo transfer,IVF-ET)技术及其衍生的卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术已在全世界广泛开展 ,被认为是治疗不孕不育症为有效的方法.ICSI和IVF的主要区别在于ICSI降低了对男方精液质量的要求,使许多采用IVF无法解决的不孕不育患者也有机会生育自己的血亲后代,但同时也带来了一些问题,如男性某些遗传病传给后代的概率增加或后代的先天性畸形率升高等,故认为只有IVF不能治疗的病人才能施行ICSI.
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IVF-ET中低受精率事件发生相关因素分析
目的 分析在体外受精中影响低受精率事件发生的相关因素.方法 回顾性分析2014年1月1日至9月30日在本生殖中心行体外受精胚胎移植(IVF-ET)辅助生殖技术治疗的1387个周期,以受精率(受精率=受精卵数/总卵数)30％为界,受精率＜30％为A组(151个周期),受精率≥30％为B组(1236个周期),比较两组患者的年龄、体重指数、不孕年限、原发/继发不孕、基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、雄激素(T)、孕激素(P)、促性腺激素(Gn)用药总量、Gn总天数,注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日的P、E2、LH、FSH水平,取卵术后第二天E2水平,手术适应证,手术日平均卵泡数、平均获卵数、成熟卵数.二分类变量Logistic回归分析P＜0.05的变量与低受精率事件发生的关系.结果 两组间年龄、体重指数、基础激素及注射HCG日的激素(FSH、LH、E2、P、T)、Gn总量、Gn总天数、平均获卵数差异均无统计学意义(P＞0.05).两组不孕年限、原发/继发不孕、手术适应证、平均卵泡数、成熟卵数差异有统计学意义(P＜0.05).二分类变量Logistic回归分析显示卵泡数(OR=1.050)、成熟卵数(OR=0.890)、适应证(OR=1.719)与IVF-ET低受精率事件的发生有密切关系(P＜0.05).结论 在IVF-ET中低受精率事件的发生与适应证中男性因素关系密切,其次是卵子发育成熟同步性.
关键词： IVF-ET 受精率 Logistic回归分析 -
不同受精方式对临床结局的影响
目的 比较常规体外受精(IVF)和卵泡浆内单精子注射(ICSI)受精对牺床结局的影响.方法 选取在我中心进行治疗的674病例共726周期(IVF 648周期,ICSI 78周期),比较两组不同受精方式获得的正常受精率、卵裂率、优胚率、冷冻事、平均移植胚胎散、妊娠率.结果 ICSI组的正常受精率、卵裂率、优胚率、冷冻率、妊娠率、平均移植胚胎数分别为80.88%,93.80%,56.98%,56.32%,34.48%,2.00 ±0.53个,而IVF组为67.52%,97.71%,51.75%,60.65%、41.2%,2.04±O.73个.ICSI组正常受精率、优胚率较IVF组高,但IVF组卵裂事较ICSI高,并且有统计学意义(P＜0.05),而冷冻率、妊娠率、平均移植胚胎数两组无统计学意义(P＞0.05).结论 ICSI治疗严重男性不育症可获得与IVF治疗女性不孕症相近的临床效果.
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体外受精胚胎移植治疗原发性不孕症疗效分析
目的 分析输卵管因素与不明原因原发不孕患者行常规体外受精一胚胎移植术(IVF-ET,in vitrofertilization and embryo transfer)时的受精率、完全受精失败率及临床妊娠率,评估常规体外授精方式的效果. 方法 将213例原发不孕患者分为输卵管因素组188例,不明原因组25例,行IVF-ET,比较二组的受精率、完全受精失败率及临床妊娠率. 结果 不明原因组受精率明显低于输卵管因素组(P＜0.01),而完全受精失败率明显高于后者(P＜0.05),二者临床妊娠率差异无统计学意义. 结论 原发不孕输卵管因素患者好选择IVF;不明原因不孕患者可以采用部分IVF部分ICSI的治疗方案.
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反复体外受精失败患者的心理护理
体外受精- 胚胎移植(in vitro fertilization and embryotransfer, IVF-ET) 是治疗女性不孕症的有效方法.令人惋惜的是受精失败及低受精率仍然时有发生.这不仅会增加不孕患者的经济、身体负担,同样也会出现较为严重的心理状况,我们对我院体外受精失败患者开展了适宜的心理护理,以期望减轻患者的心理负担,保障再次受精过程的顺利完成.
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鼠胚实验在新建IVF实验室中的质控作用
目的 探讨鼠胚实验对该院新建生殖实验室培养体系进行评估的可行性.方法 选择昆明系小鼠进行体内及体外受精胚胎进行培养,观察常规培养条件下不同受精方式来源的小鼠胚胎及不同培养环境下对小鼠体外受精胚胎的受精率、卵裂率、囊胚率.结果 体内周期数共35个,获得受精卵共844枚,受精率95.8％,卵裂率92.7％,囊胚率96.2％;体外周期数42,获得卵母细胞1119枚,受精率79.2％,卵裂率94.8％,囊胚率85.8％;体内受精的受精率和囊胚率与体外受精之间差异显著,且差异有统计学意义.体外受精胚胎在三气培养箱培养卵裂率为79.3％,受精率为95.4％,囊胚率为88.4％;在二气培养箱中卵裂率为82.7％,受精率为95.1％ 、囊胚率为84.4％;体外受精和体内受精培养在受精率、卵裂率、囊胚率差异不显著.结论 无论是体内受精还是体外受精培养的囊胚率均达到了质控标准,所以本实验室的培养环境适合进行人的体外受精操作;小鼠胚胎对二气或者三气培养箱的环境不具有敏感性,小鼠胚胎具有局限性,可重复性不高.
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避免常规体外受精失败-部分卵子单精子卵泡浆内显微注射364周期分析
目的:探讨部分卵子单精子卵泡浆内显微注射(Half intracy toplasmic sperill injection,half-ICSl)的适应征及half-ICSI对于挽救试管受精(In vitro fertilization,IVF)失败的意义.方法:对2002年～2005年7月364周期half-ICSI中IVF受精失败(受精率为0)和受精率低下(受精率<30%)的指征half-ICSI中IVF受精率正常(受精率>65%)的指征进行比较.结果:half-ICSI组IVF受精率低于常规IVF受精率.受精率低下组和受精率失败组中男性边缘因素占51.2%和63.3%.与受精率正常组比较,其指征有显著性差异(P<0.05).30例IVF受精率为0的患者中11例由于采用Thalf-ICSI的方式,获得ICSI受精的胚胎,进行了移植,而获得妊娠,占30例患者中36.7%.结论:男性边缘因素是half-ICSI的适应征.half-ICSI可以做为疑IVF受精困难者的选择,很好地预防IVF受精失败,以及低受精率的出现.
关键词： 部分卵子-单精子卵泡浆内显微注射 受精率 指征 受精失败 受精率低下 -
比较两种精子处理技术对体外受精胚胎质量的影响
目的比较经两种精液处理技术处理的精液对成熟卵的体外受精、卵裂及胚胎质量的影响.方法将1999年12月～2000年4月在重庆妇产科医院生殖与遗传中心进行体外受精胚胎移植(IVF-ET)治疗的60例患者以采卵日时间随机分为两组,将其精液分别用上游法和两层不连续percoll密度梯度离心法处理.结果 25例上游法组受精率、卵裂率、优质胚胎率分别为94.50%、98.75%、60.34%;35例两层不连续percoll密度梯度离心技术组受精率、卵裂率、优质胚胎率分别为94.21%、96.91%、68.75%.结论两种精液处理技术处理的精子在成熟卵的受精率、卵裂率上无差别,而两层不连续percoll密度梯度离心法的胚胎质量明显优于上游法组.
关键词： 上游法 两层不连续percoll密度梯度离心法 受精率 卵裂率 优质胚胎率 -
原发性不孕症与继发性不孕症受精率的比较分析
比较原发性与继发性不孕症患者行常规体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)的受精率差异,为今后选择合适的治疗方式提供参考.方法 (1)将行IVF-ET的患者分为原发性不孕症组和继发性不孕症组,比较两者的受精率差异;(2)按照精液的正常与否、不孕年限的长短及在不同疾病中的表现,比较两者的统计学差异.结果 (1)所有分组均提示原发性不孕症组和继发性不孕症组比较两者在MII形成率和受精率上无统计学差异(P＞0.05);(2)精液检查正常组与异常组比较受精率有统计学差异(P＜0.01).结论 (1)原发性不孕症本身不是受精障碍的影响因素,弱精子症是影响受精的主要因素;(2)对于原发性不孕症、不孕年限长、弱精的患者仍有自然受精的机会,可行短时受精,建议不要盲目扩大人卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)的指征.
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精子形态学、精子-透明质结合试验与体外受精率的相关性研究
目的 探讨精子形态学、精子-透明质结合试验(hyaluronan binding assay,HBA)与体外受精率的相关性.方法 对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transportation,IVF-ET)中精子形态学155例和精子-透明质结合试验38例进行分析,分别观察女方MⅡ卵子1 509个和327个,记录受精和未受精卵的数目,并分析精子正常形态率、精子-透明质结合试验结合率和受精率的相关性.结果 精子正常形态率≤5%、6%～14%、≥15%对应的MⅡ卵子受精率分别为48.05%、72.25%、81.79%,各组间相比较,差异有显著性(P<0.05).精子-透明质结合试验的结合率≤40%、41%～69%、≥70%对应的MⅡ卵子受精率分别为55.17%、72.07%、75.31%,≤40%组和其它两组间相比较,差异有显著性(P<0.05),另两组问相比较.差异无显著性(P>0.05).结论 在体外受精过程中,精子正常形态率与卵子的受精率有明显的相关性,而精子-透明质结合试验的结合率与卵子受精率有一定程度的相关性,此两项参数可作为选择不同的辅助生殖技术[体外受精(in vitro fertilization,IVF)或胞浆内单精子显微注射术(intraeytoplasmic sperm injec-tion,ICSI)]的依据.
关键词： 体外受精 精子形态学 精子-透明质结合试验 受精率 -
精子运动对体外受精率、妊娠率的影响
在体外受精-胚胎移植技术(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer简称IVF-ET)中,过去单纯考虑或更多的考虑卵子质量,是因为得到卵子比较困难,超排卵花费较高;胚胎学方面也较多地强调卵子在胚胎发育中占有的作用,所以人们常常忽视精子质量特别是其运动能力对发育的影响,越来越多的事实说明,精子对IVF-ET的成功率同样起到至关重要的作用.而在20世纪90年代产生的计算机辅助分析精子(Computer Assisted Sperm Analysis CASA)技术则能比较准确地反映精子的运动特性.
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染色体异常对体外胚胎发育的影响
1 对象与方法1.1 对象 2001年至2005年在沈阳东方医疗集团生殖中心准备进行体外受精胚胎移植的95例异常染色体患者(表1),经告知病情后不同意行植入前遗传学诊断坚持行体外受精胚胎移植,并签署知情同意书,将其按术式分为体外受精胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)和卵浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)两组,与2366名染色体正常者(对照组)分别比较受精率、异常受精率、卵裂率、妊娠率、周期放弃率及流产率.
