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无症状生殖道感染不育男性精液白细胞亚群与精子DNA损伤的关系
目的:探讨无症状生殖道感染的不育男性精液中白细胞亚群与精子DNA损伤的相关性. 方法:选择2013年3月至2015年8月就诊的无症状生殖道感染的不育男性111例,精液常规分析后,采用免疫细胞化学法检测精液中CD45+白细胞浓度,流式细胞术检测单核细胞/巨噬细胞系CD14抗原+、活化巨噬细胞HLA-DR+细胞浓度;TUNEL法检测精子DNA碎片及8-羟化脱氧鸟苷(8-OHdG)表达情况;分析精液白细胞亚群与精子DNA损伤及常规精液参数的相关性. 结果:精液CD45+细胞浓度与CD14+、HLA-DR+细胞浓度间有明显相关性(P＜0.01),而不同亚群白细胞浓度与精液传统参数、碎片率、8-OHdG+细胞比例均无明显相关性.8-OHdG+精子百分率与精子碎片百分率呈正相关(r=0.48,P＜0.01),而与精子浓度呈负相关(r=-0.44,P＜0.01).在调整年龄、禁欲时间和吸烟的基础上,精子浓度和精子碎片率(β=-0.25,P=0.008;β =0.23,P=0.05)与8-OHdG+精子百分率的变化独立相关. 结论:无症状生殖道感染的不育男性精子DNA损伤与精液质量下降相关,而与不同白细胞亚群无相关性.
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生殖系统感染对男性精液质量影响的研究
目的:探讨泌尿生殖系统感染对男性精液参数和精子DNA损伤的影响. 方法:2013年6月至2014年6月在本院生殖医学中心就诊的1 084例男性分为生殖系统感染患者300例和对照者784例两组.根据世界卫生组织标准(WHO,1999年)对其进行精液常规参数(精子浓度和精子活动力)和精子形态学测定,采用精子染色质结构分析(SCSA)检测精子DNA损伤水平,即精子DNA碎片指数(DFI). 结果:感染组和对照组的精液量、(a+b)级精子、d级精子和精子总数分别为(2.58±1.20) ml和(3.00±2.10) ml、(50.6±17.2)％和(53.2±15.8)％、(39.8±17.8)％和(36.5±16.2)％、(218.5 ±185.0)×106/1次射精和(278.5±375.5)×106/1次射精,两组相比差异有统计学意义(P＜0.05),两组男性的年龄、精子浓度和pH比较差异均无统计学意义(P＞0.05);感染组的正常形态精子百分率为(3.46±2.90)％,显著低于对照组的(4.61±3.60)％(P＜0.05);感染组和对照组的精子DFI分别为(19.4±11.4)％和(15.2±8.8)％,同时感染组中DFI＞ 30％者占13.0％,DFI＜ 10％占16.0％,而在对照组中分别占5.74％和28.0％,组间比较均具有统计学意义(P＜0.01);精浆弹性蛋白酶水平与精子浓度、精子总数、正常形态精子百分率呈显著负相关(P＜0.05),与DFI和d级精子呈显著正相关(P＜0.05或P＜0.01). 结论:男性生殖系统感染对精液参数和精子DNA损伤都具有一定的影响,生殖系统感染的排查对男性不育有重要的诊断价值.
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西维因致男性工人精子DNA损伤的机制初探
目的:探讨西维因农药暴露与男性工人精子DNA损伤的关系,并探讨其可能的机制.方法:选择某农药厂西维因生产男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工36名为内对照组;同地区男性行政人员22名为外对照组.检测3组人群精子DNA损伤、精浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及精子活性氧(ROS)含量.选用培养的小鼠精母细胞(GC2-spda细胞)进行体外功能学验证,在不同浓度西维因染毒条性下,分析细胞存活率、凋亡及SOD活性,ROS含量的变化.结果:与内、外对照组相比,暴露组男性精子DNA断裂损伤显著增加(P<0.05)、精浆SOD活性降低及精子ROS增加(P<0.05).相关性分析的结果显示,精子DNA损伤与精浆SOD的活性负相关(r=-0.53,P<0.001),与精子ROS水平呈正相关(r=0.32,P=0.002).小鼠精母细胞随西维因染毒剂量增加细胞存活率显著下降,凋亡增多并且细胞SOD减少及ROS增加(P<0.05).结论:两维因可影响男性精液质量,其可能的机制是通过氧化应激导致精子DNA的损伤.
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人精子过氧化氧化还原蛋白2表达与精子DNA损伤的相关性
目的 精子DNA损伤的分子机制尚不明确.文中旨在通过检测精子DNA正常者和精子DNA损伤患者过氧化氧化还原蛋白2(Prdx2)表达差异,分析Prdx2表达与精子DNA损伤指数(DFI)的相关性.方法 收集2017年7月至2018年7月南京军区南京总医院生殖医学中心门诊67份男性不孕患者的精液标本.按DFI值分为3组:DFI正常组(DFI≤15％,n=38)、轻度损伤组(15％
关键词： 过氧化氧化还原蛋白2 精子DNA损伤 精子活动力 -
王祖龙治疗精子DNA碎片率增高性不育症用药规律分析
王祖龙教授系河南省中医药大学三级教授、硕士研究生导师,国家重点学科中医男科学学术带头人,深谙中医经典,学识渊博、治学严谨,从事教学、临床、科研30余年,具有丰富的临床经验.笔者有幸跟师随诊学习,现仅撷其治疗精子DFI增高性胎不育症用药规律经验加以整理,以飨读者.资料与方法1 入组标准1.1 诊断标准1.1.1 DNA损伤性不育西医诊断标准 根据《世界卫生组织男性不育标准化检查与诊疗手册》[1]和DFI检测指标[2]执行:夫妻同居一年未避孕,女方正常,性生活正常,由男方因素导致女方不孕,并在符合精液分析检查的时间内所做精液分析报告中,15％≤DFI＜80％的病症.
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氧化应激与精子DNA损伤
目前我国不育症的患病率约10%～15%,其中50%是由男方因素引起的.引起男性不育的常见因素有精索静脉曲张、隐睾、感染、梗阻、囊肿件纤维化、外伤、肿瘤等,近年来研究认为,不明原因的男性不育患者精液中存在高水平的活性氧和较低的抗氧化占25%～40%.
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精子DNA损伤因素的研究进展
精子DNA在起生精过程中发生细胞凋亡、受运输过程中氧自由基的影响、包装过程中染色质异常等均可诱导使DNA双链断裂导致DNA损伤.其损伤的机制主要为DNA双链发生变性或者裂解为单链.含有DNA损伤的精子可在某种程度上回避体内精子的优化选择机制而将生殖缺陷遗传给后代.精子DNA的损伤可能导致其后代出现胚胎期发育不良、先天畸形和早期流产等不良后果.为此精子DNA损伤因素的研究成了不少男科生殖专家研究的热点之一.导致精子DNA损伤的因素很多,现结合近几年国内外相关研究成果对其作一综述,为进一步研究精子DNA损害的发生原因以及男性不育的预防、治疗以及辅助生殖技术的选用提供依据.
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活血补肾法对改善不育症患者精子DNA损伤的临床研究
目的:探讨活血补肾法对改善不育症患者精子DNA损伤的临床效果.方法:选取2015年5月-2016年7月在我院生殖中心男科门诊就诊的不育症患者,经精子染色质扩散法检测精子NDA碎片指数(DFI》＞30％患者100例,随机分为治疗组60例和对照组40例,治疗组给予活血补肾中药汤剂治疗,对照组给予西药L肉碱及维生素E治疗,比较两组治疗前后DFI及常规参数的变化.结果:治疗组总有效率为90.00％,明显高于对照组的72.50％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);观察组治疗后精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率亦明显高于对照组,两组间各值比较有统计学意义(P＜0.05).结论:活血补肾法可明显改善不育症患者精子DNA损伤,并能较好改善精子浓度、活力及正常形态,提高受孕机率.
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益肾通络方对雄性苯并(a)芘染毒大鼠DFI、XRCC1、OGG1蛋白表达的影响
目的:观察益肾通络方对雄性苯并(a)芘(benzo(a) pyrene,BaP)染毒大鼠精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)、X线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross-complementing group1,XRCC1)、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(8-Oxoguanine DNA glycosylase,OGG1)蛋白表达的影响,探讨BaP染毒大鼠精子DNA损伤机制及益肾通络方对BaP染毒大鼠精子DNA损伤的防护作用.方法:选取SPF级雄性SD大鼠100只,按体质量进行编号,并按照随机数字表法随机分为5组:溶剂对照组、BaP染毒组、益肾通络方低剂量组、益肾通络方中剂量组、益肾通络方高剂量组.除溶剂对照组外,其余各组均按1 mL·kg-1腹腔注射经BaP固体稀释成的0.1 mg·L-1工作液染毒60d,染毒浓度100 μg·(kg·d)-1,中药组均自BaP染毒第31天开始灌胃,时间为30 d,灌胃剂量按《实验动物学》相关比例折算后,低剂量组给予益肾通络方0.522g·L-1并按10mL· (kg·d)-1灌胃,中剂量组给予益肾通络方1.044 g·L-1灌胃,高剂量组给予益肾通络方2.088 g·L-1灌胃.5天称质量一次,末次给药后5组大鼠均采用水合氯醛(8 mL·kg-1)腹腔注射麻醉并收集睾丸组织、精子悬液,检测大鼠DFI、XRCC1、OGG1.结果:①大鼠DFI的变化:与溶剂对照组比较,BaP染毒组DFI显著升高(P＜0.05),益肾通络方各组DFI均低于BaP染毒组(P＜0.05),且益肾通络方中剂量组、益肾通络方高剂量组DFI显著降低(P＜0.05);②XRCC1蛋白表达水平变化:与溶剂对照组比较,BaP染毒组雄性大鼠睾丸内XRCC1蛋白表达降低(P＜0.05),益肾通络方各组XRCC1蛋白表达均高于BaP染毒组(P＜0.05),且益肾通络方高剂量组XRCC1蛋白表达水平明显高于益肾通络方低剂量组(P＜0.05);③OGG1蛋白表达水平变化:与溶剂对照组比较,BaP染毒组雄性大鼠睾丸内OGG1蛋白表达降低(P＜0.05),益肾通络方各组OGG1蛋白表达均高于BaP染毒组(P＜0.05),且益肾通络方高剂量组OGG1蛋白表达水平明显高于益肾通络方低剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:实验性BaP染毒大鼠DFI增加、XRCC1蛋白表达降低、OGG1蛋白表达降低,这可能是影响精子DNA完整性的机制之一.益肾通络方能够降低实验性染毒大鼠DFI,提升染毒大鼠睾丸内XRCC1蛋白、OGG1蛋白表达水平,对睾丸内精子DNA完整性具有保护作用,从而提升雄鼠的生殖机能.
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复发性流产的男方因素分析
目的 研究复发性流产与男性因素的相关性.方法 对2008年1月以来在本院妇产科门诊就诊的956例复发性流产夫妻男方行外周血染色体核型分析、精液常规和精子染色质扩散试验(SCD).结果 956例就诊者检出染色体异常核型94例,占9.83％.根据染色体异常主要归为下列3种类型:染色体多态性核型78例,占异常核型82.98％;罗伯逊异位核型7例,占异常核型的7.45％;平衡异位核型9例,占异常核型的9.57％.复发性流产组精浆果糖含量和a级+b级精子比率明显低于正常对照组,精子畸形率高于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).复发流产组DFI明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 男性因素在复发性流产中具有重要影响,染色体异常、精液精子质量和精子DNA损伤可能是导致复发性流产的主要原因.
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男方药物干预联合女方免疫治疗对习惯性流产治疗作用的临床研究
目的 研究男方药物干预联合女方异体淋巴细胞免疫治疗对习惯性流产的治疗作用.方法 选择封闭抗体阴性习惯性流产患者350例,按照干预措施随机分成三组,A组:男方口服左卡尼汀+维生素E+辅酶Q10,女方行异体淋巴细胞细胞免疫治疗并再次妊娠后给予常规保胎治疗;B组:男方无干预措施,女方行异体淋巴细胞免疫治疗并再次妊娠后给予常规保胎治疗;C组:仅在女方再次妊娠后给予常规保胎治疗.比较各组治疗后男方精子相关指标、女方封闭抗体转阳率和再次妊娠后流产率.结果 A组治疗后精子活力高于B组和C组,精子畸形率及DNA碎片率低于B组和C组;A组和B组的封闭抗体转阳率高于C组.A组妊娠后再次流产率低.结论 淋巴细胞免疫治疗是一种有效的治疗习惯性流产的方法,男性药物干预可以帮助改善习惯性流产患者的妊娠结局,其机制可能是通过改善精子活力、形态和DNA损伤来发挥作用.
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VC患者精子DNA损伤及精索静脉高位结扎术对精子DNA损伤影响的研究
目的:探讨精索静脉曲张(Varicocele,VC)患者精子DNA损伤程度以及精索静脉高位结扎术对精子DNA损伤的影响,并探讨精子DNA损伤的检测对评估VC患者生育能力及手术效果的可行性.方法:以WHO精液分析标准为指导对58例VC患者进行精液分析,并用精子染色质扩散实验(SCD)检测精子DNA损伤程度.其中24例VC患者行精索静脉高位结扎术,在术前和术后3个月行精液分析和精子DNA损伤的检测.以30例正常生育男性作为对照组.结果:VC伴有精液分析异常的患者精子DNA损伤程度为(33.64±7.11)％,明显高于对照组(10.78±5.01)％(P＜0.001);VC精液分析正常的患者精子DNA损伤程度为(23.94±6.04)％,也明显高于对照组(P＜0.001).行精索静脉高位结扎术后3个月,精子DNA损伤程度较术前明显减少(P＜0.001).结论:VC可引起不同程度的精子DNA损伤；精索静脉高位结扎术能有效降低VC患者的精子DNA损伤程度；精子DNA损伤的检测是评估VC患者生育能力及手术效果可行性较好的指标.
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氯乙酸甲酯染毒对大鼠精子DNA损伤的研究
目的 应用精子单细胞凝胶电泳方法探讨氯乙酸甲酯对雄性大鼠精子DNA的损伤.方法 将55只雄性大鼠按体重随机分成5组,4个剂量组分别给予4.3、8.6、17.2和34.4 mg/kg的氯乙酸甲酯,对照组给予生理氯化钠连续经口灌胃13周处死,取附睾精子进行单细胞凝胶电泳试验.结果 高剂量染毒组精子细胞拖尾率和尾长[17.4%,(5.80±6.56)μm]与对照组[5.5%,(2.70±1.76)μm]之间差异有显著性(P＜0.05).结论 高剂量氯乙酸甲酯对雄性大鼠精子DNA有损伤作用.
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氧化应激反应与不育症患者精子DNA损伤的相关性研究
目的 观察氧化应激反应与不育症患者精子DNA损伤的相关性.方法 选择2017年3月至2017年12月在我院就诊的男性不育症患者100例作为试验组,社会征集身体健康的男性20例作为对照组,比较两组的精液常规检查、 氧化应激检测、精子DNA损伤检测等相关指标.结果 试验组的精液浓度、 存活率及向前运动精子率等指标均显著低于对照组(P<0.05).试验组的MDA、DFI均显著高于对照组,SOD显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).氧化应激指标和精子DNA损伤呈明显正相关性(r=0.25,P<0.05).结论 氧化应激反应可加重精子DNA损伤,是引起男性不育症的重要原因.
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精子 DNA 损伤在辅助生殖中的研究进展
男性生育力受到许多因素的影响，其中精子DNA损伤一直是生殖医学领域研究的热点之一。该损伤可由多种因素诱发精子DNA双链断裂或使其双链变性而形成。该文通过分析精子生成错误、氧化应激、精子染色质包装异常、疾病等因素对精子DNA损伤的影响，阐述精子DNA损伤检测在辅助生殖医学中的研究现状，为进一步阐明精子DNA损伤的发生机制以及如何为辅助生殖技术选用高质量精子提供基础材料。
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精子DNA损伤对体外受精-胚胎移植结局的影响
目的 探讨精子DNA损伤对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 首次行IVF助孕治疗的不孕夫妇51对,运用精子DNA碎片染色质扩散法(SCD)检测精子DNA完整性,夫妇行IVF助孕.于体外受精后第1天观察受精情况,第3天观察卵裂情况.结果 精子DNA断裂指数(DFI)与受精率、受精卵卵裂率、2PN卵裂率均呈显著负相关(P均＜0.05),与优胚率、2PN受精率无明显相关关系.结论 精子DNA损伤影响体外受精的治疗结局.随着精子DFI水平的增加,受精率下降,进而对受精卵卵裂及胚胎的发育产生影响.精子DNA完整性可以作为精液质量的检测指标对体外受精结局进行预测.
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精子DNA完整性对体外受精-胚胎移植结局的影响
目的 探讨精子DNA损伤对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 :142对夫妇接受142周期IVF-ET治疗,采用染色质扩散实验对男方精液进行精子DNA完整性检测.分析精子DNA碎片指数(DFI)与受精率、2PN受精率、卵裂率及优胚率的相关性；根据DFI值分为DFI＜30％组与DFI≥30％组,比较两组间的种植率、妊娠率和流产率.结果 :精子DFI与受精率、2PN受精率及卵裂率均无显著相关性(P＞0.05),与优胚率具有显著负相关(P＜0.05).两组间对比,DFI＜30％组的种植率及妊娠率均高于DFI≥30％组,差异有统计学意义(P＜0.05).DFI≥30％组的流产率高于DFI＜30％组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 :IVF-ET治疗中,精子DNA损伤对受精率、2PN受精率及卵裂率无影响,但对优胚率、种植率及妊娠率有负面影响,与流产率的关系需更大样本研究.建议将精子DNA完整性分析作为精子功能分析的一个常用项目.
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精子DNA碎片率与精子核蛋白不成熟度检测在体外受精治疗中的应用研究
目的 探讨精子DNA碎片率及精子核蛋白不成熟度检测在体外受精(IVF)治疗中的应用价值.方法 选择2015年3月至2016年2月于本院接受IVF治疗的不育症患者102例,进行精液常规分析、精子核蛋白不成熟度及精子DNA碎片率检测,分析精子核蛋白不成熟度和精子DNA碎片率与精子质量分析参数、IVF受精率及优胚率等的相关性.结果 精子DNA碎片率与IVF优胚率、精子活力呈负相关(P<0.05),与IVF受精率无相关性(P>0.05);精子核蛋白不成熟度与IVF优胚率、IVF受精率无相关性(P>0.05),与精子浓度呈负相关(P<0.05).结论 精子DNA碎片率与IVF优胚率密切相关,对不育症患者IVF治疗结局具有重要的预测价值.
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重庆市大学生精液常规参数与精子DNA损伤的关联性分析
目的 探讨重庆市在校大学生精液常规参数与精子DNA损伤水平之间的关联性.方法 2014年6月招募的重庆大学生男性生殖健康调查(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS)队列639名健康大学生,手淫法采集精液样本,用计算机辅助精子分析系统(Computer-aided sperm analysis,CASA)进行精液常规分析,采用Diff-Quick试剂盒检测精子形态,采用单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测精子DNA损伤,采用Spearman相关分析探讨精子DNA损伤与精液常规参数间的关联性.结果 大学生人群精液常规各指标(中位数):精液量为3.6 mL,精子密度为52.0×106/mL,精子总活力为89.4％,前向运动精子百分率为57.0％,精子正常形态率为21.3％.精子DNA损伤(彗星实验指标)水平:尾部DNA含量百分比(Tail DNA％)为19.4％,尾长(tail length,TL)为35.7 pixels,彗星长(comet length,CL)为81.6 pixels,尾距(tail moment,TM)为7.6,Olive尾距(olive tail moment,OTM)为6.3.经Spearman相关性分析,精子密度与Tail DNA％呈负向关联(P＜0.05),精子总活力(％)与Tail DNA％、CL、TM、OTM呈负向关联(P值均＜0.01),前向运动精子百分率与精子Tail DNA％、CL、TL、TM、OTM呈负向关联(P值均＜0.05).结论 重庆市大学生精子密度、精子总活力、前向运动精子百分率均与精子DNA损伤呈负向关联.
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精子 DNA 碎片与精液各参数的相关性分析
目的：探讨男性不育患者精子DNA碎片与精液各参数的相关性，研究精子DNA完整性在评估男性生育力方面的应用价值。方法回顾性分析2014年1月至2015年11月就诊于邢台不孕不育专科医院生殖中心男科的不育患者265例，采集精液标本，通过计算机辅助行常规精液分析，采用瑞－吉染色镜检观察精子形态及通过精子染色体扩散试验（ SCD法）行精子DNA碎片率检测，对精子DNA碎片率与年龄、精液各参数（精子浓度、前向运动精子、正常精子形态）进行分组比较及相关分析。结果不同年龄段精子DNA碎片组间比较差异有统计学意义（ P＜0.05）；不同精子DNA碎片化指数（ DNA fragmentation index ，DFI）、精子浓度组间比较差异无统计学意义（ P＞0.05），前向活动精子、正常形态精子组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）；年龄与精子DNA碎片存在正相关关系，前向运动精子率、正常形态精子率均与精子DNA碎片存在负相关关系。结论年龄是影响精子DNA损伤的因素，精子DNA损伤可能是导致精子活力和正常形态精子的影响因素。
