高效液相色谱法同时测定金荞麦中4种指标成分含量
摘要： 目的 建立同时测定金荞麦中儿茶素、原花青素B2、表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的HPLC方法.方法 采用TSK ODS-100V色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)进行分离;流动相为乙腈-0.2％ 磷酸水溶液,流速为0.8 mL·min-1,梯度洗脱;检测波长280 nm;柱温为35℃;进样量为10μL.结果儿茶素、原花青素B2、表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的质量浓度分别在15.55～194.40μg·mL-1(r=0.9998)、15.36～192.00μg·mL-1(r=0.9996)、15.95～199.40μg·mL-1(r=0.9997)和15.50～193.80μg·mL-1(r=0.9992)与峰面积呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.6％(RSD=1.4％)、98.3％(RSD=1.4％)、98.6％(RSD=1.2％)和97.0％(RSD=1.5％).结论 该方法简便快速,测定结果准确可靠,可用于金荞麦药材的质量控制.
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银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎的保护作用及机制研究
目的 研究银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎的保护作用及其机制.方法 21日龄SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,即正常对照组,模型组,银黄清肺胶囊低、中、高剂量组和阳性药百蕊胶囊组.除正常对照组外,其余5个组动物经鼻腔接种甲型流感病毒,连续3d,建立流感病毒感染的肺炎模型.除了模型组和正常对照组外,其余组造模当日开始每日灌胃给予银黄清肺胶囊药液(100、200和400 mg·kg-1)或百蕊胶囊药液(600 mg·kg-1),每日1次,连续7d.观察各组大鼠的一般状态;HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA检测肺泡灌洗液中成纤维细胞生长因子-2(FGF2)水平;Western Blot检测肺组织成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR1)表达.结果 与正常对照组比较,经鼻流感病毒感染的模型组动物饮食进水量显著减少,活动量减少,精神状态差,呼吸频率加快,肺组织灌流液中FGF2含量增加,肺组织中FGFR1蛋白表达显著降低;银黄清肺胶囊(400和200 mg·kg-1)能显著改善幼龄大鼠流感病毒肺炎动物的一般情况,减轻肺组织病理学改变,增加肺组织灌流液中FGF2含量和上调肺组织FGFR1蛋白表达.结论 银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎具有较好的保护作用,其机制与调节肺组织中FGF2/FGFR1通路有关.
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白藜芦醇壳聚糖缓释微球在大鼠体内的药动学研究
目的 以白藜芦醇原料药为对照,研究白藜芦醇壳聚糖缓释微球在大鼠体内药动学过程.方法 雄性SD大鼠,分别灌胃给予白藜芦醇原料药及白藜芦醇壳聚糖缓释微球,两组均按白藜芦醇20mg·kg-的剂量给药,采用HPLC法测定白藜芦醇不同时间的血药浓度变化,并采用DAS 3.0药动学软件计算药动学参数.结果 大鼠给予白藜芦醇原料药及白藜芦醇壳聚糖缓释微球后,Cmax分别为(473.3±200.8) ng·mL-1和(362.4±151.3) ng·mL-1,与白藜芦醇原料药组相比,微球组的AUC0～∞显著增大,相对生物利用度为443％.结论 以壳聚糖为载体将白藜芦醇制成缓释微球后能显著提高制剂在体内滞留时间并明显提高白藜芦醇在大鼠体内的生物利用度.
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刺五加皂苷抗小鼠酒精性肝氧化损伤作用及机制研究
目的 研究刺五加皂苷对小鼠急性酒精性肝氧化损伤的保护作用及分子机制.方法 采用Balb/c雄性小鼠随机分为对照组、酒精肝损伤模型组和3个不同剂量刺五加皂苷保护组.刺五加皂苷保护组每日给予低、中、高剂量皂苷灌胃连续1周.在第5～7日,模型组及各给药组动物给予无水乙醇(5 g·kg-1体重)灌胃.处死实验动物取血清检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),取肝组织检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及还原型谷胱甘肽(GSH),提取肝组织蛋白检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路及核转录因子kappaB(NF-κB)通路及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的表达.结果 酒精性肝损伤能够显著提高动物血清中ALT和AST水平,同时显著提高氧化损伤产物MDA水平,降低抗氧化酶SOD、CAT和GSH水平,提高p38MAPK的磷酸化水平,促进NF-κB核转位,提高炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达.而刺五加皂苷能够剂量依赖地改善上述酒精引起的各项指标变化.结论 酒精引起明显的肝脏氧化损伤,刺五加皂苷能够通过提高抗氧化酶,降低氧化应激,抑制氧化还原调控的p38MAPK和NF-κB信号通路,抑制炎症因子释放,从而发挥抗酒精性肝氧化损伤的保护作用.
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不同种类压敏胶及透皮促渗剂对妥洛特罗药物透皮性能的影响
目的 探讨不同种类压敏胶(PSA)、PSA不同官能团及不同透皮促渗剂对妥洛特罗透皮性能的影响.方法 通过显微镜观察法测定妥洛特罗在PSA中的溶解度,并利用Franz扩散法考察PSA种类对药物透皮性能的影响;采用模型预测的方法,预测肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、二乙二醇单乙基醚(TranscutolP)、单亚油酸甘油脂、氮酮、己二酸二异丙酯等5种促渗剂的促渗效果并利用饱和药物浓度的液体石蜡溶液透皮实验进行验证.结果 药物在丙烯酸PSA的溶解度远大于聚异丁烯PSA(DUKO-TAK-6908)及硅酮PSA(BIO-4302);有结晶的聚异丁烯PSA(DUKO-TAK-6908)较丙烯酸酯PSA透皮速率快且25 h累计透皮量大.含有-COOH官能团的PSA会与药物的仲胺基团作用,增加药物在PSA中的溶解度,减慢药物的透皮速率;与不添加任何促渗剂的空白基质相比,5种促渗剂均有不同程度的促渗效果,尤其是Transcutol对药物的促渗作用在5种促渗剂中效果明显,与预测结果一致.结论 通过药物的理化性质、药物在PSA中的溶解度及PSA官能团可以预测PSA对药物透皮性能的影响;对于在角质层中浓度低的药物,通过模型预测促渗剂对药物在角质层溶解度的影响,可以预测促渗剂的促渗效果,在此基础上进行处方筛选,可提高筛选效率.
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二甲双胍联合紫杉醇对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨二甲双胍(Met)联合紫杉醇(PTX)对卵巢癌细胞(A2780)增殖和凋亡的影响.方法 本实验以体外培养的A2780为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,采用Hochest染色法、Annexm V/PI双染色法和ATP检测法检测细胞凋亡情况.结果 Met能呈浓度和时间依赖性抑制PTX对A2780细胞的生长(P＜0.05).与Met或PTX单药组比较,联合用药组凋亡程度更强,ATP下降水平更明显(P＜0.05).结论 Met能降低PTX抗卵巢癌细胞的存活率和促进其凋亡的能力.
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延龄草总皂苷对宫颈癌细胞Hela裸鼠移植瘤的增殖抑制作用
目的 观察延龄草总皂苷对宫颈癌细胞Hela裸鼠皮下移植瘤的影响及相关机制.方法 培养宫颈癌细胞Hela,接种至BALB/c裸鼠背部皮下.接种后第5日通过腹腔注射的方式给予裸鼠延龄草总皂苷治疗,每隔3d测量移植瘤的体积以及裸鼠的体重;实验结束时,采用TUNEL试剂盒检测移植瘤细胞的凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白活化型caspase 3,8,9表达的变化.结果 延龄草总皂苷可有效地抑制裸鼠移植瘤的增殖,实验结束时,肿瘤的体积分别为:模型组(1233.67±155.32)mm3,延龄草总皂苷5 mg·kg-1组(570.18±56.26) mm3,延龄草总皂苷10 mg·kg-组(254.33±52.36)mm3.延龄草总皂苷能诱导移植瘤细胞的凋亡,可浓度依赖性地促进细胞活化型caspase 3,9的表达.结论 延龄草总皂苷可有效地抑制Hela裸鼠移植瘤的增殖,其可能机制是延龄草总皂苷通过caspase依赖的方式诱导Hela细胞发生凋亡.
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朱日很滴丸包衣工艺及其稳定性的研究
目的 探讨朱日很滴丸的包衣制备工艺以及滴丸包衣后的稳定性.方法 采用单因素法筛选滴丸包衣液的制备方法;采用正交试验方法优化朱日很滴丸包衣设备工艺参数;测定包衣后滴丸中冰片和挥发油的含量变化,验证滴丸包衣后的稳定性.结果 包衣液的配制选用OpadryⅡ型(醇溶性)包衣粉,用乙醇溶解分散配制成固含量为15％的包衣液,搅拌40 min即可;包衣机工艺参数为物料温度40℃,雾化压力0.18 MPa,进液速度6r·min-1,主机转速6 r·min-,包衣增重为2％～3％.结论 新型欧巴代Ⅱ型高效薄膜包衣系统可生产出色泽均匀、质量稳定的包衣滴丸.该工艺简单实用,可以满足大生产上的应用.
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鱼腥草地下茎提取物的成分分析及其对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用
目的 通过对鱼腥草地下茎各提取物的成分分析,考察其对牙龈卟啉单胞菌的抑菌活性,为鱼腥草用于牙周炎治疗提供理论依据.方法 以新鲜紫色茎鱼腥草地下茎为原料,利用水蒸气蒸馏法获得挥发油及芳香水,采用GC-MS联用技术分析其化学成分,基于肉汤连续稀释法稀释成不同浓度的鱼腥草,接种牙龈卟啉单胞菌,采用纸片法检测各提取物的抑菌活性.结果 鱼腥草挥发油中鉴定出了甲基正壬酮、癸酸乙酯等30种化学组分,抑菌实验发现挥发油、浓缩药液及芳香水均有数个浓度组出现抑菌环,能有效抑制牙龈卟啉单胞菌生长.结论 所有鱼腥草提取物均具有体外抑制牙龈卟啉单胞菌的作用,且表现出一定的量效关系,其中挥发油部分抑菌效果佳.
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窝儿七化学成分的研究
目的 研究窝儿七(Diphylleia Radix et Rhizoma)的化学成分.方法 采用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、高效液相等色谱技术进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据进行分析和结构鉴定.结果 从窝儿七根茎95％乙醇提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为维拉木脂二醇D(1)、(7R,7'R,8S,8’S)-(+)-neo-obivil-4-O-β-D-glucopyranaside (2)、山荷叶素-4-O-α-L-阿拉伯糖基-(1→6)--D-吡喃葡萄糖苷(3)、苦鬼臼毒素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、苦鬼臼毒素-4-O-β-D-葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(6).结论 化合物1～4均为首次从山荷叶属植物中分离得到,化合物5和6为已知化合物.
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通络胶囊对大鼠脑缺血损伤的保护作用研究
目的 研究通络胶囊对大鼠局灶性脑缺血模型的保护作用.方法 雄性SD大鼠60只,体重280～320 g,按体重随机分为6组,即假手术组,模型对照组,脑得生片组(0.96 g·kg-1)及通络胶囊低、中、高(1.81 g生药·kg-1、3.62 g生药·kg-、7.24 g生药·kg-1)剂量组,各组大鼠按10mL·kg-灌胃给予相应剂量药液,每日1次,连续28 d.于给药第7日给药后1h,各组大鼠采用线栓法复制局灶性脑缺血模型,造模后各组大鼠继续给药21 d.于造模后24 h及末次给药后对各组大鼠进行神经功能评分和运动协调功能检测,麻醉取脑切片,TTC染色,并计算梗死率以及脑组织病理学检查.结果 通络胶囊中、高剂量能明显减少造模后24 h大鼠神经功能评分(P＜0.05),通络胶囊低、中、高剂量能明显减少给药28 d大鼠神经功能评分(P＜0.01),能明显增加大鼠协调运动潜伏期(P＜ 0.05或P＜0.01).通络胶囊中、高剂量组大鼠脑组织脏器系数明显减少(P＜0.01),梗死率明显降低(P＜0.01),能明显改善脑组织神经元数量减少、神经细胞肿胀,胶质细胞增生、间质性水肿及有大量炎症细胞浸润病理变化.结论 通络胶囊对大鼠局灶性脑缺血模型有明显的保护作用.
