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长春新碱对INS-1细胞hTERT、Sp1、c-myc基因表达影响的研究
目的 观察抗肿瘤药物长春新碱(Vincristine,VCR)对大鼠胰岛B细胞瘤株INS-1细胞增殖和侵袭的抑制作用和hTERT、Sp1、c-myc表达的影响及其意义,探讨胰岛B细胞瘤的发病机制.方法 INS-1分为对照组(不加VCR)和实验组(加入浓度分别为0.008 mg/mL、0.04 mg/mL、0.2 mg/mL、1 mg/mL的VCR).两组培养24 h后,用MTT比色法检测INS-1细胞的增殖抑制率;用Transwell侵袭试验检测INS-1细胞的侵袭力;RT-PCR检测各组细胞中hTERT、Sp1、c-myc基因的表达.结果 实验组抑制率明显高于对照组(P＜0.05);且随着VCR浓度的增加,INS-1细胞生长抑制率逐渐增加(P＜0.05);Transwell小室培养细胞24 h后,实验组侵袭到下层膜的细胞数为(63.26±5.12)个,对照组为(150.65±4.02)个(P＜0.01);与对照组比较,随着时间的延长,实验组的hTERT、Sp1、c-myc mRNA基因在INS-1细胞的表达也逐渐减弱(P均＜0.05).结论 VCR能抑制INS-1细胞增殖和侵袭,可能通过抑制Sp1、c-myc和hTERT表达,从而抑制INS-1的端粒酶活性,进而抑制细胞增殖和降低侵袭能力.
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β-catenin、c-myc在结直肠肿瘤中的表达及其意义
目的:探讨β-catenin、c-myc的表达在结直肠肿瘤发生发展中的作用及其与临床病理参数之间的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测β-catenin及c-myc在结直肠正常黏膜、结直肠腺瘤和结直肠腺癌中的表达.结果:(1)β-catenin在正常黏膜中为胞膜表达,腺瘤与腺癌组呈胞浆或核异位表达,异位表达率为10.8%、75.0%、98.2%,3组之间有显著差异(P＜0.01).(2)正常黏膜、结直肠腺瘤和结直肠腺癌中c-myc的表达率为10.8%、40.6%、70.2%.3组之间有显著差异(P＜0.01).(3)结直肠腺癌中β-catenin的异常表达随着肿瘤大小、组织学分级、Dukes分期的改变呈逐渐增高趋势,有淋巴结转移者β-catenin阳性表达率(100.0%)高于无淋巴结转移者(96.4%),但无统计学意义(P＞0.05).结论:β-catenin的异常表达及c-myc的过表达与结直肠肿瘤的发生发展有关,β-catenin的异常表达可能与结直肠腺癌的恶性行为有关.
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紫杉醇对大鼠颅内C6胶质瘤细胞wnt/β-catenin信号通路的影响
目的 观察紫杉醇类药物对大鼠颅内胶质瘤细胞中wnt/β-catenin信号通路基因和蛋白表达的影响,探讨wnt/β-catenin信号通路在紫杉醇治疗胶质瘤中的作用.方法 通过预实验计算出紫杉醇IC50=6.04 nmol/L,实验组中加入紫杉醇溶液终浓度6.04 nmol/L,对照组加等体积培养液,温箱中作用48 h后,采用RT-PCR法检测各组细胞c-myc基因表达,免疫组织化学法检测β-catenin蛋白表达.结果 两组C6细胞中均检测出β-catenin蛋白和c-myc的mRNA表达,癌基因c-myc mRNA 表达实验组较对照组明显下降(P＜0.05),而且-catenin蛋白表达也较对照组降低(P＜0.05).结论 抑制细胞内β-catenin 蛋白表达及癌基因c-myc的表达,从而阻断wnt信号转导通路,是紫杉醇类药物抗癌机制之一,研究紫杉醇对wnt/β-catenin信号通路的影响对提高其疗效有潜在的临床意义.
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大肠癌中β-catenin、E-cadherin、c-myc和cyclinD1的表达及其临床意义
目的:探讨β-catenin、E-cadherin、c-myc和cyclinD1在大肠癌发生、发展过程中的作用.方法:应用免疫组织化学方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、30例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中β-catenin、E-cadherin、c-myc和cyclinD1蛋白的表达情况.结果:大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤的β-catenin胞浆和(或)胞核异位表达率分别为:62.0%、53.3%、30.0%,显著高于正常大肠黏膜(0%)(P<0.01);大肠癌β-catenin异位表达率显著高于大肠腺瘤(P<0.01).大肠癌、大肠腺瘤恶变、大肠腺瘤c-myc和cyclinD1阳性率分别为:56.0%、66.0%;60.0%、50.0%;46.7%、30.0%,显著高于正常大肠黏膜(0%、0%)(P<0.01),大肠癌cyclinD1阳性率显著高于大肠腺瘤(P<0.01).大肠癌中β-catenin、E-cadherin膜表达缺失率分别为:46.0%、34.0%,显著高于大肠腺瘤(10.0%、6.67%)和正常大肠黏膜(0%、0%)(P<0.01),二者膜表达缺失和cyclinD1阳性表达与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关.大肠癌中β-catenin异位表达与c-myc和cyclinD1阳性表达呈正相关关系(γ=0.63,P<0.01;γ=0.57,P<0.01).结论:β-catenin异位表达,激活癌基因c-myc和cyclinD1阳性表达是大肠癌发生中的早期事件,并与大肠癌的发生发展密切相关;β-catenin、E-cadherin膜表达缺失和cyclinD1阳性表达与大肠癌的侵袭、转移有关.
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p14ARF、ARF-BP1、c-myc在肝细胞癌中的表达及意义
目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的表达及意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、免疫组化技术对45例HCC组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA表达和p14ARF、c-myc蛋白表达情况进行检测.结果:p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA在HCC组织中阳性表达分别为80.00%、86.67%、84.44%,在癌旁肝组织中分别为11.11%、20.00%、53.33%,三者的mRNA在癌组织中呈过表达,明显高于癌旁肝组织(P＜0.01).p14ARF、c-myc蛋白在HCC组织中表达分别为78.38%、75.68%,明显高于癌旁肝组织的13.51%(P＜0.01)和51.35%(P＜0.05).结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc在HCC组织中高表达,这种高表达可能与HCC的发生有相关性.
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大肠癌端粒酶及其相关因子表达的研究
目的:探讨端粒酶相关因子表达在大肠癌发生、发展以及浸润转移中的意义.方法:采用Southern-blot及端粒重复序列扩增法(Telomeric Repeat Amplification Protocol,PCR)测定端粒长度和端粒酶活性,免疫组化方法测定端粒酶催化亚基(Human Telomerase Reverse Transcriptase,hTERT)以及p53、C-myc的表达.结果:端粒酶活性和hTERT在大肠癌组织中的表达率明显提高,相反,大肠癌平均端粒长度则明显缩短;低分化大肠癌组织中的端粒酶和hTERT表达明显高于中分化及高分化大肠癌;伴淋巴结转移大肠癌端粒酶和hTERT阳性表达明显高于无淋巴结转移者;p53和C-myc在大肠癌中的表达明显高于癌旁肠组织、正常大肠黏膜组织及腺瘤性息肉,C-myc蛋白在端粒酶活性阳性的大肠组织中的表达率为87.76%(43/49)明显高于端粒酶阴性组31.25%(5/16)(P ＜0.01),而p53在端粒酶活性阳性及阴性组中的表达率分别为79.79%(39/49)和62.50%(10/16),两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论:端粒长度改变及端粒酶高表达可能与大肠癌的发生有密切关系,端粒酶表达水平的高低与肿瘤细胞侵袭、肿瘤进展和转移相关;C-myc蛋白可能参与端粒酶激活.
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癌基因c-myc和K-ras在卵巢癌发生发展中的作用
目的:探讨癌基因c-myc和K-ras在卵巢癌发生发展中的作用.方法:用Moloney逆转录病毒载体先后将正常的c-myc基因和突变的K-ras基因转导入小鼠正常卵巢上皮细胞(MOSE),建立表达c-myc或(和)K-ras基因的细胞系,分别称为Myc细胞、Ras细胞、RM细胞,通过细胞增殖试验、裸鼠体内成瘤试验研究转基因后MOSE细胞生物学特性的改变.结果:用携带有c-myc和K-ras基因的重组逆转录病毒感染MOSE后,用RT-PCR和Western blot能分别检测到有相应的c-myc或(和)K-ras mRNA转录以及蛋白的表达;Ras细胞增殖显著快于MOSE和Myc细胞(P＜0.01),RM细胞显著快于Myc细胞(P＜0.05);将Ras和RM细胞腹腔注射于裸鼠体内,有肿瘤形成,免疫组化结果显示瘤组织有K-ras和c-myc蛋白的表达;MOSE细胞和Myc细胞没有肿瘤形成.结论:重组逆转录病毒载体具有高转导效率,突变的K-ras可使MOSE发生恶性转化,在体内形成肿瘤;c-myc不能使MOSE发生恶性转化,但具有协同作用.
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凋亡、PCNA、p53及c-myc表达水平在鼻咽癌放疗中的相关关系
目的:探讨凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)、p53蛋白及c-myc表达水平在鼻咽癌放疗中的相互关系.方法:对31例鼻咽癌患者于放疗前及接受放射剂量1 520 cGy后分别从鼻咽部肿物取活检2次.应用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TUNEL)技术检测凋亡,应用S-P免疫组化法检测PCNA、p53蛋白及c-myc.结果:p53蛋白表达水平与放疗前凋亡率、放射诱导凋亡率以及放疗前后PCNA差值均呈高度负相关(P均<0.01),与放疗前PCNA呈高度正相关(P<0.01).c-myc表达水平与放疗前凋亡率呈负相关(P<0.05),与放射诱导凋亡率、放疗前PCNA以及放疗前后PCNA差值均呈正相关(P均<0.05).结论:鼻咽癌的细胞凋亡及细胞增殖与p53基因的突变及c-myc存在密切的相关性,并在放疗中起到重要的调控作用.
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胃癌、癌前病变细胞凋亡与bcl-2、c-myc表达的关系
目的:通过观察胃癌、癌前病变中细胞凋亡和凋亡调控基因bc1-2、c-myc的表达,探讨细胞凋亡与调控基因在胃粘膜组织恶性转化中的作用.方法:应用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组织化学染色及逆转录PCR(RT-PCR)法,观察76-例胃癌,42例肠上皮化生和34例异型增生胃粘膜活检组织细胞凋亡和bc1-2、c-myc的表达,并以20例慢性浅表性胃炎作对照.结果:胃癌细胞凋亡指数明显低于肠化和异型增生(P＜0.05)及慢性浅表性胃炎(P＜0.01);肠化生、异型增生细胞凋亡指数分别低于慢性浅表性胃炎(P＜0.05).胃癌和异型增生bc1-2阳性表达率明显高于慢性浅表性胃炎(P＜0.01),肠化生亦高于慢性浅表性胃炎(P＜0.05);bc1-2阳性胃癌细胞凋亡指数低于bc1-2阴性胃癌(P＜0.05).胃癌、肠化生和异型增生c-myc阳性表达率分别高于浅表性胃炎(P＜0.01);c-myc阳性胃癌、异型增生的细胞凋亡指数分别高于阴性胃癌(P＜0.05).结论:细胞凋亡调控基因bc1-2、c-myc失调在胃组织恶性病变转化过程中起重要作用,bc1-2可抑制细胞凋亡,而c-myc则对胃癌细胞凋亡具有促进作用.
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血清c-Myc与EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌的诊断价值
目的:探讨原癌基因c-Myc与EB病毒(EBV)抗体联合检测对鼻咽癌(NPC)的临床诊断价值.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对68例NPC患者(观察组)及20例健康体检者(对照组)血清中的c-Myc、EBV衣壳抗原IgA抗体(EB-VCA-IgA)和EBV早期抗原IgA抗体(EBV-EA-IgA)水平进行检测,观察血清c-Myc、EBV抗体浓度与患者临床病理特征的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估c-Myc、EBV-VCA-IgA和EBV-EA-IgA对NPC的诊断价值.结果:观察组患者血清c-Myc、EBV-VCA-IgA和EBV-EA-IgA浓度均明显高于对照组(均P＜0.05).晚期(Ⅲ～Ⅳ期)NPC患者血清中EBV-VCA-IgA的浓度较早期(Ⅰ～Ⅱ期)高,T3～T4期较T1～T2期高(P＜0.05);N1～N3期患者血清EBV-EA-IgA水平明显高于N0期(P＜0.05).单项检测c-Myc、EBV-VCA-IgA和EBV-EA-IgA的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.671、0.844、0.697,三者联合检测的AUC为0.879.结论:c-Myc、EBv-VCA-IgA和EBV-EA-IgA联合检测对NPC的诊断具有较高的临床价值.
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同步热放化疗对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响
目的:研究同步热放化疗治疗宫颈癌的疗效及其对宫颈癌组织C-myc、HSP70蛋白表达的影响.方法:将40例宫颈癌Ⅲb期随机分为同步热放化疗组(H+CRT组)和同步放化疗组(CRT组),观察比较局部肿瘤消退情况和1,2,3年无进展生存期；采用免疫组化法检测两组治疗前、中宫颈肿瘤组织中C-myc、HSP70蛋白表达.结果:在完成体外照射45Gy时H+CRT组局部肿瘤完全消退率高于CRT组(P＜0.05),但两组患者的1,2,3年无进展生存期差异无统计学意义(P＞0.05).在治疗前,两组C-myc、HSP70蛋白阳性表达强度差异均无统计学意义(P＞0.05).在治疗中,H+CRT组较CRT组的C-myc蛋白阳性表达强度减弱(P＜0.05)；H+CRT组较CRT组HSP70蛋白阳性表达强度增强(P＜0.05)；H+CRT组治疗中较治疗前HSP70蛋白表达强度增强(P＜0.05).结论:热疗与同步放化疗具有协同增强作用,但1,2,3年无进展生存期无差异.热放化疗能减弱C-myc蛋白阳性表达强度；可以上调HSP70蛋白阳性表达强度.同步热放化疗是否通过干扰肿瘤细胞HSP70通路诱导或对抗凋亡,有待进一步研究.
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nm23-Hl和C-mvc在肾上腺皮质肿瘤中的表达及意义
目的:探讨nm23-H 1和c-myc在肾上腺皮质肿瘤中的表达及意义,为临床早期诊断肾上腺皮质癌、判断肾上腺皮质癌预后提供理论依据.方法:采用免疫组化检测nm23-H 1和c-myc在肾上腺皮质癌、肾上腺皮质腺瘤、瘤旁正常组织中的表达水平.结果:nm23-H 1在肾上腺皮质癌表达与肾上腺皮质腺瘤比较差异无统计学意义(P>0.05),但肾上腺皮质癌转移组表达程度与无转移组比较,差异有统计学意义(P <0.05);c-myc在肾上腺皮质癌表达高于肾上腺皮质腺瘤和瘤旁正常组织,差异有统计学意义(P <0.05) ;nm23-Hl、c-myc在肾上腺皮质癌中表达无相关性(P >0.05).结论:nm23-H1可作为判别肾上腺皮质癌预后的检测指标.c-myc可能参与肾上腺皮质癌的发生、发展,检测c-myc对鉴别肾上腺皮质癌、肾上腺皮质腺瘤有重要的参考意义.
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苦参素对人肝癌Bel-7404细胞增殖及E2F1、c-myc基因表达的影响
目的:探讨苦参素对人肝癌Bel-7404细胞增殖及E2F转录因子1(E2F1)、c-myc基因表达的影响.方法:选用人肝癌Bel-7404细胞,分为不同浓度(0.5 g/L、1 g/L、2 g/L、4 g/L、8 g/L)苦参素组和对照组(加入等量不含药物的完全培养基).采用MTT法检测人肝癌Bel-7404细胞增殖抑制率,倒置显微镜下观察苦参素作用后细胞增殖及细胞形态变化,荧光定量PCR(qPCR)法检测IC50苦参素作用72 h后Bel-7404细胞E2F1和c-myc基因表达.结果:不同浓度(0.5 g/L、1 g/L、2 g/L、4 g/L、8 g/L)苦参素作用于Bel-7404细胞48 h及72 h时后,细胞抑制率随着药物浓度的升高和作用时间的延长而升高(P＜0.05),呈现剂量和时间依赖性.经IC50苦参素作用72 h后,苦参素组细胞数量明显减少,细胞大小不一,形态更加不规则.qPCR结果显示,苦参素组E2F1表达较对照组上调2.33倍,而c-myc表达下调.结论:苦参素对人肝癌细胞株Bel-7404细胞增殖有显著抑制作用,其机制可能与上调E2F1表达、下调c-myc表达有关.
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肝细胞肝癌组织中PTEN、CyclinD1及C-myc的表达及相关性研究
目的:通过检测PTEN、CyclinD1及C-myc蛋白在肝细胞肝癌(HCC)中的表达,了解其与HCC发生和发展的关系.方法:采用EnVisionTM plus免疫组织化学方法检测PTEN、Cyclin D1及C-myc蛋白在52例HCC及癌旁肝组织中的表达情况.结果:52例HCC中PTEN、CyclinD1及C-myc蛋白染色阳性表达率分别为42.3％(22/52)、48.1％(25/52)及53.8％(28/52),癌旁肝组织的阳性表达率为92.3％(48/52)、25.0％(13/52)及32.7％(17/52),PTEN、CyclinD1及C-myc在HCC及癌旁肝组织两者间差异有统计学意义(P＜0.05).在HCC中,PTEN与CyclinD1、C-myc的阳性表达均呈负相关(r=-0.3631,P=0.0197；r=-0.3697,P=0.0172)；PTEN、CyclinD1及C-myc在人HCC组织中的阳性表达率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度有关(P＜0.05).CyclinD1和PTEN的阳性表达率与门静脉癌栓有关(P＜0.05).结论:PTEN、CyclinD1及C-myc蛋白在HCC中过表达.PTEN与CyclinD1及C-myc阳性表达呈负相关,与HCC转移复发及肿瘤细胞分化有明显相关性.
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mRNA-cDNA高敏感性原位分子杂交技术
目的:探讨效果更加满意的核酸分子杂交技术的方法.方法:采用原位分子杂交技术结合免疫组化SP法,在人肝癌组织石蜡切片上显示c-myc和N-ras基因的mRNA.结果:c-myc mRNA和N-ras mRNA杂交信号呈红色,清晰可见于细胞浆内,背景浅淡,效果满意.结论:此方法与以往的原位杂交方法相比,能明显放大杂交信号,提高检测的敏感性和稳定性.
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含何首乌血清对人胚肺二倍体成纤维细胞端粒酶活性的影响
目的 观察含何首乌血清对人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)超氧化物歧化酶(SOD)活性、c-myc mRNA表达及端粒活性的影响.方法 采用含何首乌血清对2BS细胞株进行处理,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性,RT-PCR检测c-myc mRNA表达,TRAP-ELISA检测端粒酶活性.结果 与正常对照组相比,用药组2BS细胞SOD活性明显增加(P＜0.05),c-myc mRNA表达无变化,端粒酶活性显著增加(P均＜0.05).结论 含何首鸟血清对2BS细胞具有抗衰老作用,其机理可能与促进自由基的清除和激活端粒酶活性有关.
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蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子与c-Myc在鼻咽癌组织中的表达及其相关性研究
目的 探讨鼻咽癌组织中蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)与c-Myc表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色技术检测68例鼻咽癌组织(鼻咽癌组)和20例鼻咽黏膜慢性炎组织(对照组)CIP2A、c-Myc蛋白的表达,分析CIP2A、c-Myc与鼻咽癌临床病理特征的关系.结果 鼻咽癌组的CIP2A和c-Myc阳性表达率分别为54.4％(37/68)、66.2％ (45/68),均高于对照组的15.0％ (3/20)、25.0％ (5/20)(P＜0.05).CIP2A和c-Myc蛋白阳性表达与鼻咽癌患者性别、年龄、临床分期、肿瘤大小以及有无淋巴结转移无关(P＞0.05).鼻咽癌组织中CIP2A与c-Myc蛋白表达呈正相关(P＜0.05).结论 CIP2A和c-Myc在鼻咽癌组织中表达均升高,可能共同参与鼻咽癌的发生发展过程.
关键词： 鼻咽癌 蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子 c-myc 免疫组织化学染色 -
原癌基因和链蛋白在肝癌中的表达及临床意义
目的 探讨原癌基因(c-myc)和β-链蛋白(β-catenin)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC,以下简称"肝癌")中的表达及意义.方法 通过免疫组化EnVision法检测108例肝癌组织及癌旁组织中c-myc和β-catenin的表达,观察c-myc和β-catenin在肝癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系.结果 c-myc和β-catenin在肝癌组织中的表达率分别为42.59%(46/108)和40.74%(44/108),c-myc 和 β-catenin 在癌旁组织中阳性率分别为14.81%(16/108)和4.63%(5/108),二者比较差异有统计学意义(P<0.001).c-myc和β-catenin在癌组织中的表达与肿瘤分化程度相关(P<0.001),与年龄、性别、有无癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、癌旁组织是否有肝硬化均无统计学关联(P>0.05).结论 在肝癌组织中c-myc和β-catenin表达密切相关.
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三阴乳腺癌中C-myc和PTTG的表达与意义
目的 检测三阴乳腺癌组织(TNBC)中C-myc和PTTG表达并探讨其意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测56例TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织C-myc和PTTG的表达情况.结果 TNBC组织中C-myc和PTTG表达定位于细胞核,其表达率分别为57.14％(32/56)和73.21％(41/56),明显高于癌旁正常组织(P＜ 0.05)；56例TNBC组织中,C-myc和PTTG蛋白在组织学分级G3级表达率高于G1+G2级(P＜0.05),C-myc和PTTG的病理分期Ⅲ期的表达率高于Ⅰ-Ⅱ期(P＜ 0.05),表达率高低与淋巴结转移有关(P＜0.05)；相关性分析显示,二者之间呈正相关(P＜0.05).结论 C-myc和PTTG在TNBC中呈明显高表达,与TNBC的发生、发展和转移密切相关.
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c-myc和c-fos的阳性表达与肝细胞癌发生的相关性研究
目的:探讨c-myc和c-fos的阳性表达与肝细胞癌(HCC)发生的相互关系及临床意义.方法:运用免疫组化检测技术,分别检测肝癌组织、癌旁组织、正常肝脏组织中c-myc和c-fos编码蛋白的表达.结果:正常肝组织c-myc和c-fos均无阳性表达,而肝癌、癌旁组织均出现不同程度c-myc和c-fos表达.c-myc在癌组织表达率为51.43％(36/70),癌旁组织表达率为34.29％(24/70),c-fos在癌组织表达率为20.00％(14/70),癌旁组织表达率为7.14％(5/70),二者比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).研究还发现,肝癌组织中c-myc和c-fos的表达存在相关性,一种基因的表达会导致另一种基因表达的升高.c-myc和c fos癌基因的表达与HCC的发病年龄、性别、肿瘤大小无关,但与HCC的分化程度、UICC分期有关,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:癌基因c-myc、c-fos表达增强与HCC的发生、发展有密切关系.
