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安泰369光合液的毒性实验
安泰369光合细菌菌液,属光合作用微生物,含有多种细菌叶绿素和类胡萝卜素,营养成分高,有增重和保健功能,已被人们开发为新型的饲料添加剂和水质改良剂.为了解该受试物作为保健食品长期使用对人体健康的影响,对其进行了一、二阶段毒理学实验.
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一株沼泽红假单胞菌VOTO1-G的分离鉴定及应用研究
目的 分离、筛选去除富营养化水体营养盐的高效菌株.方法 采用富集、培养常规细菌分离方法,经过多次分离纯化,从河流沉积物中筛选出1株光合细菌菌株,命名为VOTO1-G.在研究其生长规律的基础上,采用分子生物学方法对该菌株进行了鉴定.将分离纯化的光合细菌富集培养后进行除污试验,探讨其不同浓度的除污效果.结果 通过形态学、革兰染色、并结合16S rDNA序列同源性分析,其鉴定结果为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris).通过对该菌株在培养过程中吸光度的测定,进一步研究了其生长规律:在5 ～10天,活菌数迅速增加,处于对数生长期,在10 ～ 14天,处于稳定期.利用不同投加量的沼泽红假单胞菌对富营养化河流水体进行处理研究,筛选的菌株具有一定的脱氮除磷、去除有机物的能力.COD、TP、TN的去除率分别为12％、25％、13％.结论 从河流沉积物中分离出的沼泽红假单胞菌具有一定的脱氮除磷、去除有机物的能力.
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简化混合光合细菌转化复方丹参制剂处方
目的:研究简化混合光合细菌转化复方丹参制剂(Ⅳ)处方.方法:用高脂饲料建立高脂血症大鼠模型,以血脂康为阳性对照,比较丹参提取液(Ⅰ)、球形红细菌转化丹参制剂(Ⅱ)、球形红细菌(Ⅲ)及Ⅳ血脂、抗氧化能力和血液流变学指标.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组能显著降低高脂血症大鼠血清总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白水平( P＜0.01,P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ组能显著提高高密度脂蛋白水平(P＜0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ能显著提高高脂血症大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力(P＜0.01),Ⅰ-Ⅲ组能显著提高超氧化物歧化酶活力(P＜0.01),Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组能显著降低丙二醛水平( P＜0.01,P＜0.05)；Ⅰ-Ⅲ组能显著降低不同切变率下全血黏度(P＜0.01),Ⅱ-Ⅳ组能有效降低血浆黏度(P＜0.01),Ⅰ-Ⅳ组能有效降低红细胞压积(P＜0.01).结论:Ⅱ综合降脂作用优于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ,可以作为混合光合细菌转化复方丹参制剂(Ⅳ)的简化处方.
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经光合细菌作用的六味地黄汤成分变化的研究
六味地黄汤为滋阴补肾的经典名方.将六味地黄汤引入光合细菌发酵培养进行药物研究,研究实验表明含有光合细菌的六味地黄汤能较原液明显缓解糖尿病症状[1],其抗衰老的作用明显增强[2].为探讨影响药效提高的物质基础,本课题研究六味地黄汤的化学成分在光合细菌作用前后的变化,为该制剂的研制、生产和质量控制提供依据.
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球形红细菌生物转化槲寄生中总三萜类化合物的测定
目的:建立槲寄生及球形红细菌转化槲寄生培养液中总三萜类化合物的含量测定方法,并对各个样品的含量进行比较研究.方法:采用紫外分光光度法,以齐墩果酸为对照品,5%的香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸为显色系统,535 nm 波长处测定总三萜类化合物的含量.结果:齐墩果酸在2～12 μg/ml 的范围内线性关系良好,标准曲线回归方程为A=21.988C-0.072,r=0.989 5.75%的乙醇提取、半量常规培养基、游离球形红细菌培养,所得培养液(样品3)总三萜含量和槲寄生75%的乙醇提取液(样品1)相比增加141%.结论:经过球形红细菌转化可以增加槲寄生提取液中总三萜类化合物的含量.
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光合细菌菌剂在提高板蓝根品质中的应用研究
目的:考察在板蓝根种植中应用光合细菌菌剂后板蓝根和大青叶药材品质的提高.方法:采用高效液相色谱法,以甲醇-水(75:25)为流动相,检测波长为289 nm,分析大青叶中靛玉红的含量:按药典要求,用45%乙醇做溶剂测定板蓝根中醇溶性浸出物的含量.结果:使用光合细菌菌剂后,大青叶中靛玉红含量由0.11 mg/g增加为0.26 mg/g,增加了136.4%;板蓝根中浸出物的含量由42.2%增加为47.2%,提高了11.8%.结论:光合细菌菌剂可以提高板蓝根和大青叶的质量.
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光合细菌抗氧化特性的体外实验研究
目的 研究类球红细菌(Ⅱ)、沼泽红假单胞菌(2c)、深红红螺菌(rub)3株光合细菌(photosynthetic bacteria,PSB)的体外抗氧化特性,为PSB制品的功效定位提供资料和菌株材料.方法 用试剂盒测定由3株PSB分别制备的菌液、菌液破碎液、菌体、菌体破碎液样品体外产生T SOD,GSH,MDA水平,超氧阴离子和羟自由基的清除能力,以及总抗氧化能力及测定3株PSB菌悬液对3种活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的抗性.结果 体外试验结果表明,3株PSB制品对羟自由基、超氧阴离子自由基均具有抑制和清除作用,由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01).同一菌株不同样品的总抗氧化能力,T SOD、GSH活性由高到低的趋势是:菌液破碎液→菌体破碎液→菌液→菌体,其之间的差异有显著性(P<0.05,P<0.01).菌株2c体外抗氧化作用强,菌液和菌液破碎液的T AOC分别是[(2.822±0.105)、(4.306±0.128)U/mg pro],在所有菌株中高.所有样品的MDA含量均较低.Fenton反应所产生的羟自由基对菌株rub、Ⅱ的活菌数有显著影响(P<0.05,P<0.01),对菌株2c活菌数无显著影响.结论 3种PSB菌株都具有抗氧化作用,但具有菌株特异性;PSB抗氧化特性能增加菌株对ROS的抗性.可将PSB制品的功效之一定位于抗氧化,选择菌株2c作为后续研发材料.
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光合细菌对高脂家兔的血脂及抗氧化作用研究
目的:探讨光合细菌对高脂家兔的血脂与增强抗氧化能力的影响.方法:在采用高脂饲料建立高脂家兔模型的同时给予光合细菌.以螺旋藻为阳性对照,设立空白对照、高脂对照,观察光合细菌对家兔血清TC、TG、LDL-C含量、脂质参数H/L和AI的影响以及对家兔血中SOD活性、GSH、LPO含量和肝脏中GSH含量的作用.结果:光合细菌能显著降低高脂家兔血清TC、TG、LDL-C含量,改善H/L及AI两个脂质参数;并可显著增强高脂家兔血中SOD活性,对血及肝脏中GSH含量有明显的提高作用,同时显著降低血中LPO含量,且优于螺旋藻.结论:光合细菌对高脂家兔具有调脂及增强抗氧化能力的作用.
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光合细菌防治高脂家兔动脉粥样硬化的研究
目的:研究光合细菌对动脉粥样硬化的防治作用.方法:用高脂饲料建立实验性高脂家兔模型;以螺旋藻作为阳性对照;设立空白对照、高脂对照,以肝脏总胆固醇含量(TC)、主动脉斑块面积百分比(PA)及冠状动脉堵塞情况等为指标,观察光合细菌对动脉粥样硬化的防治作用.结果:光合细菌组的肝脏TC含量、肝系数、PA分别比高脂组降低了63.99% 、21.96%、70.10%,都具有非常显著性差异(P＜0.01),同时也显著低于螺旋藻组.病理学检查表明,光合细菌组肝脏上的脂质沉积和冠状动脉的病变也明显轻于高脂组和螺旋藻组.结论:光合细菌对高脂家兔的动脉粥样硬化具有很好的防治作用,效果优于螺旋藻.
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光合细菌化学成分和生理活性研究进展
光合细菌具有独特的生理、生化特性,在人类生活生产中具有重要作用.但人们对其生理活性的物质基础并不十分清楚.对光合细菌化学成分、生理活性研究现状及利用光合细菌菌体和代谢物所含化学成分进行活性物质生产现状进行综述.
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枸杞提取液对球形红细菌生长的影响
目的 考察枸杞提取液对球形红细菌生长的影响.方法 在不同质量浓度的常规培养基中添加不同质量浓度的枸杞提取液,培养球形红细菌,比较球形红细菌的活菌数、生长曲线和脱氢酶活性,考察枸杞提取液对球形红细菌生长的影响.结果 在培养基中添加枸杞提取液可缩短球形红细菌生长延迟期,使其提前进入指数期和稳定期;当质量浓度为12.5 g/L时,球形红细菌活菌数增加到之前的1.5倍,使球形红细菌脱氢酶活性提高到之前的3.3倍.结论 培养基中添加一定量的枸杞提取液可以促进球形红细菌的生长,使球形红细菌生长周期缩短、活力提高.
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光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究
目的 确定光合细菌(PSB)转化槲寄生制剂中槲寄生乙醇提取的佳浓度.方法 以荷Lewis肺癌小鼠为模型,以抑瘤率、免疫指标、抗氧化指标为标准进行筛选.结果 PSB转化槲寄生制剂的各项指标均优于单纯的槲寄生制剂,其中以PSB转化槲寄生制剂Ⅱ的各项指标为佳.结论 槲寄生75%乙醇提取物所制光合细菌转化槲寄生制剂为佳.
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光合细菌转化复方决明子口服液中蒽醌类成分的含量测定
目的 建立光合细菌转化复方决明子口服液中游离蒽醌和结合蒽醌的含量测定方法.方法 用醋酸镁甲醇显色,以大黄酚为对照品,采用紫外可见分光光度法在所选大吸收波长510 nm处测定光合细菌转化复方决明子口服液中蒽醌类成分的含量.结果 在2-12μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为A=0.057 9C+0.042 4,r=0.999 7;游离蒽醌平均回收率97.8%,RSD=2.4%.结论 该紫外可见分光光度法简便、准确,可用于光合细菌转化复方决明子口服液中蒽醌类成分的含量测定.
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HPLC法测定光合细菌菌液中辅酶Q10的含量
目的 建立HPLC法测定光合细菌菌液中辅酶Q10的含量. 方法 样品经4 500 r/min离心15 min后弃去上清液,残渣用丙酮超声萃取三次,色谱柱为Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,i.d.5 μm),流动相为甲醇:无水乙醇(30:70),检测波长为275 nm,柱温25℃. 结果 平均加样回收率为98.54%,RSD为0.51%(n=6),线性范围为60-140μg/ml(r=0.999 2,n=5). 结论 该法快速、简便、灵敏、准确,适合于光合细菌菌液中辅酶Q10的含量测定.
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光合细菌调脂作用的研究
目的研究光合细菌对血清中脂质的调节作用.方法通过高脂饮食建立高脂大鼠模型,以绞股蓝总甙为阳性对照物,研究光合细菌对高脂大鼠的调脂作用.结果光合细菌能显著降低大鼠血清TC、TG、LDL-c含量,并升高血清HDL-c含量及提高H/L比值,此外还能降低TC在肝脏中的蓄积.结论光合细菌显示出较强的调脂作用,且优于绞股蓝总甙.
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有效微生物群净化湖水安全性评价
有效微生物群(Effect Microorganisms,EM)是一种复合微生物活菌制剂,由光合细菌、乳酸菌、放线菌及发酵型丝状真菌等5科10属80多种微生物复合培养而成.自20世纪90年代引入我国以来,在种植业、养殖业和环境污染治理、净化方面取得了明显的作用和效果[1-3].目前对EM的应用研究较多,而对EM的安全性研究报道较少.为了解应用EM治理污水的安全性,在观察EM净化受污染湖水的效果同时,对应用EM净化的湖水进行急性毒性及遗传毒性实验研究.
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模拟胃肠环境对3株光合细菌存活率影响的实验研究
目的 模拟胃肠环境对3株光合细菌(Photosynthetic bacteria,PSB)存活率影响进行体外实验研究.方法 测定3株PSB分别在pH 2.0、3.0和4.0的模拟胃液及含有或不含有0.45%牛胆盐(pH 8.0)的模拟小肠液中不同时间的存活率.结果 pH 2.0时模拟胃液处理不同时间对3株PSB存活率有显著影响(P<0.01);pH 3.0时,模拟胃液处理60、90和180 min对菌株rub存活率有显著影响(P<0.01),处理90、180 min对菌株Ga存活率有显著影响(P<0.05),处理180 min对菌株2C存活率无显著影响(P>0.05);pH 4.0时模拟胃液处理180 min对3株PSB存活率无显著影响(P>0.05).模拟小肠液处理240 min对3株PSB菌株活菌数无显著影响(P>0.05).结论 模拟胃液对3株PSB存活率影响具有菌株特异性和pH依赖性,而模拟小肠液对3株PSB存活率无显著影响.
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光合细菌2c菌株益生特性的实验研究
目的 研究沼泽红假单胞菌2c菌株益生特性.方法 利用耐酸、耐胆盐、体外黏附、平板抑菌试验及大鼠摄入2c菌株后在其体内的存活和持续时间实验研究其益生特性.结果 pH 2.5条件下处理30 min及0.5%或0.9%牛胆盐处理对2c菌株活菌数无显著影响(P>0.05);2c菌株体外对4株临床致病菌无抑制作用,体外黏附性能一般.2c菌株在大鼠体内存活和持续时间与摄入剂量有关,停止摄入3 d后便不能富集出.结论 2c菌株具有较好益生特性.
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北桑寄生提取液对沼泽红假单胞菌生长的影响
目的 研究北桑寄生提取液对沼泽红假单胞菌生长的影响.方法 通过添加不同质量浓度的常规培养基和北桑寄生提取液,培养沼泽红假单胞菌,观察活菌量的变化规律、生长曲线及脱氢酶活性.结果 在全量培养基和无常规培养基中,北桑寄生提取液浓度分别为(0～6.25) g/L和(0～12.50) g/L,有利于细菌生长.佳转化和未转化条件下细菌的脱氢酶活性分别增加9.72和7.20倍,活菌数无明显变化.结论 低质量浓度北桑寄生促进沼泽红假单胞菌生长,反之则表现为抑制作用.高浓度北桑寄生提取液可以增强脱氢酶活性.
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一株光合细菌的分离鉴定及其净化甲醛能力的研究
目的 筛选能够高效净化甲醛的光合细菌菌株.方法 采用双层平板法,从滇池湿地公园入口处污水中分离得到1株光合细菌,将其命名为PSB2-3,对菌株进行形态学观察、生理生化特性研究、16S rDNA分子鉴定及净化甲醛能力的测定.结果 经鉴定这株光合细菌为荚膜红假单胞菌.该菌株的适生长条件:厌氧条件,温度30℃,pH 7.0～8.0,接种量25％～30％;适碳源和氮源分别为CH3COONa和(NH4)2SO4.在适生长条件下,该菌株对甲醛的耐受浓度可达60 mmol/L,96 h可将其降解73.35％,64 h可将40 mmol/L的甲醛全部降解,32 h可将20 mmol/L的甲醛全部降解.结论 菌株PSB2-3对甲醛具有很高的耐受浓度及降解能力.
