首页 > 文献资料
-
新疆维吾尔族5-羟色胺转运体启动子区多态性与焦虑症的关联研究
目的 探讨新疆维吾尔族5-羟色胺转运体启动子区(5-HTTLPR)多态性与焦虑症的相关性.方法 运用聚合酶链反应技术检测38例焦虑症患者和108例健康对照者5-HTTLPR的分布频率.结果 共检测出4种基因型:S/S(484bp,484bp),S/L(484bp,528bp)、L/L(528bp,528bp)和S/xL(484bp,616bp),比较发现,患者组和对照组5-HTTLPR的S/S基因型频率分别为16%和39%,差异有显著性(X~2=14.274,P=0.003);S等位基因频率分别为56%和61%,差异无显著性(X~2=0.711,P=0.701).结论 患者组S/S基因型频率低于正常对照组,相关分析结果不支持5-HTTLPR多态性与新疆维吾尔族焦虑症有关.
-
针刺对卒中后抑郁大鼠脑组织神经递质及5-羟色胺转运体、5-羟色胺1A受体、去甲肾上腺素α2受体的影响
目的:观察解郁安神针法对卒中后抑郁(PSD)大鼠脑组织5羟色胺(5-HT)转运体(5-HTT)、5-HT 1 A受体(5-HT1AR)、去甲肾上腺素α2受体(NEα2 R)蛋白的影响.方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组、针刺组,每组各10只.采用大脑中动脉闭塞和慢性不可预见性温和性应激法复合制备卒中后抑郁模型.药物组予以氟西汀(2 mg/kg)灌胃,针刺组选取“百会”“风府”及双侧“神门”“太冲”穴针刺20 min,每日1次,7d为1个疗程,共3个疗程,疗程之间休息1d.观察大鼠行为学并采用高效液相色谱法检测大脑皮质5-HT、去甲肾上腺素(NE)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)、谷氨酸(Glu)变化,采用免疫印迹法检测海马、中缝核、蓝斑核5 HTT、5-HT1A R、NEα2R蛋白变化.结果:与正常组大鼠比较,PSD模型大鼠大脑皮质5 HT、NE及海马、中缝核、蓝斑核中5-HTT蛋白表达降低,大脑皮质Ach、γ GABA、Glu及海马、中缝核、蓝斑核中NEα2R、5-HT1AR蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组大鼠比较,针刺组脑皮质5-HT、NE、5-HTT蛋白表达升高(P＜0.01),Ach、γ-GABA、Glu、NEα2 R、5-HT1A R蛋白表达降低(P＜0.01,P＜0.05).结论:解郁安神针法能明显改善PSD大鼠行为学变化,其机制可能是上调大脑皮质5 HT、NE,下调Ach、γ-GABA、Glu表达,促进海马、中缝核、蓝斑核5-HTT敏感性,抑制NEα2R、5-HT1AR表达.
-
基因多态性技术在肠易激综合征个体化针刺治疗中的可行性分析
随着基因多态性技术在疾病个体化治疗中的应用,5-羟色胺(5-HT)转运体基因多态性标志物的筛选是目前肠易激综合征的研究热点,通过分析目前肠易激综合征的针刺和中药结合诊疗规范化方案以及5 HT转运体基因多态性及针刺在该方向的研究成果,在目前形成的肠易激综合征针药结合规范化诊疗方案基础上,评估和筛选5-HT转运体基因多态性标志物在肠易激综合征针刺个体化治疗中的重要性和指导意义,为进一步个体化治疗指导方案的建立提供依据.
-
健脾化湿颗粒对D-IBS大鼠脑中酪氨酸羟化酶、单胺氧化酶及5-羟色胺转运体表达的影响
目的:从脑中酪氨酸羟化酶,单胺氧化酶及5-羟色胺(5-HT)转运体角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(D-IBS)的作用机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、健脾化湿颗粒低、中、高剂量组(6.25,12.5,25 g·kg-1)、阳性药组(匹维溴铵,0.03 g·kg-1),共6组,每组10只,除正常组外,其余各组大鼠均采用灌服番泻叶联合束缚应激的方法复制D-IBS大鼠模型,观察不同时间各组大鼠糖水偏爱度的的变化,应用健脾化湿颗粒进行干预14 d.应用免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑中酪氨酸羟化酶、单胺氧化酶及5-HT转运体的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠糖水偏爱度显著下降(P＜0.01),脑中酪氨酸羟化酶表达显著升高,单胺氧化酶及5-HT转运体表达显著下降(P＜0.01).模型组比较,中、高剂量组及匹维溴铵组大鼠糖水偏爱度显著升高(P＜0.05,P＜0.01);除阳性组大鼠单胺氧化酶相对表达量外,各治疗组大鼠脑中酪氨酸羟化酶阳性表达及表达量均显著降低,单胺氧化酶和5-HT转运体阳性表达及表达量均显著升高(P ＜0.05,P＜0.01).与匹维溴铵组比较,中、高剂量组大鼠糖水偏爱度均显著升高(P＜0.05,P＜0.01);中、高剂量组大鼠脑中酪氨酸羟化酶阳性表达及相对表达量显著降低(P ＜0.05,P＜0.01);中、高剂量组大鼠脑中单胺氧化酶及高剂量组大鼠脑中5-HT转运体阳性表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01);低、中、高剂量组大鼠脑中单胺氧化酶及5-HT转运体相对表达量显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:健脾化湿颗粒降低D-IBS模型大鼠脑内5-HT含量与其下调脑中酪氨酸羟化酶表达,上调单胺氧化酶和5-HT转运体表达密切相关,这可能是其治疗D-IBS的作用机制之一.
-
经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠海马和下丘脑5-羟色胺转运体表达的影响
目的:研究经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证大鼠海马、下丘脑5-羟色胺转运体(5-HTT)表达的影响,从分子水平探讨经前舒颗粒的作用机制.方法:雌性SD大鼠随机分为正常对照组、肝郁模型组、经前舒颗粒给药组(10 g·kg-1)和氟西汀给药组(0.002 5 g·kg-1),束缚造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型,给药组大鼠ig给药5 d后,旷场实验、糖水偏好实验对模型进行评价,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术分别检测大鼠海马和下丘脑5-HTT的mRNA及蛋白的表达.结果:与肝郁模型组相比经前舒和氟西汀给药组大鼠糖水偏好指数及旷场实验得分均显著升高(P＜0.05,P＜0.01);经前舒和氟西汀给药均能显著上调海马和下丘脑中5-HTT的mRNA和蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),两给药组间无显著性差异.结论:经前舒颗粒的作用机制可能是通过调节海马、下丘脑中5-HTT的表达而发挥作用.
关键词： 经前期综合征肝气郁证 5-羟色胺转运体 经前舒颗粒 -
中医肝证情绪测量及与5-羟色胺转运体基因多态性相关的研究
目的:探讨4种中医肝病证候情绪特征及与5-羟色胺转运体(5-HTT)基因多态性的相关性.方法:采用Beck焦虑量表、Beck抑郁量表对203例肝气郁结证、肝火上炎证、肝气虚证、肝阳上亢证患者及90例健康人对照进行情绪测量.运用多聚酶链式反应技术(PCR)检测5-HTT启动子区(5-HTTLPR)基因多态性在4种中医证型中的分布频率,并与健康人对照组比较.结果:4种中医肝证患者Beck焦虑量表、Beck抑郁量表测值积分均显著高于健康人对照组(P＜0.01);Beck焦虑量表测值肝火上炎证显著高于肝气郁结证和肝气虚证(P＜0.01);Beck抑郁量表测值肝气郁结证和肝气虚证显著高于肝阳上亢证组(P＜0.01,P＜0.05).肝火上炎证、肝阳上亢证患者5-HTTLPR SS基因型频率显著高于健康人对照组(P＜0.05,P＜0.05);肝火上炎证患者S等位基因频率亦显著高于健康人对照组(P＜0.01).结论:5-HTTLPR多态性SS型个体可能是肝火上炎证和肝阳上亢证的易感人群,且该人群具有明显的焦虑情绪特征.
-
定志小丸对miR-16及5-HT重摄取的影响
该研究观察抗抑郁中药古方定志小丸(DZ)在体内外对miR-16表达水平的影响,从转录后调控的角度探索定志小丸升高5-羟色胺(5-HT)水平的机制.首先建立慢性不可预知中等强度温和刺激(CUMS)结合孤养抑郁大鼠模型,观察不同剂量定志小丸(600,300,150 mg·kg-1)给药3周后对抑郁大鼠行为学指标的影响,高效液相色谱法(HPLC)观察对海马5-羟色胺(5-HT)含量的影响,PCR和Western blot法观察定志小丸对CUMS大鼠海马miR-16及SERT表达水平的影响.并在体外培养的大鼠原代海马神经元细胞中观察定志小丸(10,100,200,500 mg·L-1)作用48 h后对miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤导致的细胞模型中miR-16及SERT mRNA表达水平的影响.结果显示,300,600 mg· kg-定志小丸可显著改善CUMS大鼠行为学评分,升高大鼠海马内5-HT的水平,同时能够升高大鼠海马区miR-16的表达,降低SERT的表达.同时,在大鼠原代海马神经元细胞中,100,200,500 mg·L-1定志小丸可显著升高miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤模型细胞中miR-16的表达水平,并显著降低上述造模引起的细胞内SERT表达水平的升高.综上,笔者认为定志小丸可能通过上调miR-16表达水平,释放其对靶基因SERT的抑制作用,抑制5-HT的重摄取,进而升高脑内5-HT的水平,发挥抗抑郁作用.
-
5-羟色胺与自杀的研究进展
5-羟色胺(5-HT)在所有可能与自杀相关的神经递质中被研究得多,主要集中在5-HT功能、5-HT受体和转运体、与自杀相关的5-HT系统候选基因等方面.本文对5-羟色胺与自杀的研究进展做一综述.
-
乙醇对大鼠脑内5-HT能神经体系的影响
目的 观察乙醇处理大鼠脑内色氨酸羟化酶(TPH)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺转运体(SERT)的表达改变,判断乙醇对脑内5-HT能神经体系的影响.方法 以20%乙醇代替饮水饲养30只Wistar大鼠6个月;利用免疫组织化学、免疫印迹及流式细胞术等方法,分析乙醇处理大鼠有关脑区5-HT能神经体系相关指标的改变.结果 1.免疫组织化学法可见,乙醇处理组大鼠脑内中缝背核TPH、5-HT免疫反应阳性神经元数量少于对照组(P＜0.01);TPH免疫阳性神经元直径小于对照组(P＜0.01);相关脑区TPH、5-HT和SERT免疫反应灰度值比对照组增高(P<0.05).2.流式细胞术检测可见,乙醇处理组大鼠TPH、5-HT和SERT的表达量低于对照组(P<0.05).3.免疫印迹法检测可见,乙醇处理组大鼠SERT和TPH与β-actin相对吸光度比值均小于相应对照组(P<0.05).结论 乙醇降低脑内TPH、5-HT和SERT的表达,可能改变脑内5-HT能神经体系的功能活动.
-
鱼藤酮致帕金森大鼠脑内5-羟色胺和5-羟色胺转运体的表达改变
目的 通过观察鱼藤酮处理大鼠脑内相关脑区5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺转运体(SERT)的表达变化,探讨鱼藤酮对5-HT能神经元的影响.方法 选用健康成年雄性Wistar大鼠42只,背部皮下注射鱼藤酮制作帕金森病大鼠动物模型,以免疫组织化学染色、免疫印迹法及流式细胞术显示大鼠脑内相关脑区5-HT和SERT的表达变化.结果 1.5-HT:免疫组织化学染色显示,鱼藤酮组大鼠中脑中缝背核5-HT免疫反应阳性神经元数量明显少于对照组(P＜0.01),中缝背核和尾壳核5-HT免疫反应强度明显减弱(P＜0.01);流式细胞术(间接免疫荧光法)检测显示,鱼藤酮组大鼠5-HT的表达量比对照组明显降低(P＜0.01).2.SERT:免疫组织化学染色显示,鱼藤酮组大鼠中缝背核和尾壳核SERT免疫反应强度明显减弱( P＜0.01);免疫印迹法检测发现,鱼藤酮组大鼠中缝背核及尾壳核的SERT与β-actin吸光度比值与对照组相比明显降低(P＜0.05).结论 鱼藤酮对5-HT能神经元具有明显的神经毒性.
-
5-羟色胺转运体基因多态性与肠易激综合征的相关性
目的:探讨SERT基因启动子区5-HTTLPR和内含子2 VNTRs多态性在肠易激综合征(IBS)中的意义.方法:采用PCR方法对51例腹泻型IBS(D-IBS)、58例便秘型IBS(C-IBS)、38例便秘腹泻交替型IBS(A-IBS)患者与48例健康对照者SERT基因启动子区5-HTTLPR和内含子2VNTRs多态性进行比较分析.结果:C-IBS组L/L基因型及L等位基因频率显著高于对照组(31.0%vs8.3%,x2=8.229,P＜0.05;47.4%vs29.2%,x2=7.342,P＜0.05),D-IBS组S/S基因型频率和S等位基因频率显著高于A-IBS和C-IBS组(S/S:56.9%vs36.8%,36.2%,P＜0.05;S:71.6%vs56.6%,52.6%,P＜0.05),L/L基因频率显著低于A-IBS和C-IBS组(9.8%vs28.1%,P＜0.05).IBS各组与对照组之间内含子2 VNTRs多态性分布无显著性差异(P＞0.05).结论:具有L/L基因型和L等位基因的人更易患C-IBS,具有S/S基因型和S等位基因的人更易患D-IBS,L/L基因型可能是D-IBS的保护因素之一.
-
肠易激综合征患者5-羟色胺转运体的基因多态性
目的探讨5-羟色胺转运体(SERT)基因多态性在肠易激综合征(IBS)中的意义.方法用PCR方法对48例健康对照和30例便秘型IBS(C-IBS)、32例腹泻型IBS(D-IBS)和19例交替型IBS(A-IBS)患者SERT基因的VNTRs和5-HTTLPR区多态性进行研究.结果 VNTRs区:IBS患者STin2.12/10基因型频率明显高于对照组,各亚型间基因型频率差异无显著性.5-HTTLPR区:C-IBS组 L/L频率显著高于D-IBS、A-IBS和对照组;D-IBS、A-IBS组L/S频率显著高于C-IBS组.C-IBS组12/12-L/L基因型联合的频率显著高于A-IBS和D-IBS组.结论 SERT基因VNTRs区STin2.12/10基因型可能与IBS相关,具有L/L基因型以及12/12-L/L基因型联合的人群可能更易患C-IBS,L/S基因型的人群易患D-IBS和A-IBS.
-
5-羟色胺转运体在模拟高原肺动脉高压大鼠肺组织中的基因表达及氟西汀的干预作用
目的 观察5-羟色胺转运体(5-HTT)在高原肺动脉高压大鼠肺组织中的基因表达规律,探讨氟西汀对其肺组织中5-HTT表达的干预作用.方法 84只雄性Wistar大鼠随机分为对照10 d,20 d,30 d组(C10,C20,C30组,各8只),高原低压低氧10 d,20 d和30 d组(H10,H20和H30组,各10只),高原低压低氧+氟西汀干预组(F10,F20,F30组,各10只),C组置于平原处喂养,H组和F组均同时置于模拟海拔5 000 m(压力:0.53×105 kPa;氧分压:42 mm Hg)高原环境.F组大鼠予以氟西汀3 mg·kg-1·d-1灌胃,C组、H组按体质量同体积蒸馏水灌胃.应用RT-PCR方法 测定各组肺组织中5-HTT mRNA表达水平.结果 H10组5-HTT mRNA表达与C10组,C20组,C30组相比增高[(0.33±0.05) vs (0.12±0.02)、(0.13±0.01)、(0.12±0.04)],H20组、H30组随缺氧时间的延长其表达量不断增加,分别为(0.63±0.02)、(0.91±0.03),P值均＜0.01.F10组、F20组与H10组、H20组相比5-HTT mRNA表达水平均明显降低[(0.19+0.02) vs (0.33±0.05),(0.26±0.03) vs (0.63±0.02).P值均＜0.01].但F30组与H30组相比无差异[(0.93±0.02) vs (0.91±0.03),P＞0.05].结论 在高原肺动脉高压大鼠肺组织中5-HTT基因表达增高,氟西汀能短期内抑制肺组织5-HTT表达,但长期作用不明显.
-
5-羟色胺转运体基因多态性与抑郁症病因及疗效的研究现状
抑郁症是一种危害人类身心健康的常见病,其终生患病率约为6.1%～9.5%.世界卫生组织指出,到2020年抑郁症将成为仅次于心脏病的第二大疾病.病因学研究证实,抑郁症的发生与遗传因素密切相关.分子遗传学研究发现,在5-羟色胺(5-HT)系统中有20余个可能与抑郁症相关的候选基因,参与了5-HT的合成、代谢、转运等.其中5-HT转运体(5-HTT)基因不仅对突触间隙的5-HT浓度具有调节作用,同时也是选择性5-HT再摄取抑制剂(SSRIs)的作用靶点,是目前研究的热点基因之一.内科
-
强迫症与5-羟色胺转运体基因多态的关联分析
目的探索汉族人群中5-羟色胺转运体SLC6A4基因多态与强迫症发病的关系.方法采用聚合酶链反应扩增片段长度多态技术测定120例强迫症患者(强迫症组)和130名健康人(对照组)的SLC6A4基因型.结果强迫症组SLC6A4第2内含子及启动子的基因型多态分布与对照组间的差异有显著性(χ2=6.70,P=0.035;χ2=6.35,P=0.042);第2内含子等位基因频数分布与对照组之间的差异有非常显著性(χ2=7.54,P=0.006);第2内含子的等位基因10,12/10基因型和启动子的L/L基因型与强迫症存在显著正关联[比数比(OR)值分别为2.24,2.12和3.57,P<0.05];强迫症组及对照组内不同性别间基因型分布的差异均无显著性(P>0.05).结论在汉族人群中SLC6A4基因可能与强迫症存在遗传关联,第2内含子的等位基因10和12/10基因型、启动子的L/L基因型可能是强迫症的风险因子.
-
5-羟色胺转运体抑制/多巴胺D2受体拮抗双重活性化合物的合成
目的 设计、合成具有5-羟色胺转运体(SERT)抑制/多巴胺D2受体(DR2)拮抗双重活性的新化合物.方法 采用分子杂合设计策略,设计、合成一系列苯并二氧戊/苯基哌嗪衍生物,采用体外放射性配体竞争结合实验测定其对SERT和DR2亲和力.结果 化合物7e双重活性特征为显著,对SERT亲和力为(4.2±1.7) nmol·L-1,DR2亲和力为(2.7±1.2)nmol·L-1.结论 分子对接模拟提示,化合物7e双重亲和力的结构基础在于苯并二氧戊环、苯基哌嗪构建单元与SERT和DR2氨基酸残基间存在潜在的相互作用.
-
吗啡依赖大鼠伏隔核区单胺转运体表达的时点变化
目的:研究慢性吗啡处理的大鼠停药后不同时间伏隔核(NAc)脑区多巴胺转运体(DAT)和5-羟色胺转运体(5-HTT)水平的变化.方法: 将50只♂SD大鼠随机等分为实验组即吗啡成瘾组(n=25)和生理盐水对照组(n=25).实验组每天两次腹腔注射(ip)吗啡,起始剂量每次5 mg·kg-1,逐日递增,直至d10时 50 mg·kg-1;其中根据动物存活的时间分为吗啡戒断后0 d组(M0),1 d组(M1),6 d组(M6),14 d组(M14),21 d组(M21),每组5只;对照组,用相同方式注射同体积的生理盐水.实验组和对照组在相同时间点处死,取NAc脑区脑组织.用免疫组化法检测NAc脑区脑组织DAT和5-HTT的表达,用图像分析系统测量免疫阳性产物的灰度均值并进行同期平行比较.结果:(1)5-HTT灰度均值实验组组内不同时点比较差异均有显著性(P＜0.001);实验组和对照组组间相同时点比较,除M21以外余各时点比较差异亦有显著性(P＜0.001),实验组M0、M1渐升高,M6、M14、M21降低.(2)DAT灰度均值实验组组内不同时点对比均差异有显著性(P＜0.001),实验组和对照组组间相同时点对比差异亦有显著性(P＜0.001),实验组在NAc脑区灰度均值与对照组相比均升高,灰度均值M0高. 结论:慢性吗啡处理后,NAc脑区DAT和5-HTT的表达在戒断初期先降低,后期有所升高,表明NAc脑区的DAT、5-HTT参与了阿片类物质依赖的形成.
-
4种临床常见选择性5-羟色胺再摄取抑制剂对5-羟色胺转运体的抑制作用比较
目的 选择性5.羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitors,SSRIs)是目前临床应用广泛的新型抗抑郁药物.通过考察氟西汀、帕罗西汀、西酞普兰和舍曲林对5-HT转运体(serotonin transporter,SERT)的抑制作用的强弱,为临床选择药物提供实验依据.方法 利用大鼠脑突触体和大鼠血小板SERT,通过放射配基实验,观察在SSRIs存在下SERT对[3H]5-HT的摄取变化,获得IC50值,比较氟西汀、帕罗西汀、西酞普兰和舍曲林对SERT抑制作用的强弱.结果 大鼠脑组织突触体和血小板SERT体外放射配基结合实验显示,帕罗西汀、氟西汀、西酞普兰和舍曲林对SERT抑制作用的IC50(nmol·L-1)分别为(血小板vs突触体):(1.26 vs 1.39)、(44.7 vs 35.5)、(10.5 vs 16.2)和(6.64 vs 7.09).结论 4种SSRIs对SERT的抑制作用都很强,IC50在nmol·L-1数量级.抑制作用的强弱依次为帕罗西汀＞舍曲林＞西酞普兰＞氟西汀.
关键词： 选择性5-羟色胺再摄取抑制剂 5-羟色胺转运体 放射配基结合实验 突触体 血小板 -
针刺对卒中后抑郁大鼠5-HTT、5-HT1AR、NEα2 R蛋白表达的影响
目的：观察针刺干预卒中后抑郁（PSD）大鼠神经递质及受体的调节和影响，从分子生物水平，阐述针刺干预卒中后抑郁的分子机制。方法将120只雄性 SD 大鼠随机分为空白组、模型组、药物组、针刺组，其中空白组10只，模型组30只，药物组和针刺组各40只，采用大脑中动脉闭塞和慢性不可预见性温和性应激法复合制备卒中后抑郁模型。药物组予以氟西汀2 mg／kg 溶入生理盐水灌胃，针刺组选取百会、风府、神门、太冲穴20 min，期间行针1次，以上治疗每日1次，共27 d，每7 d 之间休息1 d，采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测卒中后抑郁大鼠海马、中缝核、蓝斑核去甲肾上腺素α2受体（NEα2 R）、5-羟色胺1A 受体（5-HT1A R）和5-羟色胺转运体（5-HTT）蛋白的表达。结果与空白组比较，模型组海马、中缝核、蓝斑核5-HTT 蛋白表达非常显著减少（P ＜0．01），NEα2 R 蛋白表达非常显著增加（P ＜0．01）；海马、中缝核中5-HT1A R 蛋白表达非常显著增加（P ＜0．01），蓝斑核5-HT1A R 蛋白表达显著增加（P ＜0．05）；与模型组比较，针刺组与药物组海马、中缝核、蓝斑核5-HTT 蛋白表达显著增加（P ＜0．01），NEα2 R 蛋白表达非常显著减少（P ＜0．01）；海马中5-HT1A R 蛋白表达非常显著减少（P ＜0．01），中缝核、蓝斑核5-HT1A R 蛋白表达显著减少（P＜0．05）。与药物组比较，针刺组海马、中缝核以及蓝斑核5-HTT 蛋白、5-HT1A R 蛋白、NEα2 R 蛋白表达无显著增加（P >0．05）。结论针刺能降低 PSD 大鼠脑内单胺神经递质5-HT1A R 和 NEα2 R的表达量，提高5-HTT 的含量，进一步提示针刺能调节大鼠脑内单胺类神经递质5-HT 和去甲肾上腺（NE）的含量或转运率。从而发挥针刺抗抑郁作用。
-
一种改良的5-羟色胺转运体活性化合物高内涵筛选方法
[目的]建立一种改良的5-羟色胺转运体(SERT)活性化合物高内涵筛选(HCS)方法,包括构建稳定转染hSERT细胞株和优化SERT活性化合物HCS条件.[方法]应用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒hSERT-pcDNA3转染人HEK293细胞,采用遗传霉素(G418)筛选获得稳定转染细胞系,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法分别从转录和翻译水平验证hSERT表达,采用SERT荧光底物4-(4-二甲氨基)苯基-1-甲基吡啶(APP+)在高内涵系统上验证SERT摄取功能并优化其检测条件,应用选择性SERT抑制剂Fluoxetine和SERT增强剂Tianeptine验证SERT HCS方法可靠性.[结果]经PEI转染和G418筛选获得了稳定转染hSERT-HEK293细胞株.与HEK293细胞相比,hSERT-HEK293细胞中hSERT mRNA和蛋白表达量均显著性增加,APP+摄取实验表明hSERT-HEK293细胞摄取ApP+显著性增加,并可被Fluoxetine特异性抑制.实验优化了高内涵检测APP+摄取实验中APP+浓度、孵育时间、数据分析方法等条件.Fluoxetine显著地抑制hSERT-HEK293对ApP+的摄取,Tianeptine显著地增强hSERT-HEK293对APP的摄取,证实此HCS方法的可靠性.[结论]本研究首次优化了应用APP+检测SERT活性的HCS条件,显著提高了SERT荧光检测方法灵敏度,并首次证实此HCS方法适用于SERT促进剂筛选,因此,建立了一种改良的SERT活性化合物HCS方法.
关键词： 5-羟色胺转运体 APP+ hSERT-HEK293细胞系 高内涵筛选
