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Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制
目的 探讨Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化(EMT)中的作用及其机制.方法 76例行肺癌根治术的女性肺癌组织标本为观察组,49例癌旁肺组织标本为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹法检测Sox4的表达水平;采用RNA干扰技术下调Sox4表达,利用脂质体2000向肺癌细胞系XWLC-05转染Sox4-siRNA,同时以未转染XWLC-05为对照,采用qPCR和Western印迹方法检测两组Sox4表达水平及内镜下黏膜切除术(EMR)上皮标记β-catenin、E-cadherin,间质标记Fibronectin、vimentin、N-cadherin的表达情况,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氯唑溴盐(MTT)、Transwell及细胞划痕实验检测转染组与未转染组细胞增殖、侵袭、迁移能力.结果 观察组Sox4 mRNA水平及蛋白水平表达均明显高于对照组(P<0.05);转染组Sox4 mRNA水平及蛋白水平表达均明显低于未转染组(P<0.05);qPCR结果显示,转染组β-catenin、E-cadherin水平明显高于未转染组(P<0.05),转染组Fibronectin、vimentin、N-cadherin水平明显低于未转染组(P<0.05),Western印迹结果与qPCR检测结果相一致;MTT实验结果显示,转染Sox4-siRNA细胞后,XWLC-05细胞增殖能力与未转染组无明显差异(P>0.05),Transwell实验结果显示,转染Sox4-siRNA细胞后,XWLC-05细胞侵袭、迁移能力较未转染组明显降低.结论 Sox4可能是通过下调β-catenin、E-cadherin表达及上调Fibronec-tin、vimentin、N-cadherin表达促进EMT发生,诱导人肺癌细胞发生侵袭转移.
关键词： SOX4 肺癌 上皮-间质转化(EMT) -
上皮-间质细胞转化的分子机制及其在肿瘤转移中的作用
上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是具有极性的上皮细胞转换成为具有移行能力的间质细胞并获得侵袭和迁移能力的过程,它存在于人体多个生理和病理过程中.上皮-间质转化(EMT)在恶性肿瘤的侵袭转移过程中起着关键的作用,研究EMT的始发因素及其下游通路在肿瘤生长、侵袭、转移中的作用,阻断这一机制的发生发展,对恶性肿瘤的侵袭转移前的早期诊断、早期治疗有着非常重要的意义.
关键词： 上皮-间质转化(EMT) 肿瘤侵袭 肿瘤转移 分子机制 -
Twist相关信号通路与肿瘤的研究进展
Twist基因属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子家族,具有高度保守性,是肿瘤细胞发生间质-上皮转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)并获得迁徙、侵袭和转移能力的主要诱导因子之一,它的信号通路是一个复杂、多途径的网络系统.Twist可通过AKT磷酸化影响口腔鳞癌和膀胱癌的发生和侵袭,通过调控AKT信号途径使鼻咽癌细胞和乳腺癌细胞株产生对紫杉醇的耐药性；STAT3、Twist1和AKT2形成一个功能信号轴参与乳腺癌细胞的侵袭和转移、参与胃癌的发生和发展,异常的p-STAT3/Twist/E-cadherin信号轴可能介导肝癌的侵袭与转移.随着Twist相关信号通路与肿瘤关系的深入研究,其在肿瘤的诊断、治疗和预后预测中的重要作用逐步显现,本文就近年来关于Twist癌基因的结构、功能及其相关信号通路与肿瘤的关系的研究做一综述.
关键词： Twist 上皮-间质转化(EMT) PI3K/AKT Wnt 信号通路 -
肝细胞癌(HCC)对索拉非尼耐药相关机制的研究进展
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是常见的恶性肿瘤之一.分子靶向药物索拉非尼是不能手术切除的进展期HCC的一线疗法.但部分HCC对其耐药性的出现影响了总体疗效,耐药可分为原发性(HCC原本就对索拉非尼缺乏敏感性)和获得性(开始敏感,治疗过程中出现耐药)两类,其机制尚不清楚.HCC对索拉菲尼的耐药机制主要表现在肝癌细胞自身和肿瘤微环境两个方面:前者包括细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、铁死亡(ferroptosis)受抑制和肿瘤起始细胞(tumor-initiating cell,T-IC)等;后者包括外泌体(exosome)和血管选定等.本文对其相关研究进展进行总结.
关键词： 细胞表型 自噬 上皮-间质转化(EMT) 铁死亡 肿瘤起始细胞(T-IC) 外泌体 血管选定 索拉非尼 -
小RNA在器官纤维化上皮-间质转化(EMT)中的作用
小RNA是一类长度约22~28个核苷酸的非编码小分子RNA,近年来发现其在转录后水平和翻译水平的基因调控过程中发挥重要作用.上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,它在生理和病理过程中发挥了重要作用.近年来发现小RNA在各种器官纤维化的EMT过程中也起了重要作用.本文就小RNA在器官纤维化EMT过程中的作用作一综述,以期为器官纤维化疾病的治疗提供新的思路.
关键词： 小RNA 上皮-间质转化(EMT) 纤维化 -
上皮-间质转化与乳腺癌的研究进展
上皮‐间质转化（E M T ）是一种哺乳动物胚胎发育及组织发生过程中必需的生理现象，它是上皮细胞获得迁移能力的有效方法。自从被提出以来，大量的研究发现 EM T 与上皮来源恶性肿瘤的发生、发展、转移及侵袭过程密切相关，而且体内和体外实验也发现，EM T 在乳腺癌、肺癌、结肠癌等多种恶性肿瘤的原发性浸润和远处转移的过程中发挥重要作用。因此，探讨恶性肿瘤发生EM T 的分子机制，将为靶向EM T的分子治疗提供理论依据。本文就EM T 与乳腺癌的研究进展做一综述。
关键词： 上皮-间质转化(EMT) 乳腺癌 靶向治疗 -
PKC-ζ通过上皮-间质转化对肺腺癌侵袭转移的影响
目的 观察蛋白激酶C-ζ(PKC-ζ)通过上皮-间质转化(EMT)对肺腺癌侵袭转移的影响作用方法 应用RNAi技术将合成的小RNA干扰质粒瞬时转染入肺腺癌细胞系A549,进行Western blot检测转染,其后应用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力及转染细胞组中E-cadherin,Vimentin蛋白的表达情况 结果 转染72h后,与Scr/A549相比,SiPKC-ζ/A549中PKC-ζ蛋白表达量明显降低,同时SiPKC-ζ/A549的体外侵袭能力明显减弱(P＜0.05),并伴有Vimentin蛋白表达水平的降低和E-cadherin蛋白表达水平的升高(P＜0.05).结论 PKC-ζ通过促进肺腺癌细胞EMT的发生,从而促进肺腺癌细胞的侵袭和转移.
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miR-9在TGF-β诱导的人肾小管上皮细胞纤维化中的作用
目的 探讨miR-9对转化生长因子β(TGF-β)诱导的HK-2肾小管上皮细胞纤维化过程中的作用.方法 永生化的HK-2细胞给予5 ng/mL TGF-β刺激0、72 h,应用实时荧光定量PCR检测上皮钙黏素(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(Col1)、3型胶原蛋白(Col3)、纤连蛋白(fibronectin)、结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA和miR-9水平;Western blot法检测E-cadherin、α-SMA、Col1、Col3、fibronectin、CTGF的表达变化;给予5 ng/mL TGF-β刺激或不用TGF-β刺激的HK-2细胞,培养48 h,转染miR-9的模拟物、模拟物阴性对照,采用实时定量PCR及Western blot法检测上述指标的变化.生物信息学方法预测miR-9的靶基因,荧光素酶报告基因法进行验证.结果 TGF-β刺激72 h后,HK-2细胞中的miR-9、α-SMA、Col1、Col3、fibronectin、CTGF的水平增加,而E-cadherin水平下降;给予HK-2细胞转染miR-9模拟物后,miR-9、α-SMA、Col1、Col3、fibronectin、CTGF含量增加,E-cadherin含量下降;给予HK-2细胞TGF-β刺激48 h并转染miR-9抑制剂后,miR-9、α-SMA、Col1、Col3、fibronectin、CTGF含量下降,E-cadherin含量增加.通过TargetScan进行生物学信息预测,结果显示E-cadherin可能为miR-9的靶基因,并通过荧光素酶报告基因确证.结论 miR-9在人HK-2细胞转分化中起重要作用,并且通过抑制E-cadherin的表达而促进HK-2细胞转分化及纤维化.miR-9抑制剂可逆转TGF-β刺激HK-2细胞转分化及纤维化.
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黄连素对肺腺癌 A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响
目的：研究黄连素（BBR）对 A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响，初步探讨 BBR 抑制 A549细胞转移的机制。方法：用不同浓度的 BBR 作用于 A549细胞，MTT 法测定 A549细胞增殖水平，流式细胞仪检测 A549细胞的凋亡，Transwell 实验测定 A549细胞的迁移和侵袭能力，Western blot 测定 A549细胞中与 EMT 相关的蛋白 E - cadherin、Vimentin、Slug、Snail 的表达。结果：BBR 以浓度及时间依赖的方式抑制 A549细胞的增殖；流式细胞仪检测发现 BBR 作用于 A549细胞后凋亡率呈剂量依赖性增加；Western blot 显示 BBR 作用 A549细胞后，E - cadherin 表达升高，Vimentin、Slug、Snail 表达降低，Transwell 实验显示 BBR 作用于 A549细胞后，能够抑制其迁移和侵袭。结论：BBR 能抑制 A549细胞增殖，诱导其凋亡，通过促进 E - cadherin 表达和抑制Vimentin、Slug、Snail 的表达来抑制 EMT 的发生，从而抑制了 A549细胞的迁移和侵袭。
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蛋白激酶C激活对口腔鳞癌细胞上皮-间质转化的影响
目的:利用舌癌细胞系HN12探索激活蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)对口腔鳞癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法:采用质粒pCMV6-AC-GFP-P120ctn转染HN12细胞,使HN12过表达P120-连环蛋白(P120-catenin,P120ctn),再加入蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)激活剂佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA),采用实时荧光定量PCR、Western blot检测PMA处理前后PKC、P120ctn、E-cad的mRNA和蛋白表达,通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移试验等方法检测细胞的迁移和侵袭能力.结果:当PKC被PMA活化时,细胞形态发生改变,细胞中P120ctn的表达显著降低,E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)也随之降低,间质标记蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(Vimentin,Vim)的mRNA和蛋白表达水平显著升高,肿瘤细胞的迁移和侵袭能力显著提高(P＜0.05).结论:PKC可能通过磷酸化调节P120ctn的表达,参与细胞黏附的调控,促进EMT,在口腔鳞癌细胞的迁移和侵袭过程中发挥作用.
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下调尾型同源盒基因-2对结肠癌细胞的侵袭及迁移能力的影响及其机制
目的 观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制.方法 构建CDX2 RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX2基因的干扰效率;应用Transwell及划痕实验检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blotting及RT-PCR检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因(E-cadherin、ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail)表达的影响.结果 构建的CDX2 RNAi慢病毒载体可有效地抑制SW480、HT29细胞中CDX2基因的表达;转染LV-CDX2-shRNA组与转染空病毒组(LV-NT-shRNA)及空白对照组相比,侵袭、迁移能力显著增强(P＜0.05);且E-cadherin表达下降,ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail表达均升高.结论 下调CDX2可诱导EMT发生,从而增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力.
关键词： 尾型同源盒基因-2(CDX2) 结肠癌 侵袭 迁移 上皮-间质转化(EMT) -
宫颈癌细胞系中EMT相关基因的表达及其意义
目的 上皮-间质转化(EMT)是上皮来源的恶性肿瘤侵袭转移的重要机制之一,其特征为上皮细胞标志物表达下调(E-cadherin等)而间质细胞标志物(vimentin等)表达上调.本研究旨在探讨人宫颈癌细胞系EMT相关标志物的表达情况,以确定宫颈癌细胞是否发生EMT,并为确定相关的细胞研究模型奠定基础.方法 采用逆转录PCR方法检测4株人宫颈癌细胞系(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213)中E-cadherin、vimentin、Snail和Slug mRNA的表达;Western blotting检测E-cadherin和vimentin的蛋白表达;免疫细胞化学方法检测Snail和Slug的蛋白表达.结果 vimentin和Snail mRNA在4种细胞中均有表达,E-cadherin和Slug mRNA在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达.E-cadherin蛋白在SiHa和RJC-1细胞表达,vimentin蛋白在HeLa和CS1213细胞表达.Snail蛋白在4个细胞株都有表达,Slug蛋白在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达.结论 HeLa和CS1213表现出间质细胞表型,SiHa和RJC-1则表现为上皮细胞表型.
