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丁香柿蒂汤颗粒定性定量方法研究
目的 建立丁香柿蒂汤颗粒的定性定量研究方法.方法 TLC法对丁香、生姜、人参进行定性鉴别;HPLC法测定丁香酚、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量.结果 TLC鉴别斑点清晰,分离度好;丁香酚、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1分别在0.126～12.644 mg·mL-(r=0.9996)、0.037～0.743mg·mL-1(r=1.0000)、0.073～1.462 mg·mL-(r=0.9999)内与峰面积呈良好线性关系;平均回收率分别为98.9％(RSD为0.79％)、96.0％(RSD为2.4％)、94.2％(RSD为2.1％).结论 所建方法专属性良好,精密度高,重复性好,可用于丁香柿蒂汤颗粒的质量控制.
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吴茱萸汤复方颗粒定性定量方法研究
目的 建立吴茱萸汤复方颗粒的定性定量方法.方法 采用薄层色谱法(TLC)对方中吴莱萸、生姜、人参3味药材饮片进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对吴莱萸碱和吴茱萸次碱进行定量测定,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),以乙腈(A)-水(B)(51∶49)为流动相,流速0.8mL·min-1,检测波长256 nm,柱温25℃;采用HPLC法对人参皂苷Re和人参皂苷Rb1进行定量测定,色谱柱为Agilent Zorbax TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相进行洗脱(0～35 min,19％A;35～55 min,19％～29％A;55～70 min,29％A;70～100 min,29％～40％A),流速1 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温25℃.结果 TLC斑点清晰,分离度良好,阴性无干扰;吴莱萸碱在0.041～1.02 μg与峰面积线性关系良好,r=1.000;吴茱萸次碱在0.041～1.03μg与峰面积线性关系良好,r=0.9999;人参皂苷Re在0.298～7.438 μg与峰面积线性关系良好,r=1.000;人参皂苷Rb1在0.300～7.509 μg与峰面积线性关系良好,r=1.000;平均回收率分别为99.3％、96.3％、100.5％、100.6％,RSD分别为1.3％、0.51％、1.2％、2.1％(n=6).结论 建立的方法简便、专属性强、结果准确,可作为吴茱萸汤复方颗粒的质量控制标准.
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人参皂苷Re对Caco-2细胞葡萄糖吸收功能的影响
目的:研究人参皂苷Re对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响.方法:Caco-2细胞培养21 d后加入根皮素及人参皂苷Re孵育,采用稳定性同位素示踪技术,以LC-MS/MS法测定细胞中葡萄糖的吸收量,检测GLUT2蛋白和mRNA表达变化.结果:根皮素能够显著抑制葡萄糖的吸收,50μmol/L人参皂苷Re能够改善受根皮素抑制的葡萄糖吸收量,并增加GLUT2蛋白及mRNA表达.结论:人参皂苷Re能够促进Caco-2细胞对葡萄糖的吸收,并能扭转根皮素对葡萄糖吸收的抑制作用,其作用机理的发挥可能与调控GLUT2有关.
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应用核-壳色谱柱优化参须中人参皂苷含量测定方法研究
目的:应用核-壳色谱柱优化人参须药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、及人参皂苷Rb1的高效液相色谱含量测定方法.方法:采用Kinetex核-壳色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.6 μm)；流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～6 min:19％A;6～13 min:19％～29％A；13～18 min:29％～40％A；18 ～25 min:40％～19％A)；流速为1.8mL/min,检测波长203 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.4242～3.3936 μg(r1=0.9992)、0.6504～5.2032 μg(r2=0.9992)和1.3442～10.7536 μg(r3=0.9992),平均加样回收率分别为99.91％(RSD =0.9％)、100.59％(RSD=1.6％)和102.64％(RSD=1.8％).结论:该测定方法简便可行,准确可靠,重现性好,结果稳定,可用于人参及参须的含量测定.
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胶束电动毛细管色谱法分离分析人参中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re
目的:测定人参中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量.方法:采用胶束电动毛细管色谱法分离,紫外检测器200 nm下检测.结果:通过对缓冲溶液的优化,得到佳分离条件为20 mmol/L SDS、30 mmol/L Na2B4O7、60 mmol/L胆酸钠溶液,在此条件下,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的分离度可达3.4.结论:该方法的重现性、精密度良好,满足分析的要求.
关键词： 胶束电动毛细管色谱法 人参皂苷Rg1 人参皂苷Re -
HSCCC法分离制备人参果中人参皂苷Re
目的:运用高速逆流色谱(HSCCC)从人参果中分离制备高纯度人参皂苷Re.方法:应用制备型高速逆流色谱仪,以乙酸乙酯-正丁醇-水(1:6:7)上相为固定相,下相为流动相,组成溶剂系统对人参果提取物进行分离.结果:所得人参果皂苷Re经HPLC分析,纯度达到98.84%.结论:此方法重现性好、试剂消耗少、方法简单,可以应用于人参果中人参皂苷Re的分离制备.
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HPLC-ELSD法同时测定益心宁神片中5种成分的含量
目的:建立同时测定益心宁神片中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd、五味子醇甲和五味子乙素5种成分含量的方法.方法:采用HPLC-ELSD法,Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温35℃;ELSD漂移管温度110℃;气体流速3.6 L/min.结果:人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd、五味子醇甲和五味子乙素的进样量分别在1.1371 ～ 16.9755 μg(r1=0.9999)、1.4028 ～21.042 μg(r2 =0.9996)、1.7136～25.704tμg(r3 =0.9998)、2.5044～ 37.566μg(r4=0.9997)、1.0384～15.576μg(r5 =0.9996)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.45％、98.56％、98.52％、98.05％、98.49％.结论:该方法操作简单、准确、重复性好,可用于益心宁神片的质量控制.
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HPLC法测定活血止痛片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量
目的:建立活血止痛片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法.方法:采用HPLC法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量.结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1四者的平均加样回收率分别为98.89%、97.73%、99.58%、99.18%,RSD分别为1.42%、1.02%、1.51%、1.32%.结论:该方法简便、灵敏,重现性好,可作为活血止痛片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法.
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活力素胶囊提取工艺优选
目的:寻找活力素胶囊中内容物提取的佳提取工艺.方法:以人参皂苷Re和蒽醌的含量为指标,采用正交设计法和高效液相色谱法探讨活力素胶囊的佳提取工艺条件.结果:活力素的佳提取工艺是用8倍量的50%的乙醇提取2次,每次2 h.
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HPLC法同时测定百事乐胶囊中5种成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定百事乐胶囊中金丝桃苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、姜黄素5种有效成分的含量.方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.μm);流动相为0.1％磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱;进样量20 mL;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长348 nm(0～25 min),203 nm(26～64 min),425nm(65 ～ 95 min).结果:金丝桃苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、姜黄素在6.3～ 31.5.μg/mL、97.5 ～487.5 μg/mL、66 ～ 330μg/mL、101～505 μg/mL、1 ～5 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9997、0.9995、0.9996、0.9996、0.9997;平均加样回收率均大于95.0％.结论:该方法简便、准确、灵敏度高,稳定性和重现性良好,可为百事乐胶囊的质量控制提供依据.
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人参皂苷Re对球囊损伤所致大鼠血管内膜增生及NF－κBp65信号通路的影响
目的：研究人参皂苷Re对大鼠颈动脉球囊损伤所致血管内膜增生的作用及其对NF－κB p65炎症信号通路的影响。方法：40只SD大鼠随机分组为5组：假手术组，模型组，人参皂苷Re低、中、高剂量组。除假手术组外，其余组大鼠均用2F球囊导管建立颈动脉球囊损伤模型，制模后次日灌胃给药，假手术组和模型组给予等体积蒸馏水，人参皂苷低、中、高剂量组大鼠分别给予12．5、25、50 mg／kg人参皂苷Re。连续给药14 d后取损伤段颈动脉，HE染色观察血管形态学改变，并测定血管管腔面积（ lumen area，LA）、内膜面积（ intima area，IA）、中膜面积（ media area，MA），计算内膜／中膜面积比（ IA／MA）；real－time PCR法检测肿瘤坏死因子－α（ tumor necrosis factor－α， TNF－α）和白细胞介素－1β（ interleukin－1β，IL－1β）的mRNA水平；免疫组织化学法检测血管壁增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和核因子κB（nuclear factor－kappa B，NF－κB）p65蛋白的表达。结果：与假手术组相比，模型组大鼠血管腔明显变窄（P＜0．01），血管壁TNF－α、IL－1β的mRNA水平及PCNA、NF－κB p65蛋白的表达均明显增高（P＜0．05）；与模型组比较，人参皂苷Re中、高剂量组血管内膜增生明显减轻（P＜0．05），血管壁TNF－α和IL－1β的mRNA水平及PCNA和NF－κB p65的蛋白表达则明显下调（ P＜0．05）。结论：人参皂苷Re能减轻球囊损伤所致大鼠颈动脉内膜增生，其机制可能与抑制NF－κB p65炎症信号通路有关。
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高丽红参进口药材标准含量测定方法的改进
目的 通过改进供试品溶液的制备过程,采用紫外检测器建立测定高丽红参含量的高效液相色谱(HPLC)法,以改进进口药材标准中的含量测定方法.方法 色谱条件为Agilent poroshell C18柱(4.6 mm×75 mm,5μm);以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.7 mL·min-1,检测波长为203 nm,柱温为25℃.供试品溶液采用水饱和正丁醇加热回流提取进行制备.结果 改进方法的人参皂苷Rg1在0.920 9 ～9.208 5μg、人参皂苷Re在0.928 0～9.279 8μg、人参皂苷Rb1在0.955 2～9.551 8 μ.g范围内与峰面积呈良好的线性关系;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1平均加样回收率分别为100.9％,102.5％,101.7％(n=6).本方法结果比原标准方法的结果略高,相对偏差均小于5％.结论 改进后的方法操作简单准确,重现性好,能提高检测效率.
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HPLC测定益气复脉口服液中红参的含量
目的 建立HPLC测定益气复脉口服液的有效成分红参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1总含量的方法.方法 色谱柱YMC ODSA柱,(150 mm×4.5 mm,粒径5 μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为203 nm,柱温为25 ℃.结果 人参皂苷Rg1在0.4008～2.0040 μg范围内(r=0.9998)、人参皂苷Re在0.4188～2.0940 μg范围内(r=0.9998)、人参皂苷Rb1在1.1880～5.9400 μg范围(r=0.9998)线性关系良好;RSD分别为2.10%、1.86%、2.33%; 加样回收率分别为100.16%、102.94%、96.12%.结论 本方法准确、重复性好,可用于该制剂中红参的质量控制.
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生脉饮中人参总皂苷与麦冬总皂苷的含量测定
目的 对生脉饮中的人参总皂苷与麦冬总皂苷的含量进行测定.方法 对照人参皂苷Re,采用香草醛比色法对生脉饮之中的人参总皂苷含量进行测定,采用高氯酸法对生脉饮中的总皂苷含量进行测定,并在两种测量方法之间建立换算系数,从而获得依据鲁斯考皂苷元为对照品所计算出来的麦冬总皂苷的含量.结果 测量得出生脉饮中人参总皂苷的线性范围在0.0752~0.2006 mg之间(r=0.9993),其中平均回收率为100.64%,RSD为2.88%;总皂苷的线性范围在0.1881~0.8151 mg之间(r=0.9996),计算平均回收率为101.33%,RSD为2.01%.根据计算公式可以的出生脉饮中的麦冬总皂苷含量为C=(A-1.82B)/4.16.从而得出生脉饮中人参总皂苷、总皂苷以及麦冬总皂苷的含量分别为18.1448 mg/g、39.1208 mg/g、1.4657 mg/g.结论 本次研究中的测量方法可以对生脉饮中人参和麦冬的总皂苷的含量进行精确的测量,有利于对相关药物中两种物质进行有效的质量控制.
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人参皂苷Re对运动性疲劳模型大鼠MDA含量和SOD活性的影响
目的 通过人参皂苷Re对运动性疲劳模型大鼠丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性影响的实验研究,阐明人参皂苷Re抗运动性疲劳的作用机制.方法 将30只雄性SD大鼠,随机均分为空白对照组、模型对照组和人参皂苷Re组,共3组,每组10只.人参皂苷Re组每天灌胃给药50 mg/kg,模型对照组和空白对照组灌胃等量生理盐水,人参皂苷Re组和模型组大鼠在灌胃1h后进行中等运动强度的水平跑台运动,速度为15 m/min,坡度0°,跑台20 min,间歇40 min,再跑台20 min,每天1次,连续14 d.采用硫代巴比妥酸法测定各组织丙二醛含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性.结果 人参皂苷Re组血清、肝组织和骨骼肌MDA含量均明显低于模型对照组(P＜0.01);人参皂苷Re组红细胞、肝和骨骼肌SOD活性均明显高于模型组(P＜0.01).结论 人参皂苷Re能降低运动性疲劳模型大鼠血清、肝和骨骼肌MDA含量,提高红细胞、肝和骨骼肌SOD活性,从而达到抗疲劳的作用.
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人参皂苷Re促进自然衰老大鼠学习记忆作用及其机理的研究
目的 研究人参皂苷Re对自然衰老大鼠学习记忆功能的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用Morris水迷宫法观察人参皂苷Re对大鼠学习记忆功能的影响,同时采用电生理学方法观察人参皂苷Re对大鼠突触长时程增强(LTP)的作用.结果 人参皂苷Re能显著对抗自然衰老引起的记忆获得障碍,对麻醉大鼠海马齿状回基础突触传递有增强作用,且能形成突触长时程增强形象.结论 人参皂苷Re有改善大鼠学习记忆障碍的作用,该作用可能与其增强基础突触传递、促进LTP形成有关.
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HPLC-MS同时测定复方阿胶浆中的5种药效成分
目的：建立同时测定复方阿胶浆中绿原酸、党参炔苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re等药效成分的定量方法。方法采用TSQ Quantum Access Max三重四级杆质谱仪，电喷雾负离子模式（ESI-）；Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；以水-0.02%甲酸为流动相A，以乙腈-0.02%甲酸为流动相B，梯度洗脱，柱温为30℃。结果绿原酸、党参炔苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re分别在2.05~51.68μg·mL-1（r=0.9993）、2.33~58.80μg·mL-1（r=0.9996）、1.13~28.99μg·mL-1（r=0.9995）、1.23~30.63μg·mL-1（r=0.9992）、2.25~56.45μg·mL-1（r=0.9993）范围内线性关系良好；加样回收率均在99.14%~99.82%之间，RSD均小于5%。结论该方法可操作性强、稳定，结果准确。应用该方法可对复方阿胶浆进行全面准确的质量评价。
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HPLC法同时测定三芎止痛膏中三七皂苷R1和人参皂苷的含量
目的 建立同时测定三芎止痛膏中三七4种有效成分含量的方法 .方法 采用Kromasil KR100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和水为流动相梯度洗脱,检测波长203 mm.结果 4种成分均达到良好分离,在测定范围内线性良好,回收率均在98%～100%之间.结论 所建立的含量测定方法 简便可行、重复性好,可用于三芎止痛膏的质量监控.
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HPLC法测定糖脂清胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1、Re及三七皂苷R1的含量
目的 建立复方制剂糖脂清胶囊中多种有效成分的含量测定方法.方法 用D101型大孔吸附树脂柱富集纯化制剂中的人参皂苷Rg1、Rb1、Re及三七皂苷R1等有效成分,采用HPLC法对制剂中人参皂苷Rg1、Rb1、Re及三七皂苷R1等有效成分进行含量测定.结果 Rg1、Rb1、Re和R1线性范围分别为1.88～11.28μg,1.76～10.56μg,0.294～1.764μg,0.752～2.256μg.该方法回收率Rg1为101.51%(RSD=0.75%),Rb1为100.58%(RSD=0.46%),Re为100.29%(RSD=1.01%),R1为98.64%(RSD=O.73%).结论 本测定方法简便可行、重复性好,可用于本制剂中各有效成分的含量测定.
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参辛胶囊质量标准研究
目的研究复方制剂参辛胶囊的质量标准.方法采用HPLC法对参辛胶囊中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re进行含量测定,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(95:405),检测波长203nm.采用薄层色谱法对制剂中的主要药味人参、羚羊角、细辛等进行定性鉴别.结果人参皂苷Rg1线性范围为1.032～9.288μg(r=0.999 8,n=5),平均回收率为99.76%,RSD=2.10%.人参皂苷Re线性范围为0.850～7.650μg(r=0.999 8,n=5),平均回收率为96.24%,RSD=1.67%.薄层图谱斑点清晰,可鉴别出与人参、细辛对应的斑点,阴性对照无干扰.结论该方法准确、重现性好,可用于参辛胶囊的质量控制.
