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应用FCM对磁共振多谱图像分割的探讨
本文利用磁共振图像的多参数性,应用模糊C均值法(fuzzyc-means,FCM)对磁共振多谱图像进行自动分割处理.使分割图像效果高于用FCM方法对单幅磁共振加权图像的分割结果.从而能更精确地对磁共振图像进行空间定位.
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FCM分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素对实验结果的影响
目的:结合FCM分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素,总结对实验结果的影响.方法:采取FCM对血液淋巴细胞免疫表型进行分析.结果:血液采集1h和6h时,淋巴细胞免疫表型结果测定没有显著性的意义,P>0.05.单核细胞和中性粒细胞中的一种表面白细胞共同抗原表达进行比较,P<0.05.借助于荧光/散射光射门设置淋巴细胞门,用三色荧光/侧向散射光设门设置淋巴细胞门,其中的门中淋巴细胞百分比和总标本中的淋巴细胞比值和散射光设门比较,明显较大,P<0.05.散射光设门和荧光/散射光设门对T细胞亚群结果分析中有着大致相同的结果,P>0.05.双色、单色以及三色免疫荧光技术对淋巴细胞免疫表型分析结果比较,P<0.05.结论:FCM分析血液淋巴细胞免疫表型对实验结果产生一定的影响,血液擦剂[请与作者核对]之后,就要及时的实现免疫荧光染色和固定,时间不能推迟6h,三色荧光/侧向散射光设门和荧光/散射光设门对淋巴细胞亚群分析结果好于散射光设门对T细胞亚群的分析,血液淋巴细胞免疫表型三色用FCM分析时,这种方法和双色免疫荧光分析比较,较好,同时单色免疫荧光分析,尽可能的不采用.
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一种结合FCM的Mumford-Shah混合模型MR图像分割方法
为了实现MB图像中多目标感兴趣区域的提取,提高MR分割精度.提出一种在Mumford-Shah混合模型中耦合模糊C均值聚类(FCM)的MR图像分割方法.首先,采用FCM对图像进行预分割,解决初始零水平集曲线的定位问题;其次,在Mumford-Shah混合模型的保真项中耦合感兴趣区域的FCM信息.所提取方法对脑白质、脑灰质、脑室平均重叠率分别为76.05%、72.61%和71.18%,而使用FCM方法分别为64.77%、62.38%和60.79%.实验结果表明:与FCM区域信息结合的Mumford-Shah模型在MR图像分割处理中有较高的分割精度与抗噪声能力.
关键词： 图像分割 MRI Mumford-Shah模型 FCM 水平集 -
套细胞淋巴瘤一例误诊分析
套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一类较少见的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL),形态学方法常难以将其与其他类型小细胞淋巴瘤相鉴别.为了提高对MCL的认识,报道1例误诊为滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)的MCL,总结该病例临床资料及实验室检查特点.结果显示:流式细胞术(flow cytometry.FCM)及免疫组织化学染色检查符合MCL的特征,细胞遗传学检查发现了包括t(11;14)在内的多种染色体异常.结论:MCL为难以确诊的疾病,间期荧光原位杂交、多重荧光原位杂交、FCM以及免疫组织化学染色等检查有助于MCL的诊断.
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国内首例抗HPA-5b引发的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜的检测、诊断及分析
本研究旨在探讨抗HPA-5b抗体引发的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP)的实验检测及临床诊断.临床监测患儿血小板计数及其他临床表现;多重PCR及DNA测序检测患儿及其父母HPA-1-21 bw系统基因型;流式细胞术(FCM)和血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测及鉴定患儿及其母亲血清中的血小板特异性抗体.结果表明:患儿临床症状较轻,基因分析显示患儿为HPA-5 ab,父亲为HPA-5 ab,母亲为HPA-5aa;患儿母亲血清中含与父亲血小板反应的血小板特异性抗体为抗HPA-5b抗体.结论:该病例为抗HPA-5b抗体引起的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜.
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基于模糊连接度的FCM分割方法在医学图像分析中的应用
图像分割的一个重要应用领域是医学图像的分割.我们针对医学图像的模糊特点和实际应用的要求,结合模糊连接度阈值分割和模糊C均值聚类两种分割方法的优点,提出一种新的交互式医学图像分割方法.首先计算整幅图像的模糊连接度,通过闽值分割提取出感兴趣的对象,并将模糊连接度作为图像的冗余特征;然后在由冗余特征和原图像特征构成的二维聚类空间中,利用模糊C-均值聚类方法优化上一步骤的分割结果,提高分割准确度.我们以CT和MR图像为实验对象进行了验证,实验结果表明这是一个有效的方法.
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流式细胞仪与免疫磁珠分选法纯化脐血嗜碱粒细胞的比较
近年来研究结果显示,嗜碱粒细胞在过敏反应炎症中担当重要角色,是炎症的发起者和传播者~[1].嗜碱粒细胞占外周血白细胞的小部分(<1%),提纯一定数量的嗜碱粒细胞就需要较多的血,这限制了对它的深入研究.产妇脐带血血量较多,可得到50-150 ml的量,而且脐带血尚未直接受到外界抗原刺激,是研究过敏性疾病发病机制的理想标本.本研究比较流式细胞仪分选和免疫磁珠分选两种方法提纯产妇脐带血中嗜碱粒细胞的分选效率.
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T淋巴细胞亚群和病毒感染
细胞免疫功能在人体抗病毒感染中发挥重要作用,各种病毒感染性疾病的转归与细胞免疫功能尤其是与T淋巴细胞功能密切相关.临床上目前缺乏体内直接检测T淋巴细胞功能的手段,主要靠体外间接的方法来评估.如检测外周血中T淋巴细胞及各亚群数量和比例、增殖功能及产生细胞因子的能力,主要方法有ELISA、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、流式细胞术(FCM),其中FCM鉴于其独特的优势在临床中应用广泛.
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流式细胞术的发展、原理及临床应用
流式细胞术(FCM)是用流式细胞仪测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术.是近年来随着细胞生物学、分子生物学、激光技术、电子计算机技术等学科的高度发展而形成的一种对细胞或生物粒子的结构、功能以及相互间作用进行多参数分析的技术，具有速度快、敏感性高、准确性好等优点[1,2].下面就从FCM的发展、原理以及临床应用上进行一综述,供大家参考.
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流式细胞术的发展、原理及临床应用
流式细胞术(FCM)是用流式细胞仪测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术.是近年来随着细胞生物学、分子生物学、激光技术、电子计算机技术等学科的高度发展而形成的一种对细胞或生物粒子的结构、功能以及相互间作用进行多参数分析的技术,具有速度快、敏感性高、准确性好等优点[1,3].下面就从FCM的发展,原理以及临床应用上进行一综述,供大家参考.
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FCM联合多重PCR技术在慢性淋巴细胞白血病基因异常检测的效果分析
目的 探讨流式细胞术(FCM)技术联合多重PCR技术在慢性淋巴细胞白血病基因异常检测的效果.方法选择30例白血病患者的外周血标本和骨髓标本及10例阴性对照标本,均采用FCM技术与多重PCR技术检测基因异常表达情况.结果在30例慢性粒细胞白血病患者中,FCM检测有25例发生基因甲基化转录阳性,阳性率为83.3%,PCR甲基化检测结果都为阳性.而在对照组中,FCM与PCR检测都未发生阳性表达情况.结论 FCM技术联合多重PCR技术既可以定性又可以定量检测白血病基因甲基化表达情况,可成为白血病治疗过程中疗效评价的重要参考方法.
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p53基因的原核表达与活性测定
目的 原核表达P53重组蛋白,检测P53蛋白对人类白血病细胞系K562增生的影响.方法 运用PCR技术鉴定了pET-p53重组质粒导人BL21菌株中p53基因的存在,并在IPTG的诱导下,大量产生外源基因产物.通过Ni-NAT亲和层析柱纯化分离P53蛋白,SDS-PAGE确定该蛋白准确性.以不同浓度的P53重组蛋白诱导K562细胞后,用MTT比色法、集落形成法、流式细胞术(FCM)测定P53蛋白对靶细胞增生的影响.结果 成功地构建了含人野生型p53基因的原核表达载体,纯化了P53重组蛋白.活性测定结果表明,随着P53重组蛋白浓度的增加,K562细胞存活率显著降低,并发现该蛋白能促进肿瘤细胞凋亡,且呈现明显的剂量依赖性,经相关分析,细胞抑制率与P53蛋白浓度呈正相关(r=0.8981),其半数抑制浓度(IC50)为6.74μg/ml.结论 P53重组蛋白具有促进K562细胞凋亡的作用.
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基于HPCPC白首乌C21甾体苷诱导PC-3细胞凋亡研究
目的 从白首乌块根中提取纯化C21甾体苷类化合物,并研究其诱导PC-3肿瘤细胞凋亡作用.方法 运用高效离心分配色谱,从白首乌总苷中分离纯化C21甾体苷,并利用FCM检测对PC-3细胞周期和凋亡的影响,利用AO荧光染色观察凋亡细胞形态学.结果 提取物对PC-3细胞的诱导凋亡作用具有量-效关系,且可以浓度依赖性的提高细胞G2/M期比例;AO染色荧光显微镜观察,提取物可诱发明显的核断裂和核固缩,以及凋亡小体的形成.结论 运用高效离心分配色谱分离纯化白首乌中的C21甾体苷,提取物能诱导PC-3肿瘤细胞凋亡,发生G2/M期阻滞,这可能是它抗肿瘤作用机制之一.
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胃癌DNA倍体、SPF与肿瘤生物学行为的关系
目的 以2010年4月-2010年10月从手术室取材的43例新鲜胃癌组织标本为研究对象,研究胃癌细胞DNA的异倍体率和S期分数(SPF＞15％)百分率与肿瘤临床病理因素的相关性.方法 采用流式细胞仪测定43例胃癌细胞DNA含量及倍体、S期分数以及对应的癌旁细胞的DNA含量及倍体、S期分数,对照临床资料进行分析.结果 胃癌组织细胞的异倍体率及SPF＞ 15％)的百分率与癌旁组织细胞的差别有统计学意义(P＜0.01).在肿瘤的分化程度(高中分化、低分化及印戒细胞癌,P＜0.05)、浸润程度(黏膜及黏膜下、肌层、肌层至浆膜外,P＜0.05)、TNM分期(Ⅰ -Ⅱ、Ⅲ-V期,p＜o.05)之间的差别有统计学意义,而在淋巴结转移(阳性、阴性,P＞0.05)差别无统计学意义.结论 用流式细胞仪分析胃癌DNA含量及倍体类型、S期分数对疾病的早期诊断、研究胃癌的生物学行为,了解疾病预后、指导临床综合治疗具有重要价值.
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流式细胞仪的原理和临床中的应用
流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测.我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有700多台.
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FCM检测氧化苦参碱对人胃癌细胞BCL-2/BAX表达的影响
目的 考察氧化苦参碱体内外抗人胃癌细胞的分子生物学机制.方法 培养人胃癌MGC-803细胞,并接种于裸鼠皮下,制备人胃癌裸鼠移植瘤模型,用氧化苦参碱进行干预.实验结束时,FCM分别检测人胃癌MGC-803细胞及裸鼠移植瘤细胞BCL-2、BAX的表达.结果 氧化苦参碱干预后,人胃癌细胞及其裸鼠移植瘤细胞BCL-2表达降低,而BAX表达增加,与阴性对照组比较差别均具统计学意义(P<0.05).结论 氧化苦参碱能上调人胃癌细胞BAX的表达,下调BCL-2的表达,这可能是氧化苦参碱抗胃癌MGC-803细胞的分子生物学机制.
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华蟾素对膀胱癌T24细胞株的体外抑制作用(综述)
目的 研究华蟾素对膀胱癌T24细胞的体外抑制作用,探讨其对膀胱癌的临床应用价值.方法 用MTT法测定不同浓度华蟾素和配伍丝裂霉素C(MMC)作用下的T24细胞24h、48h的抑制作用;用流式细胞术(flow cytometer,FCM)测定不同浓度华蟾素作用T24细胞48h后细胞周期表现.结果 (1)华蟾素组:25、2.5、0.25、0.025、0.001mg/ml华蟾素作用T24细胞24h后,生长抑制率分别为52.7％、47.2％、38.9％、41.7％、33.3％;作用48h后,分别为58.3％、50.0％、47.4％、47.4％、44.8％.MMC组:0.001、0.000 5mg/ml MMC作用24h后,抑制率分别为71.1％、60.6％;48h后,分别为75.0％、72.2％.配伍组:0.001 mg/mlMMC与2.5mg/ml华蟾素、0.000 5mg/mlMMC与2.5mg/ml华蟾素,作用24h后抑制率分别为80.6％、68.4％,两组间差异有统计学意义(P＜0.05);48h后抑制率分别为84.2％、72.2％.与MMC组比较,相同MMC浓度下配伍组24h、48h抑制率差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)0.025、0.25、2.5mg/ml华蟾素作用T24细胞48h后发现T24细胞G0/G1期分别占76.3％、78.7％、79.6％.结论 华蟾素对体外T24细胞有明显抑制作用,且呈时间及浓度依赖性;具有G0/G1期阻滞作用;与MMC有协同作用;可作为中晚期膀胱癌药物治疗的一种选择.
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应用流式细胞术检测原发免疫性血小板减少症患者血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的表达及其临床意义
免疫性血小板减少症(Primary immune thrombocytopenia，ITP)是一类由体液和细胞免疫异常导致血小板破坏增多的疾病[1-2]。发病机制与免疫功能异常引起的自身抗血小板抗体产生关系密切。血小板表面膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa是血小板及巨核细胞主要的膜糖蛋白，GPⅡb/Ⅲa抗体是ITP患者自身抗体的主要成分之一。目前测定血小板膜糖蛋白特异性抗体的方法主要有放射免疫微球法[3]、单克隆抗体俘获血小板抗原技术( MAIPA)[4]，我们用流式细胞术(FCM)检测血小板减少患者及正常人血小板GPⅡb/ⅢRa的变化，探讨FCM检测血小板GPⅡb/Ⅲa在诊断免疫性血小板减少性紫癜中的意义。
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端粒酶活性及粘附分子CD44 v5/v6与卵巢癌恶性行为的相关性研究
目的:研究卵巢癌组织中端粒酶活性、粘附分子CD44 v5/v6的表达及其与卵巢癌恶性行为的关系.方法:TRAP-ELISA法半定量测定卵巢癌组织的端粒酶活性:FCM(Flow cytometrv)技术分析DNA含量及粘附分子CD44 v5/v6的阳性表达率.结果:①端粒酶活性随着卵巢癌临床分期、病理分级的升高而显著增高(P＜0.05或0.01),淋巴结转移及DNA异倍体组端粒酶活性显著高于无转移及DNA二倍体组(P＜0.05或0.01);②随着临床分期、病理分级的升高,粘附分子CD44 v5/v6阳性表达率显著增加(P＜0.01或0.05);淋巴结转移及DNA异倍体组CD44 v5/v6阳性表达率明显高于无转移组及DNA二倍体组(P＜0.01);③随着端粒酶活性增加,CD44 v5/v6阳性表达率明显增高(P＜0.01).结论:肿瘤细胞增殖活性相关的端粒酶活性和肿瘤转移相关的CD44 v5、v6都与卵巢癌的恶性程度及转移潜能密切相关,且二者之间存在相关性.联合检测可从不同的角度评价卵巢癌的恶性行为.
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多种教学方法在机能实验学教学中的应用
机能实验学是将生理学、病理生理学和药理学的实验课综合为一体,更新教学内容,如删除重叠性实验、压缩验证性实验、增加综合性和设计性实验,形成的独立的实验课程.机能实验学课程单独制订教学计划,确定授课内容,独立对学生进行考核.开设机能实验学课程旨在加强学生综合能力的培养,完成学科间的交叉渗透和教学内容的协调统一,实现资源共享,完成实验教学由单纯验证理论到能力培养的根本转变.教学方法的选择与优化对实现教学目标至关重要,在教学进展的不同阶段,承德医学院机能实验学教研室根据教学内容、授课对象的不同尝试应用了多种教学方法,取得了较好的教学效果,现总结报告如下.
