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不同月龄婴儿接种腮腺炎疫苗的免疫效果比较
8~11和12~17月龄婴儿分别为44人(其中8月龄34人)和52人,每人皮下注射常州延申生物技术有限公司生产的S79株冻干流行性腮腺炎活疫苗0.5ml.于免前和免后1个月分别采血,双份血清同时用HI和ELISA法检测血清抗体.HI抗体滴度≥1:2为阳性,抗体由阴转阳或滴度≥4倍增长为免疫成功.腮腺炎血凝素购自中国药品生物制品检定所;腮腺炎抗体ELISA试剂盒购自美国Clark公司.
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麻疹血凝素效价的稳定性
麻疹血凝素(HA)是检测麻疹血凝抑制(HI)抗体水平的试剂之一.
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H1N1流感病毒血凝素对人肺细胞的损伤作用及机制研究
目的:研究H1N1流感病毒血凝素HA对人胚肺成纤维细胞的损伤作用并初步探讨其机理.方法:合成2009 H1N1的HA基因全长,分别将HA的PCR产物和pEGFP-N1质粒经Hind Ⅲ和EcoRⅠ酶切电泳、纯化、连接并转化大肠杆菌DH5α,构建真核表达质粒pEGFP-N1/HA.质粒转柒293细胞,检测其转染效率,并收获细胞总蛋白进行Western blotting检测.将阳性质粒转染MRC-5细胞,CCK-8检测HA的表达对细胞增殖活性,线粒体膜电位检测试剂盒检测其对细胞的早期凋亡的影响,ATP检测试剂盒检测HA的表达对ATP水平的改变.结果:PCR电泳检测获得分子量为1700 bp左右的目的条带,菌落PCR鉴定HA片段成功插入pEGFP-N1载体.荧光显微镜下检测pEGFP-N1/HA转染293细胞有明显荧光,Western blotting结果显示pEGFP-N1/HA转染细胞有单一的目的蛋白表达.HA的表达可明显抑制MRC-5细胞活力,HA的高表达降低MRC-5细胞的线粒体膜电位及ATP水平.结论:H1N1流感病毒HA对人肺细胞的损伤作用可能与影响肺细胞的线粒体功能有关.
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甲型H1N1流感重症患者病毒血凝素和神经氨酸酶基因特性分析
目的 通过分析2009-11-02~12-04期间北京市6例甲型H1N1流感重症患者咽拭子中病毒的血凝素、神经氨酸酶基因特性,了解其基因进化特点,以期对下一步甲型H1N1流感的防控和重症的治疗提供理论依据.方法 使用实时荧光PCR方法,检测重症患者样本为甲型H1N1流感病毒阳性样本,利用测序引物扩增血凝素、神经氨酸酶基因,测定核苷酸序列,利用生物信息软件拼接序列;分析重要基因位点,对其进行基因进化、耐药性分析.结果 6件测定样本血凝素、神经氨酸酶基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1)核苷酸、氨基酸的同源性分别为99.2%及99.5%,有8个血凝素基因的氨基酸发生替换,为65、100、145、185、216、220、338及391位,其中145位位于抗原决定簇A区,220位位于抗原决定簇D区,同时是受体结合位点的后壁;有5个神经氨酸酶基因的氨基酸发生了替换,为59、106、232、248及365位,其中106、232、248位位于酶活性区域;未发生神经氨酸酶基因275位H→Y的替换.结论 北京市甲型H1N1流感重症患者病毒血凝素和神经氨酸酶基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1)高度同源,部分血凝素基因、神经氨酸酶基因有氨基酸替换,但其作用不清.所有测定样本未发生对达菲类药物的耐药性突变.
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上海市闵行区禽类接触人群甲型流感病毒抗体调查
甲型流感是由甲型流感病毒引起的人和动物共患的一种呼吸道传染病,传染性强,传播途径易实现,病原体常变异导致难以有效控制.甲型流感病毒有多种亚型,已证实有15种血凝素(H1~H15)和9种神经氨酸酶(N1~N9).目前人群中流行主要为H1和H3型,其中H3型居多;而在禽类特别是水禽中各个亚型的血凝素均已被发现[1~3].1997年香港的H5N1、2003年底至2004年初亚洲地区H5N1以及1998年至1999年我国内地和香港H9N2禽流感病毒人间感染事件的发生,都昭示了人感染禽流感病毒的高度可能性.
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流行性感冒病毒裂解疫苗质量控制与稳定性研究
[目的]研制安全有效的流行性感冒病毒裂解疫苗. [方法] 将A1,A3和B三株流感病毒分别接种鸡胚,收取尿囊液,经乙醚裂解病毒,制成疫苗. [结果] 该疫苗主要技术指标均符合WHO规程要求,并具有良好的免疫效果,同时稳定性试验取得令人满意的结果. [结论] 该疫苗是安全有效的.
关键词: 流行性感冒病毒裂解疫苗 血凝素 稳定性 -
流感病毒变异与流行性感冒流行和预防
流感病毒不断变异是导致流行性感冒反复流行的基本因素.变异的表达是多方面的,但经常并与流行关系密切的是病毒抗原性变异,主要是指病毒包膜表面血凝素(H)的改变.
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副粘病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白结构与功能的研究进展
副粘病毒的血凝素-神经氨酸酶和融合蛋白具有重要的生物学活性,其中前者具有受体识别活性、神经氨酸酶活性和促进融合蛋白的细胞融合作用.本文对近年来血凝素-神经氨酸酶结构和功能方面的研究进展进行了综述.
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2013-2014年南京市流感病毒H3N2亚型血凝素分子遗传特性分析
2013-2014年南京市流感病原监测系统分离到31株流感病毒H3N2亚型毒株,通过提取病毒RNA,反转录―聚合酶链反应(reverse transcriptase―polymerase chain reaction,RT―PCR)扩增血凝素(hemagglutinin,HA)基因片段,进行PCR产物纯化、测序并分析其遗传进化特征.结果显示,31株分离株与疫苗株A/Texas/50/2012之间的核苷酸和氨基酸进化距离分别为0.0102和0.0121,核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.9%~99.6%和97.2%~99.3%.遗传进化分析表明,分离株的HA基因分属不同的进化分支,3株2013年分离株属3B基因型,3株2014年分离株属3C.1基因型,2株2014年分离株属3C.2b基因型,其余23株属3C.3a基因型.与疫苗株相比,分离株的分子特征表现为发生N128A/T和P198S/A(去信号肽排列)氨基酸位点变异,均位于抗原决定簇B;分离株抗原决定簇上发生变异的位点共计24个;7株分离株出现126 NWT糖基化位点,3株分离株糖基化位点45NSS和144NNS消失.结果提示,2013-2014年南京市流感病毒H3N2亚型的HA基因较疫苗株发生了较大变异,疫苗对病毒的预防效果需重新评估.
关键词: 流感病毒H3N2亚型 血凝素 分子特征 -
028几丁质微粒作为佐剂与血凝素疫苗进行鼻内接种在抗流感病毒感染中的作用
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广谱流感疫苗的研究进展
流行性感冒(简称流感)的频频暴发严重危害人类健康和公共卫生 ,已引起全球范围内的高度关注.预防流感有效和经济的措施是接种疫苗 ,但流感病毒的持续变异可逃逸人群已有的免疫应答 ,目前使用的季节性流感疫苗仅对亚型内抗原匹配较好的毒株产生免疫保护作用 ,难以有效应对因抗原漂移或抗原转换而产生的无法预料的流感大流行.因此 ,研发对流感病毒不同亚型均具有交叉免疫保护作用的广谱流感疫苗具有重要意义.近年来 ,流感病毒广谱中和抗体的发现、对流感病毒抗原保守区域及细胞免疫机制的深入研究、疫苗免疫策略的优化等都为广谱流感疫苗的研发提供了新思路.本文简述了近几年基于血凝素、基质蛋白、核蛋白等多种流感靶抗原的广谱流感疫苗的研究进展.
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禽流感病毒与人禽流感的研究进展
禽流感病毒(AIV)与甲型流感病毒同属正黏病毒科(Orthonuxoviridae).迄今根据血凝素H,共有16个亚型,神经氨酸酶N共有9个亚型,可组成144种亚型.虽然H1~16均存在于禽中,但迄今已报道可直接感染人的AIV为H5、H7、H9及H10.其中1997年香港特区流行的亚型是H5N1,有18例患者,6例死亡.1999、2000、2004年在中国内地及香港特区感染人的AIV主要是H9N2亚型.有报道,H7N2、H7N3、H7N7、H10N7亚型分别曾在荷兰、美国、加拿大、埃及感染人,但病例数少,且未有患者死亡.
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鼻内接种C3d融合的血凝素产生的抗流感病毒感染的保护作用
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055 麻疹病毒血凝素和/或融合蛋白DNA疫苗免疫对病毒攻击后细胞因子应答的影响
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C3d增强麻疹血凝素中和抗体滴度的研究
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022 植物来源的麻疹病毒血凝素蛋白诱导小鼠产生中和抗体
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138 重组流感H5病毒血凝素疫苗对人体的安全性及免疫原性
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表达甲型H1N1流感病毒血凝素重组腺病毒的构建及免疫学评价
构建表达甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)的重组腺病毒,探讨其经滴鼻和肌肉注射免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的sss能力.通过人工合成HA基因,克隆其至穿梭质粒pShuttle-CMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装携带H1N1 HA基因的重组腺病毒Ad-HA.RT-PCR和免疫荧光检测HA基因在Vero细胞中成功的转录和表达.CsCl密度梯度离心纯化重组腺病毒,通过鼻腔免疫和肌肉注射免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗HA抗体滴度.结果显示Ad-HA通过鼻腔免疫和肌肉注射两种途径均能刺激小鼠产生抗HA的抗体,鼻腔免疫能在初次免疫后两周刺激机体产生抗体,高抗体效价可达1:103,4,而肌肉注射初次免疫两周后未出现明显的免疫应答,加强免疫后抗体水平出现明显的上升,高抗体效价可达1:104.结果表明表达甲型H1N1流感病毒HA蛋白的重组腺病毒通过肌肉注射和滴鼻免疫两种途径均能刺激小鼠产生针对HA的IgG抗体.
关键词: 甲型H1N1流感病毒 血凝素 重组腺病毒 免疫原性 -
中国部分地区 H7N9禽流感暴发
H7N9流感病毒是一种鸟类流感病毒,但在鸟类中致病性较低。目前发现 H7N9禽流感病毒是东亚鸟类和我国东部鸡的流感病毒基因重组而来。因为鸟类感染 H7N9流感病毒不发病,相比大多数鸟类感染 H5N1禽流感病毒后死亡,所以前者发现较为困难。H7N9禽流感病毒对人类有很高的致病性,但人与人之间不易传播。尽管 H7N9禽流感病毒对奥司他韦和扎那米韦敏感,但由于先前对禽流感病毒H7N9产生的血凝素和神经氨酸酶缺乏了解,而且一旦病毒发生突变可能导致它在人与人之间传播,因此 H7N9禽流感仍存在全国性暴发的可能性。
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流行性感冒预防和治疗的新进展
流行性感冒(流感)病毒易变异而导致流感的反复流行.近10年来由于管理加强,疫苗改进及新的抗病毒药的应用,在流感的防治上有明显进步,现综述如下.一、流感的流行情况及监测流感是一种经典的传染病,迄今,每年仍有大量的发病和很高的死亡率.Turkulov等[1]报道,每年全世界大约有1 000万人感染流感病毒.Newton等[2]报道在美国每年有20 000多患者死于流感.20世纪曾发生6次世界大流行,分别在1900、1918、1957、1968、1977和1998年,其中1957、1968、1977年的世界大流行均是从我国大陆开始的[3].以1918-1919年的世界大流行严重,至少有2 100万人丧生.流感的反复大流行是与流感病毒的变异密切相关的.流感病毒是一种有完整包膜的RNA病毒,病毒表面的两种主要抗原为血凝素(H)和神经氨酸酶(N).H为一种分子质量(m)为75 000u的糖蛋白,其作用在于H与红细胞表面糖蛋白的受体结合而引起红细胞凝集;H与宿主细胞结合而使细胞受染.N亦是一种糖蛋白,可以水解细胞膜上许多多糖受体末端的N-乙酰神经氨酸,此酶的功能是促进病毒从细胞内释放和聚集,对感染的扩散起重要作用.