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  • 针灸对环磷酰胺化疗小鼠血清中IL-7和IL-18含量的影响

    作者:刘海伟;路玫;曹大明;于冬冬;滕迎春

    目的 通过观察针灸治疗前后环磷酰胺(CTX)化疗模型小鼠血清中白介素-7 (IL-7)和白介素-18(IL-18)含量的变化,探讨针灸改善化疗后所导致免疫抑制的分子生物学机制.方法 选用清洁级昆明种雄性小鼠80只,按体重随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组20只.除空白组外,其余各组均腹腔注射CTX制备小鼠骨髓抑制模型.针刺组和艾灸组选取大椎、膈俞、肾俞、足三里进行针刺和艾灸治疗,空白组、模型组每日陪同抓取和固定,不做任何治疗.依次经过治疗后3d和5d,在每组中分两次分别处死10只小鼠,摘眼球取血,采用ELISA法检测血清中IL-7和IL-18的含量.结果 治疗3d至5d,针刺组和艾灸组白细胞均开始回升,且针刺组疗效优于艾灸组;在3d组和5d组中,针刺组和艾灸组血清中IL-7含量均高于模型组(P<0.05),且针刺组疗效优于艾灸组(P<0.05);在3d组和5d组中,针刺组和艾灸组血清中IL-18含量均高于模型组(P<0.05),且在5d组中,针刺组疗效优于艾灸组(P<0.05).结论 针刺和艾灸可以明显上调CTX化疗小鼠血清中IL-7、IL-18的含量,减轻CTX引起的免疫抑制,提高机体的免疫功能.

  • IL-7对PHA-抗CD3LAK细胞抑制效应的研究

    作者:叶萍;程一櫂;王艳;范亚欣;郭连英;钱振超

    文章将IL-7与IL-2,PHA及αCD3联用诱生PHA-αCD3 LAK细胞,应用活细胞计数、MTT和APAAP等方法测定了细胞增殖活性、mIL-2R的表达、外源性IL-2的消耗、细胞毒活性和效应细胞表型等指标,并分析比较了IL-7的加入对以上指标的影响.结果表明II-7的加入使PHA-αCD3 LAK细胞消耗IL-2的量、mIL-2R表达的量和细胞的增殖能力降低,细胞毒活性减弱,并伴有CD8+细胞百分率的下降.这一结果呈现出的IL-7的抑制作用尚未见报道,有进一步研究的价值.

  • 乙型肝炎病毒 B、C 基因型细胞免疫和肝功能差异与白细胞介素-7诱导滤泡辅助性 T 淋巴细胞关系的研究

    作者:华忠;戴亚萍;王栋;陆忠华;汤勤;汪铮;裴豪;朱银芳;付德才;顾锡炳

    目的:探讨 HBV B、C基因型感染者特异性CTL和肝功能差异是否与IL‐7诱导滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)差异有关。方法无锡市第五人民医院2013年8月至2015年1月就诊的CHB患者67例,另取30名健康献血员作为健康对照组。比较B、C基因型感染者,HBeAg阳性和HBeAg阴性患者,高ALT水平与低ALT 水平患者外周血IL‐7、Tfh、IL‐21、HBV特异性CTL、非特异性CTL、HBV DNA、ALT和 TBil水平。同时对IL‐7相关因素进行多因素回归分析。计量资料采用 t检验,计数资料采用χ2检验。结果 CHB患者67例中,男48例,女19例,平均年龄(35.1±11.4)岁。C基因型感染者32例,B基因型感染者35例;HBeAg阳性40例,HBeAg阴性27例;高ALT 水平17例、低ALT水平50例。C基因型感染者外周血 IL‐7、Tfh、IL‐21、HBV 特异性 CTL 水平分别为(20.79±4.82)ng/L、(3.93±0.82)%、(24.77±7.52)ng/L 和(0.20±0.04)%,低于 B 基因型感染者的(29.13±8.17) ng/L、(5.92±1.92)%、(39.94±24.00) ng/L和(0.40±0.06)%,差异均有统计学意义(t值分别为5.027、5.595、3.553和15.133,均 P<0.01);C基因型感染者外周血非特异性CTL、HBV DNA、ALT和TBil水平均高于B基因型感染者,差异均有统计学意义(t值分别为4.899、6.815、2.763和4.020,均 P<0.01)。HBeAg阳性患者外周血IL‐7、Tfh、IL‐21、HBV特异性CTL水平低于 HBeAg阴性患者,差异均有统计学意义(均 P<0.01);HBeAg 阳性患者外周血非特异性CTL、HBV DNA、ALT和TBil水平高于HBeAg阴性患者,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。高ALT水平患者外周血IL‐7、Tfh、IL‐21、HBV特异性CTL水平低于低ALT水平患者,两组比较差异均有统计学意义(均 P<0.01);高ALT水平患者外周血非特异性CTL、HBV DNA水平高于低ALT水平患者,两组比较差异有统计学意义(均 P<0.01)。 HBV DNA、IL‐21和非特异性 CTL 与 IL‐7有相关性(均P<0.01)。结论 B、C基因型感染者的HBV特异性CTL和肝功能差异可能与IL‐7诱导Tfh差异有关。

  • CD4+ CD25+ CD127dim/-调节性T淋巴细胞对肝星状细胞增殖及功能的影响

    作者:陈永平;程瑗;金晓芝;阳韬;王春莹;刘俊;郑明华

    目的 了解CD4+ CD25+ CD127dim/-调节性T淋巴细胞在体外对肝星状细胞(HSC)增殖以及功能的影响,初步探讨调节性T淋巴细胞促肝纤维化的机制。方法传代培养HSC LX-2,将免疫磁珠细胞分选(MASC)法分离所得慢性乙型肝炎患者调节性T淋巴细胞与HSC LX-2按不同方式共培养5d,以单独培养的HSC作为对照,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测共培养HSC增殖情况,ELISA法检测上清液中转化生长因子(TGF)β1含量,放射免疫法检测HSC分泌HA、PCⅢ水平。统计学处理采用LSD-t检验。结果 5例调节性T淋巴细胞与HSC比例为1.5∶1时HSC增殖为明显,10例直接接触共培养与使用Transwell系统共培养调节性T淋巴细胞与HSC吸光度值分别为(0.713±0.032)、(0.735±0.028) cpm,均较对照组的(0.677±0.029)cpm增殖明显(t=5.4003,8.7878;均P<0.01)。10例直接接触共培养与Transwell组细胞上清液中TGFβ1浓度分别为(781.59±76.45)、(813.53±60.62)pg/mL,显著高于对照组的(722.51±59.66) pg/mL(t=4.0014,6.1653;均P<0.01);HA浓度分别为(433.57±27.90)、(445.40±23.73)ng/mL,显著高于对照组的(415.83±19.44)ng/mL(t=3.3124,5.5231;均P<0.01);PCⅢ浓度分别为(21.93±1.71)、(23.12±1.87) ng/mL,显著高于对照组的(20.10±1.49)ng/mL(f=4.8082,7.9436;均P<0.01)。且Transwell组各项结果均显著高于直接接触组(t=3.3875,2.1639,2.2107,3.1354;均P<0.05)。结论CD4+ CD25+ CD127dim调节性T淋巴细胞可促进共培养的HSC增殖及其HA、PCⅢ的分泌。体外实验证明,CD4+ CD25+ CD127dim/-调节性T淋巴细胞具有促进肝纤维化的重要作用。

  • SA-IL-7融合蛋白的制备及其膀胱内灌注对小鼠表浅性膀胱癌的治疗效应

    作者:张振;贺利民;马磊;李金龙;许晓玲;高基民

    目的:制备链亲和素标记的白介素7(streptavidin-tagged interleukin-7,SA-IL-7)融合蛋白,评价其对小鼠表浅性膀胱癌治疗的效果.方法:构建pET24a-SA-IL-7重组质粒,制备SA-IL-7融合蛋白.流式细胞术检测SA-IL-7融合蛋白与生物素化膀胱癌细胞MB49的结合,胸腺细胞增殖法检测SA-IL-7融合蛋白促进胸腺细胞增殖的生物学活性.应用小鼠表浅性膀胱癌模型评价膀胱内灌注SA-IL-7的治疗效果,观察小鼠生存期,免疫组化法检测各组小鼠肿瘤浸润CD8+T细胞.结果:成功制备的SA-IL-7融合蛋白可锚定于生物素化的MB49细胞表面,结合率达(96.6±1.3)%;同时能够促进胸腺细胞的增殖.SA-IL-7融合蛋白能够锚定于小鼠生物素化的膀胱黏膜表面7d以上,而未生物素化的膀胱黏膜在始终未检测到IL-7的存在.在小鼠表浅型膀胱癌模型中,MB49细胞接种后的第80天,IL-7灌注治疗组90%小鼠死亡,而SA-IL-7组60%小鼠存活且未出现肿瘤(P<0.05);且SA-IL-7灌注治疗组小鼠肿瘤组织中浸润CD8+T细胞明显增多(P<0.01).SA-IL-7治愈的15只表浅型膀胱癌模型小鼠中,11只能够抵抗膀胱内MB49细胞的第二次接种,而对照组15只小鼠仅1只幸存(P<0.01).结论:SA-IL-7融合蛋白膀胱内灌注能够产生抗肿瘤免疫应答和明显的治疗效果,有可能成为免疫治疗浅表性膀胱癌的新方法.

  • 湿疹患者外周血白细胞介素7、37的表达及临床意义

    作者:张宁;陈宏;魏婷;门剑龙

    目的:探讨白细胞介素(IL)-7和IL-37在湿疹患者外周血单一核细胞(PBMC)中mRNA的表达及与湿疹面积及严重度指数(EASI)、部分实验室指标的相关性.IL-7、IL-37在湿疹发生发展中的作用机制及白芍总苷(TGP)在湿疹中的治疗作用.方法:采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法测定PBMC中IL-7、IL-37 mRNA的表达量并进行分析.结果:湿疹患者PBMC中IL-7 mRNA和IL-37 mRNA表达量显著高于健康对照组(均P<0.01);IL-7和IL-37 mRNA表达量与EASI评分之间均呈正相关(r=0.417,P<0.05);湿疹患者IL-7 mRNA表达量与嗜酸性粒细胞计数呈正相关(r=-0.029,P<0.05);经TGP治疗2周后湿疹患者IL-7和IL-37 mRNA表达量降低(P<0.05);治疗4周后湿疹患者IL-7和IL-37 mRNA表达量比治疗2周后明显降低(P<0.05).结论:IL-7在湿疹发生发展过程中可能起一定的促炎作用,而IL-37可能起一定的抗炎作用;TGP可能通过IL-7及IL-37两因子或其传导通路对湿疹产生治疗作用.

  • 卵巢上皮性癌患者白细胞介素-7测定的临床意义

    作者:钟惠珍;谢幸;谢建华;叶大风;吕卫国;陈怀增

    目的探讨卵巢上皮性癌患者血清和腹腔液白细胞介素-7(interleukin-7,IL-7)测定的意义.方法ELISA检测32例卵巢上皮性癌患者外周血、腹腔液及3例原代培养细胞上清液IL-7水平,并将16例健康妇女血清和16例良性卵巢上皮性肿瘤患者血清、腹腔液作为对照组.结果原代培养卵巢癌细胞上清液不能测得IL-7;卵巢癌患者血清IL-7水平显著高于健康妇女及良性对照组(P<0.05),卵巢癌患者腹腔液IL-7水平与良性对照组相比差异无显著性(P>0.05).卵巢癌和良性对照组的血清和腹腔液IL-7水平之间均存在正相关(P<0.05);卵巢癌患者血清和腹腔液IL-7水平与相应CA125值相关性不显著(p>0.05).结论卵巢癌细胞不分泌IL-7,但可刺激宿主免疫细胞分泌IL-7;腹腔IL-7无显著升高可能与卵巢癌腹腔局部免疫抑制有关.

  • 白细胞介素7剪接变异体的克隆和序列分析

    作者:冯凤兰;彭羽瑜;潘德顺;李晓波;金小宝;朱家勇

    目的:克隆白细胞介素-7(IL-7)剪接变异体,筛选出在IL-7开放阅读框内剪接变异体,为其生物活性的研究打基础.方法:运用自行设计的IL-7引物,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,分离正常培养的肝癌细胞株HepG2、结肠癌细胞株HT29 IL-7 mRNA,再对电泳所获条带进行克隆、测序和分析.结果:肝癌细胞株HepG2、结肠癌细胞株HT29都能检测到IL-7 mRNA,而且从培养癌细胞株分离出多条新带,经亚克隆及测序,证实这些条带是来源人IL-7基因、但缺乏不同外显子的IL-7剪接变异体cDNA;通过和IL-7 cDNA比对分析,发现其中5个剪接变异体在IL-7开放阅读框内.结论:IL-7剪接变异体广泛存在于各种肿瘤细胞中.对其进一步的研究,将为癌症病人的免疫调节紊乱和临床免疫治疗提供新的研究方向.

  • 急性冠脉综合征患者血清IL-7的表达水平及其对预后的影响

    作者:周代星;王定淼;占成业;严丽;钟强;李树生

    目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清白细胞介素(IL)-7表达水平并分析其与预后的关系.方法:选择ACS患者130例(急性心肌梗死70例,不稳定型心绞痛60例)、稳定型心绞痛患者33例(SAP组)、健康体检者89例(健康对照组),使用ELISA法检测各组IL-7水平并进行比较,并跟踪随访130例ACS患者的病情,通过Logistic回归分析判断IL-7水平与预后的关系.结果:与健康对照组和SAP组比较,UAP组和AMI组IL-7水平均显著升高[(1.84±0.47) pg/ml、(2.11±0.63) pg/ml比(4.87±0.52) pg/ml、(5.15±0.71) pg/ml,P<0.05或P<0.01],健康对照组与SAP组,UAP组与AMI组之间IL-7水平无显著差异(P均>0.05);Logistic回归分析显示,ACS患者血清中IL-7的水平是发生不良心血管事件的独立危险因素(OR=1.212,95%CI:1.061~1.418).结论:白细胞介素-7作为机体重要的炎症因子之一,其水平在急性冠脉综合征患者的异常升高,可能具有判断疾病预后的重要价值.

  • 转化生长因子β1、白细胞介素2、7与卵巢上皮性癌患者腹腔局部免疫功能的关系

    作者:吕卫国;叶大风;谢幸;陈怀增;傅云峰

    目的:探讨转化生长因子β1(TGFβ1)和白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-7(IL-7)与卵巢上皮性癌腹腔局部免疫功能的关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,测定49例卵巢上皮性癌,18例卵巢良性上皮性肿瘤患者血清、腹腔液中TGFβ1和IL-2、IL-7水平,比较两组之间各细胞因子水平的差异性及其相互关系.结果:卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1 、IL-2水平与良性对照组差异无显著性(P>0.05),IL-7水平则高于对照组(P<0.05);腹腔液中TGFβ1 水平明显高于对照组(P<0.01),IL-2水平明显低于对照组(P<0.05),IL-7水平则与对照组相比差异无显著性(P>0.05).Ⅲ期患者腹腔液中TGFβ1 水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01).卵巢上皮性癌患者血清与腹腔液中TGFβ1 、IL-2相关性不显著,而IL-7水平存在正相关;卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1、IL-2和IL-7水平两两之间均无明显相关性;但腹腔液中TGFβ1 与IL-2、IL-7水平均存在显著的负相关,IL-2与IL-7水平则无明显相关性.结论:卵巢癌存在腹腔局部免疫缺陷,腹腔液中TGFβ1、IL-2和IL-7参与这一过程,且3者之间可能存在一定的关系.

  • 卵巢上皮癌IL-7mRNA表达的研究

    作者:程蓓;谢幸;叶大风;陈怀增;吕卫国

    目的:研究卵巢上皮癌组织及细胞株中IL-7mRNA的表达,探讨IL-7是否参与了卵巢癌的局部免疫调节,为IL-7用于卵巢癌基因治疗提供实验基础.方法:以6例正常卵巢组织为对照,采用RT-PCR方法测定42例卵巢上皮癌组织及2株卵巢癌细胞株SKOV3和3AO IL7mRNA的表达.结果:6例正常卵巢组织未能检测到IL-7mRNA的表达,42例卵巢上皮癌组织只有2例表达IL-7mRNA,表达率为4.8%,SKOV3和3AO均不表达IL-7mRNA.结论:卵巢上皮癌组织IL-7mRNA表达率低,推测IL-7未能在卵巢癌癌灶和腹腔局部发挥重要抗肿瘤作用.

  • 白细胞介素7对多发性硬化症患者不同亚群自然杀伤细胞的影响

    作者:苏宁;施福东

    目的:观察白细胞介素7(IL-7)对多发性硬化症(MS)患者不同亚群自然杀伤(NK)细胞的影响。方法抽取10例MS患者的静脉血,提取外周单个核细胞后体外培养,采用流式细胞术检测NK细胞亚群及IL-7受体α( IL-7Rα);分别加入50 ng/mL的IL-7或等体积培养液,检测分泌干扰素(IFN-γ)的NK细胞比例及细胞存活率。结果本组MS患者NK细胞分为CD-3 CD+56、CD-3 CD+16、CD-3 CD+573个亚群,其IL-7Rα表达的荧光强度分别为185.0±38.56、139.30±14.30、137.60±23.03;CD-3 CD+56与CD-3 CD+16、CD-3 CD+57亚群比较,P均<0.05。 IL-7刺激后,CD-3 CD+56亚群分泌IFN-γ的细胞比例增长了9.71%±2.59%、细胞存活率增长了4.80%±1.88%,均高于CD-3 CD+16亚群的1.91%±0.93%、2.49%±1.00%和CD-3 CD+57亚群的2.90%±1.09%、1.87%±0.57%,P均<0.01。结论 IL-7可以促进各亚群NK细胞分泌IFN-γ并提高其存活率,且对CD-3 CD+56亚群的影响高于CD-3 CD+16和CD-3 CD+57亚群。

  • 慢性乙型肝炎患者干扰素治疗前后血清IL-7及调节性T细胞的变化

    作者:童新灯;李敏;胡国信;熊晓佳;彭雁忠

    目的 研究慢性乙型肝炎患者干扰素治疗前后血清IL-7及调节性T细胞的变化.方法 本研究共有慢性乙型肝炎(CHB)患者67例,慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者18例,健康对照者14例.CHB组患者予以派罗欣(聚乙二醇干扰素α-2a注射液180 μg,1次/周)抗病毒治疗24周,治疗结束后,按HBV-DNA定量不同再分为完全应答组(16例)、部分应答组(15例)和无应答组(36例);HBV携带组和健康组不做任何治疗.分别于0周、24周检测外周血IL-7、CD4+ CD25+调节性T细胞百分比.结果 在0周时,外周血IL-7含量和CD4+ CD25+调节性T细胞在完全应答组、部分应答组及无应答组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);24周时,完全应答组与部分应答组、无应答组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);完全应答组治疗前后比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 慢性乙型肝炎患者干扰素治疗后血清IL-7升高,调节性T细胞降低,可能与病毒应答有关.

  • 原发性胆汁性肝硬化患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T淋巴细胞及其免疫功能分析

    作者:姜艳芳;JIN Qing-long;李婉玉;XU Hui-ning;牛俊奇

    原发性胆汁性肝硬化(PBC)的发病机制尚不清楚,目前尚无特效治疗方法.天然调节性T淋巴细胞(Tregs)可能在其发病机制中起关键作用,并有可能为其免疫治疗提供新的治疗手段.

  • 持续气道正压通气对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者外周血IL-7的影响

    作者:胥正艳;曾泉;王晓强;胡国华

    目的:通过研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者经持续气道正压通气(CPAP)治疗前后外周血中IL-7和调节性T (T reg )细胞的水平变化,探讨IL-7和T reg细胞在OSA HS患者中病理生理机制。方法采集OSA HS患者(OS-A HS组,51例)治疗前以及健康体检者(对照组,35例)人群外周静脉血标本,分别采用ELISA及流式细胞术(FCM )检测受试者外周血中IL-7和Treg细胞水平,并分析OSAHS患者外周血IL-7和Treg细胞水平与睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)和低血氧饱和度(SaO2)的相关性;OSAHS组患者经CPAP治疗后再次检测上述各项指标,比较其治疗前后的水平变化。结果 OS-AHS组患者治疗后外周血IL-7表达[(186.41±18.10)pg/mL]较治疗前明显增高[(87.39±5.16)pg/mL],Treg细胞数量在治疗后为(1.28±0.19)%,较治疗前[(0.95±0.11)%]明显升高。相关性分析显示,OSAHS患者外周血IL-7及 Treg细胞水平与低SaO2呈正相关(r=0.679,r=0.681,P<0.01);OSAHS患者外周血IL-7及 Treg细胞水平与 AHI呈负相关(r=-0.653, r=-0.632,P<0.01)。结论 OSAHS患者外周血中IL-7和Treg细胞水平较对照组降低可能是OSAHS患者高水平系统炎症的原因之一,CPAP治疗能有效提高OSAHS患者的IL-7与Treg细胞水平,改善患者机体免疫失衡状态。

  • 重组人白细胞介素7蛋白的表达、复性和纯化

    作者:彭羽瑜;陈鉴华;严思;李晓波;金小宝;朱家勇;潘德顺

    目的 表达、复性和纯化重组人白细胞介素7 (recombinant human interleukin-7,rhIL-7)蛋白,为其功能研究打下基础.方法 在已经对IL-7基因TA克隆的基础上进行亚克隆,插入pET-21b载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序成功后转化入大肠杆菌BL21 (DE3)中,优化rhIL-7蛋白表达条件,并对表达的蛋白进行复性及纯化,利用免疫印迹鉴定重组蛋白.结果 表达的蛋白与预期相对分子质量17 400相符,经优化后确定蛋白表达条件为:诱导温度为37℃、IPTG诱导浓度为1.0 mmol/L、诱导时间为2h,且rhIL-7的复性效率较好(约50%),纯化后蛋白纯度高达95%以上,并经Western blot证实表达的蛋白为rhIL-7.结论 成功获得高纯度的rhIL-7复性蛋白.

  • IL-7和IL-2协同对肺结核患者Th1/Th2平衡调节作用的研究

    作者:杨晓敏;董德琼;杨渝浩;李华芬

    目的探讨白细胞介素7(IL-7)、白细胞介素2(IL-2)协同对肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的影响.方法随机将20例肺结核病患者和15例健康对照者PBMC按加入刺激物的不同分为RPMI-1640组、PPD组、PPD+IL-7组、PPD+IL-2组,PPD+IL-7+IL-2组,培养72小时后收集上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组培养上清液中IFN-γ、IL-4的水平.结果与PPD组相比,加入IL-7或IL-2均能有效促进肺结核患者及健康对照者PBMC分泌IFN-γ(P<0.05),IL-7可抑制IL-4的合成(P<0.05);同时加入IL-7和IL-2可显著增加肺结核病患者及健康对照者PBMC分泌IFN-γ(P<0.01),抑制IL-4的合成(P<0.05).结论IL-7和IL-2协同可显著促进IFN-γ分泌,抑制IL-4合成,从而调节Th1/Th2平衡,对结核分枝杆菌感染患者发挥保护性的免疫反应.

  • 白细胞介素7对肺结核患者Th1/Th2平衡的调节作用

    作者:杨晓敏;董德琼;杨渝浩;李昶;李华芬

    目的探讨白细胞介素7(IL-7)对肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子d(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)的影响.方法随机将20例肺结核患者和15名健康人PBMC分为RPMI1640组、PPD组、PPD+IL-7组、PPD+anti-IL-7组,培养72小时后收集上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组培养上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10的水平.结果与PPD组相比,加入IL-7能有效促进肺结核患者及健康人PBMC分泌IFN-γ(108.6±62.0~156.8±78.6,201.2±60.4~290.3±108.4)和TNF-α(463.5±172.2~880.9±249.3,1 163.0±381.6~1 716.8±522.6),抑制IL-4(58.8±14.7~36.9±13.2,47.8±17.7~35.3±11.8)和IL-10(154.4±45.9~111.0±34.4,136.9±46.4~99.3±45.7)的合成;而加入antiIL-7可抑制IFN-γ和TNF-α的分泌,促进IL-4和IL-10的合成.肺结核患者各组IFN-γ、TNF-α水平均低于健康人各对照组(P<0.05),而IL-4、IL-10差异无显著性意义(P>0.05).Ⅱ型肺结核患者组IFN-γ、TNF-α水平低于Ⅲ型肺结核患者组(P<0.05),IL-4、IL-10水平高于Ⅲ型肺结核患者组(P<0.05).结论IL-7通过诱导IFN-γ、TNF-α分泌,抑制IL-4、IL-10合成,从而调节Th1/Th2平衡,对结核分枝杆菌感染患者发挥保护性的免疫反应.IL-7是一种结核免疫调节剂.

    关键词: 结核 白细胞介素7
  • IL-7和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体的构建

    作者:宁昌;余长林;李建军;胡锴勋

    目的:构建白细胞介素7(IL-7)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的重组腺病毒载体,为进一步感染干细胞奠定基础.方法:将目的基因IL-7克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质粒,继而在H293细胞中扩增,纯化后测定病毒滴度.结果:pShuttle-EGFP-mIL7重组穿梭质粒经酶切鉴定得到0.5kb和5.1kb 2条带;pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体质粒经酶切鉴定得到14K、11.8K、3.1kb、2.66kb、2.47K、1.45K、0.6K 7条带;TCID50法测定纯化后的病毒滴度为2×1010pfu/ml.结论:pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体构建成功.

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