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B超监视下宫腔内手术391例临床分析
对于早孕绒毛产前诊断,不孕症诊治以及某些困难节育手术,在B超监视下操作,可提高安全性和准确性.我们于1989年5月~2001年7月对上述受术者在B超下进行宫腔内操作共391例,收到较好的效果,现报道如下.
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20例人早孕绒毛滋养细胞的体外培养
目的 建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外培养的方法. 方法 采用0.25%胰酶和Ⅱ型胶原酶混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜对培养出的细胞进行形态评价;用细胞角蛋白和波形蛋白单克隆抗体检测细胞纯度. 结果 联合消化法的细胞生长迅速,接种6~8d可以传代,原代细胞生长时间明显缩短,所得细胞纯度达95%. 结论 联合消化法是一种较有效的人早孕绒毛滋养细胞培养方法.
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超声诊断剂量与人早孕绒毛细胞凋亡
目的:检测超声诊断剂量与人早孕绒毛细胞凋亡的关系.材料与方法:将拟进行人工流产的24例早孕(45~60d)妇女随机分为4组:对照组为空白照射组、10min组、20min组和30min组.应用Hp 8500彩色多普勒超声诊断仪,对孕囊进行不同时间的持续照射,照射后24h取材.用原位末断脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)技术检测上述各组绒毛组织凋亡细胞.结果:超声照射后10min组绒毛组织凋亡细胞与对照组无差别,20min组和30min组凋亡细胞明显增加,显著大于对照组和10min组(P<0.001).结论:诊断超声持续照射早孕孕囊组织>10min可引起绒毛滋养层细胞凋亡增加,且随照射时间延长而继续增加.
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survivin基因在早孕绒毛与蜕膜中的表达及米非司酮对其的影响
survivin是一种凋亡抑制蛋白,大多数人类的恶性肿瘤组织及人与鼠的胚胎组织中有表达[1].本研究通过检测早孕绒毛和蜕膜组织中survivin mRNA及其蛋白产物的表达,以证实绒毛和蜕膜中survivin基因的存在,并初步探讨米非司酮对其表达的影响.
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孕激素对早孕绒毛滋养层细胞胰岛素样生长因子基因表达的影响
胰岛素样生长因子(IGFs)可通过自分泌和(或)旁分泌形式, 对滋养层细胞起到促增殖和(或)诱导分化的作用,影响其激素分泌、特异蛋白质合成及其侵蚀性,对胚胎组织的生长、发育、分化都具有重要的调节作用.本研究的目的是观察孕激素对体外培养的人早孕绒毛滋养层细胞IGFs基因表达的影响.
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胎盘生长因子及瘦素在早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义
妊娠滋养细胞疾病( gestational trophoblastic disease,GTD)是一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾病.根据滋养细胞的分化程度、绒毛间质多少及生物学行为,GTD可分为葡萄胎、侵蚀性葡萄胎(invasivemole)、绒毛膜癌(chorionic carcinoma)及胎盘部位滋养细胞肿瘤[1].本研究排除胎盘部位滋养细胞肿瘤.
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盆腹腔诊断性超声对早孕绒毛增殖的影响
超声广泛应用于产科,但国内外虽曾进行了一系列诊断超声安全性研究,尚不能为确定诊断超声对胚胎、胎儿安全与否提供可靠证据[1].因而,我们用B型诊断超声仪经腹照射妊娠6~8周孕囊,通过流式细胞仪(FCM)动态监测绒毛细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平,探讨诊断超声对绒毛增殖发育的影响,以评价目前诊断超声对胚胎的安全性,从分子水平进一步为临床正确应用超声提供理论依据.
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PPARγ在滋养细胞疾病中的表达及意义
过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)属于核内激素类受体家族,是配体激活的转录因子,它能够结合位于靶基因增强子中的过氧化物酶体增殖反应元件,调节靶基因的转录,从而在细胞分化、肿瘤侵袭、转移中发挥重要作用.常见的妊娠滋养细胞疾病(GTD),包括葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜上皮癌,它们大的不同之处在于侵袭性存在明显差异.本研究应用免疫组织化学方法检测PPARγ蛋白在正常早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜上皮癌组织中的定位和表达变化,探讨PPARγ与GTD的关系.
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米非司酮诱导早孕绒毛及蜕膜组织细胞凋亡的研究
本文应用透射电镜、免疫组化及流式细胞分析技术,检测米非司酮药物流产绒毛及蜕膜组织在细胞超微结构上的改变及分子水平上细胞增殖与凋亡相关基因及DNA的变化,从细胞增殖与凋亡角度探讨米非司酮药物流产的作用机制.
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米非司酮对早孕绒毛Oct4、Sox2、Nanog表达影响
目的:探讨米非司酮对早孕绒毛组织Oct4、Sox2、Nanog mRNA和蛋白水平表达的影响.方法:要求终止妊娠的正常早孕妇女60例,分为:负压吸宫组及服用米非司酮150mg及米索前列醇联合行药物流产组.运用Real-time PCR方法检测两组早孕绒毛组织中Oct4、Sox2、Nanog mRNA的表达;采用免疫组织化学方法检测两组早孕绒毛组织Oct4、Sox2、Nanog蛋白的定位及半定量表达情况,比较两组差异.结果:Oct4、Nanog、Sox2mRNA在药物流产组早孕绒毛中相对表达量明显低于负压吸官组,差异有统计学意义(相对表达量分别为:0.15±0.045;0.37±0.053;0.23±0.040,P值均<0.05);Oct4、Nanog、Sox2在药物流产组早孕绒毛蛋白表达量亦明显低于负压吸宫组,差异有统计学意义(药物流产组蛋白表达量分别为13869±541、19251±1503、139492±918明显低于负压吸官组22017±235、30543±729、37237±710).结论:米非司酮可以通过抑制早孕绒毛中Oct4、Sox2、Nanog表达,发挥抗早孕作用.
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诊断用经阴道彩色多普勒超声辐照对人早孕绒毛细胞凋亡的影响
目的 探讨诊断用经阴道彩色多普勒超声(TVCD) 辐照对人早孕绒毛细胞早期凋亡的影响,以期为TVCD的产科安全应用提供新的佐证.方法 将拟行人工流产的25例健康早孕妇女(孕40~60 d)按TVCD辐照时间的不同随机分为5组:对照组、照射5 min组、10 min组、20 min组、30 min组,每组5例.应用TVCD,按不同时间固定持续照射孕囊.照射后24 h取绒毛,采用流式细胞仪检测绒毛细胞早期凋亡的水平.结果 (1)流式细胞仪直方图显示:对照组偶见散在的早期凋亡细胞;5 min组及10 min组出现早期凋亡细胞;20 min组及30 min组的早期凋亡细胞明显增多,以30 min组为明显;(2)早期凋亡率比较:照射各组与对照组比较,均有显著性差异(P均<0.01),照射10 min组与5 min组之间差异有显著性(P<0.01),照射30 min组与10 min组之间差异有显著性(P<0.01).结论 TVCD辐照可引起人早孕绒毛细胞凋亡增多,且绒毛细胞的早期凋亡率会随着辐照时间的延长而增高.
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常规诊断用B超对早孕绒毛组织影响的研究
将孕6~10周的30例欲行人工流产术的健康妇女分成7个对照组,再分别用常规诊断B超辐照子宫内孕囊1、2、3、4、5、7、10 min。我们用电镜对每例孕妇的绒毛超微结构进行了B超辐照前、辐照后的自身对比研究,结果表明均无任何变化。作者认为:对早孕人体行常规诊断用B超检查,只要每次检查时间不超过10 min是安全、可靠的。
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葡萄胎组织中CK-8表达观察
葡萄胎是胚胎外层滋养细胞发生水肿变性、绒毛水肿而形成的水泡状胎块,具有恶变倾向。葡萄胎患者清宫后,主要依靠连续监测血HCG、临床症状及体征诊断侵袭性葡萄胎。但有些患者术后未及时监测HCG,给诊断增加困难。寻找葡萄胎生物学特性的有效预测指标对于存在恶变潜能的葡萄胎患者有重要意义。细胞角蛋白8(CK-8)被发现与细胞增殖及凋亡调控、信号转导、肿瘤发生发展等有关。本研究观察并比较了早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎组织中CK-8的表达变化,探讨CK-8与葡萄胎恶变的关系。
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survivin(存活素)在早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达
目的:研究早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中survivin(存活素)的组织定位和表达,探讨survivin与妊娠滋养细胞疾病的关系.方法:采用免疫组化SP法检测14例正常早孕绒毛、14例葡萄胎、12例侵蚀性葡萄胎及12例绒癌滋养细胞中survivin的表达.结果:survivin在滋养细胞细胞核及细胞浆的表达强度PU值依下列顺序增加:正常早孕组、葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组及绒癌组,各组间的表达强度差异有统计学意义(P<0.05).结论:适度survivin是正确完成胚胎细胞有丝分裂和细胞增殖的必要条件,因survivin的过表达引起的细胞凋亡阻滞在妊娠滋养细胞疾病的发生发展过程中可能起重要作用.
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米非司酮对早孕绒毛、蜕膜的影响
胚胎d13-21绒毛逐渐形成,经初级绒毛、二级绒毛发展转变为三级绒毛.在妊娠d 5中绒毛内血管形成,胎儿循环开始.孕卵着床后,子宫内膜致密层蜕膜样细胞继续增大,逐渐变成蜕膜细胞[1].