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板蓝根提取物中总有机酸和水杨酸含量测定方法研究
目的:建立板蓝根提取物的质量控制方法.方法:采用酸碱滴定法测定总有机酸含量,并用反相高效液相色谱法测定板蓝根提取物中水杨酸的含量.结果:酸碱滴定法测得总有机酸含量为13.0%,RSD 2.0%;HPLC测得提取物中水杨酸的含量为0.22%,RSD 1.6%.结论:该方法能有效控制板蓝根提取物的质量.
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不同产地板蓝根药材中clemastanin B的含量比较
目的:建立板蓝根中抗病毒有效成分clemastanin B的高效液相色谱测定方法,测定不同产地板蓝根中clemastanin B的含量.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水11:89;流速为1.0 mL·min~(-1);检测波长为225 nm,柱温为30℃.结果:clemastanin B在0.061 5～1.844 1μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率为97.74%,RSD 1.4%;测得8批板蓝根中clemastanin B的质量分数为0.269～0.900 mg·g~(-1),其中以河北安国产板蓝根药材中clemastanin B含量高,安徽阜阳、河北承德和安徽亳州产的次之,其他几个产地的含量相对略低,甘肃岷县产的低.结论:该方法准确、可靠,可用于板蓝根药材的测定.
关键词： 高效液相色谱法 板蓝根 clemastanin B 含量测定 -
高效毛细管电泳同时测定板蓝根中水杨酸、丁香酸、苯甲酸和邻氨基苯甲酸
目的:建立同时测定板蓝根药材中水杨酸、丁香酸、苯甲酸和邻氨基苯甲酸含量的高效毛细管电泳方法.方法:采用重力进样,进样高度10 cm,进样时间30 s,正极进样,负极柱上220nm检测.操作电压11.5kV,运行缓冲溶液为乙腈.硼砂(15%乙腈,25 mmol·L~(-1)硼砂,15 mmol·L~(-1)β-CD),pH 9.10.对电压、缓冲液pH、缓冲液浓度、乙腈、β-CD浓度等因素对分离的影响做了系统的研究.水杨酸、丁香酸、苯甲酸和邻氨基苯甲酸分别在3.0～90,4.0-120,2.0～60,5.0～100 mg·L~(-1)线性关系良好(r=0.999 4,0.999 5,0.999 8,0.999 2);回收率分别为95.9%～102.6%,98.6%～103.4%,98.7%～104.1%,96.1%～104.3%,基于3倍信噪比(S/N=3),4种有机酸的检出限分别为0.7,1.1,1.2,1.5 mg·L~(-1).
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板蓝根切制工艺的优选及切制前后指纹图谱的变化研究
目的:优选板蓝根软化切制的工艺条件;通过比较不同产地板蓝根药材切制前后指纹图谱的差异性,客观反应润药切制对药材总体成分的影响.方法:以药材软化时加水量、润制时间和饮片切制厚度为考察因素,以水溶性浸出物为指标,采用正交设计,优选板蓝根软化切制的条件;采用反相高效液相色谱法,zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相乙腈-水,梯度洗脱,检测波长238 nm,进样量10μL.对板蓝根粗粉和水润切制后的饮片进行HPLC测定,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行比较.结果:板蓝根软化切制的佳工艺为:0.6倍量的水,浸润24 h,饮片厚度为2 mm;结论:建立了板蓝根药材醋酸乙酯萃取物HPLC指纹图谱.板蓝根在切制前后,指纹图谱对照谱图差异明显,切制后中等极性部分损失较多.
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种植密度对菘蓝生长动态及产量的影响
目的:研究不同种植密度对菘蓝生长动态及产量的影响,以期为菘蓝规范化栽培提供理论依据.方法:采用大田随机区组试验,定期定点采集菘蓝样品,测定各器官生长量.结果与结论:在不同种植密度下,菘蓝主根根长和根直径生长均呈现"先快后慢"趋势;而单株叶片数增长却呈现"先慢后快"趋势;叶长和叶宽生长呈"先升后降"的单峰曲线变化.单株叶片、根及全株干物质积累速率在出苗后65～76 d达到高.不同种植密度下菘蓝叶片及根部产量差异显著,综合考虑叶片及根部产量2个方面,25 cm×7 cm为适宜种植密度.
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板蓝根F022部位抗内毒素活性研究
目的:研究板蓝根F022部位抗内毒素活性并初步探讨其作用机理.方法:ELISA法检测内毒素刺激鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6) 水平;内毒素致兔发热实验;内毒素致BCG增敏小鼠死亡实验.结果:F022与LPS同时或F022提前1 h处理巨噬细胞,能显著性抑制上清中TNF-α和IL-6水平.先给予F022,能拮抗内毒素所致家兔发热反应,显著延长BCG增敏小鼠受LPS攻击后的存活时间,并呈剂量依赖性.结论:以上结果提示F022对内毒素拮抗作用发生在LPS激活机体免疫系统之前,该过程F022可能竞争性阻断LPS与其受体的结合.
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安徽亳州板蓝根种质资源的调查研究
目的:为制定板蓝根规范化种植的操作规程提供依据.方法:进行安徽亳州板蓝根的种质资源调查和种子染色体的鉴定研究.结果:安徽亳州板蓝根种质资源有四倍体菘蓝和二倍体菘蓝.结论:确定二倍体菘蓝为板蓝根规范化种植的种质资源.
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毛细管电泳法研究板蓝根水提物抗流感病毒的作用机制
目的:探讨板蓝根水提物抑制H1N1型流感病毒细胞结合活力的机制.方法:显微镜检判定板蓝根不同处理方式下的红细胞经流感病毒侵染后的形态学差异,通过毛细管电泳结合显微镜镜检、血凝滴度指标进一步阐述板蓝根抗流感病毒的生化机制.结果:经过板蓝根保护过的细胞,能阻止病毒对细胞的吸附,推测其可能是通过与细胞膜的作用来保护细胞.结论:板蓝根通过结合到细胞膜上而起到保护细胞的作用,有效抑制了流感病毒对细胞的结合,从而达到抗病毒的目的.
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板蓝根的化学成分研究
目的:对板蓝根的化学成分进行分离和鉴定.方法:采用正相、反相、凝胶柱色谱和高效液相制备方法进行分离纯化,利用波谱数据和理化常数鉴定化合物的结构.结果:从乙醇提取物中分离鉴定了11个化合物,分别为:(+)-异落叶松树脂醇(1),(+)-落叶松树脂醇(2),落叶松树脂醇-9-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷(3),落叶松树脂醇-4'-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷(4),落叶松树脂醇4,4'-二-O-β-D-.吡喃型葡萄糖苷(5),3-甲酰吲哚(6),1-methoxy-3-indolecarbaldehyde(7),1-methoxy-3-indoleacetonitrile(8),deoxyvasicinone(9),表告依春(10),腺苷(11).结论:化合物4～8均为首次从该植物中分离得到.
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生物热力学法观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞的影响
目的:观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响.方法:分离培养小鼠淋巴细胞,以生物热动力学方法观察板蓝根不同提取部位的免疫活性,并以常规离体细胞培养法进行药效学验证.结果:板蓝根水提部位、萃后部位具有明显的淋巴细胞增殖作用.有机溶剂萃取部位均具有一定的淋巴细胞增殖作用,但其活性不显著.生物热力学方法与常规药效学方法结果基本一致.结论:板蓝根不同提取部位对淋巴细胞的作用为:萃后部位＞水提部位＞正丁醇部位＞醋酸乙酯部位＞氯仿部位＞石油醚部位.
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播种期对板蓝根形态学特征、产量及质量的影响
目的:研究不同播种期对板蓝根形态学特征、产量及质量的影响,以期为菘蓝适宜播种期的选择提供科学依据.方法:采用大田随机区组试验,调查菘蓝各物候期进程情况,收获时随机采集样品,测定板蓝根形态学指标、小区根产量及活性成分含量,并进行方差及相关性分析.结果:各播种期明显影响菘蓝的物候期进程;播种期与菘蓝根部性状、产量及质量呈负相关;不同播期对板蓝根形态学特征、产量及内在质量形成存在显著差异.结论:安徽阜阳地区菘蓝以3月下旬至4月上旬为适宜播种期;如采用麦药轮作的复种制度,也可将播种期适当延迟至5月下旬至6月上旬.
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HPLC测定板蓝根药材及其制剂中表告依春的含量
目的:建立HPLC测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法,为板蓝根药材及其制剂的质量控制提供依据.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相乙腈-水-磷酸-三乙胺(8.50:90.72:0.73:0.05);流速0.7 mL·min-1;检测波长245 nm,柱温30℃.结果:表告依春含量测定的线性范围0.020 4-0.306 0 μg(r=0.999 8),平均加样回收率98.99%,RSD 1.31%.结论:建立了高效液相色谱法测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法,该方法准确、可靠,可用于板蓝根药材及其制剂的质量评价.
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配方施肥对板蓝根产量和多糖含量的影响
目的:对不同配方施肥处理的板蓝根的产量及多糖含量进行分析,以确定板蓝根的佳氮磷钾配比.方法:采用L16(43)正交法设计,研究氮磷钾不同配比对板蓝根产量的影响;采用苯酚-硫酸比色法对多糖含量进行测定.结果:板蓝根产量大和多糖含量高的优施肥配方是A2B2C1,即尿素869.0 kg·hm-2、过磷酸钙1 428.6 kg·hm-2、硫酸钾0 kg·hm-2.结论:磷肥能显著影响板蓝根的产量水平,氮肥能显著影响板蓝根多糖的含量.
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板蓝根的化学成分研究
在HPLC-MS指纹图谱指导下采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、半制备型高效液相等分离技术手段对板蓝根lsatis in-digotica的化学成分进行研究,从板蓝根水提物的乙酸乙酯部位中分离得到19个化合物,并通过理化性质,MS,NMR等波谱技术鉴定了它们的结构,分别为7-羟基脱氧鸭嘴花碱(1)、(1H-indol-3-yl)oxoacetamide(2)、1-甲氧基-吲哚-3-乙腈(3)、arvelexin(4)、吲哚-3-乙腈(5)、3-甲酰吲哚(6)、3-吲哚乙酸(7)、2,3-二氢-4-羟基2-氧-吲哚-3-乙腈(8)、deoxyvasicinone(9)、indigotiiso-coumarin A(10)、cycloanthranilylproline(11)、quinazoline-2,4(1H,3H)-diones(12)、靛玉红(13)、(+)-松脂素(14)、(+)-表松脂酚(15)、burselignan(16)、(+)-isolariciresinol(17)、香草酸(18)和5-羟基麦芽酚(19),其中化合物1为新的天然产物,化合物2,14,15,18,19为首次从该植物中分离得到.
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板蓝根水提取物的化学成分研究
采用大孔树脂、MCI树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20、制备薄层色谱和反相HPLC等多种色谱技术和方法,从板蓝根的水煎煮提取物中分离得到33个化合物,借助理化性质和波谱学数据分析,鉴定其结构为:(+)-去氢催吐罗芙木醇(1),(S)-(+)-脱落酸(2),(R)-4-羟基-4-[(R,E)-3-羟基丁-1-烯基]-5,5-二甲基环己烷-2-烯酮(3),环(L-苯丙-L-亮)二肽(4),环(L-苯丙-L-酪)二肽(5),环(L-酪-L-亮)二肽(6),环(L-脯-L-酪)二肽(7),(+)-3.-羟基-1,2-二(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-丙酮(8),(+)-丁香树脂醇(9),(-)-(7R,7'R,8S,8'S)-4,4’-二羟基-3-甲氧基-7,9’；9,7’-双环氧木脂素(10),(-)-皮树脂醇(11),(+)-(7R,7'R,8S,8'S)-新橄榄树脂素(12),(-)-5-甲氧基异落叶松树脂酚(13),1,3-二氢-2H-吲哚-2-酮(14),4-甲氧基-2,3-吲哚二酮(15),N-甲氧基二氢抗坏血酸原(16),尿蓝母(17),(-)-(S)-腈甲基-3-羟基氧吲哚(18),4’-羟基-7-甲氧基异黄酮(19),毛蕊异黄酮(20),豆甾-5-烯-3β-醇-7-酮(21),香草乙酮(22),4-羟基-3,5-二甲氧基苯乙酮(23),二氢松柏醇(24),3-甲氧基-4-羟基苯丙酸(25),3-羟基-1-(4-羟基苯基)丙-1-酮(26),3-羟基-1-(3-甲氧基4-羟基苯基)丙-1-酮(27),对氨基苯甲酸(28),3-(4-羟基苯基)丙-1-醇(29),4-(2-羟乙基)苯酚(30),2-甲氧基4-乙烯基苯酚(31),邻苯二酚(32)和4-戊烯酰胺(33).这些化合物均为首次从板蓝根中分离得到.在初步体外抗病毒活性筛选中,异黄酮类化合物19对流感病毒A/汉防/359/95 (H3N2)、单纯性疱疹病毒1型(HSV-1)和柯萨奇病毒B3型(Cox-B3)病毒株均显示有一定抑制活性,IC50分别为2.06,6.84,8.70 μmol·L-；在1.0×10-5molL-1下,其他化合物均未表现出活性.
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HPLC测定清开灵滴丸中栀子苷的含量
清开灵滴丸是由胆酸、珍珠母、猪去氧胆酸、桅子、水牛角、板蓝根、黄芩苷、金银花8味中药组成.具有清热解毒和镇静安神的功能,用于急性化脓性扁桃体炎、急性咽炎、急性气管炎等上呼吸道感染,病毒性感冒和高热等症.
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板蓝根化学成分研究
板蓝根Radix Isatis为十字花科菘蓝属植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根,性寒味苦,具有清热解毒、凉血利咽之功效,临床上广泛用于抗病毒、抗菌,并具有抗肿瘤,增强机体免疫力的功能,抗内毒素作用[1-4].
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板蓝根的生长及碳、氮类化合物的积累规律研究
板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的根[1],具有清热解毒,凉血利咽的功效[2].作为一种特殊的经济作物,板蓝根的生长量是药农关心的指标,而其有效成分含量则是药学研究者关心的指标.
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不同栽培居群菘蓝花粉的扫描电镜观察
菘蓝Isatis indigotica Fort.为十字花科菘蓝属越年生草本植物,作为大宗中药材板蓝根、大青叶的基源植物.菘蓝多为栽培类型,还没有发现野生类型,在全国各地广为栽培,栽培历史悠久,由于地域间隔大,彼此间交配机会少,形成了一些地方繁育居群(local breeding population),在进化过程中遗传发生漂变,不同栽培居群菘蓝的遗传组成产生变异.
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清开灵注射液对内毒素诱导的大鼠炎性因子产生的抑制作用
清开灵注射液是由牛黄、水牛角、珍珠母、黄芩、板蓝根、金银花、栀子等中药制备的复方中药注射剂,具有清热解毒,化痰通络,醒神开窍的功效.清开灵注射液在临床上应用广泛,尤其是治疗感染性疾病、高热和脑中风疗效显著[1-5].
