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肝移植感染的防治问题
随着移植外科技术的成熟,新一代免疫抑制剂和器官保存液的应用,肝移植已成为能成功救治终末期肝病的有效方法.免疫排异一直是受体成活关心的重点,然而随着FK506、MMF等免疫抑制剂的成功应用,它对受体生存威胁越来越小,相反,感染却成为受体死亡的主要原因之一.移植感染在传染病学中把它归为免疫缺陷感染或免疫抑制相关感染的范畴,近年来,由于广谱抗生素的滥用及社会自然环境的一些原因,细菌的流行病学较十年前发生了很大变化,机会菌和耐药菌明显增多,并出现了一些少见的细菌感染和机会感染,在这个大的背景下肝移植感染则更具挑战.肝移植的感染有什么特点,针对感染如何防治,本文就这一问题,把一些已阐明的观点,好的防治经验予以读者.
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肝脏移植的适应证及手术时机
1963年3月,肝脏移植的先驱者Starzl进行了世界上首例人体肝移植,迄今已40年.多年来人类在这一布满荆棘而又充满希望的领域进行了艰苦的探索.肝脏移植已取得了一系列突破性的进展.新型器官保存液的研制成功,新一代免疫抑制剂的问世及使用,以及肝脏移植手术技术的进步,术前和术后处理的完善,使肝脏移植进入了临床广泛应用的新时期.良好的移植效果及长期存活人群的大批涌现,使肝移植这一20世纪重大医学成果被越来越多的人所接受.肝脏移植已成为举世公认的治疗终末期肝病的有效手段.
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自制多器官保存液（AMU）对兔肾脏低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响
目的：研究自制多器官保存液（AMU)对兔肾低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响。方法建立兔离体肾脏单纯低温保存模型。结果兔肾随着低温保存时间的延长，肾皮质匀浆两组N a+-K+-A T P酶活性均出现降低趋势，保存24h和48h , N a+-K+-A T P酶活性，两组保存液比较无明显差异( P>0.05)，保存72h,AMU液组Na+-K+-ATPase活性明显高于HCA液组，具有显著差异(P<0.05)。结论 AMU保存液对兔肾低温保存期间在提高Na+-K+-ATP酶活性方面显著优于HCA保存液。
关键词： 器官保存液 肾 Na+-K+-ATP酶 兔 -
含饱和氢气肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响
目的 评价含饱和氢气肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠24只,周龄8～10周,体重200～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=8):对照组(H1组)大鼠仅切除右肾；普通肾保存液组(H2组)大鼠采用冷缺血再灌注模型,用4℃普通HC-A肾保存液对左肾行冷灌注和冷保存；含饱和氢气肾保存液组(H3组)大鼠操作同H2组,灌注液及保存液换用自制的4℃含饱和氢气HC-A肾保存液.于再灌注24 h时抽取下腔静脉血样,测定血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度；切取左肾,测定肾组织MDA和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,光镜下观察肾组织病理学结果.结果 与H1组相比,H2组和H3组大鼠血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度及肾组织MDA和8-OHdG含量均升高(P＜ 0.05);与H2组相比,H3组血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度及肾组织MDA和8-OHdG的含量均降低(P＜0.05).H1组肾组织形态结构未见明显异常,H2组肾小管损伤明显,H3组肾小管损伤较H2组减轻.结论 含饱和氢气肾保存液可明显减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤.
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抑肽酶-低钾-右旋糖酐保存液对兔肺缺血再灌注损伤的影响
目的 探讨抑肽酶-低钾-右旋糖酐保存液对常温兔肺缺血再灌注损伤的影响.方法 成年新西兰大白兔18只,体重0.9～1.5 kg,雌雄不拘,随机分为3组(n=6):对照组(C组)、低钾-右旋糖酐(LPD)组(L组)、抑肽酶+LPD组(A组).C组直接阻断左肺门,不灌注肺保存液,L组和A组阻断左肺动脉,待肺膨胀后分别经左肺动脉导管灌注LPD保存液或抑肽酶+LPD保存液30 ml/kg(含抑肽酶150 kIU/ml),灌注结束后阻断左肺静脉,在肺膨胀一半时阻断左主支气管,2 h后依次开放左肺静脉、动脉和左主支气管,再灌注90min后处死动物取出左肺,测定肺组织丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性,计算肺组织干湿重比(D/W),观察肺组织病理学变化;分别于缺血前及再灌注15、60、90 min检测动脉血氧分压(PaO2)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.结果 与缺血前比较,3组再灌注期间血清TNF-α浓度升高,PaO2下降(P＜0.01);与C组比较,L组、A组再灌注期间肺组织MDA含量、MPO活性降低,D/W升高,血清TNF-α浓度降低,PaO2升高(P＜0.05或0.01);与L组比较,A组肺组织MDA含量、MPO活性降低,D/W升高,血清TNF-α浓度降低,PaO2升高(P＜0.01).A组肺组织水肿、渗出、损伤等病理变化较C组和L组减轻.结论 抑肽酶-LPD保存液可减轻兔常温肺缺血再灌注损伤,改善肺功能.
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改良HBSS液对体外培养人牙周膜细胞存活和克隆能力的影响
目的 比较室温下改良HBSS液对体外培养人牙周膜细胞(PDLC)存活和克隆能力的影响.方法 采用台盼蓝染色法和平板克隆形成试验检测体外培养的第4代人PDLC.在HBSS中添加青霉素、链霉素各100 U/ml、地塞米松8 mg/L及1、3、5mmol/L的还原型谷胱甘肽(GSH)制成改良HBSS液,并与HBSS液比较,观察PDLC在上述溶液中保存不同时间后的细胞活性及克隆能力的变化.结果 3 mmol/L和5 mmol/LGSH组保存的细胞存活率在2～24 h显著高于HBSS液组,且5mmol/LGSH组保存的PDLC克隆能力在1～12 h显著高于HBSS液组.结论 含5 mmol/LGSH改良HBSS液保存人PDLC活性的效果在12 h内明显好于HBSS液.
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高压干燥保存移植心脏机制的实验研究
目的：探索一种全新的器官保存方式———高压干燥保存，并通过检测炎性因子水平探讨该方式优于目前常用的浸泡保存方式的可能作用机制。方法2014年12月—2015年8月选取SPF级C57BL／6小鼠60只，其中4～6周龄供体小鼠36只，6～8周龄受体小鼠24只。供体小鼠采用随机数字表法分为空白对照组、组氨酸－色氨酸－酮戊二酸盐液（ HTK液）浸泡保存组、高压干燥保存组，每组12只。受体小鼠采用随机数字表法分为HTK液浸泡保存受体组、高压干燥保存受体组，每组12只。空白对照组仅取供心，不做移植； HTK液浸泡保存组供心浸泡于HTK液中；高压干燥保存组供心悬挂并置于高压气体罐中（ PO2：1600 hPa＋PCO：400 hPa＝2000 hPa）。移植后2 h，对比观察HTK液浸泡保存受体组、高压干燥保存受体组供心复跳率及供心移植物功能评分。移植后24 h，采用荧光实时定量－聚合酶链式反应（ RT－PCR）法检测3组供体小鼠心肌细胞肿瘤坏死因子α（ TNF-α）、白介素（ IL）1β、 IL-6、IL-10、细胞间黏附分子1（ICAM－1）表达水平及心肌细胞凋亡指数。结果高压干燥保存受体组小鼠供心复跳率高于HTK液浸泡保存受体组〔83.3％（10／12）与25.0％（3／12）， P＝0.012〕。高压干燥保存受体组小鼠供心移植物功能评分高于HTK液浸泡保存受体组〔3.5（1.0）分与1.3（0.5）分， Z＝－3.447， P＜0.01〕。 HTK液浸泡保存组和高压干燥保存组小鼠心肌细胞TNF-α、 IL-1β、 IL-6、 IL-10、 ICAM－1表达水平高于空白对照组（P＜0.05）； HTK液浸泡保存组小鼠心肌细胞TNF-α、 IL-1β、 IL-6、 ICAM－1表达水平高于高压干燥保存组（ P＜0.05）；高压干燥保存组小鼠心肌细胞IL-10表达水平高于HTK液浸泡保存组（P＜0.05）。空白对照组、 HTK液浸泡保存组、高压干燥保存组小鼠心肌细胞凋亡指数分别为（1.36±0.30）％、（14.18±4.75）％、（6.61±1.06）％，差异有统计学意义（ F＝62.963， P＜0.05）； HTK液浸泡保存组、高压干燥保存组小鼠心肌细胞凋亡指数高于空白对照组（ P＜0.05）； HTK液浸泡保存组小鼠心肌细胞凋亡指数高于高压干燥保存组（ P＜0.05）。结论氧气和一氧化碳（ PO2：1600 hPa＋PCO：400 hPa＝2000 hPa）的高压干燥环境通过抗凋亡和减轻炎性损伤作用，对供心有保护作用，促进移植后供心功能恢复，有效延长供心保存时间。
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彩色多普勒超声在原位肝移植中应用的体会
随着新的器官保存液和新的免疫抑制剂的应用以及肝移植手术技术的进步,使肝移植进入了广泛应用的新时期.已成为治疗各种良、恶性终末期肝病的有效手段,彩色多普勒血流显象(CDFI)作为重要的检测手段成为原位肝移植(Orthotopic livertransplantation,OLT)围手术期的首选影像学检查方法.我院从2001年9月至今完成OLT 3例,现将我们对这3例OLT患者的超声检查体会报告如下:
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左卡尼汀强化St.Thomas No.2液对低温离体心脏的保存效果
背景:在心脏瓣膜置换中应用添加左卡尼汀的心脏停搏液可明显减轻心肌线粒体的脂质过氧化反应,保护心肌细胞.目的:观察加入左卡尼汀的St.Thomas No.2液对大鼠离体心脏低温保存的效果.方法:利用Langendorff 灌注装置建立SD大鼠离体心脏灌注和工作模型,随机分成4组,其中2组采用 St.Thomas No.2 液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h,另2组采用添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h.结果与结论:与St.Thomas No.2 液保存4 h组比较,添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 4 h组心脏心率、冠状动脉流量、左心室收缩峰压和左心室内大上升速率及心肌含水量、ATP含量差别无显著性意义(P > 0.05),但心肌酶漏出量明显减少(P < 0.05);添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 6 h组上述指标检测结果均优于St.Thomas No.2保存6 h组 (P < 0.05).提示左卡尼汀强化的St.Thomas No.2液可显著提高大鼠离体心脏的低温保存效果.
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自制新型多器官保存液低温保存小型猪肾
背景:在前期实验的基础上,此次实验成功配制了含聚乙二醇的新型上海多器官保存液.目的:以普通器官保存液为对照,验证自制含聚乙二醇的上海多器官保存液低温保存小型猪肾的效果.设计、时间及地点:随机分组,对照实验观察,2006-05/2007-07在解放军器官移植研究所移植实验室完成.材料:健康成年实验用巴马小型猪12头.自制新型新帮上海多器官保存液,主要含聚乙二醇,相对分子质量20 000.pH7.43±0.10,渗透压825～900 kPa,UW液,购白美国Bristol-Myers Squibb公司.方法:巴马小型猪肾分别以4℃器官保存液或上海多器官保存液原位灌注后离体保存24,48,72 h.保存终点测保存液pH值及乳酸脱氢酶含量,左肾取标本行组织学检查,右肾采用体外非循环猪肝/肾灌注系统灌注30,60,120 min测灌注液乳酸脱氢酶含量.灌注终点取肾皮质标本测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性.主要观察指标:光镜、电镜观察肾冷保存后的形态学变化;灌注液及保存液乳酸脱氢酶含量;肾皮质标本测丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性:肾组织细胞凋亡指数.结果:保存48,72 h后,器官保存液组保存液pH值高于上海多器官保存液组(P<0.05).保存72 h终点保存液及再灌注30,60,120 min灌注液中乳酸脱氢酶活性器官保存液组高于上海多器官保存液组(P<0.05).同时间点两组肾组织光镜、电镜下形态学改变、肾皮质凋亡指数、超氧化物歧化酶、丙二醛含量差芹均无显著性.结论:新型上海多器官保存液对小型猪肾脏低温保存效果与普通器官保存液基本一致,对缺氧代谢器官细胞内酸中毒的缓冲能力以及对低温和缺血再灌注损伤的保护作用优于普通器官保存液.
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肺移植供肺获取100例:冷缺血时间》6h及肺减容对预后的影响
背景:肺移植过程中供肺获取的手术技巧、冷缺血时间的上限以及供肺与受者胸腔大小不匹配等问题的处理有待进一步研究.目的:总结肺移植中供肺获取的手术技巧,探讨冷缺血时间和肺减容对受者移植后各种并发症以及生存率的影响.方法:回顾分析100例供肺获取和101例受者的临床资料,根据供肺冷缺血时间所有受者分为冷缺血时间< 6 h组或> 6 h组;另根据移植中是否出现供肺与受者胸腔大小不匹配分为肺减容组和对照组,不匹配的均行不同方式肺减容.分析冷缺血时间>6 h和肺减容对肺移植患者预后的影响.结果与结论:100例供肺获取和101例肺移植均成功,其中1供者的左右肺分别移植给2例受者,共完成101例肺移植.除供肺冷缺血时间>6 h组原发性移植物失功发生率要高于< 6 h组(P < 0.05)外,其他各指标差异均无显著性意义(P > 0.05);肺减容组与对照组各临床指标差异亦无显著性意义(P > 0.05).提示严格的供者选择、恰当的供肺减容以及尽量缩短供肺冷缺血时间可以有效防止受者移植后各种并发症的发生,提高肺移植成功率,改善患者预后.
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左卡尼汀强化St.Thomas No.2液对老年大鼠离体供心冷保存的影响
目的 研究添加左卡尼汀(LCN)的St.Thomas No.2液对冷保存离体老年大鼠心脏保存效果的影响及其机制.方法 利用Langendorff灌注装置建立离体老年大鼠心脏灌注和工作模型,选择20月龄SD老年大鼠24只,随机分成3组,每组8只,对照组采用St.ThomasN0.2液作为心脏停搏液并作为保存液分别保存离体心脏6h,LCN1组、LCN2组采用St.Thomas No.2液分别添加6、12 g/L LCN为心脏停搏液和保存液,其他处理相同,观察心脏保存前及保存后再灌注后心功能情况,比较心功能恢复率、心脏复跳时间、冠状动脉流出液心肌酶浓度、心肌含水量及心肌组织匀浆丙二醛(MDA)的变化.结果 三组离体心脏保存6h后均能成功复跳,复跳时间比较无差异(P＞0.05),心功能指标以LCN2组恢复为理想,LCN1组次之,对照组差(P＜0.05);冠状动脉流出液心肌酶浓度和心肌含水量比较,对照组高,LCN2低(P＜0.05);MDA以对照组高(P＜0.05),LCN1、LCN1比较无差异(P＞0.05).结论 LCN强化的St.Thomas No.2液可以提高冷保存老年大鼠离体心脏的保存效果,此效果与LCN通过减轻自由基损伤和维持心肌能量平衡两方面减轻缺血再灌注损伤有关.
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自制多器官保存液对兔肾脏低温保存期间线粒体钙离子内流的阻滞作用
[目的]研究自制多器官保存液(AMU)对兔肾低温保存期间线粒体钙离子内流的阻滞作用.[方法]建立兔离体肾脏单纯低温保存模型,分别采用0～4℃的AMU、离体肾脏保存液(HCA)对兔肾进行灌注和保存,并根据所用保存液的不同分为AMU组和HCA组.分别于低温保存24,48和72 h后应用生物化学甲基百里香酚蓝比色法测定肾组织细胞线粒体中钙离子的含量.[结果]随着低温保存时间的延长,AMU组和HCA组肾组织细胞线粒体中钙离子含量均出现增高趋势,两组单纯低温保存兔肾脏24 h时线粒体中的钙离子含量间差异无统计学意义(P＞0.05);保存48,72 h时AMU组均明显低于HCA组(P＜0.05).[结论]AMU对兔肾低温保存期间线粒体钙离子内流具有阻滞作用,在保持线粒体钙超载方面优于HCA.
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异体双手移植1例报告
2001年1月13日，在多科室的协助下，完成1例异体双手移植术(本例为世界第3例，亚洲第2例)，现患者双手血循环良好，创口一期愈合，已过超急排斥反应期和加速排斥反应期，处于急性排斥反应期和康复治疗中。 患者男性，18岁，一年前双下肢被火车压掉，双手冻伤于腕上截肢。供体双手取自脑死亡自愿捐献者。术前组织配型：同为B型血，群体反应性抗体(PRA)为阴性，人白细胞抗原(HLA)有两个位点相符，淋巴细胞毒性交叉试验阴性。 手术在全麻下分为4个小组同时进行：1组切取供体左手，2组切取供体右手，3组处理受体左手，4组处理受体右手。按术前计划进行切开暴露标记全部各种组织，供体在肱动脉处用4℃UW器官保存液500ml灌注。上述各组处理完毕后两左手和两右手组合并为左手组和右手组进行移植，每只手均吻合2条动脉，4条静脉，其它组织均进行了相应的修复，桡骨做成梯形截骨面，用两枚螺钉固定，尺骨用4孔钢板固定。双手移植平面在腕上4cm处，供体双手热缺血时间为65min，冷缺血时间左手为4h，右手为4.17h。手术历时10.33h。术后双手石膏外固定。 术后常规应用抗生素、抗凝制剂、解痉药和联合应用抗免疫排斥反应药物。用药量根据血液药物浓度调整。严密观察手部血循环和排斥反应现象的发生。 患者术后第2天即开始做轻微的指间关节、掌指关节的被动活动。4周后开始做主动的锻炼。 术后至今未发现有排斥反应现象的发生；曾做4次皮肤病理检查，亦未发现有排斥反应的表现，存活良好。双手移植术后功能及远期临床效果有待临床进一步观察。
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UW器官保存液对供心保护的研究进展
UW器官保存液的特点是高钾、低钠、无钙,主要胶体成分是羟乙基淀粉、蜜三糖及乳糖醛酸.本文将介绍UW器官保存液近年来的研究进展.
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自制低钾右旋糖酐溶液和Euro-Collins溶液对大鼠离体肺的保护作用
目的:研究自制低钾右旋糖酐(LPD)溶液和Euro-Collins(EC)溶液对大鼠离体肺的保护作用.方法:30只SD大鼠随机分成5组,每组6只,取离体肺分别用生理盐水(NS)、LPD溶液和EC溶液进行肺灌洗和保存,并于保存后4、8 h取肺组织进行病理切片观察、肺干湿重比和肺通透性的测定.结果:(1)经4 h保存,LPD组和EC组肺组织未见严重损伤,与NS组均有显著性差异(P<0.01).(2)经4 h保存,干湿重比LPD组和EC组明显低于NS组(P<0.01,P<0.001); 肺通透性测定LPD组和EC组的伊文斯蓝量明显低于NS组(P<0.01,P<0.05).(3)经8 h保存,干湿重比LPD组明显低于EC组(P<0.05);肺通透性测定伊文斯蓝含量LPD组略低于EC组(P=0.073 6).结论:自制的LPD溶液和EC溶液对大鼠离体肺有良好的保存效果,长时间保存,LPD溶液效果更好.
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多器官保存液的研究进展(Ⅱ)
本文的第(Ⅰ)部分论述的是器官保存的关键点,以及现有的多器官保存液的成分及其特点,发表于本刊2005,5(4):325.现论述如下内容.
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多器官保存液的研究进展(Ⅰ)
本文综述了30年来多器官保存液的基础研究和临床应用的状况及进展.论述了器官保存的关键点.对现有的多器官保存液,包括:组氨酸-色氨酸-α-酮戊二酸溶液、威斯康星大学溶液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤溶液、自制长征-1号溶液、Celsior溶液、Euro-Collins溶液、Carolina rinse溶液、St.ThomasⅡ溶液、乳果糖-组氨酸-聚蔗糖溶液、上海多器官溶液及其他器官保存液的成分及其特点进行分析,评估了上述器官保存液对脏器的保存效果,简述了中药在器官保存液中的应用.
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用RP-HPLC法测定高渗枸橼酸盐腺嘌呤-Ⅱ保存液中三种成分的含量
近年来,国内肝、肾等大器官移植取得很大进展.第二军医大学长征医院在国内早研制出肾保存液,已供临床使用了20多年,在上海市科委重点基金资助下,又开展了新一代肾保存液的研究,日前取得了阶段性成果.
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上海多器官保存液保存离体大鼠肝脏的实验研究
目的:观察上海多器官保存液(Shanghai-mutil-organ solution,SMO液)对离体大鼠肝脏的保存效果,探讨应用SMO液保存离体供肝的可行性.方法:SD大鼠随机分为SMO液、UW液和HTK液保存组,建立离体肝脏单纯低温保存模型,保存液保存8、16、24、36 h分析肝脏组织能量代谢情况,观察肝组织形态学改变和肝脏细胞凋亡情况.结果:保存16、24、36 h,SMO液组肝组织三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷总量(TAN)及Atkinson能荷(AEC)均明显高于同时点HTK液组 (P＜0.05),与同时点UW液组无显著差异;形态学检查见SMO液组组织损伤较同时点HTK液组轻,除细胞肿胀较同时间点UW液组明显外,其余表现基本一致.保存24、36 h,SMO液组凋亡指数明显低于HTK液组(P＜0.05),而与UW液组无明显差异.结论:SMO液对大鼠离体肝脏的保存效果总体上与UW液相当,优于HTK液,仅在防止细胞水肿方面较UW液稍差.
