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  • 烟草影响人成骨细胞生物学性能机制的研究

    作者:白冰;朱静涛;钟丽芳

    目的 探讨尼古丁对体外培养的人成骨样细胞(MG63)生物学性能的影响.方法 用含不同浓度尼古丁(1×10-4mol/L和1×10 -3mol/L)的DMEM高糖培养基体外培养MG63细胞,分别于第3、5.7、10、14天采用MTT比色法检测MG63细胞的增殖力;用Trizol提取总RNA,Real-Time PCR法检测MG63细胞骨桥蛋白、骨唾液磷酸蛋白的基因表达情况.结果 与对照组相比,体外尼古丁处理对MG63细胞的增殖起抑制作用;高浓度尼古丁在第5、7天对细胞骨桥蛋白的基因表达起促进作用;并且尼古丁促进了骨唾液磷酸蛋白的基因表达.结论 尼古丁可抑制成骨细胞的增殖,但不是通过抑制骨桥蛋白与骨唾液磷酸蛋白的分泌起作用.

    关键词: 尼古丁 OPN BSP MG63细胞
  • 骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-2在胰腺癌中的表达及其临床意义

    作者:张翼;徐泽宽;张国新;郝波

    目的:检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2),在胰腺癌组织及细胞中的表达及其临床意义,分析其在胰腺癌浸润、转移中的作用.方法:构建胰腺癌组织芯片,共178例胰腺癌及36例癌旁正常胰腺组织,应用免疫荧光染色法检测OPN蛋白在胰腺癌细胞株内定位;应用免疫组织化学方法检测OPN及MMP-2的表达情况.结果:OPN主要表达于细胞胞膜和胞浆内.胰腺癌组织芯片中OPN和 MMP-2表达阳性率分别为74.2%(132/178)和71.3%(127/178),均高于其在癌旁正常胰腺组织的表达(P<0.05);肿瘤组织中OPN和MMP-2表达之间存在正相关性(r=0.34,P<0.05).OPN表达与胰腺癌病理分级相关(P<0.05);OPN及MMP-2在胰腺癌组织中表达与其淋巴结转移和神经浸润明显相关(P<0.05).结论:OPN和MMP-2在胰腺癌组织中的过表达对胰腺癌的生长、浸润及转移起重要作用.OPN与MMP-2在胰腺癌的进展中起协同作用.

  • OPN通过SDF-1/CXCR4轴调控胃癌细胞的生物学行为

    作者:王静;张国新

    目的:观察骨桥蛋白(osteopontin,OPN)小干扰RNA稳定转染人胃癌细胞SGC-7901后,细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化并探讨其可能的分子机制.方法:用脂质体法分别将OPNsiRNA-pcDNATM 6.2及空载体质粒pcDNATM6.2转染人胃癌细胞SGC-7901,稻瘟素筛选,克隆环挑取细胞克隆,用Western blot及RT-PCR技术筛选阳性克隆,并检测稳转细胞中OPN、趋化因子受体4(CXCR4)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,应用MTT法、流式细胞仪、细胞迁移试验分别检测转染细胞的增殖、凋亡及迁移能力.结果:OPN siRNA稳定转染细胞SGC-7901后,稳转细胞中CXCR4和MMP2表达量下降;细胞的增殖能力(与转染空载体质粒比较)降低、细胞凋亡率显著高于对照组,转染细胞的迁移能力明显降低.结论:OPN siRNA使胃癌细胞增殖和迁移能力降低、细胞凋亡增加;提示OPN可能通过SDF-1/CXCR4轴及MMP2参与的信号通路调节肿瘤细胞生长及转移.

    关键词: OPN CXCR4 MMP2 胃癌 迁移
  • 刺头复叶耳蕨总黄酮促进脐带间充质干细胞成骨分化

    作者:严晨;殷嫦嫦;王子瑶;殷明

    目的 研究刺头复叶耳蕨总黄酮(total flavonoids from arachniodes exilis,TFAE)在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)成骨分化中的作用.方法 采用组织块贴壁法分离培养hUCMSCs,取P3代细胞进行实验,不同浓度的TFAE处理hUCMSCs,CCK-8法检测细胞活性;AMP法测定碱性磷酸酶(ALP)活力,茜素红染色检测钙结节形成;RT-PCR检测成骨相关基因I型胶原酶a1(collagen type I alpha1, Col1a1)、骨桥蛋白(osteopotin, OPN)、Runx2、Osterix(Osx)mRNA表达水平,Western blot检测Col1a1、OPN蛋白表达水平.结果 在一定浓度范围内,TFAE(1、5 mg·L-1)促进细胞增殖;钙结节数量增多;ALP活力增强,成骨相关基因Col1a1、OPN、Runx2、OsxmRNA及Col1a1、OPN蛋白表达水平上调.结论 一定浓度的TFAE促进hUCMSCs增殖及成骨分化.

  • OPN基因多态性与慢乙肝易感性的相关性研究

    作者:张鑫;周振华;李曼;孙学华;金树根;高亚婷;高月求

    目的:研究骨桥蛋白(OPN)基因多态性与中国汉族人慢乙肝易感性的相关性.方法:利用Sequenom基因分型技术,对234例慢乙肝患者和150例健康对照OPN基因的9个SNPs进行基因分型,分析其与慢乙肝易感性的相关性.结果:OPN基因的8个SNPs的等位基因频率在病例组和对照组间的分布无统计学差异.结论:OPN基因多态性可能与中国汉族人慢乙肝的易感性无相关性.

    关键词: OPN 慢乙肝 多态性
  • 骨桥蛋白与乳腺癌的关系

    作者:马春雷;刘晓娟

    近年来,在世界范围内乳腺癌的发病率呈逐年升高的趋势,骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型、黏附性的糖基化磷蛋白.近年来的研究揭示,OPN在肿瘤细胞的黏附、移行、浸润、血管新生、凋亡以及肿瘤的微环境中起关键作用~([1-2]),现将其与乳腺癌的关系综述如下.

  • 血清VEGF、MMP-9、OPN检验对肝癌治疗效果的评价效果分析

    作者:马欣玥

    选取2014年6月~2015年4月本院收治的100例肝癌患者,根据随机数字表法分为对照组和观察组各50例,观察组进行重组人血管内皮抑制素与TACE联合疗法治疗,对照组进行TACE单纯疗法,比较两组治疗前、治疗7d、半个月、1个月的血清骨桥蛋白(OPN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)等指标水平.两组治疗后7d、半个月、1个月的血清OPN、MMP-9、VEGF等指标水平均有降低,但观察组治疗后的7d、半个月、1个月的OPN、MMP-9、VEGF等临床指标水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).检验肝癌患者的血清OPN、MMP-9、VEGF等指标可用于评估临床治疗效果,值得临床推广.

    关键词: 肝癌 OPN MMP-9 血清VEGF
  • 结直肠癌患者血清中TK1、OPN与CEA的表达及临床意义

    作者:邢浩;张志峰

    目的 探讨TK1,OPN与CEA在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义.方法 通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测结直肠癌患者术前血清及正常对照血清中TK1,OPN表达的变化,通过电化学发光法检测结直肠癌患者术前血清及正常对照血清中CEA表达的变化.结果 结直肠癌患者血清中TK1,OPN与CEA的含量与正常对照组相比显著升高;血清TK1,OPN联合CEA诊断的阳性率较单一方法诊断的阳性率有显著提高(P<0.05).结论 血清中TK1,OPN,CEA均可作为结直肠癌的诊断指标,以CEA + TK1 + OPN的联合检测诊断结直肠癌的临床价值好.

    关键词: 结直肠癌 Tk1 OPN CEA
  • OPN、CEA、CA125、CA19-9联合检测对胰腺癌诊断的临床意义

    作者:陈志刚;李庆洁

    目的 OPN、CEA、CA125、CA19-9联合检测对胰腺癌诊断的临床意义.方法 应用全自动电化学发光法,检测72例胰腺癌患者血清中OPN、CEA、CA125、CA19-9的水平变化,并与150例正常对照组比较.结果 胰腺癌患者血清中OPN、CEA、CA125、CA19-9水平较正常对照组明显增高(P<0.01);四项标志物联合检测的敏感性和诊断准确性均比单项检测高,其中以CA19-9敏感性和特异性高,分别为82% 和86.7%,联合检测可提高其敏感性和特异性,分别为89.8%和96.7%.结论 OPN、CEA、CA125、CA19-9联合检测对胰腺癌的诊断具有重要的临床意义.

  • 狼毒对荷瘤小鼠体内恶性黑色素瘤细胞的抑制作用及其分子机制研究

    作者:王莉平;王义善;张国营;刘昆;段慧英;马念

    目的 观察狼毒大戟提取液(LDE)对荷瘤小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 观察荷瘤小鼠空白组和狼毒治疗组的肿瘤生长情况;采用ELISA法检测小鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)和骨桥蛋白(OPN)的活性;Western Blot蛋白印迹法检测了狼毒大戟提取液对荷瘤小鼠黑色素瘤B16组织中的Bcl - 2/Bax凋亡蛋白的表达.结果 与对照组相比较,狼毒大戟提取液对荷瘤小鼠体内恶性黑色素瘤B16细胞的生长有显著的抑制作用,能明显减慢肿瘤体积生长趋势和减轻瘤重;与对照组相比较,狼毒治疗组的VEGF、OPN的水平有统计学意义(P<0.05);HGF的的水平有显著的统计学意义(P<0.01);狼毒能下调小鼠体内恶性黑色素瘤B16中Bcl - 2/Bax凋亡蛋白的表达.结论 狼毒大戟提取液是一种有效的抗恶性黑色素瘤B16细胞增殖的中药水提液成分.其作用机制可能与诱导细胞凋亡,影响细胞中相关蛋白表达以及肿瘤血管生长和肿瘤转移相关因子VEGF、HGF、OPN的活性有关.

  • 骨桥蛋白对Ⅰ型神经纤维瘤病小鼠破骨细胞功能的影响

    作者:李会杰;刘亚玲;井永敏;张英泽;杨逢春

    Ⅰ型神经纤维瘤病( NFI)患者有明显的骨质疏松和骨量减少[1-2],我们报道了神经纤维瘤病破骨细胞功能增强是引起骨改变的机制之一[3].骨桥蛋白(OPN)具有细胞因子和基质蛋白两种性质,能影响骨代谢平衡,造成骨质疏松.我们应用Nf1基因杂合型小鼠模型,研究外源性骨桥蛋白对其破骨细胞生物学功能的影响,并与同源野生型小鼠破骨细胞功能进行统计学比较.

  • BMP-2、OPN、VEGF的表达在骨肉瘤肺转移中的意义

    作者:柴斌;杨述华;王渝;余理瑶;杨操

    目的 研究BMP-2、OPN、VEGF在骨肉瘤组织中的表达,探讨其与骨肉瘤肺转移的关系.方法 运用免疫组织化学SABC法,检测53例有完整随访资料的骨肉瘤病例中BMP-2、OPN、VEGF的表达.结果 ①BMP-2、OPN和VEGF的阳性表达均定位于细胞胞浆,BMP-2、OPN和VEGF在53例骨肉瘤组织中的阳性表达率分别为62.26%(33/53)、50.94%(27/53)和67.92%(36/53).②在已发生肺转移的骨肉瘤组织中BMP-2、OPN和VEGF的阳性表达率分别为92.3%(12/13)、76.92%(10/13)和92.3%(12/13),明显高于无肺转移的骨肉瘤组织中BMP-2(52.5%,21/40)、OPN(42.5%,17/40) 和VEGF(60%,24/40)的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05).③三者在骨肉瘤组织中的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、肿瘤部位、组织学类型、发病时间等因素差异无统计学意义(P>0.05),但与是否肺转移显著相关.结论 BMP-2、OPN及VEGF在骨肉瘤中有着不同程度的高表达,与骨肉瘤的发生发展,并与骨肉瘤肺转移密切相关,BMP-2的表达分别和OPN、VEGF的表达密切相关.

  • OPN和VEGF的表达在乳腺癌复发转移中的意义

    作者:廖妮;唐利立;王泽强;姚志刚;张超杰

    目的 探讨乳腺癌组织中OPN的表达及其与VEGF的联合表达对乳腺癌复发转移的影响以及在乳腺癌中两者的相互关系.方法 选取中南大学湘雅医院乳腺科1996~2001年间手术,并获随访的乳腺癌患者70例,分为5年内复发转移组40例(A组)和无瘤生存5年以上组30例(B组),纤维瘤组织10例(C组)及正常乳腺组织15例(D组).应用免疫组化法检测OPN、VEGF的表达情况.结果 (1)OPN在70例乳腺癌组织中阳性表达率为72.86%,与C组及D组的OPN表达比较差异有统计学意义(P<0.001);(2)OPN和乳腺癌的复发转移有关;A、B组间OPN表达及它与VEGF的联合表达经x2检验及Lowrank检验差异均存在统计学意义;(3)OPN与VEGF正相关(P<0.05),r=0.421.结论 OPN可能与乳腺癌的发生发展及预后有关.在乳腺癌中它与VEGF的表达正相关.两者高表达患者易发生复发转移.

  • OPN及β-catenin在涎腺黏液表皮样癌中的表达及意义

    作者:赛音乌力吉;吕克文;赵尔扬

    目的:研究OPN及β-catenin在黏液表皮样癌中的表达,探讨其在黏液表皮样癌病变中的作用及其临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P法检测35例黏液表皮样癌及12例正常涎腺组织中β-catenin及OPN的表达.结果:黏液表皮样癌中β-catenin和OPN的阳性表达率分别为37.1%(13/35)和65.7%(23/35)与正常对照组存在显著性差异(P<0.05).在黏液表皮样癌中它们的表达呈显著相关性(P=0.0001,R=-0.691).β-catenin和OPN的阳性率在不同分化程度的黏液表皮样癌中存有差异(P<0.05),且与是否存在淋巴结转移有显著性关系(P<0.05).结论:β-catenin及OPN的表达与黏液表皮样癌的发生和发展关系密切,检测该指标有助于判断黏液表皮样癌的病理分级和淋巴结转移的关系.

  • 骨桥蛋白的生物学特性及在骨改建中的作用

    作者:符策广;刘洁

    骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)作为一种分泌型的磷酸化糖蛋白,含有特异的RGD序列,具有强大的单核/巨噬细胞趋化和黏附作用,可参与多种代谢过程,如骨代谢、肿瘤的生长与转移、炎性反应与免疫等.现对OPN的生物学特征及其在骨改建中的作用等方面综述国内外部分学者对其研究进展及成果.

  • 骨肉瘤组织中骨桥蛋白、COX-2和VEGF表达

    作者:廖有乔;李锋;熊敏;刘家国;张劲松;徐圣康

    目的:探讨骨肉瘤组织中骨桥蛋白(OPN)、环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的临床意义.方法:应用免疫组化方法检测38例骨肉瘤组织中OPN、COX-2和VEGF蛋白表达情况.结果:OPN、COX-2和VEGF蛋白总阳性率分别为60.53%,63.16%, 68.42%, 在不同恶性级别的骨肉瘤中均具有差异性(P<0.05),而且与肿瘤的恶性程度相关;COX-2,OPN与VEGF表达正相关.结论:OPN,COX-2和VEGF在肿瘤的进展过程中起促进作用,OPN和COX-2是VEGF表达调控因子.OPN可能是肿瘤形成过程中的早期分子事件,可作为监测肿瘤恶性进展的一个生物学标志.

  • 胰腺癌诊断中OPN、CEA、CA125、CA19-9联合检测的临床意义

    作者:朱瑞勤

    目的:探讨分析肿瘤诊断物OPN、CEA、CA125、CA19-9联合检测对胰腺癌诊断的临床意义.方法:从我院选取的2008年2月到2011年2月收治的60例胰腺癌患者,运用全自动电化学免疫分析仪检测所有患者血清中OPN、CEA、CA125、CA19-9的含量,将所测结果与60例正常对照组的检测结果进行比较,并对联合检测和单独检测的敏感度、诊断准确率进行比对.结果:通过检测分析发现,60例胰腺癌患者血清中OPN、CEA、CA125、CA19-9的平均含量均要高于正常对照组,且差异显著(P<0.05);四项指标中CA19-9的敏感性高,高达81.7%,特异性达到85.0%,联合检测的敏感性和特异性分别是 91.7

  • TRPV5和OPN在泌尿系结石患者肾组织中的表达及意义

    作者:吴敬彰;赵津津;张占五;于千

    目的 探讨上皮细胞钙离子通道蛋白(TRPV5)和骨桥蛋白(OPN)在泌尿系结石患者肾组织中的表达及临床意义.方法 收集我院含钙肾结石患者(结石组)和正常无结石者(对照组)肾皮质标本各20例,运用HE染色观察两组肾皮质组织的形态;Real-time PCR测定两组肾皮质组织中TRPV5和OPN mRNA表达水平;免疫组织化学染色和Western blot检测两组肾皮质组织中TRPV5和OPN蛋白表达水平.结果 尿生化检查结果显示,结石组患者的24h尿钙排泄量显著高于对照组[(458.24±57.25) mg vs(184.72±31.47)mg,P<0.01].对照组未见草酸钙结晶,结石组肾小管上皮肿大,管腔内可见坏死物质及部分脱落的上皮细胞;远曲小管、集合管和肾盂内均可见较多透明不规则小块状草酸钙晶体.免疫组化结果显示结石组患者肾组织的TRPV5蛋白表达水平低于对照组;对照组中检测到OPN的微弱表达,OPN在髓攀降支细段和远曲小管上皮细胞表面表达呈弱阳性;在结石组患者肾组织中OPN表达则明显增强,OPN在髓攀降支细段、近曲小管、远曲小管和集合管均表达.Real-time PCR结果显示16例结石患者肾组织中TRPV5 mRNA表达量明显降低[(1±0.02) vs(0.22±0.01),t =1.826,P =0.002)],3例无变化;1例表达升高;OPN mRNA在19例结石组肾组织中的表达量显著高于对照组[(1±0.03) vs(4.68±0.17),P<0.01],1例无显著差异.Western blot结果显示16例结石组肾组织中TRPV5蛋白表达量明显低于对照组[(1.24±0.05)vs(0.07±0.01),t=1.772,P=0.00],3例无显著差异,1例表达水平降低;而OPN蛋白在19例结石组肾组织中的表达量显著高于对照组[(0.34±0.02)vs(1.79±0.11),P<O.01],1例无显著差异.结论 TRPV5的表达与泌尿系结石的发生率呈负相关,而OPN的表达与泌尿系结石的发生率呈正相关,二者的表达水平可作为临床诊断泌尿系结石潜在的生化指标.

  • 宫颈鳞状细胞癌化疗前后骨桥蛋白变化及与化疗效果的关系

    作者:吴婷婷;关婷

    目的 探讨TP方案新辅助化疗对宫颈鳞癌组织中骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 以34例Ⅰb2(18例)~Ⅱa期(16例)的宫颈鳞状细胞癌患者为研究对象,TP方案化疗2个疗程后行宫颈癌根治术,免疫组化法检测化疗前后组织中OPN表达及与化疗效果的关系.结果 (1)全组病例化疗前后OPN阳性表达率分别为85.29%(29/34)和61.76%(21/34),表达强度差异有统计学意义(P=0.007);(2)临床分期为Ⅰb2期、Ⅱa期、年龄>45岁者化疗前后OPN的阳性表达差异无统计学意义;年龄≤45岁、病理提示高中分化及低分化者化疗后OPN的阳性表达较前明显降低(P<0.05);(3)新辅助化疗总有效率67.65%(23/34),其中完全缓解率52.94%(18/34),部分缓解率23.53%(8/34).结论 TP方案新辅助化疗能总体上降低宫颈鳞状细胞患者组织中OPN表达强度,延缓宫颈癌病情进展.OPN在宫颈癌组织中的表达强度与化疗敏感性及化疗效果有关,化疗前检测宫颈鳞状细胞癌组织中OPN的表达强度可能对预测宫颈鳞癌新辅助化疗敏感性有帮助.

  • 基础研究钠离子调节成骨细胞功能及其相关基因的差异性变化

    作者:卢丽;林晓慧;陈珺;陆幸妍;吴亮;贾欢欢;万超;李青南

    目的 探讨钠离子(Na+)对大鼠成骨细胞成骨功能的调节,及其相关基因mRNA的变化.方法 应用CCK-8试剂盒和碱性磷酸酶(AKP)试剂盒检测5种不同浓度Na+对成骨细胞增殖和分化的影响.再从中选用低(1×10-4mol/L)、中(0.1 mol/L)、高(0.5 mol/L)3种浓度,于处理细胞15、30、120 min时,通过RT-PCR测定Na+对成骨细胞成骨功能相关基因OPN、Cbfa1 mRNA转录的影响.结果 在1×10-4~1 mol/L范围内,与正常组相比,低浓度Na+明显促进成骨细胞分化,使AKP活性增加,高浓度则呈抑制作用,而Na+对成骨细胞的正常增殖无影响.RT-PCR结果显示与正常组相比,低浓度Na+显著地上调成骨细胞OPN、Cbfa1 mRNA的转录,高浓度则呈抑制作用.然而OPN、Cbfa1基因对Na+调节作出反应所需的时间存在差异,Cbfa1基因在经处理30 min时即可出现mRNA转录变化,而OPN基因则在处理120 min时才出现相应改变.结论 Na+可直接调节成骨细胞成骨功能,低浓度促进成骨细胞分化和相关功能基因OPN、Cbfa1的增加,而高浓度则显示抑制作用;且各基因转录变化具有时间差异.

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