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中药狼毒对人乳头瘤病毒-18感染的HeLa细胞增殖及凋亡的影响
目的：探讨中药狼毒对人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)-18感染的HeLa细胞增殖及凋亡的影响。方法配制狼毒乙醇浸出液。运用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖，并运用 Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡。结果以10、20μg/ml的狼毒乙醇浸出液处理HPV-18感染的HeLa细胞12 h后，细胞增殖抑制率增高[分别为(16.36±5.06)%、(18.59±5.99)%]，与对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.01)。以0.625、1.25、2.5、5、10、20μg/ml的狼毒乙醇浸出液处理HPV-18感染的HeLa细胞72 h后，细胞增殖抑制率均增高[分别为(13.82±3.66)%、(30.24±6.58)%、(43.29±4.29)%、(53.32±1.41)%、(54.24±1.97)%、(50.68±1.74)%],与对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.01)。Hoechst 33258染色显示，以10μg/ml的狼毒乙醇浸出液处理HPV-18感染的HeLa细胞24 h后，可见凋亡的细胞。结论中药狼毒可抑制HPV-18感染的HeLa细胞增殖，并诱导其凋亡。
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狼毒大戟配伍大枣对诱导肝硬化大鼠的抵抗作用及机制
目的:研究狼毒大戟配伍大枣对肝硬化腹水大鼠模型的抵抗作用.方法:采用苯巴比妥联合四氯化碳(CCl4)法建立肝硬化腹水大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、肝硬化腹水模型组、狼毒大戟组,狼毒大戟配伍大枣组,每组各10只.观测大鼠水代谢及苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,用免疫组织化学法测定Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ),Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ),纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN),层粘连蛋白(Laminin,LN),结蛋白(Desmin)在肝组织中的表达.结果:与模型组比较,狼毒大戟组及狼毒大戟配伍大枣组大鼠24 h尿量明显增多(P＜0.01),腹腔积液显著减少(P＜0.01).给狼毒大戟配伍大枣组大鼠肝脏纤维间隔及变性程度较模型组有明显改善.免疫组化结果显示,肝硬化模型组及狼毒大戟治疗组,Ⅰ,Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白的含量均显著高于正常组(P＜0.01),模型组LN和Desmin的含量显著高于正常组(P＜0.01),狼毒大戟配伍大枣组能显著降低LN和Desmin的积分吸光度IA.结论:狼毒大戟配伍大枣可明显改善肝硬化腹水大鼠肝硬化病理进程:增加尿量,促进腹水排泄,其作用机制可能与狼毒大戟配伍大枣对Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ,FN,LN,Desmin的调控有关.
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狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究
目的:研究狼毒大戟的抗乙肝病毒活性成分.方法:应用各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定,并将化合物进行抗乙肝病毒活性的筛选.结果:分离鉴定了11个化合物,分别为5,24-甘遂二烯-3β-醇(tirucalla-5,24-dien-3-ol,1),24-亚甲基-5,24-甘遂二烯-3β-醇(24-methyltirucalla-5,24-dien-3-ol,2),大戟醇(euphol,3),丁酰鲸鱼醇(butyrospertool,4),24-亚甲基环阿屯醇(24-methylenecycloartenol,5),环阿屯醇(cycloartenol,6),大戟内酯E(jolkinolide E,7),泽漆内酯A(helioscopinolide A,8),异莨菪亭(isoscopoletin,9),西瑞香素(dephnoretin,10),3,3'-二甲氧基逆没食子酸4'-O-β-D-木糖苷(33'-di-O-methylellagic acid 4'-O-β-D-xylopyranoside,11).结论:化合物1,2,10为首次从该属中分离得到,化合物3,4,11为首次从该植物中分离得到,化合物1,8,9,11对HBsAg和HBeAg有弱的抑制作用,化合物10对HBsAg有弱的抑制作用.
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狼毒大戟对病毒性T细胞白血病的抑制作用
目的研究中药狼毒大戟抗病毒性肿瘤机理. 方法 615近交系小鼠50只,随机分为5组,其中设肿瘤对照组(Ⅰ),2种剂量的治疗组 (Ⅱ、Ⅲ),药物对照组 (Ⅳ)和正常对照组(Ⅴ).治疗组和肿瘤对照组皮下接种L615白血病肿瘤株,治疗组及药物对照组每天经胃分别给予狼毒水浸出液1.8 g/kg(36 mg)、3.0 g/kg(60 mg),连续1周.检测外周血白细胞总数,观察肿瘤细胞凋亡形态特征及DNA电泳图谱,并检测肿瘤细胞c-myc和ras基因的表达. 结果 3.0 g/kg狼毒给药组外周血白细胞[(0.1164±0.0123)×109/L]明显低于肿瘤对照组[(0.2199±0.1099)×109/L],P＜0.01.1.8 g/kg和3.0g/kg狼毒药物组的细胞凋亡率(23.60%±2.27%),(36.40%±4.99%)均明显高于肿瘤对照组(4.60%±0.97%),P＜0.01.在治疗组动物外周血中观察到大量的具有特征性的凋亡细胞和典型的DNA凋亡梯形电泳带.与肿瘤对照组相比,狼毒治疗组肿瘤细胞c-myc和ras基因表达受到明显的抑制(P＜0.01),表达强度也明显减弱.随着狼毒剂量增大,作用效果更为明显(P＜0.01). 结论狼毒大戟能抑制T淋巴细胞白血病的增殖,并可通过促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞c-myc和ras基因表达发挥抗病毒性肿瘤的作用.
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狼毒大戟提取液治疗Lewis肺癌机制的探讨
目的:探讨狼毒大戟提取液优化治疗非小细胞肺癌的机制.方法:收集狼毒干预24 h后的细胞,流式细胞技术分析肿瘤细胞周期及凋亡率;real time PCR检测Caspase-9 mRNA的表达.收集对数生长期细胞接种至C57BL/6小鼠右侧腋窝下,随机分组,腹腔给药后计算抑瘤率;流式细胞技术分析肿瘤细胞周期及凋亡率;real time PCR检测Bcl-2mRNA和Bax mRNA的表达,抗氧化能力检测法检测CAT和SOD的表达.结果:体内外实验显示,狼毒大戟能明显促进肿瘤细胞的凋亡,将细胞周期阻滞在S期,并能明显促进Bax mRNA、抑制Bcl-2 mRNA的表达;体内实验也显示狼毒大戟可以明显提高机体抗氧化能力.结论:狼毒大戟在促进肿瘤细胞凋亡的同时可以提高机体抗氧化能力,充分体现了狼毒大戟优化治疗肿瘤的优势,前景广阔,值得进一步研究,为临床应用提供依据.
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狼毒大戟对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡影响及其机制的初步探讨
目的:观察中药狼毒大戟提取液对体外培养的Lewis肺癌细胞凋亡及Caspase-9基因表达的影响.方法:Lewis 细胞培养后以不同药物浓度(0.2、0.4和0.8 mg/mL)干预24 h.Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡率的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化; Real-time PCR检测基因Caspase-9表达的变化.结果:阴性对照组与狼毒大戟低、中、高剂量组(0.2、0.4和0.8mg/mL)细胞凋亡率分别为(0.331±0.012)％、(8.27±0.067)％、(28.19±0.270)％和(32.96±0.14)％;阴性对照组与狼毒大戟低中高剂量组S期所占比例分别为(50.3±0.77)％、(44.2±1.82)％、(34.1±1.56)％和(25±0.72)％；Real-time PCR结果显示,阴性对照组与狼毒大戟组Caspase-9 mRNA的相对表达量分别为1.00和1.64.结论:狼毒大戟可以明显促进Lewis肺癌细胞的凋亡,将细胞周期阻滞在G0/G1期；并且可以明显提高Caspase-9的表达.狼毒大戟可能是通过将细胞周期阻滞于G0/G1期并且促进Caspase-9 mRNA的表达而诱导Lewis细胞的凋亡.
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狼毒大戟蛋煎剂治疗消化道腺癌的
半个世纪来,癌症严重地威胁着全世界人类的生命和健康,是当今人类主要的"隐形杀手"之一.为了探索对消化道腺癌新的治疗手段,作者研制了一种抗癌新方剂"狼毒大戟蛋煎剂",并对此制剂进行了实验性动物毒性和抑癌研究,在此基础上将此药用于30例经手术和病理确诊的消化道腺癌术后患者中,同时进行术后长期缓解治疗效果的对比性研究.经过十余年长期临床观察,这部分患者生存期明显延长,且生活质量显著改善,改到了显著的治疗效果,现将本文研究结果报告如下.
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狼毒大戟提取物不同组分对结核杆菌抑制作用的比较
目的比较狼毒大戟根不同提取物对结核杆菌的体外抑菌效果.方法根据狼毒大戟根化合物的极性,采用系统分离法对其进行提取,得到11种狼毒大戟根分离组分,采用改良7H10琼脂培养基22倍稀释法进行结核杆菌培养,共2周,动态观察对结核杆菌的抑制作用.结果狼毒大戟提取物不同组分对结核杆菌均有程度不同的抑制作用,乙酸乙酯热提、乙醚冷提组分抑菌作用强.结论狼毒大戟根不同提取部分对结核杆菌有较明显的抑制作用,选择合适的提取方法分离其有效成分,制备成相应的制剂,对结核病的治疗有一定的应用前景.
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狼毒大戟治疗白血病时的毒性作用研究
以L615白血病小鼠为动物模型,探讨狼毒大戟(Euphorbia fisheriana Steud,EFS)在治疗T淋巴细胞性白血病时的毒性作用.
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狼毒大戟多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响
目的:探讨狼毒大戟多糖(EFP-AW1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子白介素2(IL-2)和干扰素 γ(IFN-γ)分泌的影响.方法:制备小鼠脾淋巴细胞,加入EFP-AW1,使终质量浓度分别为0、25、50、100、200 mg/L,再加入Con A,培养60 h后,采用MTT法检测不同质量浓度狼毒大戟多糖EFP-AW1对Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响;将5种不同浓度的EFP-AW1分别加入小鼠脾淋巴细胞培养体系,再加入Con A,培养48 h后,收集培养上清,ELISA法检测不同质量浓度EFP-AW1对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ 的影响.结果:与空白组比较,50、100、200 mg/L的狼毒大戟多糖能够促进Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应(P<0.05),并能够提高脾淋巴细胞产生IL-2和IFN-γ 的水平(P<0.05).结论:狼毒大戟多糖具有一定的免疫增强作用.
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狼毒大戟的化学成分研究(Ⅱ)
狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud. 系大戟科植物,近年临床多用于治疗肿瘤、皮肤病和结核病等.作者对狼毒大戟的化学成分进行了系统研究 [1].
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狼毒大戟地上部分化学成分研究
目的 研究新鲜狼毒大戟Euphorbia fischeriana地上部分的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、高效液相及重结晶等方法进行分离纯化,通过波谱分析的方法鉴定化合物结构.结果 从新鲜狼毒大戟地上部分甲醇提取液正己烷萃取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为23(E)-25-methoxycycloart-23-en-3β-ol(1)、24-hydroperoxycycloart-25-en-3β-ol (2)、25-hydroperoxycycloart-23-en-3β-01 (3)、羽扇豆醇(4)、24-亚甲基环阿尔廷醇(5)、大戟醇(6)、24-methylenecycloartane-3,28-diol(7)、钝叶甾醇(8)、叶绿醇(9)、iolkinolideA(10)、2,4-二羟基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮(11)、24-亚甲基-9,19-环-3-羊毛甾酮(12)、12-去氧佛波醇-13-十六酸酯(13)、butyrospermol (14).结论 其中化合物9为首次从该属植物中分离得到,化合物1～3、7、8为首次从该植物中分离得到.
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狼毒大戟化学成分的研究
目的研究狼毒大戟Euphorbia fisheriana的根茎中的化学成分.方法利用硅胶柱色谱及制备薄层色谱分离,采用化学性质分析及NMR数据解析等方法确定结构.结果分离得到2个酚酸性成分,分别鉴定为狼毒乙素(I)和没食子酸(Ⅱ).结论这2个化学成分均为首次从该种植物中分离得到,狼毒大戟中狼毒乙素的分离推翻了狼毒乙素是月腺大戟中的特征化学成分这一结论.
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狼毒大戟化学成分与药理作用
综述了狼毒大戟的化学成分、药理作用和临床应用等,认为其在抗肿瘤、抗结核方面有一定的应用前景.
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中药狼毒抗癌作用研究概况
狼毒,首载于<神农本草经>,属于不常用中药材.目前在我国市场上主流商品的狼毒为瑞香狼毒或狼毒大戟和月腺大戟的根[1].其味辛,性平,有毒.入肺、肝、脾经.有逐水祛痰,散结杀虫的功效.主治水肿腹胀,痰、食、虫积,心腹疼痛,咳喘,瘰疬,痰核,疥癣,灭蝇蛆[2].全国各地均有分布.不同品种、产地的狼毒,其主治及毒性差异甚大,不能混用[3].现代医学和中医学研究均发现其具有抗肿瘤活性.近研究还发现其具有抗病毒作用,特别是抗HIV病毒作用[4].提示其有潜在的重要药用价值.从而引起了国内外学者的广泛关注和深入研究.本文仅就狼毒抗癌作用的研究综述如下.
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瑞香狼毒研究进展
狼毒在国内同名异物很多,其正品应为<本草纲目>中所记载的瑞香科植物瑞香狼毒(Stellera chamejasme L.)的根,又名断肠草、红狼毒.而东北地区所用狼毒是大戟科植物狼毒大戟(Euphorbia fischeriana Steud)的根,又名东北狼毒、白狼毒,虽其根同作狼毒入药,但其主治及毒性差别甚大,故不能混用.
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狼毒大戟中巴豆烷型二萜的抗肿瘤活性研究
目的:研究狼毒大戟(Euphorbia fischeriana Steud.)中巴豆烷(Tigliane)型二萜的抗肿瘤活性.方法:采用硅胶柱色谱、ODS、Sephadex LH-20分离化学成分,根据理化性质和波谱数据确定化合物结构,并对得到的化合物进行抗肿瘤活性研究.结果:从狼毒大戟中共分离鉴定了3个巴豆烷型二萜化合物,分别为:prostratin(1)、Langduin A(2)和13-O-Acetylphorbol (3),同时利用肝癌HepG-2细胞、胃癌SGC-7901细胞和乳腺癌MCF-7细胞进行抗肿瘤实验.结论:在MTT抗肿瘤实验中,化合物prostratin对肝癌和乳腺癌有显著的抗肿瘤活性、Langduin A对胃癌和乳腺癌有抗肿瘤活性、13-O-Acetylphorbol仅对乳腺癌有抗肿瘤活性.
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狼毒大戟中没食子酸乙酯的提取分离及抗肿瘤活性
目的：对狼毒大戟中没食子酸乙酯进行提取分离，并探索其抗肿瘤作用。方法：采用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法和半制备高效液相色谱法从狼毒大戟的乙酸乙酯层分离纯化没食子酸乙酯，通过MTT法观察其在不同浓度和时间条件下对三种肿瘤细胞的生长抑制作用。结果：没食子酸乙酯对结肠癌LOVO细胞、肺癌A549细胞、口腔鳞癌CAL-27细胞的生长均具有一定的抑制作用，经药物作用72h后，大抑制率分别达到（74．67±0．47）％、（62．01±1．27）％和（37．17±2．12）％。结论：狼毒大戟乙酸乙酯层提取分离的没食子酸乙酯在体外有抗肿瘤活性。
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毒性中药狼毒质量标准研究
目的:建立毒性中药狼毒的质量标准.方法:采用显微、化学、液相色谱/质谱等方法进行定性鉴别,以液相色谱及液相/质谱法测定含量.结果:狼毒大戟中月腺大戟乙素含量为0.01%w/w,月腺大戟中月腺大戟乙素含量范围为0.01%～0.02%w/w,均未检出瑞香内酯、狼毒色原酮和新狼毒素A.瑞香狼毒中瑞香内酯、狼毒色原酮及新狼毒素A等成分含量范围分别为0.57%～2.12%w/w、0.86%～1.6%w/w及0.45%～0.96%w/w,但未检出含月腺大戟乙素成分.结论:各法能用于常规检测狼毒属植物.
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UPLC法同时测定狼毒大戟中岩大戟内酯A和B
目的 建立UPLC法同时测定狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud.中岩大戟内酯A和B的含有量.方法 狼毒大戟甲醇提取物的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长250 nm;柱温35 ℃.结果 岩大戟内酯A和B分别在1.804 ～54.12 μg/mL(r=0.999 5)和9.663 ～ 209.8 μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.3％、98.6％,RSD分别为0.76％、0.77％.结论 该方简便准确,重复性好,可用于狼毒大戟的质量控制.
