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2种方法检测热毒宁与头孢哌酮钠／舒巴坦钠对广泛耐药鲍曼不动杆菌协同作用的比较
目的：观察微量肉汤棋盘稀释法与纸片扩散法检测体外环境下中药热毒宁联合头孢哌酮钠／舒巴坦钠（SCF）对广泛耐药鲍曼不动杆菌（XDR-AB）协同作用的结果，比较两者的符合性，以指导临床用药。方法筛选2015年该院住院患者感染的XDR-AB 共12株，将菌株培养传代，先采用微量肉汤棋盘稀释法检测 SCF 和热毒宁单独及联合使用时的低抑菌浓度（MIC），通过计算判断是否有协同作用，再使用纸片扩散法检测抑菌环直径和药物的协同作用。结果微量肉汤棋盘稀释法检测热毒宁与 SCF 联合用药时，与单独用药时相比，MIC 均有不同程度下降，热毒宁与 SCF 联合用药时的抑菌浓度指数均小于或等于0．5，具有协同作用。纸片扩散法测定出热毒宁原液的抑菌环直径为10 mm ，不同 XDR-AB 菌株对 SCF 的抑菌环直径有所差异，其中5株为15 mm ，3株为16 mm ，4株为17 mm 。但当热毒宁与 SCF 联合作用时，抑菌环直径扩大，12株也都出现了协同作用。结论体外环境下，热毒宁联合 SCF 对 XDR-AB 有很好的协同作用，2种方法结果一致，虽然纸片法更加简便，但结果判断带有一定主观性，需要有经验的人员操作。
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K-B法对自动化检测流感嗜血杆菌对氨苄西林药敏误差的校正作用
目的 以肉汤稀释法为参考方法,观察纸片扩散(K-B)法对自动化微量肉汤稀释(A TB)法产生误差的校正作用.方法 收集228株流感嗜血杆菌(HI),采用肉汤稀释法、K-B法、A TB法同时检测 HI对氨苄西林的敏感性,观察3种实验方法药敏结果的一致性,分析K-B法对A TB法产生误差的校正作用.结果 K-B法和A TB法与肉汤稀释法的一致率分别为77.19%、70.18%,二者联合可将一致率提高至86.0%,明显高于A TB法(χ2=16.600,P=0.000);A TB法的重大误差率(42.0%)明显高于K-B法(10.0%,χ2=13.306,P=0.001),K-B法与 A TB法的次要误差率和极重大误差率差异均无统计学意义(χ2=1.208,P=0.272;χ2=1.182,P=0.227);K-B法可校正A TB法76.19% 的重大误差和53.57% 的极重大误差,K-B法对A TB法次要误差的校正能力较弱.结论 K-B法可合理校正A TB法产生的药敏误差,A TB法判定为氨苄西林耐药且β-内酰胺酶阴性菌株的菌株,建议采用K-B法进行校正,而A TB法判定为氨苄西林敏感且β-内酰胺酶阳性的菌株,则务必采用K-B法进行校正.
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头孢吡肟对革兰阴性杆菌的体外敏感性分析及方法评价
目的 调查昆明医学院第一附属医院2007年8月至12月301株临床常见革兰阴性杆菌对第4代头孢菌素头孢吡肟的耐药状况,评价采用的MICROSCAN细菌鉴定药物敏感系统中快速接种法的准确性.方法 用琼脂稀释法、纸片扩散法、标准浊度法和MICROSCAN快速接种法测定头孢吡肟时301株细菌的体外抑菌活性.以琼脂稀释法为标准参考方法,比较其他3种方法与其结果的一致性.结果 琼脂稀释法测定301株革兰阴性杆菌对头孢吡肟的体外总敏感率为78.07%;纸片扩散法、标准浊度法和MICROSCAN快速接种法与标准参考方法的一致率分别为99.00%,98.34%和95.35%.纸片扩散法、标准浊度法检查结果与琼脂稀释法无统计学差异(P>0.05),MICROSCAN快速接种法检查结果与琼脂稀释法有统计学差异(P<0.05).结论 头孢吡肟对大部分临床常见革兰阴性杆菌具有良好的体外抗菌活性,纸片扩散法及标准浊度法结果准确性较高,MICROSCAN快速接种法的准确性有待进一步探讨.
关键词： 头孢吡肟 琼脂稀释法 标准浊度法 MICROSCAN快速接种法 纸片扩散法 -
355株金黄色葡萄球菌药敏试验结果分析
目的:探讨金黄色葡萄球菌(S-aureus)对抗菌药物的敏感性,为临床应用抗生素提供科学依据.方法:按<全国临床检验操作规程>对S-aureus进行培养分离鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验,参照美国国家临床实验室标准化委员会标准(NCCLS)读取结果.结果:8年来从各类临床标本中分离出355株S-aureus,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为140株.金黄色葡萄球菌对万古霉素、利福平、头孢哌酮、丁胺卡那霉素、头孢唑啉、庆大霉索、环丙沙星、氟哌酸、氨苄西林、青霉素G、苯唑西林的敏感率分别为100.0%、97.8%、76.1%、76.1%、69.9%、60.3%、60.1%、54.7%、3.9%、2.1%、0.9%.结论:MRSA感染呈上升趋势,青霉索类已不能成为治疗S-aureus感染的一线药物,万古霉素、利福平可作为治疗S-aureus感染的首选药物.
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婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌与阪崎肠杆菌分离株的药敏分析
目的 研究中国婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌及阪崎肠杆菌分离株的药物敏感性.方法 采用纸片扩散法测定15株细菌对氨苄西林、头孢唑林、环丙沙星、阿米卡星等8大类共24种抗生素的敏感性.结果 2009年自30份婴幼儿奶粉样品中共分离得到15株肠杆菌科细菌,经生化鉴定,其中肺炎克雷伯菌8株(53.3％),阪崎肠杆菌7株(46.7％).药敏结果显示:所有菌株对β-内酰胺类抗生素均有不同程度的耐药性,对氟喹诺酮类和氨基糖甙类均敏感.分别有1株肺炎克雷伯菌和1株阪崎肠杆菌几乎对所有头孢类抗生素耐药.结论 要幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌和阪崎肠杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性较强,其多重酎药性不断的出现对婴幼儿构成了极大的危害.
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75株金黄色葡萄球菌药敏试验结果分析
目的 探讨金黄色葡萄球菌对抗菌药物的敏感性,为临床应用抗生素提供科学依据.方法 按中华人民共和国国家标准食品卫生微生物标准GB/T4789.10-2003对金黄色葡萄球菌进行培养分离鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验,参照中华人民共和国卫生行业标准纸片法抗菌药物敏感试验标准WS/T125-1999读取结果.结果 75株金黄色葡萄球菌对氯霉素、万古霉素、利福平、四环素、氧氟沙星、庆大霉素、红霉素、磺胺甲基异恶唑素的敏感率分别为96.00％、94.66％、61.33％、60.00％、49.33％、46.67％、37.33％、6.66％.结论 氯霉素、万古霉素可作为治疗金黄色葡萄球菌感染的首选药物.
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10种病原菌药敏试验结果分析
[目的]探讨10种常见病原菌(包括副溶血性弧菌、霍乱弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、大肠杆菌O157,,变形杆菌、沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、溶血性链球菌)对抗菌药物的敏感性,为临床应用抗生素提供科学依据.[方法]按GB/T4789.5.6.8.11.10.30-2003,GB/T4789.7.4-2008,WSM-1996,GB15984对十种病原菌进行分离培养,采用纸片扩散法进行药敏试验,参照WS/T125-1999读取结果.[结果]副溶血性弧菌对丁胺卡那霉素、氯霉素等6种抗生素的敏感性为100.00%.大肠杆菌0157对丁胺卡那霉素、头孢唑琳等7种抗生素的敏感性为100.00%,霍乱弧菌感对丁胺卡那霉素、红霉素等4种抗生素的敏感性为100.00%.沙门菌对庆大霉素、氧氟沙星的敏感性为100.00%.小肠结肠炎耶尔森菌对环丙沙星、庆大霉素等6种抗生素的敏感性为100.00%.金黄色葡萄球菌对氯霉素、万古霉素的敏感性为95.00%以上.单核细胞增生李斯特菌对利福平、特利霉紊等10种抗生素的敏感性为100.00%,溶血性链球菌对氧氟沙星、利福平等8种抗生素的敏感性为100.00%.志贺菌对丁胺卡那霉素、庆大霉素等3种抗生素的敏感性为100.00%,变形杆菌对羧卞西林的敏感性为100.00%o[结论]10种常见病原菌对某些抗生素仍保持较高的敏感性,可作为感染的首选药物.
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44例老年嗜麦芽窄食单孢菌肺炎分析
1对象与方法1.1 病例选择 44例中男33例，女11例。年龄60～83岁，平均年龄67.2岁。1.2 诊断标准1.2.1 临床表现具有发热、咳嗽、咯痰、气促、乏力、纳差、胸痛及肺部干、湿罗音。1.2.2 X线表现肺部纹理增粗及浸润性炎性改变。1.2.3 痰标本细菌学检查连续2次有嗜麦芽窄食单孢菌生长。1.3 细菌分离鉴定嘱病人晨起漱口后从肺深部咳出痰于无菌瓶中，按《全国临床检验操作规程》进行分离鉴定。1.4 药物敏感性鉴定采用K—B纸片扩散法，铜绿假单孢菌ATCC27853作室内质控，结果判断按美国国家临床实验标准化委员会NCCLS规定的标准进行。
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1995～2002年阴沟肠杆菌临床分离株的耐药性分析
目的:调查1995～2002年阴沟肠杆菌临床分离株对临床常用抗茵药物的耐药性变化.方法:药物敏感性试验采用纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET5软件.结果:1995年1月1日至2002年12月31日,国家细菌耐药性监测网医院共收集阴沟肠杆茵临床分离茵5 558株.标本来源主要为痰、尿液及和伤口及其分泌物,分别占53%～65%、9%～12%和2%～13%.阴沟肠杆菌对临床常用抗茵药物的耐药率,除亚胺培南和美洛培南外,8年间都有不同程度的增加.头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素和阿米卡星等抗茵药物的耐药率增加了20%以上.2002年的结果表明,碳青霉烯类抗生素、阿米卡星、头孢吡肟和头孢哌酮/舒巴坦对阴沟肠杆菌临床分离株有较好的抗茵活性.此外,阴沟肠杆菌临床分离株对头孢噻肟和头孢他啶双重敏感率在逐年下降,双重耐药率在逐年增加.头孢噻肟和头孢他啶抑茵圈直径的均值也在逐年减小.结论细菌耐药性问题是抗感染治疗的主要威胁,合理使用抗茵药物以降低耐药性和采取有效措施控制其传播是非常重要的.
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产SHV型超广谱β内酰胺酶不动杆菌的检测及其耐药表型和基因型研究
目的:研究临床分离的产SHV型超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum βlactamases,ESBLs)不动杆菌对常用抗生素的耐药性及其基因类型.方法:采用NCCLS推荐的酶抑制剂联合三代头孢菌素低抑菌浓度(MIC)法、NCCLS推荐的ESBLs表型确证法、双纸片协同法、酶抑制剂增强纸片扩散法及E-test检测ESBLs,并进行比较;采用紫外分光光度计测定7株ESBLs标准产酶株对第三代头孢类抗生素的水解活性;采用纸片扩散法测定产ESBLs不动杆菌对临床常用18种抗生素的耐药性;使用聚合酶链反应(PCR)技术扩增20株产ESBLs不动杆菌bla shv基因,测定并分析它们的核苷酸和氨基酸序列.结果 60株不动杆菌中32株产ESBLs菌株,占53.3%(32/60),五种鉴定方法的结果无显著性差异,但实际操作中各有利弊,双纸片协同法受涂布菌液浓度和纸片间距的影响较明显.
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富血小板血浆对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌实验研究
目的 通过体外实验探索富血小板血浆(PRP)对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用.方法 采用纸片扩散法(简称“改良K-B法”)来进行PRP体外抑菌的实验,设置红霉素溶液阳性对照药,贫血小板血浆(PPP)为阴性对照药,后测定抑菌圈直径.结果 PRP对痤疮丙酸杆菌有较强的敏感性,在纸片扩散法实验中的抑菌圈直径为(15.37±0.747 0)mm,与PPP相比差异有统计学意义(P＜0.05).参考抗生素药敏实验等级划分的判断标准,PRP对痤疮丙酸杆菌的抑菌效果属于高敏.结论 PRP对痊疮的主要致病菌座疮丙酸杆菌有良好的抑菌效果.
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纸片扩散法比较BioPure MTAD等冲洗液抑制根管内常见菌株性能的试验研究
目的 用纸片扩散法检测不同根管冲洗液对多种根管内常见菌株的抑菌圈,比较其体外抑菌能力.方法 固体培养基上涂布菌悬液,放无菌滤纸片,纸片上滴加0.005 mL试验液体或蒸馏水作阴性对照.适宜条件培养后观察并测定抑菌圈大小.结果 BioPure MTAD对多种试验菌株的抑菌圈大,而质量分数为1.3%的次氯酸钠对多种试验菌株的抑菌圈小,两者间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 在纸片扩散法中,BioPureMTAD对多种试验菌株均显示了良好的抑菌性能.
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2002年临床常见革兰氏阴性杆菌耐药性监测
目的调查国家细菌耐药性监测网临床常见革兰氏阴性杆菌对各种抗菌药物的耐药性现状.方法药物敏感性试验采用纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET5软件.结果2002年国家细菌耐药性监测网8个省、市、自治区的57家三级甲等医院共收集患者首次分离株24826株;大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯氏菌是常见菌.主要标本为痰、尿和伤口及分泌物,分别占全部标本的47.9%,16.8%和10.4%.绝大多数肠杆菌科细菌对亚胺培南和美罗培南敏感,其次为第三代头孢菌素、含酶抑制剂的头孢菌素及阿米卡星.15%(15.6%～51.2%)的肠杆菌、柠檬酸杆菌、沙雷氏菌和普罗威登氏菌对第三代头孢菌素耐药.除大肠埃希氏菌外,环丙沙星和左氧氟沙星对其他肠杆菌科细菌的耐药率低于30%(6.0%～29.7%);产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌株的检出率分别为18.2%和22.6%;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为19.1%和15.2%.鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗生素较敏感,但对头孢哌酮、头孢他啶和阿米卡星的耐药率分别为52.8%,41.6%和31.8%.结论细菌耐药性问题是抗感染治疗的主要威胁,合理使用抗菌药物以降低耐药性和采取有效措施控制其传播是非常重要的.
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抗菌药物纸片法敏感性试验的质量评价与改进
目的采用实例分析,系统评价药敏试验的质量,促进药敏试验质量的持续改进.方法利用WHONET5软件对北京、湖北两地采用纸片扩散法得到的质控资料和细菌耐药性监测数据进行分析.结果采用不同质控菌株对同一抗生索药敏纸片进行测试,有助于了解、分析和确认测量值偏移原因.对质控结果和耐药性调查时,试验人员读取数据的人为因素会造成直方图分布偏移.有时质控试验的结果符合要求,但并不能保证对所有患者分离株的药敏测试都能得到准确的结果.当发现不典型或不稳定的结果时,应重复试验和/或鉴定过程,以确保结果的准确.结论利用WHONET5软件,及时对日常细菌耐药性监测数据进行回顾性分析,可持续改进药敏试验的质量,保证试验数据的可靠性.
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1999～2002年北京、广东、湖北和辽宁地区大肠埃希氏菌及肺炎克雷伯氏菌临床分离株耐药性比较分析
目的调查1999年～2002年国家细菌耐药性监测网不同地区大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌临床分离株的耐药性,比较不同来源菌株耐药率间的差别.方法药物敏感性试验采用纸片扩散法,WHONET5软件进行结果分析.结果四年间共收集大肠埃希氏菌14803株和肺炎克雷伯氏菌7923株.尿液、痰和血液等是大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌临床分离株的主要标本来源.1999～2002年,北京、广东、湖北和辽宁地区大肠埃希氏菌临床分离株对亚胺培南敏感,其次为头孢他啶和阿米卡星.在全部大肠埃希氏菌临床分离株中,广东地区的菌株对头孢噻肟的耐药率高,2002年增加到37.2%.环丙沙星的耐药率超过50%,复方磺胺甲噁唑和四环索的耐药率分别为67.4%～86.0%和72.3%～84.4%.肺炎克雷伯氏菌临床分离株对亚胺培南敏感,其次为头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星和环丙沙星.1999～2002年,除北京分离菌株对头孢噻肟和头孢他啶的耐药率无明显变化外,广东、湖北和辽宁地区的分离菌株对头孢噻肟和头孢他啶的耐药率有明显增高,环丙沙星的耐药率也有一定程度的增高.湖北地区肺炎克雷伯氏菌临床分离株对氨曲南的耐药率四年间增加了13.0%.北京、广东、湖北和辽宁地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的检出率逐年增高,2002年广东地区产ESBL大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的检出率分别为28.1%和23.7%,湖北地区的检出率分别为23.1%和27.7%.产ESBLs的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌临床分离株对头孢噻肟的耐药率明显高于头孢他啶,表明ESBLs主要为头孢噻肟酶.结论细菌耐药性问题是抗感染治疗的主要威胁,合理使用抗菌药物以降低耐药性和采取有效措施控制其传播是非常重要的.
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淋球菌对氟喹诺酮类药物的耐药性研究
为了解淋球菌对氟喹诺酮类药物的耐药性,用琼脂稀释法和纸片扩散法分别对1998～1999年间广东省湛江地区分离出的98株淋球菌流行株进行了药物敏感性测定.测定了流行株对诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星和洛美沙星5种氟喹诺酮类药物的小抑菌浓度(MIC)和抑菌圈直径(mm),根据NCCLS标准判定敏感与耐药.结果表明,纸片扩散法测定淋球菌对这5种抗生素的耐药百分率分别为91.84%、97.96%、84.70%、75.71%和87.76%,而琼脂稀释法相应的耐药百分率为83.50%、91.20%、59.30%、53.80%和75.80%.结果提示,湛江地区淋球菌流行株对氟喹诺酮类药物耐药现象十分普遍,临床医生进行淋病治疗时要引起高度重视.
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非白念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性分析
目的 了解非白念珠菌对我国常用抗真菌药物的耐药状况.方法 采用Roseo Neo-Sensitab纸片扩散法检测116株非念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性.结果 除2株光滑念珠菌对两性霉素B耐药外,其它菌株均对两性霉素B敏感;86.4%的热带念珠菌和80%的近平滑念珠菌对氟康唑敏感;光滑念珠菌对两性霉素B、氟康唑和伊曲康唑的耐药率分别为3.6%、16.1%和10.7%;所有克柔念珠菌对氟康唑和氟胞嘧啶均耐药.结论 绝大多数非白念珠菌对两性霉素B敏感,克柔念珠菌对氟胞嘧啶及三唑类抗真菌药物的耐药率高,光滑念珠菌对常用抗真菌药物包括两性霉素B的敏感性低,对三唑类抗真菌药物的耐药率高,且对三唑类抗真菌药物存在交叉耐药.
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苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点判断凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药性的评价
目的评价苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点在判断凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)甲氧西林耐药性中的准确性.方法苯唑西林(1μg)和头孢西丁(30μg)纸片扩散法测定149株临床分离的CNS对甲氧西林的耐药性,量取两种纸片的抑菌环直径.对苯唑西林组分别以≤14mm、≤15mm、≤16mm、≤17mm(CLSI/NCCLS 2004标准)为耐药折点,对头孢西丁组分别以≤21mm、22mm、≤23mm、≤24mm(CLSI/NCCLS 2004年标准)为耐药折点,与mecA基因检测结果比较,评价两种纸片扩散法在各折点对耐甲氧西林CNS判断的敏感性和特异性.结果与mecA基因检测结果比较,苯唑西林纸片扩散法在不同的耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为52.3%、75.0%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为66.7%、79.0%、90.1%、97.5%,特异性分别为100%、100%、100%、94.4%;头孢西丁纸片扩散法在不同耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为45.5%、70.1%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为83.6%、91.8%、97.3%、100%,特异性都为100%.结论苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林CNS的现行耐药折点标准在判断表皮葡萄球菌和非表皮葡萄球菌CNS的甲氧西林耐药性中都有很高的敏感性和特异性,适用于CNS对甲氧西林耐药性的判断.对于非表皮葡萄球菌CNS,头孢西丁纸片扩散法较苯唑西林纸片扩散法结果更可靠.
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肺部感染致病菌耐药性分析
由于抗感染药物的广泛应用和不注意合理用药,引起致病菌耐药性日趋势严重,社会易感人群结构改变,呼吸道感染的病原谱正向多元化发展,且细菌的耐药情况越来越复杂,不仅给临床治疗带来极大困难,还给病人增加痛苦,加重经济负担.为了能合理地、有针对性地使用抗菌药,我们对本院1999年8月至2003年1月临床呼吸道分离出的198株致病菌,应用纸片扩散法对20种抗菌药进行了耐药性测定,从而为临床合理选用抗菌药提供科学依据.
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ATB法和K-B法细菌药物敏感试验结果比较
体外药物敏感试验可为临床正确选用对感染菌的有效抗菌药物提供依据及进行临床耐药性分析.目前,国内临床微生物学实验室多采用Kirby-Bauer 药敏纸片扩散法(简称K-B法).随着临床检验日益自动或半自动化,我科还引进了 VITEK SystemATB Expression(简称ATB)用于临床分离菌的鉴定及药敏.现就K-B法与ATB两种方法对临床检出细菌的药敏试验结果进行一些相关性比较,以供参考.
